雷 艷

（天祝藏族自治縣食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，甘肅天祝 733299）

現(xiàn)階段“生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”由“法定行為規(guī)范”“水質(zhì)指標(biāo)濃度量限值”兩個(gè)部分組成，前者是為保證飲用水相關(guān)指標(biāo)與相應(yīng)要求相符，約束、規(guī)范集中式供水單位生產(chǎn)流程；后者主要目的是保證飲用水中所含各種物質(zhì)不會(huì)影響公眾健康與生存質(zhì)量[1]。但從現(xiàn)下我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展?fàn)顩r來看，工業(yè)生產(chǎn)使得生活飲用水質(zhì)量較差，不達(dá)標(biāo)現(xiàn)象較為嚴(yán)重。傳統(tǒng)過濾消毒等處理方法雖然可在一定程度上減少生活飲用水中的微生物含量，但從整體效果來看，依然不夠理想，需相關(guān)部門對(duì)相關(guān)監(jiān)測(cè)工作予以更高的重視，盡量減輕飲用水中有害微生物對(duì)居民健康造成的危害[2]。因此，探索精準(zhǔn)、有效的生活飲用水檢驗(yàn)方式，保障居民飲水安全極為重要。本研究以300 份生活飲用水水樣、未經(jīng)處理水樣展開研究，分析對(duì)比生活飲用水微生物檢驗(yàn)中多管發(fā)酵法與濾膜法的檢驗(yàn)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2022 年1 月至2023 年3 月檢測(cè)人員從水廠中采集的300 份生活飲用水水樣以及未經(jīng)處理水樣作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，分別運(yùn)用多管發(fā)酵法（150 份）與濾膜法（150 份）進(jìn)行檢驗(yàn)。多管發(fā)酵法、濾膜法檢驗(yàn)的水樣中均包含管網(wǎng)末梢水60 份、出廠水60 份、二次供水30 份。兩組水樣來源、數(shù)量等方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），可比較。

1.2 儀器與設(shè)備

載玻片；錐形瓶；顯微鏡；試管；冰箱；抽濾設(shè)備；天平；分度吸管；0.45 μm 孔徑濾膜；小導(dǎo)管；平皿；培養(yǎng)箱等。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 濾膜法操作步驟

①濾膜滅菌法：將濾膜置于燒杯內(nèi)部，向其中添加蒸餾水，煮沸3次后，滅菌處理15 min，待水被煮沸2 次后，更換水，清除容器內(nèi)殘存的試劑，再次將水煮沸。②水樣過濾：使用無菌鑷子對(duì)滅菌濾膜進(jìn)行夾取（粗糙面向上），將其置于無菌濾床上，在濾器中注入100 mL 水樣，將閥門打開，進(jìn)行抽濾處理。③水樣濾過后，抽氣5 s，關(guān)閉濾器閥門，夾取濾膜，將其放于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基上，濾膜細(xì)菌殘留面朝上放置，放到恒溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。

1.3.2 多管發(fā)酵法操作步驟

①按照培養(yǎng)基配方，稱取成品乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基直接溶解于1 000 mL 水中，并將pH 值調(diào)節(jié)為7.1 ～7.5，混勻后分裝到試管中，置于高壓蒸汽滅菌器中115 ℃滅菌15 ～20 min。滅菌結(jié)束后取出放于冰箱中存儲(chǔ)待用。②將1 mL 飲用水水樣加入制備好的單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（10 mL）試管中，后將10 mL 飲用水水樣加入雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（10 mL）試管中，將9 mL 飲用水水樣加入無菌生理鹽水（9 mL）試管中，充分混勻后，將1 mL 混合液加入單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，放于恒溫培養(yǎng)箱（37 ℃）中培養(yǎng)（時(shí)長24 h）。③培養(yǎng)結(jié)束后，試管內(nèi)不存在產(chǎn)酸、產(chǎn)氣表現(xiàn)，則代表大腸菌群陰性；如果產(chǎn)生產(chǎn)酸、產(chǎn)氣現(xiàn)象，則需展開如下步驟：對(duì)于產(chǎn)氣、產(chǎn)酸接種管，將其置于伊紅美藍(lán)瓊脂板上，轉(zhuǎn)種，并放于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。隨后細(xì)致觀察菌落形態(tài)，將淡紫紅色不存在金屬光澤且中心顏色較深或者紫黑色、有金屬光澤的菌落展開染色處理，并經(jīng)鏡檢核實(shí)。

