金立

(安徽豐樂農(nóng)化有限責(zé)任公司，合肥 231600)

黃條跳甲(Phyllotretaspp.)是一種可嚴(yán)重為害十字花科蔬菜根部和葉片的鞘翅目葉甲科害蟲，包括黃曲條跳甲、黃直條跳甲、黃狹條跳甲和黃寬條跳甲4 種，主要危害十字花科的白菜類、甘藍(lán)類和茄果類，瓜類，豆類蔬菜。近年來(lái)，隨著種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整和設(shè)施栽培的普及，黃條跳甲的發(fā)生危害逐年加重，對(duì)作物的品質(zhì)和產(chǎn)量造成很大影響[1-4]。篩選出防治黃條跳甲高效低毒抗性低的農(nóng)藥，是廣大農(nóng)民的迫切需求。

金龜子綠僵菌(Metarhizium anisopliae)作為生物農(nóng)藥真菌殺蟲劑，具有寄主范圍廣，致病力強(qiáng)，對(duì)人、畜、農(nóng)作物無(wú)毒，無(wú)殘毒，菌劑易生產(chǎn)，持效期長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)[5]。四氯蟲酰胺(tetrachlorantraniliprole)化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理屬于鄰甲酰氨基苯甲酰胺類魚尼丁受體調(diào)節(jié)劑，對(duì)多種害蟲均有防效[6]。為進(jìn)一步明確金龜子綠僵菌和四氯蟲酰胺混配對(duì)黃條跳甲的作用效果，采用室內(nèi)生物測(cè)定方法開展了金龜子綠僵菌和四氯蟲酰胺及其不同配比組合對(duì)黃條跳甲的聯(lián)合毒力以及田間藥效試驗(yàn)，以期為藥劑開發(fā)提供科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)藥劑

150 億孢子/g 金龜子綠僵菌母藥，95%四氯蟲酰胺原藥，7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑(金龜子綠僵菌質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%、孢子濃度80 億孢子/g，四氯蟲酰胺含量1%)，100 億孢子/g 金龜子綠僵菌懸浮劑，1%四氯蟲酰胺懸浮劑，10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑均由安徽豐樂農(nóng)化有限責(zé)任公司提供。

1.2 供試靶標(biāo)

黃條跳甲成蟲，外出采集，在安徽豐樂農(nóng)化有限責(zé)任公司生測(cè)室用蘿卜苗籠罩飼養(yǎng)。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定

參照殺蟲劑室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則NY/T 1154.6—2006 和 NY/T 1154.7—2006[7-8]，采用浸蟲法進(jìn)行藥劑對(duì)黃條跳甲的毒力測(cè)定。將四氯蟲酰胺用丙酮配制成母液或金龜子綠僵菌母藥直接用含0.1%吐溫-80 水溶液稀釋成5 個(gè)濃度，將黃曲條跳甲成蟲浸于藥劑溶液中，浸泡5 s 后取出置于放有蘿卜葉和保濕濾紙的培養(yǎng)皿中，空白對(duì)照使用未加藥劑的0.1%吐溫-80 水溶液。每處理4 次重復(fù)，每重復(fù)40 頭蟲。處理后置于[溫度(26±1)℃、相對(duì)濕度70%～80%、光照L∶D=14 h∶10 h]人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)和觀察，48 h 后統(tǒng)計(jì)死亡蟲數(shù)。以蟲體色發(fā)黑不活動(dòng)作為黃曲條跳甲死亡標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，每個(gè)藥劑單劑及不同配比液按有效成分含量分別設(shè)5 個(gè)系列濃度處理，具體處理劑量：金龜子綠僵菌32、16、8、4、2 mg/L，四氯蟲酰胺8、4、2、1、0.5 mg/L，金龜子綠僵菌與四氯蟲酰胺26∶1、16∶1、6∶1、1∶1、1∶6 配比液 9.6、4.8、2.4、1.2、0.6 mg/L。

相關(guān)計(jì)算公式為：

式中：P1為校正死亡率(%)；Pt為處理死亡率(%)：P0為空白對(duì)照死亡率(%)。

采用DPS 處理軟件統(tǒng)計(jì)求毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、各藥劑的LC50值，參照農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則的方法計(jì)算混配劑的共毒系數(shù)(CTC)，計(jì)算公式如下：

式中：S為標(biāo)準(zhǔn)殺蟲劑的LC50；M為混劑的LC50；TIA為A 藥劑毒力指數(shù)；PA為A 藥劑在混劑中的百分含量；TIB為B 藥劑毒力指數(shù)；PB為B 藥劑在混劑中的百分含量。當(dāng)CTC≥120 表現(xiàn)為增效作用；CTC≤80 表現(xiàn)為拮抗作用；0＜CTC＜120 表現(xiàn)為相加作用。

