杜彩虹,張耀文,李 嘉,王虎成

(蘭州大學(xué) 草種創(chuàng)新與草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)全國重點實驗室,蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)教育部工程研究中心,蘭州大學(xué) 草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,蘭州 730020)

毛發(fā)是動物在適應(yīng)環(huán)境和進(jìn)化過程中由皮膚上的毛囊細(xì)胞發(fā)育而成[1]。毛囊分為有完整附屬結(jié)構(gòu)的初級毛囊及僅有不發(fā)達(dá)皮脂腺的次級毛囊。研究表明,初級毛囊由上皮細(xì)胞和真皮細(xì)胞相互作用產(chǎn)生[2],其密度隨胎齡的增大逐漸減小,而次級毛囊是初級毛囊的分支,其密度在羔羊出生前經(jīng)歷先增加后降低至出生時穩(wěn)定的過程[3]。毛囊發(fā)育受遺傳、營養(yǎng)及環(huán)境因素多方面調(diào)控[4]。洪瓊花等[5]在不同營養(yǎng)水平下研究云南半細(xì)毛羔羊的毛囊發(fā)育,發(fā)現(xiàn)高營養(yǎng)水平下其總毛囊密度、毛發(fā)生長速率均高于低營養(yǎng)水平。仉連平等[6]研究發(fā)現(xiàn),甘肅高山細(xì)毛羊次級毛囊密度出生至3月齡斷奶時毛囊成熟率達(dá)92.40%,若在此時期到6月齡以后羔羊能夠得到充足營養(yǎng),毛囊原始體則進(jìn)一步發(fā)育形成毛纖維。目前,較多研究集中在不同品種毛用羊胚胎期的毛囊發(fā)育及成年羊的毛囊周期性變化[7-8]。研究表明,羔羊期作為羔羊生長發(fā)育[9]、胃腸道發(fā)育[10]和毛用羊產(chǎn)毛、產(chǎn)絨的關(guān)鍵時期[11],在該階段研究飼喂水平對羔羊毛囊發(fā)育的影響較少。基于此,本試驗以3月齡斷奶的高山美利奴公、母羔羊為試驗動物,研究不同飼喂水平的全混合顆粒飼糧對斷奶羔羊生產(chǎn)性能及毛囊發(fā)育情況的影響,進(jìn)而為改善羊毛品質(zhì)及提高羊毛產(chǎn)量的研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計及飼糧組成

選取48只3月齡斷奶的高山美利奴羔羊[公:n=24,體質(zhì)量:(28.70±1.12) kg;母:n=24,體質(zhì)量:(24.74±1.42) kg],分別將不同性別的羔羊根據(jù)飼喂水平分為自由采食組(AL)、70%飼喂水平組(0.7AL)及40%飼喂水平組 (0.4AL)[12],每組16只。AL組羔羊確保每天有10%左右的剩料,0.7AL組和0.4AL組依自由采食量的70%和40%投喂,每天的飼喂量根據(jù)AL組羔羊前一天的采食量進(jìn)行調(diào)整。0.4AL組為維持采食量組,平均日增質(zhì)量目標(biāo)為0 g/d,AL組的公羔和母羔平均日增質(zhì)量目標(biāo)分別為250 g/d、200 g/d,0.7AL組公羔和母羔平均日增質(zhì)量目標(biāo)分別為125 g/d、100 g/d。在AL組公羔和母羔的目標(biāo)體質(zhì)量分別達(dá)到45 kg和40 kg后屠宰。試驗預(yù)飼期10 d,正試期90 d。所有試驗羊單欄飼喂,于每天8:30和18:30分2次投喂顆粒飼料,飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of diet (DM basis)

1.2 測定指標(biāo)及方法

1.2.1 生長性能 試驗期間記錄試驗羊每天的給料質(zhì)量和剩料質(zhì)量,并間隔10 d于晨飼前1 h稱體質(zhì)量,用以計算試驗羊的日采食質(zhì)量和平均日增質(zhì)量。