1.4 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)2 組水樣內(nèi)細(xì)菌檢出情況和檢驗(yàn)合格狀況。以國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)，水樣細(xì)菌總數(shù)不超過100 MPN·mL-1。檢測(cè)指標(biāo)包括耐熱大腸桿菌、大腸桿菌、大腸埃希菌和腸桿菌科。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)由SPSS 27.0 軟件處理，計(jì)數(shù)（水樣中細(xì)菌檢出狀況；兩種方式水樣檢驗(yàn)合格率）資料由數(shù)（n）或率（%）表示，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 水樣中細(xì)菌檢出狀況

由表1 可知，多管發(fā)酵法耐熱大腸桿菌、大腸桿菌、大腸埃希菌和腸桿菌科的檢出率比濾膜法更高（P＜0.05）。

表1 水樣中細(xì)菌檢出狀況對(duì)比[n（%）]

2.2 兩種檢驗(yàn)方式水樣檢驗(yàn)合格率

由表2 可知，兩種檢驗(yàn)方式水樣檢驗(yàn)合格率（多管發(fā)酵法為95.33%；濾膜法為78.00%）相比，數(shù)據(jù)差異顯著（P＜0.05）。

表2 兩種檢驗(yàn)方式水樣檢驗(yàn)合格率對(duì)比[n（%）]

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果顯示，多管發(fā)酵法耐熱大腸桿菌、大腸桿菌、大腸埃希菌、腸桿菌科檢出率比濾膜法更高（P＜0.05），兩種檢驗(yàn)方式水樣檢驗(yàn)合格率相比，數(shù)據(jù)差異顯著?？梢姡喙馨l(fā)酵法在生活飲用水微生物檢驗(yàn)中的檢出率、靈敏度要高于濾膜法。究其原因，多管發(fā)酵法為一種新式生活飲用水檢驗(yàn)方法，此方式可清晰鑒定出飲用水中的大腸桿菌以及其他菌群，且在水質(zhì)量鑒定上質(zhì)量較高，效果理想。對(duì)于此檢驗(yàn)方法，其結(jié)果準(zhǔn)確性會(huì)隨數(shù)據(jù)可靠程度、試劑稀釋倍數(shù)等增加而持續(xù)縮小。由此可以看出，在生活飲用水微生物檢驗(yàn)中，檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性需根據(jù)結(jié)果數(shù)據(jù)決定。為最大限度降低生活飲用水污染程度，相關(guān)工作者要從源頭入手，強(qiáng)化對(duì)水源的監(jiān)管，并做好相關(guān)宣教教育工作。羅永亮[3]以186 份生活飲用水樣本（2017 年3 月至2018 年3 月）作為研究對(duì)象，其中豐水期93 份、枯水期93 份，分別實(shí)施濾膜法、多管發(fā)酵法檢測(cè)，研究發(fā)現(xiàn)，多管發(fā)酵法枯水期耐熱菌群、大腸埃希菌檢出率[耐熱菌群（94.62%）；大腸埃希菌（91.40%）]比濾膜法檢出率[耐熱菌群（79.57%）；大腸埃希菌（58.06%）]更高，多管發(fā)酵法豐水期耐熱大腸菌群、大腸埃希菌檢出率[耐熱大腸菌群（80.65%）；大腸埃希菌（96.77%）]高于濾膜法檢出率[耐熱大腸菌群（79.57%）；大腸埃希菌（93.55%）]，由此可知，兩種檢查方式均適合用于生活飲用水微生物檢驗(yàn)中，且多管發(fā)酵法優(yōu)于濾膜法。羅永亮研究結(jié)果與本研究結(jié)果基本相同。

