白雪瑩,熱孜亞·麥麥提,蔡 超,2,呂天宇,盛 強,羅 明,2*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院,烏魯木齊 830052;2.新疆維吾爾自治區(qū)高校農(nóng)林有害生物監(jiān)測與安全防控重點實驗室,烏魯木齊 830052;3.新疆巴音郭楞蒙古自治州農(nóng)業(yè)科學研究院,庫爾勒 841003)

梨火疫病是嚴重危害梨、蘋果、山楂、海棠等仁果類果樹生產(chǎn)的毀滅性細菌病害[1],被我國列為一類農(nóng)作物病害和進境植物檢疫性有害生物[2-3]。該病害1780年首次發(fā)生于美國紐約州,現(xiàn)已擴散傳播到60多個國家和地區(qū)[4]。我國于2016年首次在新疆伊犁發(fā)現(xiàn)梨火疫病,2017年該病在新疆巴州發(fā)生暴發(fā)流行并迅速蔓延,近幾年已傳至甘肅張掖和武威地區(qū)[5-6]。國外對梨火疫病已有超過200年的研究歷史,但該病害的病原菌傳播速度快,傳播途徑多樣,用于病害防治的效果優(yōu)良、環(huán)境安全和無系統(tǒng)性藥害的專用登記注冊藥劑欠缺,至今仍然是果樹病害防治中的難題[7]。目前化學防治是梨火疫病最主要的防治手段,其中抗生素和銅制劑發(fā)揮了重要作用[8]。農(nóng)用鏈霉素曾經(jīng)是梨火疫病防治的最佳藥劑，在果樹開花期噴施,對保護花器,顯著降低病原菌菌源量、減少初侵染發(fā)生的效果顯著[9]。但它的普遍使用導(dǎo)致了病原菌抗藥性菌系的產(chǎn)生,使防效大大降低[10]。在我國農(nóng)用鏈霉素2016年已經(jīng)停止生產(chǎn)并退出了農(nóng)藥市場。銅制劑作為廣譜殺菌劑對梨火疫病具有一定的防效,但存在易對葉片和果實產(chǎn)生藥害的缺陷,已有多種植物病原細菌對銅離子產(chǎn)生了抗性[11]。篩選和研發(fā)出新型的高效殺菌劑,阻斷梨火疫病的進一步傳播擴散,是保障林果產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的當務(wù)之急。

噻唑鋅是我國自主研發(fā)創(chuàng)制的新農(nóng)藥,是防治農(nóng)作物細菌性病害的新一代高效、低毒、安全的噻唑類農(nóng)用殺菌劑[13],對水稻細菌性條斑病(病原Xanthomonasoryzaepv.oryzicola)、水稻白葉枯病(病原Xanthomonasoryzaepv.oryzae)和柑橘潰瘍病(病原Xanthomonasaxonopodispv.citri)等細菌性病害具有良好的防治效果并已在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用[14]。針對梨火疫病菌Erwiniaamylovora,課題組通過室內(nèi)毒力測定、溫室盆栽苗生物測定和果園防效試驗,明確了該藥劑具有顯著的抑菌作用和較好的防病效果。2021年噻唑鋅獲得了梨火疫病防治藥劑的登記認證,同時獲批登記的有春雷霉素和噻霉酮等藥劑,但都未大面積使用。本研究采用2016年-2021年期間在新疆不同地區(qū)、不同寄主上獲得的梨火疫病菌的分離菌株,建立梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線,比較不同菌株對噻唑鋅的抗性差異,并分析梨火疫病菌對噻唑鋅及其他藥劑的敏感性差異,以期為梨火疫病防治藥劑的選擇和合理使用提供依據(jù),并為田間病原菌抗藥性的監(jiān)測和治理提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試藥劑

96.9%噻唑鋅(zinc thiazole)和84%噻霉酮(benziothiazolinone)原藥,分別由浙江新農(nóng)化工有限公司和陜西西大華特科技實業(yè)有限公司提供;98%硫酸農(nóng)用鏈霉素(streptomycin)和70.2%春雷霉素(kasugamycin)原藥分別購自J&K公司和陜西麥可羅生物科技有限公司。

