王洪 天津市職工醫(yī)院檢驗(yàn)科 （天津 300050）

內(nèi)容提要： 血細(xì)胞分析是臨床上常用的技術(shù)和手段，隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，血細(xì)胞分析技術(shù)也取得了巨大的進(jìn)步。隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，臨床儀器也在不斷的研發(fā)當(dāng)中，并且取得了巨大成績(jī)，血細(xì)胞分析是臨床上最為基礎(chǔ)的檢測(cè)手段，也是檢測(cè)患者血項(xiàng)的重要過(guò)程，能夠?yàn)榕R床上很多疾病提供科學(xué)的參考依據(jù)和基礎(chǔ)，為后續(xù)治療方案的制定和實(shí)施提供依據(jù)，而血細(xì)胞分析儀的便利性與準(zhǔn)確性與否，直接關(guān)系到臨床患者指標(biāo)檢測(cè)的準(zhǔn)確性，檢測(cè)項(xiàng)目越多的儀器，往往能夠在一次檢測(cè)當(dāng)中獲取到患者的血項(xiàng)數(shù)據(jù)，不但節(jié)約了檢測(cè)的時(shí)間，還簡(jiǎn)化了檢測(cè)的流程。為了分析其在臨床診斷當(dāng)中的價(jià)值和意義，本次綜述將對(duì)血細(xì)胞分析儀的臨床研究進(jìn)展進(jìn)行深入的分析。

血細(xì)胞分析儀是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中最常用的分析儀器之一，其主要功能為對(duì)血液中不同類型的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)、血紅蛋白等含量測(cè)定等，并根據(jù)檢測(cè)數(shù)據(jù)得出相應(yīng)的細(xì)胞形態(tài)參數(shù)，一般主要由機(jī)械系統(tǒng)、電子系統(tǒng)、細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)及計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等以不同形式組合構(gòu)成。血液細(xì)胞檢查一直是臨床上比較常用的檢測(cè)手段，而傳統(tǒng)的檢測(cè)方式是手工檢測(cè)，操作較為復(fù)雜，并且準(zhǔn)確率低，會(huì)受到較多因素的影響，而隨著科技的發(fā)展，血細(xì)胞分析的儀器也逐漸問(wèn)世[1]，血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)結(jié)果更為準(zhǔn)確。本次綜述將對(duì)血細(xì)胞分析儀的臨床研究進(jìn)展進(jìn)行分析[2]。

1.檢測(cè)方法不斷完善，儀器測(cè)試原理的改進(jìn)

1.1 檢測(cè)方法完善

電阻抗法細(xì)胞計(jì)數(shù)是臨床上較為原始的檢測(cè)方式，它是建立在血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)的基礎(chǔ)上，通過(guò)其在電解質(zhì)當(dāng)中的漂浮狀態(tài)進(jìn)行計(jì)數(shù)[3]，血細(xì)胞在電解質(zhì)當(dāng)中，會(huì)直接呈現(xiàn)出懸浮狀態(tài)，這是因?yàn)榕R床認(rèn)為其算為不良導(dǎo)體。當(dāng)其通過(guò)檢測(cè)器微孔時(shí)，電壓會(huì)發(fā)生瞬間的變化，也正是因此，一個(gè)電壓脈沖信號(hào)就因此而形成[4]，因此，可以通過(guò)對(duì)脈沖的數(shù)量的統(tǒng)計(jì)，來(lái)判斷血細(xì)胞的數(shù)量。在早期，只能夠檢測(cè)紅細(xì)胞的數(shù)量，逐漸擴(kuò)展到對(duì)白細(xì)胞、血紅蛋白等臨床指標(biāo)的檢測(cè)，這也就形成了能夠檢測(cè)八項(xiàng)指標(biāo)的血細(xì)胞分析儀[5]。隨后，臨床推出了檢測(cè)白細(xì)胞二分群小細(xì)胞群和大細(xì)胞群的儀器，之后又推出了細(xì)胞三分群小細(xì)胞群大細(xì)胞群、中間細(xì)胞群的分析儀器，將檢測(cè)的指標(biāo)提升至18項(xiàng)[6]。