1.4 田間藥效試驗(yàn)

根據(jù)室內(nèi)配方篩選的結(jié)果，選取共毒系數(shù)最高的配比配制成7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑(金龜子綠僵菌含量6%，四氯蟲酰胺含量1%)開展田間藥效試驗(yàn)驗(yàn)證[9]。

1.4.1 試驗(yàn)作物和試驗(yàn)對(duì)象

作物：小白菜；品種：金品28 青梗菜。

各小區(qū)白菜品種、播量、播種時(shí)間、田間密度、肥水管理等栽培條件一致，小白菜長(zhǎng)勢(shì)均勻。

試驗(yàn)對(duì)象為黃條跳甲，施藥時(shí)正處于黃條跳甲發(fā)生初期，多數(shù)葉片出現(xiàn)零星被害癥狀，部分葉片有明顯被害癥狀。

1.4.2 試驗(yàn)地點(diǎn)和氣候情況

試驗(yàn)安排在北京市平谷區(qū)山東莊鎮(zhèn)魚子山村。東經(jīng) 117°12′3124″，北緯 40°08′2849″。土壤類型為黃壤土。種植時(shí)間為2021 年4 月25 日，種植方式為機(jī)械直播，種植密度為株距3 cm，行距10 cm，生長(zhǎng)情況：小白菜處于苗期3～4 片葉。

1.4.3 藥劑試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共7 個(gè)處理。每個(gè)處理4 個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積20 m2，各個(gè)小區(qū)隨機(jī)排列，藥劑設(shè)計(jì)為7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑25、30、35 mL/667 m2；100 億孢子/g 金龜子綠僵菌懸浮劑240 mL/667 m2；1%四氯蟲酰胺懸浮劑23 mL/667 m2；10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑28 mL/667 m2。

1.4.4 施藥方法

施藥時(shí)間為2021 年5 月25 日，在小白菜黃條跳甲發(fā)生初期，噴霧法施藥1 次。按照清水對(duì)照、試驗(yàn)藥劑(由低到高濃度)、對(duì)照藥劑的順序噴施各處理。施藥前噴霧器流速校準(zhǔn)3 次，小區(qū)用水量校準(zhǔn)3 次，更換藥劑及施藥后清洗噴霧器、噴桿各3 次。

1.4.5 藥效調(diào)查

調(diào)查 3 次，當(dāng)天施藥前(2021 年 5 月 25 日)：調(diào)查葉片受害指數(shù)；施藥后2 d(2021 年5 月27 日)：調(diào)查葉片受害指數(shù)、安全性；施藥后7 d(2021 年6 月1 日)：調(diào)查葉片受害指數(shù)、幼蟲數(shù)、安全性。

成蟲調(diào)查：每小區(qū)隨機(jī)選取20 株作物調(diào)查植株的葉片受成蟲為害情況，分級(jí)記錄并計(jì)算葉片受害指數(shù)。0 級(jí)：無(wú)被害癥狀；1 級(jí)：葉片上有零星被害癥狀；3 級(jí)：葉片上有1/3 以下面積被害；5 級(jí)：葉片上有1/3～1/2 面積被害；7 級(jí)：葉片上有1/2～2/3面積被害；9 級(jí)：葉片上有2/3 面積被害。

幼蟲調(diào)查：藥后最后1 次調(diào)查時(shí)，每小區(qū)固定3 點(diǎn)，每點(diǎn)調(diào)查2 株，將植株根部及周圍泥土挖出并用清水漂洗，調(diào)查泥土中的活幼蟲數(shù)。

安全性：目測(cè)法觀察藥劑對(duì)作物有無(wú)藥害及對(duì)其他非靶標(biāo)生物的影響，對(duì)藥害程度進(jìn)行分級(jí)。-：無(wú)藥害；+：輕度藥害，可見受害狀，不影響作物正常生長(zhǎng)；++：中度藥害，可復(fù)原，不會(huì)造成作物減產(chǎn)；+++：重度藥害，影響作物正常生長(zhǎng)，對(duì)作物產(chǎn)量和質(zhì)量造成一定程度的損失；++++：嚴(yán)重藥害，作物生長(zhǎng)受阻，作物產(chǎn)量和質(zhì)量損失嚴(yán)重。

1.5 藥效計(jì)算方法及數(shù)據(jù)處理

根據(jù)調(diào)查結(jié)果，按照下式計(jì)算防效：

式中：CK0為清水對(duì)照區(qū)藥前葉片受害指數(shù)；CK1為清水對(duì)照區(qū)藥后葉片受害指數(shù)；PT0為藥劑處理區(qū)藥前葉片受害指數(shù)；PT1為藥劑處理區(qū)藥后葉片受害指數(shù)。