1.1.2供試病原菌菌株

梨火疫病菌Erwiniaamylovora菌株:2016年-2020年連續(xù)5年,在新疆巴州(庫爾勒市、輪臺縣)、伊犁州(霍爾果斯市、鞏留縣)、昌吉州(昌吉市、呼圖壁縣)、哈密地區(qū)、阿克蘇地區(qū)、喀什地區(qū)、和田地區(qū)、塔城地區(qū)、阿勒泰地區(qū)和烏魯木齊市(三坪農(nóng)場、五一農(nóng)場)等10個地州(區(qū)/市)的果樹種植區(qū)采集具有梨火疫病典型癥狀的300余份病樣,通過組織分離法分離菌株,經(jīng)致病性測定、鑒定及保存的E.amylovora菌株145株[15]。選取其中來自不同地區(qū)、不同寄主和不同分離年份的具有代表性的50個菌株作為供試菌株,詳見表1。

表1 供試梨火疫病菌菌株來源及分布Table 1 Source and distribution of the tested Erwinia amylovora strains isolated from Xinjiang

1.1.3培養(yǎng)基

營養(yǎng)瓊脂(NA)培養(yǎng)基(g/L):牛肉浸膏3.0,蛋白胨10.0,氯化鈉5.0,蔗糖5.0,瓊脂粉18.0,pH 7.2。

營養(yǎng)肉湯(NB)培養(yǎng)基(g/L):牛肉浸膏3.0,蛋白胨10.0,氯化鈉5.0,蔗糖5.0,pH 7.2。

1.2 梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感性測定

1.2.1藥劑母液及稀釋液配制

將噻唑鋅原藥加入二甲基亞砜(DMSO),在200 r/min,28℃振蕩7 d溶解,獲得20 mg/mL的母液,過濾除菌后室溫貯存?zhèn)溆肹16]。使用時用二甲基亞砜將母液稀釋制成1 200、1 000、900、800、600 μg/mL和400 μg/mL的藥液備用。

1.2.2梨火疫病菌菌懸液的制備

將供試的E.amylovora菌株接種在NA培養(yǎng)基平板上活化,挑取單菌落接入NB培養(yǎng)基中,28℃、160 r/min振蕩培養(yǎng)12～18 h,再以1%(V/V)的接種量轉(zhuǎn)接至NB培養(yǎng)基中,28℃,培養(yǎng)至OD600達到1.2左右,用無菌水將菌懸液稀釋至濃度為108cfu/mL的接種液。

1.2.3敏感性測定

采用藥劑-病原菌共培養(yǎng)+平板菌落法。在裝有25 mL 滅菌NB培養(yǎng)液的三角瓶中,分別加入1.2.1配制的不同濃度的噻唑鋅稀釋液1 mL和25 μL梨火疫病菌菌懸液,在28℃、160 r/min振蕩共培養(yǎng)24 h,以不加藥劑的病原菌培養(yǎng)液(加入與處理等體積的二甲基亞砜)為對照。分別取藥劑和病原菌共培養(yǎng)液以及對照1 mL,10倍梯度稀釋后,取3個稀釋度的100 μL稀釋液均勻涂布于NA培養(yǎng)基平板,重復(fù)3次,28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,計數(shù)菌落數(shù),計算菌懸液中存留的活菌數(shù)(cfu/mL),統(tǒng)計抑制率。

抑菌率=(病原菌培養(yǎng)液中的菌落平均數(shù)-藥劑和病原菌共培養(yǎng)液中的菌落平均數(shù))/病原菌培養(yǎng)液中菌落平均數(shù)×100%。

1.2.4梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線的建立

使用DPS v 9.01和SPSS 22.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。以藥劑有效成分濃度對數(shù)值(lg)為自變量(x),抑菌率的幾率值為因變量(y),進行回歸分析,計算抑制中濃度(EC50)、相關(guān)系數(shù)及95%置信限[17]。采用Kolmogorov-Smirnov檢驗方法,對供試菌株對噻唑鋅的敏感性頻率進行正態(tài)分布檢驗。依據(jù)野生型病原群體對藥劑的敏感性為正態(tài)分布的原理,以EC50為橫坐標,菌株分布頻率為縱坐標,繪制敏感性頻率分布柱狀圖,確定敏感基線[18]。

1.2.5梨火疫病菌對噻唑鋅的抗性水平

依據(jù)殺菌劑抗藥性行動委員會(FRAC)制定的植物病原菌對殺菌劑抗性標準的劃分方法,根據(jù)供試菌株的EC50與1.2.4確定的敏感基線的比值,確定供試菌株的抗性水平[19]。