1.2 儀器測(cè)試原理的改進(jìn)

這些血細(xì)胞分析儀的改進(jìn)方式主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類部分的改進(jìn)，即電阻抗法的二分群發(fā)展為多項(xiàng)技術(shù)聯(lián)合同時(shí)檢測(cè)一個(gè)細(xì)胞，綜合分格實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得岀的較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞分群結(jié)果。（1）光散射技術(shù)可使血細(xì)胞分析儀里的血細(xì)胞在未經(jīng)任何處理，與體內(nèi)形態(tài)完全相同的自然狀態(tài)下得出檢測(cè)結(jié)果。首先在標(biāo)本內(nèi)中只作用于紅細(xì)胞的溶血?jiǎng)┦辜t細(xì)胞溶解，然后加入抗溶血?jiǎng)┢鹬泻腿苎獎(jiǎng)┑淖饔?，使白?xì)胞表面、胞質(zhì)及細(xì)胞大小等特征仍然保持與體內(nèi)時(shí)間相同的狀態(tài)。光散射能提供細(xì)胞類型的鑒別方式，對(duì)細(xì)胞顆粒的構(gòu)型和顆粒質(zhì)量有區(qū)別能力。（2）阻抗與射頻技術(shù)聯(lián)合白細(xì)胞分類，通過(guò)嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、嗜堿性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、淋巴、單核、粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、幼稚細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)，采用電阻與射頻聯(lián)合檢測(cè)的方式對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類。（3）光散射與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)，將血細(xì)胞經(jīng)過(guò)氧化物染色后，胞質(zhì)內(nèi)即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng)，血液分析儀的分析基礎(chǔ)形成，分血器將血加入到高滲液體內(nèi)并孵育20秒鐘，細(xì)胞被破壞，白細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶被固定，發(fā)生第二步反應(yīng)，由于酶反應(yīng)強(qiáng)度不同和細(xì)胞體大小不同，激光束射到細(xì)胞上的前向角和散射角有所不同，以X軸為吸光率標(biāo)記酶反應(yīng)強(qiáng)度，Y軸為光散射標(biāo)記細(xì)胞大小。每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的兩個(gè)信號(hào)結(jié)合定位在細(xì)胞圖上。每秒鐘儀器可測(cè)上千個(gè)細(xì)胞。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)存儲(chǔ)的資料進(jìn)行分析處理并結(jié)合嗜好堿性粒細(xì)胞或分葉核粒細(xì)胞通道結(jié)果計(jì)算出白細(xì)胞總參數(shù)和分類參數(shù)。（4）多角度偏振光散射白細(xì)胞分類技術(shù)：其原理是一定體積的全血標(biāo)本用鞘流液按適當(dāng)比例稀釋。其白細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài)，因嗜堿性粒細(xì)胞具有吸濕的特性，所以嗜堿性粒細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細(xì)胞內(nèi)部的滲透壓高于鞘興高釆烈的滲透壓而發(fā)生改變，紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白從細(xì)胞內(nèi)游離出來(lái)，而鞘液內(nèi)的水分進(jìn)入紅細(xì)胞中白細(xì)胞檢測(cè)。然后從前角光、狹角光、消偏振光、垂直光散射四個(gè)角度測(cè)定散射光的密度，從這四個(gè)角度同時(shí)對(duì)個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行測(cè)量，同一種特定的程序自動(dòng)儲(chǔ)存和分析數(shù)據(jù)，將白細(xì)胞分為嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞5種。