1.2.2 皮膚樣品采集及組織切片制作 飼喂試驗結(jié)束后,在3 個飼喂水平組中各挑選4只公羔和4只母羔屠宰,采集其腹側(cè)約2 cm2的皮膚樣品,于4%多聚甲醛固定液中固定24 h以上。修整固定后的皮膚樣品用70%乙醇換洗,在不同濃度梯度的乙醇中脫水。使用二甲苯中透明處理,用石蠟浸透后包埋。將包埋好的蠟塊置于切片機(jī)修塊、固著后根據(jù)毛囊生長方向切片,隨后貼片,貼標(biāo)簽,使用伊紅—蘇木精進(jìn)行HE染色制成橫切片,供顯微鏡觀察。

1.2.3 皮膚毛囊參數(shù)測定 將皮膚組織切片置于100×顯微鏡下觀察,每個切片選5個不同的視野,分別統(tǒng)計每個視野中初級毛囊和次級毛囊的個數(shù),計算初級毛囊和次級毛囊密度及毛囊比(S/P)。由于皮膚組織會發(fā)生收縮現(xiàn)象,故本試驗中所有皮膚數(shù)據(jù)皆為皮膚收縮率校正后的數(shù)據(jù)。

毛囊密度=每個視野毛囊個數(shù)/視野面積 (2.992 5 mm2)

S/P值=次級毛囊密度/初級毛囊密度

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2019初步整理后,使用SPSS 26.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA),采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較,數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”形式表示,P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼喂水平對斷奶羔羊生長性能的影響

如表2所示,AL組斷奶公羔的末體質(zhì)量和日增質(zhì)量均極顯著高于0.7AL和0.4AL組 (P<0.01),0.7AL和0.4AL組的斷奶公羔的日增質(zhì)量與AL組相比分別降低35.49%、 78.00%。 0.7AL組和0.4AL組的斷奶母羔與AL組相比日增質(zhì)量分別降低62.66%、88.99%。斷奶公、母羔AL、0.7AL及0.4AL組的平均日增質(zhì)量和日采食量變化規(guī)律相同,即AL> 0.7AL>0.4AL,3組之間差異顯著(P<0.05)。0.4AL組料質(zhì)量比最高,顯著高于AL組和 0.7AL組(P<0.05)。

表2 不同飼喂水平下斷奶羔羊的生長性能Table 2 Growth performance of weaned lambs in different feeding levels

2.2 飼喂水平對斷奶羔羊毛囊發(fā)育性能的影響

由表3和圖1可知,不同飼喂水平下斷奶公羔的次級毛囊密度和S/P值差異顯著(P< 0.05),初級毛囊密度無顯著差異(P>0.05)。AL組的次級毛囊密度顯著高于0.7AL、0.4AL組(P<0.05),S/P值隨飼喂水平的降低顯著降低(P<0.05)。不同飼喂水平下斷奶母羔的次級毛囊密度和S/P值差異顯著(P<0.05),而初級毛囊密度差異不顯著(P>0.05)。AL組的次級毛囊密度和S/P值顯著高于0.7AL、0.4AL組(P<0.05),同時,0.7AL組與0.4AL組的次級毛囊密度和S/P值無顯著差異(P>0.05)。

表3 不同飼喂水平下斷奶羔羊的毛囊發(fā)育性能Table 3 Hair follicle development performance of weaned lambs in different feeding levels