抗性水平(Rf)=供試菌株EC50/敏感性基線值。Rf<5為敏感菌株(S);5≤Rf<10為低抗菌株(LR);10≤Rf<40為中抗菌株(MR);Rf≥40為高抗菌株(HR)。

1.2.6梨火疫病菌對噻唑鋅及農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素的抗性相關(guān)性

參照成世杰等[20]的方法分析梨火疫病菌對噻唑鋅及其他3種殺菌劑的抗性相關(guān)性。選取對噻唑鋅敏感性較高(X16,X27,Ea15,H10)和敏感性較低的(Ea20,X13,X32,Y126) 8個E.amylovora菌株為供試菌株,分別測定其對農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素的敏感性。98%硫酸農(nóng)用鏈霉素原藥和70.2%春雷霉素原藥均用無菌水溶解制備母液,過濾滅菌后用無菌水稀釋成不同濃度(1 600、800、400、200、100 μg/mL和50 μg/mL)的藥液。84%噻霉酮原藥用無水乙醇溶解配制成母液,過濾滅菌后用無菌水稀釋成不同濃度(1 600、800、400、300、200 μg/mL和100 μg/mL)的藥液。E.amylovora對噻霉酮和農(nóng)用鏈霉素敏感性采用抑菌圈法測定[21],對春雷霉素的敏感性的測定方法同1.2.3。

將藥劑的EC50轉(zhuǎn)換為lgEC50,采用皮爾遜相關(guān)性系數(shù)分析梨火疫病菌對不同藥劑的抗性相關(guān)性。

2 結(jié)果與分析

2.1 梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感性

供試的50個E.amylovora新疆分離菌株對噻唑鋅的敏感性測定結(jié)果見表2。結(jié)果表明,不同E.amylovora菌株對噻唑鋅的敏感性存在明顯差異,EC50值范圍為2.67～38.13 μg/mL,均值為(18.60±6.35)μg/mL。其中33個菌株的EC50在2～20 μg/mL之間,占供試菌株的66%;15個菌株的EC50在20～30 μg/mL之間,占供試菌株的30%;EC50>30 μg/mL的菌株只有2個。H10菌株(分離自阿瓦提縣的杜梨)的敏感性最高,EC50為2.67 μg/mL,而Y126菌株(分離自巴州輪臺縣的山楂)的敏感性最低,EC50為38.13 μg/mL,二者相差13.28倍。

2.2 梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線

供試的E.amylovora新疆分離菌株對噻唑鋅的EC50值呈現(xiàn)連續(xù)性變化,通過Kolmogorov-Smimov進行正態(tài)分布檢驗,D=0.092,漸進連續(xù)性P=0.15(>0.05),符合正態(tài)分布。所測定的E.amylovora菌株對噻唑鋅敏感性分布頻率呈連續(xù)的單峰曲線(圖1),表明不同來源的E.amylovora分離菌株對噻唑鋅敏感性較高,未發(fā)現(xiàn)敏感性分化的亞群體。因此,可將其EC50平均值(18.60±6.35) μg/mL作為新疆梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線值。

圖1 新疆梨火疫病菌分離菌株對噻唑鋅的敏感性頻率分布Fig.1 Frequency distribution of sensitivity of Erwinia amylovora strains isolated from Xinjiang to zinc thiazole

2.3 梨火疫病菌不同分離菌株對噻唑鋅的抗性水平

2.3.1不同地州(區(qū)/市)的E.amylovora分離菌株對噻唑鋅的抗性水平

基于本研究建立的梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線,比較新疆不同地州(區(qū)/市)來源的E.amylovora分離菌株對噻唑鋅的抗性水平。結(jié)果(表3)顯示,巴州輪臺縣的E.amylovora菌株對噻唑鋅的敏感性最低,EC50平均值為23.63 μg/mL,抗性水平均為1.29;其次是阿克蘇、喀什、烏魯木齊、庫爾勒和阿勒泰地區(qū)的菌株,EC50平均值在17.08～20.06 μg/mL之間,抗性水平為0.92～1.09;再次是昌吉、伊犁、塔城及哈密的菌株,EC50平均值在12.34～16.07 μg/mL之間,抗性水平在0.64～0.86之間;和田的菌株對噻唑鋅的敏感性最高,EC50均值最低,為12.05 μg/mL,抗性倍數(shù)為0.62。敏感性最低的輪臺和敏感性最高的哈密兩地菌株的EC50相差0.96倍,抗性水平相差2.08倍。同一地區(qū)的菌株的敏感性也存在差異,如阿克蘇分離菌株的EC50最高值(28.57 μg/mL)和最低值(2.67 μg/mL)相差9.7倍,抗性水平相差10.86倍。

