張立國(guó)，劉 越，許虎君,

(1 哈爾濱敷爾佳科技股份有限公司，黑龍江 哈爾濱 150000；2 江南大學(xué)化工學(xué)院，江蘇 無(wú)錫 214122)

美白、抗皺、保濕，是女人近年來(lái)永恒的話題，抗皺換膚也是其中較熱議的話題[1-2]。當(dāng)機(jī)體衰老時(shí)，由于皮膚彈性纖維被打亂及膠原的衰退使皮膚失去堅(jiān)實(shí)性及柔軟性，從而出現(xiàn)皺紋[3]。隨著生活水平的提高，人們抗皺的意識(shí)也隨之加強(qiáng)。目前比較常見的抗皺方法包括抗皺類護(hù)膚品諸如抗皺眼霜緊膚霜等的使用[4-5]，維生素E以及維生素C以及一些微量元素的攝入[6]，充足的睡眠，規(guī)律的作息以及避免在陽(yáng)光下曝曬[7]同樣對(duì)皮膚抗皺有著不俗的效果。目前皮膚抗皺的主要手段還是一些抗皺護(hù)膚品的使用，而面膜由于使用方便效果好，是女性常用的美容護(hù)膚方式，目前市面上也不乏一些抗皺面膜的制備方法[8-10]。在本研究中，選擇抗皺多肽(SenbioTMFreezes-Up)作為原料制備了一種抗皺面膜，并對(duì)其進(jìn)行了皮膚抗皺的功效評(píng)價(jià)。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 主要試劑與儀器

主要試劑更改為：

A: 卡波姆、生物糖膠-1、透明質(zhì)酸鈉(5000)、透明質(zhì)酸鈉(120萬(wàn))、乙?；鶜ぬ前贰y耳子實(shí)體提取物、聚谷氨酸鈉、神經(jīng)酰胺3；

B: 甘油;

C: 氫氧化鈉、去離子水;

D: 1,3-丁二醇、對(duì)羥基苯乙酮、1,2-己二醇;

E: 羥苯基丙酰胺苯甲酸, 丁二醇, 1,2-戊二醇, 抗壞血酸棕櫚酸酯、傳明酸、抗皺多肽(水, 1,2-戊二醇, 1,2-己二醇, 二肽二氨基丁酰芐基酰胺 二乙酸鹽, 乙酰基六肽-8, 精氨酸/賴氨酸多肽。

主要測(cè)試儀器：面部圖像分析系統(tǒng)Visia-CR，美國(guó)Canfield公司；皮膚彈性測(cè)試儀MPA580，德國(guó)CK公司；皮膚測(cè)試儀CorneometerCM825，德國(guó)CK公司；皮膚測(cè)試儀TewameterTM Hex，德國(guó)CK公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 面膜的制備工藝

將一定量的去離子水加入燒杯中，加熱至82～85 ℃,將A相中的粉料逐一加入去離子水中，完全攪拌至分散均勻。將B相中的甘油預(yù)分散后加入，攪拌均勻后均質(zhì)5～8 min，保溫15～20 min消毒，消泡，降溫。降溫至60～70 ℃，加入C相物料，攪拌至完全均勻。將D相原料預(yù)混合，加熱溶解后，冷卻至室溫，備用。降溫到42～45 ℃時(shí)，依次加入D相物料和E相，中速攪拌至完全均勻。攪拌至室溫后，取樣，檢測(cè)，合格后，200目濾網(wǎng)過(guò)濾出料。

1.2.2 產(chǎn)品面部皮膚測(cè)試方法

選擇面部作為測(cè)試部位，選取一定數(shù)量符合條件的受試者參加測(cè)試。受試者根據(jù)使用要求使用測(cè)試產(chǎn)品，在受試者相應(yīng)測(cè)試部位采集皮膚數(shù)據(jù)，并分析測(cè)試區(qū)域使用樣品前后皮膚數(shù)據(jù)變化。具體測(cè)試過(guò)程如下：

(1)測(cè)試當(dāng)天受試者用指定潔面樣品清潔面部，在溫度(21±1)℃，濕度50%±10% RH的實(shí)驗(yàn)室中靜坐30 min；

(2)測(cè)試受試者皮膚基礎(chǔ)值：Corneometer測(cè)試皮膚角質(zhì)層水分含量，Tewameter測(cè)試經(jīng)表皮水分流失率，Cutometer測(cè)試彈性R2值、緊致度F4值，Visia拍攝，臨床評(píng)估法令紋和抬頭紋等級(jí)；

