王瑩 王曉川 宋淑亞 吉萍 馬麗 王秀麗★

宮頸癌是危害全球女性健康的常見(jiàn)惡性腫瘤之一，在罹患癌癥死亡中排名第四［1］。在所有患者中，大約85%的確診女性和87%死于宮頸癌的女性生活在發(fā)展中國(guó)家［2-3］。人乳頭瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）存在于大多數(shù)宮頸癌患者的組織中，持續(xù)性高危型HPV 感染被認(rèn)為是宮頸癌的主要病因［4-5］。HPV 是小型無(wú)囊膜的雙鏈DNA 病毒，屬于α 乳頭瘤病毒科［6］。根據(jù)與宮頸癌的相關(guān)性，分為高危型HPV（包括HPV16、18、52 等）和低危型HPV（包括HPV6、11、40 等）［7］。在中國(guó)的不同地區(qū)，由于研究對(duì)象、經(jīng)濟(jì)條件、生活習(xí)慣等的不同，各地區(qū)HPV感染率及流行的HPV 主要的基因型分布不同［8-11］。

本研究擬調(diào)查在洛陽(yáng)市某三甲醫(yī)院行HPV 檢測(cè)女性中流行的主要HPV 基因型，為該病疫苗接種計(jì)劃的制定及檢測(cè)等提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究人群和樣本

從2019 年1 月至2021 年12 月，在河南省洛陽(yáng)市某三甲醫(yī)院，對(duì)來(lái)門(mén)診參加體檢或各科室送檢的宮頸拭子樣本進(jìn)行檢測(cè)，采集樣本若不能及時(shí)檢測(cè)，2～8℃保存不超過(guò)2 個(gè)星期，-20℃保存不超過(guò)三個(gè)月。納入標(biāo)準(zhǔn)：①在72 小時(shí)內(nèi)沒(méi)有使用陰道藥物或清洗劑；②在過(guò)去24 小時(shí)內(nèi)無(wú)性交；③未處在經(jīng)期；④未使用醋酸或碘液涂抹。根據(jù)限制條件，共有6 538 名女性符合標(biāo)準(zhǔn)，中位年齡為（41.14±11.42）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均被告知且簽署知情同意書(shū)。

1.2 HPV 基因分型

采用商品化HPV 分型檢測(cè)試劑盒（潮州凱普生物化學(xué)有限公司生產(chǎn)的37 種人乳頭瘤病毒分型檢測(cè)試劑盒（PCR+導(dǎo)流雜交法），30 人份/盒），按試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)樣品進(jìn)行HPV 基因分型檢測(cè)。將收集的樣本用商品化試劑盒提取核酸作為模板，然后按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行PCR 擴(kuò)增。將PCR 產(chǎn)物與含有37 個(gè)基因型特異性寡核苷酸的基因芯片雜交進(jìn)行基因分型，并使用HybriMax（中國(guó)潮州）分析。該芯片可識(shí)別37 種基因型，包括19 種LR-HPV（即6、11、34、40、42、43、44、54、55、57、61、67、69、70、71、72、81、83 和84）和18 種HR-HPV（16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73和82）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV 感染型別分布

在入選6 538 名人員中，12.3%的女性HPV檢測(cè)為陽(yáng)性，其中9.6%檢測(cè)為高危型HPV，顯著高于4.0%的低危型HPV 感染率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。不同型別HPV，不同型別高危型HPV 及低危型HPV 的感染率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。感染率最高的5 種高危型HPV 基因 型 包 括HPV52、HPV16、HPV58、HPV51 和HPV39。感染率最高的5 種低危型HPV 基因型包括HPV61、HPV54、HPV81（CP8304）、HPV6 和HPV11。見(jiàn)表1。

表1 37 型人乳頭狀瘤病毒（HPV）在不同年齡段的感染率［n（%）］Table 1 Prevalence of 37 HPV genotypes in different age groups［n（%）］

2.2 單一或多型別感染的分布

單一和多型別HPV 感染情況見(jiàn)表2。單一型HPV 感染率顯著高于多重HPV 感染率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。單一型HPV 感染中，高危型HPV 感染率顯著高于低危型HPV 感染率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。多重HPV 感染中，同時(shí)感染高危型和低危型HPV 感染率顯著高于多重感染高危型HPV 和多重感染低危型HPV，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。多重感染HPV 中，雙重感染HPV 顯著高于三重和四重及以上HPV 感染，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