2.3.2不同寄主的E.amylovora分離菌株對噻唑鋅的抗性水平

從不同寄主上分離的梨火疫病菌菌株對噻唑鋅的抗性水平比較見表4。榅桲分離菌株的敏感性最低,EC50為20.66 μg/mL,抗性水平為1.14;其次是山楂和蘋果上的分離菌株,EC50分別為20.58 μg/mL和20.28 μg/mL,抗性水平為1.03和1.09,二者抗性水平差異不大;香梨上分離的菌株EC50平均值為17.09 μg/mL,抗性水平1.01；杜梨上分離的菌株對噻唑鋅最為敏感,其EC50平均值為6.90 μg/mL,抗性水平最低,為0.37。

表3 不同地區(qū)分離的梨火疫病菌對噻唑鋅的抗性水平1)Table 3 Sensitivity and resistance level of Erwinia amylovora strains from different regions to zinc thiazole

表4 不同寄主的梨火疫病菌分離菌株對噻唑鋅的抗性水平Table 4 Sensitivity and resistance level of Erwinia amylovora strains from different host to zinc thiazole

2.3.3不同年份的E.amylovora分離菌株對噻唑鋅的抗性水平

比較2016年-2020年分離的E.amylovora菌株對噻唑鋅的抗性水平(表5)可見,噻唑鋅對2016年的梨火疫病菌分離菌株的EC50均值為14.76 μg/mL,抗性水平均值為0.80;而噻唑鋅對2019年和2020年分離菌株的EC50均值分別增加至21.45 μg/mL和18.33 μg/mL,抗性水平均值提高到1.16和0.99。梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感性總體呈現(xiàn)出隨年份增加緩慢下降,抗性水平逐漸增大的趨勢。

2.4 梨火疫病菌對噻唑鋅及其他3種殺細菌劑的抗性相關(guān)性

供試的E.amylovora菌株對噻唑鋅及農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素的抗性相關(guān)性分析表明,噻唑鋅對梨火疫病菌的EC50與農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素藥劑敏感性的皮爾遜相關(guān)性系數(shù)(r)分別為0.138、0.417、0.434,均小于0.6,F檢驗的顯著水平(P)值分別為1.56、0.78、0.65,均大于0.05,表明噻唑鋅與這3種殺細菌劑之間不存在相關(guān)性。

表5 梨火疫病菌不同年份分離菌株對噻唑鋅的抗性水平Table 5 Sensitivity and resistance level of Erwinia amylovora strains isolated in different year to zinc thiazole

圖2 梨火疫病菌對噻唑鋅及農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素的抗性相關(guān)性Fig.2 Cross-resistance of Erwinia amylovora to zinc thiazole with streptomycin,benziothiazolinone and kasugamycin by LgEC50 values