3 討 論

3.1 斷奶羔羊不同飼喂水平條件下的生長性能

生長性能是研究動物生長發(fā)育的基礎(chǔ),常用來評價動物的經(jīng)濟(jì)價值。保證動物機(jī)體從飼料中獲得充足營養(yǎng)物質(zhì)是維持正常新陳代謝的必要條件[13]。目前,較多研究集中在試驗期內(nèi)羔羊的平均日增質(zhì)量、料質(zhì)量和日采食質(zhì)量等指標(biāo)。其中料質(zhì)量比越低,表示飼料轉(zhuǎn)化率越高[14-15]。陳軍強(qiáng)等[16]研究表明,隨著限飼水平的升高,小尾寒羊的平均日增質(zhì)量逐漸降低。Galvani等[17]對特克賽爾斷奶羔羊的研究結(jié)果表明,隨著限飼水平的升高,羔羊的平均日增質(zhì)量顯著下降。本試驗中隨著限飼水平的升高,斷奶公、母羔羊的平均日增質(zhì)量均降低,與前人[6-7]結(jié)果一致。許貴善等[18]研究發(fā)現(xiàn),對20～35 kg杜寒雜交公羔而言,40%自由采食質(zhì)量能滿足羔羊的維持需要。本試驗中,0.4AL組為維持采食質(zhì)量供應(yīng)組,即保證在試驗期內(nèi)保持體質(zhì)量不增不減,但由于在生產(chǎn)實際中難以做到,一般以平均日增質(zhì)量控制在50 g以內(nèi)為計,試驗結(jié)果中斷奶公羔和母羔在0.4AL飼喂水平時平均日增質(zhì)量分別為46.34 g/d、20.14 g/d,表明該飼喂水平滿足高山美利奴羔羊維持 需要。

3.2 斷奶羔羊不同飼喂水平條件下的毛囊發(fā)育情況

毛囊主要分布于皮膚真皮層,是由表皮和間葉細(xì)胞相互作用形成的復(fù)雜器官,其生長發(fā)育對羊毛產(chǎn)量和品質(zhì)起決定性作用[19]。營養(yǎng)對毛囊生長發(fā)育的調(diào)節(jié)作用主要表現(xiàn)在調(diào)控皮膚組織的血流量和血液中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度,加快皮膚結(jié)構(gòu)發(fā)育及改善膠質(zhì)顯微結(jié)構(gòu)和特性,增加毛囊數(shù)量和皮膚厚度,縮短毛球細(xì)胞周期,最終增加羊毛產(chǎn)量和改善羊毛品質(zhì)[20]。何茂昌等[21]研究發(fā)現(xiàn),隴東絨山羊初級毛囊密度隨月齡的增加差異變小,次級毛囊密度從出生至6月齡逐漸增加。孟楊等[22]研究發(fā)現(xiàn),羔羊期遼寧絨山羊公、母羔皮膚的次級毛囊密度和毛囊比值均在6月齡時達(dá)到最高。初級毛囊發(fā)育和分化早,形成粗毛,而次級毛囊分化晚,形成絨毛。次級毛囊密度與初級毛囊密度的比值是反映產(chǎn)毛性能的重要指標(biāo)。王曉波等[23]研究表明,在限飼條件下,動物機(jī)體獲取的能量、蛋白等營養(yǎng)物質(zhì)含量均不同程度降低,導(dǎo)致毛囊發(fā)育需要的營養(yǎng)無法滿足,從而降低了次級毛囊密度,影響羊毛產(chǎn)量。本研究結(jié)果與王曉波等[23]的研究結(jié)果一致,斷奶公、母羔羊初級毛囊密度無顯著變化,而0.7AL組和0.4AL組次級毛囊密度及毛囊比(S/P值)均顯著低于AL組,表明在限制飼糧時羔羊雖能滿足機(jī)體維持需要的能量,但無法滿足毛囊發(fā)育的營養(yǎng)需要,從而使次級毛囊密度和毛囊比顯著降低,進(jìn)而對羊毛產(chǎn)量產(chǎn)生影響。

4 結(jié) 論

研究發(fā)現(xiàn),飼喂水平對斷奶羔羊的日增質(zhì)量、次級毛囊密度和S/P值有影響,斷奶公羔AL組的平均日增質(zhì)量、次級毛囊密度和S/P值比 0.7AL組分別高87.78 g/d、12.31 mm-2、1.52,斷奶母羔AL組的平均日增質(zhì)量、次級毛囊密度和S/P值比 0.7AL組分別高104.58 g/d、11.11 mm-2、1.95。飼喂水平對斷奶的公、母羔羊平均日增質(zhì)量、次級毛囊密度和初級毛囊密度與次級毛囊密度的比值(S/P)有顯著影響。