2.設(shè)置的功能不斷增多，拓展了儀器的使用范圍

隨著臨床檢驗(yàn)學(xué)的不斷發(fā)展，生產(chǎn)儀器的廠家為了能夠生產(chǎn)出符合臨床的檢驗(yàn)設(shè)備，也在不斷的發(fā)展當(dāng)中。血細(xì)胞分析儀隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，也取得了巨大的進(jìn)步，將很多軟件系統(tǒng)等運(yùn)用到了其中，也就是說(shuō)，血常規(guī)的檢測(cè)已經(jīng)是臨床最基礎(chǔ)的檢測(cè)了，還增加了許多擴(kuò)展功能[7]，能夠?yàn)榕R床幫助較多。常見(jiàn)的型號(hào)有SYSMEX SE-9500、XE-2100 COULTER STKS等儀器。含有網(wǎng)織紅細(xì)胞的測(cè)定儀器，可選的染料有傳統(tǒng)的化學(xué)染料、熒光染料等，儀器有全自動(dòng)的，也有半自動(dòng)的，不同的儀器對(duì)于網(wǎng)織紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)也存在一定的誤差，對(duì)于有條件的實(shí)驗(yàn)室，可以采用較為高端的手段進(jìn)行校準(zhǔn)，調(diào)節(jié)儀器的參數(shù)，但是要按照原廠配套的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行把控和調(diào)整。此外，還有的儀器增加了幼稚細(xì)胞分析和有核紅細(xì)胞分析功能[8]，比如BAYER ADVIA-120、SYSMEX SE-9500/XE-2100、COULTER LH750、ABBOTT CD3 500/4000等，具有顯著的效果和意義，而對(duì)于試劑方面，有的儀器需要，而有的儀器是不需要，在寄生蟲(chóng)檢測(cè)方面，有的儀器是能夠直接檢測(cè)出的[9,10]，比如對(duì)瘧原蟲(chóng)有良好的敏感度的儀器是ABBOTT CD3200。臨床上還有的儀器，會(huì)在血細(xì)胞分析儀上綁定流式細(xì)胞分析儀的某些功能，也就是說(shuō)，臨床可以將其進(jìn)行常規(guī)血常規(guī)檢查時(shí)，也能夠?qū)⒛承┝馨图?xì)胞亞群獲得，比如將抗CD4和CD8單克隆抗體的聚苯乙烯微球與血液混合的儀器是Coulter GENS，它能夠?qū)⑵浣Y(jié)合含有相應(yīng)表面抗原標(biāo)志的淋巴細(xì)胞，從而改變細(xì)胞的VCS性質(zhì)，從而得出CD4和CD8淋巴細(xì)胞的計(jì)數(shù)，并且計(jì)算比率。在Abbott CELL-DYN 4000的儀器上[11]，可以對(duì)CD3、CD4、CD8和CD6進(jìn)行測(cè)定，實(shí)現(xiàn)一機(jī)兼有兩類儀器的功能。此外，CD-3700和ADVIA-2120具有特殊的分析模式，從而分析血細(xì)胞的數(shù)據(jù)，而ADVIA-2120可以與特殊的試劑結(jié)合[12]。

3.計(jì)算機(jī)技術(shù)的應(yīng)用，提高了自動(dòng)化程度

血細(xì)胞分析儀的自化程度不斷提高，要得益于計(jì)算機(jī)技術(shù)的不斷應(yīng)用和發(fā)展。此外，也使得檢測(cè)的速度和效率大大提升，不僅體現(xiàn)在檢測(cè)手段的多樣化，還表現(xiàn)在將自動(dòng)稀釋技術(shù)運(yùn)用到儀器當(dāng)中，還有的會(huì)直接連接到全自動(dòng)流水線的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，這就大大節(jié)約了檢測(cè)的時(shí)間[13]，還提升了取樣和稀釋的精度，并且操作簡(jiǎn)便靈活，將檢測(cè)的速度和效率大大提升。目前，Bayer ADVIA可以檢測(cè)120個(gè)標(biāo)本/每小時(shí)[14]，而Sysmex XE-2100可以檢測(cè)150個(gè)標(biāo)本/每小時(shí)，在操作靈活的基礎(chǔ)上，能夠成批的進(jìn)行檢測(cè)，并且在檢測(cè)的中間，可以隨時(shí)插入其他的標(biāo)本[15,16]，檢驗(yàn)的方式也多種多樣，比如CBC方、CBC+DIFF方式和RET方式，也可以將其任意的組合，來(lái)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行辨別和檢測(cè)，能夠直接將患者的信息進(jìn)行區(qū)分，再根據(jù)不同的條碼返回到患者的手中，記錄在檔案中，從而提供了電子的檢查數(shù)據(jù)結(jié)果，大大避免了編號(hào)帶來(lái)的差錯(cuò)[17]。