(3)初始數(shù)據(jù)采集完成后，給受試者發(fā)放樣品，進(jìn)行全臉貼敷，靜待20 min后取下面膜貼并按摩至吸收，在溫度(21±1)℃，濕度 50%±10%RH的實(shí)驗(yàn)室中靜坐30 min；

(4)測(cè)試受試者皮膚30 min數(shù)據(jù)值；

(5)受試者填寫調(diào)查問(wèn)卷，實(shí)驗(yàn)室技術(shù)員根據(jù)樣品使用要求和使用部位指導(dǎo)受試者使用樣品，并提供書面測(cè)試注意事項(xiàng)和使用說(shuō)明；

(6)受試者使用樣品2周后，測(cè)試受試者皮膚14天數(shù)據(jù)值，臨床評(píng)估法令紋和抬頭紋等級(jí)，填寫調(diào)查問(wèn)卷；

(7)受試者使用樣品4周后，測(cè)試受試者皮膚28天數(shù)據(jù)值，臨床評(píng)估法令紋和抬頭紋等級(jí)；

(8)受試者填寫調(diào)查問(wèn)卷，回收使用日志。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法

儀器測(cè)量：均值，標(biāo)準(zhǔn)誤差，最大值，最小值;

受試者自我評(píng)估：認(rèn)同度占比。

2 結(jié)果與討論

2.1 面膜使用過(guò)程中不良反應(yīng)反饋

本次納入31名女性受試者，年齡范圍29～49歲，平均年齡為40.97歲。根據(jù)人體試用試驗(yàn)結(jié)果測(cè)試面膜使用過(guò)程中的不良反應(yīng)情況，結(jié)果如表1所示。

表1 人體試用試驗(yàn)結(jié)果

皮膚不良反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)是參考2015年版《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定的人體試用皮

膚不良反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。具體分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如表2所示。

表2 皮膚不良反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)反饋結(jié)果可知：使用樣品14天后，觀察區(qū)域皮膚反應(yīng)均為0級(jí)，皮膚未發(fā)生不良反應(yīng)，使用樣品28天后，觀察區(qū)域皮膚反應(yīng)均為0級(jí)，皮膚未發(fā)生不良反應(yīng)。

2.2 皮膚角質(zhì)層水分含量測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者皮膚角質(zhì)層水分含量進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)試值越大，皮膚角質(zhì)層水分含量越高。皮膚角質(zhì)層水分含量改善率(%)計(jì)算方法如式(1)所示：

(1)

皮膚角質(zhì)層水分含量改善率越大，樣品改善皮膚角質(zhì)層水分含量效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表3所示。

表3 皮膚角質(zhì)層水分含量測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品30 min后，皮膚角質(zhì)層水分含量得到了明顯改善，改善率為83.84%。并且在使用產(chǎn)品14天以及28天后，皮膚角質(zhì)層水分含量均得到了改善，改善率分別為25.07%，45.98%，且皮膚角質(zhì)層水分含量改善率隨著使用時(shí)間的增加而增加，說(shuō)明測(cè)試產(chǎn)品對(duì)皮膚角質(zhì)層水分含量的改善有著明顯的效果。

2.3 皮膚經(jīng)表皮水分流失率測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者皮膚經(jīng)表皮水分流失率進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越小，單位時(shí)間、單位橫截面積的經(jīng)表皮水分流失量越少，表征肌膚屏障越好。皮膚經(jīng)表皮水分流失率改善率(%)計(jì)算方法如式(2)所示：

(2)

皮膚經(jīng)表皮水分流失率改善率越大，樣品改善皮膚角質(zhì)層水分含量效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表4所示。

表4 皮膚經(jīng)表皮水分流失率測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚經(jīng)表皮水分流失率得到了一定的改善。與使用前相比，使用樣品14天后，皮膚經(jīng)表皮水分流失率改善率為16.21%，使用樣品28天后，皮膚經(jīng)表皮水分流失率改善率為23.09%。

2.4 皮膚彈性R2值測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者皮膚彈性R2值進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越大，皮膚彈性越好。皮膚彈性R2值改善率(%)用式(1)進(jìn)行計(jì)算

皮膚彈性R2值改善率越大，樣品改善皮膚彈性效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表5所示。

表5 皮膚彈性R2值測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚彈性得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品30分鐘后，皮膚彈性R2值改善率為12.34%，使用樣品14天后，皮膚彈性R2值改善率為11.62%，使用樣品28天后，皮膚彈性R2值改善率為19.12%。

2.5 皮膚緊致度F4值測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者皮膚緊致度F4值進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越小，皮膚緊致度越好。皮膚緊致度F4值改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