式中：N0清水對(duì)照區(qū)幼蟲數(shù)；N1藥劑處理區(qū)幼蟲數(shù)。

利用Excel 進(jìn)行數(shù)據(jù)輸入和統(tǒng)計(jì)，采用鄧肯氏新復(fù)極差(DMRT)法進(jìn)行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)聯(lián)合毒力測(cè)定

金龜子綠僵菌、四氯蟲酰胺及其不同混配組合對(duì)黃條跳甲的聯(lián)合毒力測(cè)定結(jié)果見表1。由表1 可知：金龜子綠僵菌、四氯蟲酰胺5 個(gè)不同配比混配組合對(duì)黃條跳甲有明顯的增效或加成作用，其共毒系數(shù)為108.10～470.80，其中以金龜子綠僵菌與四氯蟲酰胺6∶1 的混配組合增效作用最顯著，其共毒系數(shù)最大。

表1 金龜子綠僵菌-四氯蟲酰胺不同配比混劑處理黃條跳甲的毒力測(cè)定結(jié)果

2.2 對(duì)小白菜黃條跳甲的田間防效

7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑防治小白菜黃條跳甲田間藥效試驗(yàn)的防治效果見表2。

防治成蟲時(shí)，藥后2 d，7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑25、30、35 mL/667 m2的防效分別為55.85%、59.65%、64.17%，100 億孢子/g 金龜子綠僵菌懸浮劑、1%四氯蟲酰胺懸浮劑和10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑的防效分別為55.82%、50.62%、55.04%；藥后7 d，各試驗(yàn)處理防效相較于藥后2 d 均有顯著提升，其中7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑25、30、35 mL/667 m2防效分別為71.00%、78.72%、83.13%，100 億孢子/g 金龜子綠僵菌懸浮劑、1%四氯蟲酰胺懸浮劑和10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑處理的防效分別為62.76%、65.15%、76.26%。

防治幼蟲時(shí)，藥后7 d，7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑25、30、35 mL/667 m2的防效分別為63.41%、72.94%、81.64%，100 億孢子/g 金龜子綠僵菌懸浮劑、1%四氯蟲酰胺懸浮劑和10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑的處理防效分別為60.77%、61.75%、71.61%。

2.3 安全性

試驗(yàn)期間，試驗(yàn)藥劑各處理區(qū)與清水對(duì)照相比，小白菜生長(zhǎng)正常，無(wú)藥害；未觀察到對(duì)其他非靶標(biāo)生物的不良影響。

3 結(jié)論與討論

近年來(lái)，因生態(tài)環(huán)境惡化、水資源下降、人口持續(xù)增長(zhǎng)等問題，使得提升農(nóng)作物產(chǎn)量，提高植物保護(hù)效果與生態(tài)性的呼聲越來(lái)越高。生物農(nóng)藥低毒安全，對(duì)周圍環(huán)境影響小，能夠維系生物生存環(huán)境的健康、穩(wěn)定，利用生物農(nóng)藥加強(qiáng)對(duì)病蟲害的防治，為農(nóng)作物的生長(zhǎng)創(chuàng)造更安全的環(huán)境，不僅保護(hù)農(nóng)作物，又可增加農(nóng)作物產(chǎn)量[10-12]。而生物農(nóng)藥與化學(xué)農(nóng)藥復(fù)配使產(chǎn)品在具有生物農(nóng)藥綠色環(huán)保安全和持效期長(zhǎng)等優(yōu)勢(shì)的同時(shí)，兼具化學(xué)農(nóng)藥速效性強(qiáng)的特點(diǎn)，對(duì)害蟲防控有很高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑(金龜子綠僵菌孢子濃度為80 億孢子/g)為微生物-化學(xué)農(nóng)藥復(fù)配制劑。本試驗(yàn)結(jié)果表明，金龜子綠僵菌與四氯蟲酰胺復(fù)配有顯著增效作用，7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑對(duì)小白菜黃曲條跳甲具有較好的防治效果，高劑量處理對(duì)跳甲成蟲與幼蟲的防效均能達(dá)到80%以上，且對(duì)小白菜安全，是防治小白菜黃曲條跳甲較為理想的藥劑。7%金龜子綠僵菌·四氯蟲酰胺懸浮劑的推薦用量為150～210 g a.i./hm2(制劑量為375～525 mL/hm2)；施用方法：根據(jù)植株大小，以每株達(dá)到1～2 頭成蟲時(shí)為防治適期，用水量為600～750 L/hm2，在上午10 時(shí)之前或下午16 時(shí)以后成蟲活動(dòng)不夠活躍時(shí)噴藥，施藥時(shí)需在小白菜葉片正反兩面均勻噴霧。