3 結(jié)論與討論

目前用于防治細菌性病害的化學藥劑的類型和品種都相對較少,新型、安全和高效的殺細菌劑較為缺乏[22]。噻唑鋅是新一代噻二唑類有機鋅殺菌劑,在我國于2009年正式登記，開始生產(chǎn)和應(yīng)用,主要用于防治水稻、柑橘和黃瓜、番茄等作物的細菌性病害[23-25]。作為梨火疫病防治的新登記藥劑,為了明確噻唑鋅對梨火疫病菌的抑菌活性,梨火疫病菌田間種群對其敏感性和抗藥性現(xiàn)狀,本研究采用2016年-2020年期間從新疆不同地州(區(qū)/市)分離獲得的50個E.amylovora菌株,通過藥劑-病原菌共培養(yǎng)結(jié)合平板菌落法測定了梨火疫病菌對噻唑鋅(96.9%原藥)的敏感性。結(jié)果表明,不同來源的E.amylovora菌株對噻唑鋅的EC50在2.67～38.13 μg/mL,供試菌株對噻唑鋅的敏感性分布頻率符合正態(tài)分布,未發(fā)現(xiàn)敏感性分化的亞群體,將EC50均值(18.60±6.35)μg/mL作為新疆梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感基線。周麗洪等[26]采用抑菌圈法檢測了西南地區(qū)云貴川3省水稻細菌性條斑病菌X.oryzaepv.oryzicola菌株對20%噻唑鋅懸浮劑的敏感性,將EC50平均值 1.641 μg/mL 作為西南地區(qū)水稻細菌性條斑病菌對噻唑鋅的敏感基線。Zhang等[27]采用比濁法測定浙江、江蘇、安徽、湖北4省的水稻白葉枯病菌X.oryzaepv.oryzae對20%噻唑鋅懸浮劑的敏感基線值為(6.79±1.61)mg/L。研究結(jié)果顯示,在離體條件下噻唑鋅對不同植物病原細菌的抑菌活性有較大差異,對E.amylovora有較強的抑菌活性,但略低于對X.oryzaepv.oryzicola和X.oryzaepv.oryzae的抑菌活性。其原因一方面與病原菌自身的生理差異有關(guān),另一方面藥劑不同劑型的理化性質(zhì)、毒力測定的不同方法都可能是影響因素。有研究發(fā)現(xiàn),噻唑鋅具有內(nèi)吸向頂傳導(dǎo)的特性,在水稻活體上對X.oryzaepv.oryzae的殺菌活性遠高于其在離體條件下的毒力,還具有促進植物生長的特性[28]。本研究僅測定了離體條件下噻唑鋅對梨火疫病菌的抑菌活性,以后還需進一步結(jié)合活體試驗進行測定。

細菌殺菌劑毒力測定方法主要有濾紙片-抑菌圈法、比濁法和平板菌落法等,每種方法各有其優(yōu)缺點,應(yīng)依據(jù)不同的供試藥劑的特點選擇適宜的方法。游文莉等[29]用抑菌圈法和平板菌落計數(shù)法分別測定農(nóng)用鏈霉素、氧氯化銅對柑橘潰瘍病菌和白菜軟腐病菌(病原Pectobacteriumcarotovorumsubsp.carotovorum)的毒力,發(fā)現(xiàn)與抑菌圈法相比平板菌落計數(shù)法具有快速、簡便、重復(fù)性好等優(yōu)點。本研究測定的噻唑鋅原藥溶解性差,在平板培養(yǎng)基中不易擴散的特性使其不適宜采用濾紙片-抑菌圈法測定其毒力。在前期預(yù)試驗中將藥液-病原菌共培養(yǎng)液分別采用比濁法和平板菌落法進行比較。比濁法通過測定藥劑+病原菌共培養(yǎng)液混濁度的變化來反映藥劑的抑菌效果,無法區(qū)分培養(yǎng)液中病原菌的死活細胞數(shù),所得結(jié)果較為粗放;而平板菌落法通過測定藥劑與病原菌的共培養(yǎng)液中存活的病原菌數(shù)體現(xiàn)藥劑的抑菌效果,該法測定細菌殺菌劑毒力具有變異系數(shù)小,結(jié)果更加靈敏、精確,數(shù)據(jù)穩(wěn)定、可重復(fù)性好的優(yōu)點,因此采用該法測定的EC50建立了E.amylovora對噻唑鋅的敏感基線。研究中也發(fā)現(xiàn)，在應(yīng)用平板菌落計數(shù)法測定殺細菌劑毒力的過程中,應(yīng)根據(jù)供試細菌的培養(yǎng)特性,使懸浮液中菌體充分分散、嚴格控制菌懸液的稀釋倍數(shù)和加入量以及培養(yǎng)時間,才能保證測定結(jié)果的準確性。