4.檢測(cè)參數(shù)的臨床應(yīng)用

血細(xì)胞分析儀可以檢測(cè)白細(xì)胞等常規(guī)的臨床指標(biāo)，在疾病的診斷和評(píng)估當(dāng)中，起到參考的作用和價(jià)值，對(duì)于疾病的鑒別也能夠起到輔助和參考作用[18]。

4.1 過(guò)氧化物酶散點(diǎn)圖

BAYER ADVIA 120儀器能夠分析和辨別各類白血病及亞型，根據(jù)各種白細(xì)胞的MPO活性不同，從而對(duì)外周血或骨髓標(biāo)本進(jìn)行分析，結(jié)果表明，兩組人群的符合率均為100%，但是在急非淋M 1、M 2、M4的鑒別診斷具有顯著差異[19]，因此，過(guò)氧化物酶散點(diǎn)圖異常和MPO活性減低相結(jié)合的方式，是臨床評(píng)估和診斷白細(xì)胞MPO缺陷癥的依據(jù)和參考[20]。

4.2 紅細(xì)胞血紅蛋白含量

紅細(xì)胞血紅蛋白含量是BAYER ADVIA 120的類似儀器采用光散射測(cè)量的紅細(xì)胞參數(shù)的一種[21]，在貧血的診斷當(dāng)中具有顯著價(jià)值，在相關(guān)疾病的診斷當(dāng)中具有顯著的意義[22]，尤其是兒童、孕婦人群，除此之外，還在血液透析患者鐵缺乏、慢性病貧血時(shí)功能性鐵缺乏的診斷和評(píng)估當(dāng)中具有顯著效果和價(jià)值[23]。

4.3 造血干細(xì)胞

造血干細(xì)胞是體內(nèi)常見(jiàn)的細(xì)胞，可進(jìn)行二次可移植性[24]。造血干細(xì)胞的移植目前在臨床上的運(yùn)用十分廣泛，并且效果顯著，很多疾病在臨床上的救治均需要造血干細(xì)胞的移植，再加上其具有可塑性[25]，能夠代替患病的組織、細(xì)胞或者器官，大大提升心臟功能。

5.總結(jié)

隨著科技的發(fā)展，血細(xì)胞分析的儀器的不斷更新，檢測(cè)方法不斷完善，陸續(xù)出現(xiàn)了檢測(cè)白細(xì)胞二分群小細(xì)胞群、大細(xì)胞群、三分群小細(xì)胞群、大細(xì)胞群、中間細(xì)胞群的分析儀器，測(cè)量參數(shù)逐漸增加至18項(xiàng)；檢測(cè)功能不斷完善，出現(xiàn)了網(wǎng)織紅細(xì)胞、幼稚細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞亞群的血細(xì)胞分析功能。計(jì)算機(jī)技術(shù)的應(yīng)用，自動(dòng)稀釋、批量檢測(cè)、條碼返還技術(shù)的運(yùn)用，簡(jiǎn)化了操作，檢測(cè)的速度、效率、準(zhǔn)確度大大提升，還能為患者提供手機(jī)端的檢查數(shù)據(jù)結(jié)果。血細(xì)胞分析檢測(cè)參數(shù)可以應(yīng)用到過(guò)氧化物酶散點(diǎn)圖、紅細(xì)胞血紅蛋白含量、造血干細(xì)胞對(duì)疾病的鑒別起到輔助和參考作用。血細(xì)胞分析儀還在不斷的研發(fā)和推新當(dāng)中，相信其會(huì)在臨床上具有更多顯著的價(jià)值和意義。