皮膚緊致度F4值改善率越大，樣品改善皮膚緊致度效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表6所示。

表6 皮膚緊致度F4值測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚緊致度得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品30 min后，皮膚緊致度F4值改善率為14.05%，使用樣品14天后，皮膚緊致度F4值改善率為20.71%，使用樣品28天后，皮膚緊致度F4值改善率為28.88%。

2.6 魚尾紋面積占比測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者魚尾紋面積占比進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越小，魚尾紋面積占比越小。魚尾紋面積占比改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

魚尾紋面積占比改善率越大，樣品改善魚尾紋效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表7所示。

表7 魚尾紋面積占比測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚魚尾紋面積占比得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品30分鐘后，魚尾紋面積占比改善率為3.02%，使用樣品14天后，魚尾紋面積占比改善率為10.12%，使用樣品28天后，魚尾紋面積占比改善率為12.88%。

2.7 眼下紋面積占比測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者眼下紋面積占比進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越小，眼下紋面積占比越小。眼下紋面積占比改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

眼下紋面積占比改善率越大，樣品改善眼下紋效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表8所示。

表8 眼下紋面積占比測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，眼下紋面積占比得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品30 min后，眼下紋面積占比改善率為5.36%，使用樣品14天后，眼下紋面積占比改善率為8.73%，使用樣品28天后，眼下紋面積占比改善率為11.15%。

2.8 皮膚紅區(qū)a值測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者皮膚紅區(qū)a值進(jìn)行了測(cè)試，測(cè)量值越小，皮膚泛紅程度越輕。皮膚紅區(qū)a值改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

皮膚紅區(qū)a值改善率越大，樣品改善皮膚泛紅程度越好，具體測(cè)試結(jié)果如表9所示。

表9 皮膚紅區(qū)a值測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚泛紅程度得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品14天后，皮膚紅區(qū)a值改善率為4.62%，使用樣品28天后，皮膚紅區(qū)a值改善率為6.90%。

2.9 臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)進(jìn)行了評(píng)估，評(píng)估值越小，法令紋越少。臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)改善率越大，樣品改善法令紋效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表10所示。

表10 臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚法令紋得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品14天后，臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)改善率為7.06%，使用樣品28天后，臨床評(píng)估-法令紋等級(jí)改善率為11.76%。

2.10 臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)測(cè)試結(jié)果描述性及統(tǒng)計(jì)分析

對(duì)受試者臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)進(jìn)行了評(píng)估，評(píng)估值越小，抬頭紋越少。臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)改善率(%)用式(2)進(jìn)行計(jì)算。

臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)改善率越大，樣品改善抬頭紋效果越好，具體測(cè)試結(jié)果如表11所示。

表11 臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)測(cè)試結(jié)果描述性分析

以上說(shuō)明，使用測(cè)試產(chǎn)品后，皮膚抬頭紋得到了一定改善。其中，與使用前相比，使用樣品14天后，臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)改善率為10.13%，使用樣品28天后，臨床評(píng)估-抬頭紋等級(jí)改善率為17.72%。

3 結(jié) 論

在抗皺多肽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的使用配方體系中，通過(guò)31名受試者連續(xù)28天使用本次測(cè)試樣品，由結(jié)果可得知以下功效：

(1)與使用前相比，使用樣品30 min、14天、28天后，皮膚角質(zhì)層水分含量均顯著提升，改善率分別為83.84%、25.07%、45.98%；使用樣品14天、28天后，皮膚經(jīng)表皮水分流失率均顯著降低，改善率分別為16.21%、23.09%；使用樣品30 min、14天、28天后，皮膚彈性R2值與皮膚緊致度F4值均顯著提升，改善率分別為12.34%、11.62%、19.12%以及14.05%、20.71%、28.88%；使用樣品30 min、14天、28天后，魚尾紋面積占比與眼下紋面積占比均顯著降低，改善率分別為 3.02%、10.12%、12.88%以及5.36%、8.73%、11.15%；使用樣品14天、28天后，皮膚紅區(qū)a值均顯著降低，改善率分別為4.62%、6.90%。

(2)使用樣品14天、28天后，臨床評(píng)估-法令紋以及抬頭紋等級(jí)均顯著降低，改善率分別為7.06%、11.76%以及10.13%、17.72%；

(3)使用樣品28天后，96.77%的受試者整體認(rèn)同該樣品；100%的受試者認(rèn)為樣品溫和不刺激。此外，31名受試者使用樣品28天，皮膚均未出現(xiàn)不良反應(yīng)。