表2 單一或多型別人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染率［n（%）］Table 2 The prevalence of 37 HPV genotypes of single/multiple infection in all the specimens［n（%）］

2.3 不同年齡組HPV 感染率

不同年齡組的女性HPV 感染率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在807 名感染HPV 的女性中，HPV 感染呈雙高峰，首峰出現(xiàn)在≤20 歲組（29.7%，11/37），次峰出現(xiàn)在61～65 歲組（25.4%，43/169）。低危型、高危型、單一型和多重型HPV 感染組表現(xiàn)出相同的趨勢(shì)。見(jiàn)圖1。

圖1 不同年齡組女性的HPV 感染率分布Figure 1 Prevalence of the HPV infection types in different age groups

3 討論

宮頸癌是嚴(yán)重危害全球女性健康排名第四的惡性腫瘤，每年新增53 萬(wàn)例，我國(guó)女性該病發(fā)病率也較高［1，3］。高危型HPV 感染，如HPV16、HPV18、HPV52 等，已被確定為宮頸癌的主要危險(xiǎn)因素，在大多數(shù)感染病例可檢出［12］。本研究對(duì)2019～2021年來(lái)河南省洛陽(yáng)市門(mén)診就診的6 538 例女性37 型HPV 感染情況進(jìn)行分析，HPV 的總體感染率為12.3%，接近于鄭州2016 年報(bào)道的HPV 陽(yáng)性率12.09%，其中2019 年HPV 感染率為20.05%，與其它研究者報(bào)道相似［13-14］。在我國(guó)不同地區(qū)，HPV 感染率差異較大，如山西（32%）、新疆（9.34%）、云南（7.6%）等［9，11，15］。許多因素，包括性別、年齡、種族和經(jīng)濟(jì)發(fā)展情況等，可導(dǎo)致不同地區(qū)HPV 感染率差異顯著［16］。

在本研究中，HPV16 和HPV52 是洛陽(yáng)地區(qū)感染率最高的HR-HPV 基因型。在中國(guó)的一些地區(qū)，例如北京，女性中最常見(jiàn)的HR-HPV 基因型為HPV16，在上海，HPV52 是最主要的基因型（3.58%）［17-18］。自2016 年以來(lái)，二價(jià)（HPV16 和HPV18）、四價(jià)（HPV6、11、16 和18）和九價(jià)（HPV6、11、16、18、31、33、45、52 和58）宮頸癌疫苗已獲得中國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局的批準(zhǔn)。本研究為河南省宮頸癌篩查和HPV 疫苗接種的實(shí)施提供了有價(jià)值的數(shù)據(jù)。從本研究調(diào)查數(shù)據(jù)可知，HPV39和HPV51 在洛陽(yáng)市感染率較高，含有此兩種基因型的HPV 疫苗將更有效地預(yù)防該地區(qū)HPV 感染。HPV 感染率與年齡有一定的相關(guān)性。在所有感染類(lèi)型中均觀察到兩個(gè)年齡段的女性感染率較高，分別是≤20 歲和61～65 歲，這和其他人的研究相似［19-21］。女性HPV 感染率在≤20 歲較高一方面與此年齡段檢測(cè)人員數(shù)量較少有關(guān)，另一方面，此年齡段性活躍較高而缺乏對(duì)HPV 抵抗力也是主要原因［22］。HPV 感染率第二個(gè)高峰出現(xiàn)在61～65 歲組（38.0%，151/397），包括10.6%（42/397）LR-HPV 感染和33.5%（133/397）HR-HPV 感染。女性在該年齡段由于體內(nèi)激素波動(dòng)引起的生理和免疫失調(diào)，使該年齡段成為HPV 高發(fā)時(shí)期［23］。本研究將有助于制定宮頸癌的預(yù)防策略，將年齡＞60 歲的女性納入更多檢查，包括細(xì)胞學(xué)檢查，甚至陰道鏡檢查，可能會(huì)有效預(yù)防宮頸癌。

綜上所述，本研究對(duì)中國(guó)中部地區(qū)女性人群中HPV 的分布和基因型提供了基本信息，有助于該地區(qū)制定宮頸癌的預(yù)防策略，促進(jìn)檢測(cè)診斷和疫苗的發(fā)展。