本研究利用建立的E.amylovora菌株對噻唑鋅的敏感基線,分析了來源于新疆不同地區(qū)、不同寄主和年份的梨火疫病菌田間分離菌株對噻唑鋅的抗性水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn),供試的E.amylovora菌株對噻唑鋅均敏感,未發(fā)現(xiàn)抗性菌株。有研究證明,不同地理來源的病原菌對同一種殺菌劑的敏感性會存在明顯差異[30]。本研究也發(fā)現(xiàn),不同地州(區(qū)/市)的梨火疫病菌分離菌株對噻唑鋅的抗性水平存在一定差異。如巴州輪臺縣分離菌株的敏感性最低,抗性倍數(shù)最高,和田市分離菌株的敏感性最高,抗性倍數(shù)最低,兩地差異顯著(P<0.05),其他地州(區(qū)/市)分離的菌株之間也明顯不同。從榅桲上分離的菌株對噻唑鋅最不敏感,抗性倍數(shù)最高,而杜梨上的分離菌株最敏感,抗性倍數(shù)最低,兩寄主之間差異顯著(P<0.05),其他寄主上的分離菌株的抗性也有一定差異。2016年-2020年連續(xù)5年的分離菌株,總體體現(xiàn)出隨年份增加,敏感性下降的趨勢。田間植物病原菌對藥劑抗藥性水平的差異,除了與菌株的地理來源分布、寄主植物及種植年限、病原菌采集時間有一定關(guān)系外,與病害的發(fā)生程度、當?shù)厣a(chǎn)所施用的藥劑種類,用藥時間、濃度、施藥方式和范圍等都可能有關(guān)。此外,本研究中受分離菌株的局限性,有些地區(qū)(塔城、和田、哈密和阿勒泰地區(qū)分離菌株各1株)、寄主(榅桲和杜梨分離菌株各3株),年份(2016年分離菌株5株)供試菌株的樣本量偏少,不能完全代表不同地區(qū)、寄主和年份分離菌株的敏感性差異及變異程度,還需更加廣泛地收集菌株進一步比較驗證。目前尚未見植物病原細菌對噻唑鋅的抗性報道。有試驗表明,在實驗室紫外線下誘導(dǎo)獲得的X.oryzaepv.oryzae的噻唑鋅抗藥突變體不具備穩(wěn)定遺傳性,但從藥劑處理稻苗后接種病原所形成的病斑上,能夠篩選到致病力不受影響的該病原菌抗藥性突變體[27]。E.amylovora菌株在離體條件下尚未產(chǎn)生抗藥性,但在活體植株上是否存在對噻唑鋅的抗藥性風險還需在后續(xù)工作中進一步監(jiān)測。

農(nóng)用鏈霉素曾是防治梨火疫病的傳統(tǒng)最佳藥劑。針對梨火疫病在新疆首次發(fā)生,在疫情嚴重、缺乏專用藥劑的情況下,應(yīng)急采用了花期噴施農(nóng)用鏈霉素防治病害。雖然農(nóng)用鏈霉素用于防治梨火疫病的時間不長,但它已在我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用50多年,不可避免地導(dǎo)致植物病原細菌多重抗藥性的出現(xiàn)及傳播[31]。噻唑鋅、噻霉酮和春雷霉素都是近期在我國登記的梨火疫病的防治藥劑。本研究通過分析梨火疫病菌對噻唑鋅與農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素敏感性的相關(guān)性表明噻唑鋅與農(nóng)用鏈霉素、噻霉酮和春雷霉素之間不存在明顯相關(guān)性。其原因可能是這幾種藥劑的作用機制不同并且在生產(chǎn)中剛開始小規(guī)模應(yīng)用，尚未對病原菌產(chǎn)生選擇壓力。影響菌株的敏感性和抗藥性產(chǎn)生風險的因素是多方面的,與殺菌劑和病原菌雙方,如殺菌劑的選擇壓力、抗性突變體的適合度以及與生產(chǎn)中使用的其他藥劑之間的交互抗性,藥劑的作用機制等密切相關(guān)[32]。目前,噻唑鋅在梨火疫病發(fā)生的林果生產(chǎn)區(qū)應(yīng)用僅僅幾年時間,本研究通過測定梨火疫病菌對噻唑鋅的敏感性,尚未發(fā)現(xiàn)在離體條件下的抗性菌株,說明目前該藥劑防治梨火疫病的風險低。今后在推廣應(yīng)用中仍需繼續(xù)監(jiān)測病原菌對藥劑抗性的發(fā)展情況,將噻唑鋅與噻霉酮、春雷霉素等不同作用機制的殺細菌劑合理搭配與輪換使用,為制定合理的病害防治策略,防止或延緩病原菌抗藥性的產(chǎn)生提供依據(jù)。