生活飲用水為人們賴以生存的必備資源，其質(zhì)量對(duì)人的機(jī)體健康、生活質(zhì)量存在直接影響。近些年，受生態(tài)環(huán)境變化等因素影響，使得水污染問題越發(fā)突出，人們對(duì)飲用水質(zhì)量方面要求不斷提高。從我國國情來看，我國水資源儲(chǔ)量較高，但受我國人口基數(shù)較大、地域分布不均等因素影響，使得人均水資源占有量較少，水資源合理運(yùn)用在當(dāng)代社會(huì)中有著重要價(jià)值。與此同時(shí)，隨工業(yè)進(jìn)程的推進(jìn)，致使環(huán)境污染問題越發(fā)嚴(yán)重，此情形也對(duì)現(xiàn)有水資源質(zhì)量造成了直接影響，使得我國存在水資源匱乏、水質(zhì)較差等問題，如果不及時(shí)采取有效措施加以應(yīng)對(duì)，極有可能對(duì)社會(huì)發(fā)展產(chǎn)生不利影響[4]。鑒于此，相關(guān)部門應(yīng)強(qiáng)化生活飲用水檢測(cè)工作，剖析其存在的問題，并于此基礎(chǔ)上應(yīng)用針對(duì)性策略，及時(shí)控制、整改污染的水源，防止造成嚴(yán)重后果。此外，水質(zhì)檢測(cè)工作還可避免流行病傳播，通過對(duì)飲用水中微生物進(jìn)行檢測(cè)，查看有無傳染病等不良因素，從該角度來看，對(duì)生活飲用水中微生物展開檢測(cè)存在極高的社會(huì)價(jià)值。從檢測(cè)方法層面分析，當(dāng)前所用的檢測(cè)方法有濾膜法、多管發(fā)酵法等，多管發(fā)酵法主要指稀釋水樣后培養(yǎng)菌落，以稀釋濃度差異為依據(jù)分別對(duì)菌落進(jìn)行觀察，對(duì)單位體積數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)對(duì)比[5]。濾膜檢驗(yàn)是指過濾器過濾水樣，把濾膜放于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，隨后統(tǒng)計(jì)濾膜大腸桿菌單位體積數(shù)。此兩種檢測(cè)方式各具優(yōu)、缺點(diǎn)，相比于濾膜法檢測(cè)，多管發(fā)酵檢測(cè)合格率更高，而濾膜檢驗(yàn)操作難度較低，效率較高，兩種方法均適合用于飲用水微生物檢測(cè)工作中[6]。但檢測(cè)結(jié)果比較顯示，在未處理水樣檢驗(yàn)時(shí)，多管發(fā)酵法細(xì)菌檢出率高于濾膜法，而在檢測(cè)生活飲用水期間，相比于濾膜法檢測(cè)，多管發(fā)酵檢測(cè)水質(zhì)合格率更高，代表多管發(fā)酵檢驗(yàn)靈敏度較高，可較為精準(zhǔn)地檢測(cè)出細(xì)菌菌落[7]。

本文依據(jù)持續(xù)優(yōu)化措施對(duì)飲用水微生物檢驗(yàn)工作展開更為深入的分析，發(fā)現(xiàn)影響微生物檢測(cè)質(zhì)量的因素主要包含以下幾點(diǎn)。①實(shí)驗(yàn)室人員的能力和素質(zhì)因素。由于微生物檢驗(yàn)工作對(duì)檢測(cè)人員的素質(zhì)、技能層面要求較高，若檢測(cè)人員技能生疏或經(jīng)驗(yàn)積累較少，其必然會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量產(chǎn)生一定影響[8]。②標(biāo)本因素。如果水樣采集人員難以及時(shí)將樣本送至檢驗(yàn)室，易使樣本遭受外界因素污染，或儲(chǔ)存不當(dāng)使得細(xì)菌死亡等，均會(huì)影響檢測(cè)質(zhì)量。所以檢驗(yàn)前質(zhì)量保證工作對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量存在關(guān)鍵性影響，疾控中心或者相關(guān)部門需加強(qiáng)對(duì)該方面的重視，針對(duì)性展開培訓(xùn)，降低檢驗(yàn)前相關(guān)因素對(duì)檢測(cè)質(zhì)量的影響。③儀器因素。微生物檢驗(yàn)工作中使用儀器較多，儀器校準(zhǔn)、保養(yǎng)等皆均有可能影響檢測(cè)結(jié)果的精度。④試劑因素。試劑質(zhì)量對(duì)微生物檢驗(yàn)質(zhì)量有著關(guān)鍵性影響[9]。所以，相關(guān)人員必須強(qiáng)化試劑質(zhì)量控制，從而減輕試劑因素對(duì)檢測(cè)質(zhì)量的影響。為使微生物檢驗(yàn)工作質(zhì)量得到進(jìn)一步提升，疾控中心以及相關(guān)部分還可針對(duì)性組建專業(yè)化的檢驗(yàn)團(tuán)隊(duì)，科學(xué)分工，構(gòu)建完善、科學(xué)的規(guī)章制度，提高檢驗(yàn)人員的責(zé)任感，調(diào)動(dòng)其積極性。定期組織專業(yè)化培訓(xùn)，及時(shí)對(duì)檢測(cè)人員知識(shí)庫進(jìn)行鞏固、更新，從而提高檢驗(yàn)人員的業(yè)務(wù)水平，保證檢驗(yàn)質(zhì)量[10]。

綜上所述，多管發(fā)酵法、濾膜法均適用于生活飲用水檢驗(yàn)中，可有效檢驗(yàn)出水中微生物菌落數(shù)，但與濾膜法相比，多管發(fā)酵法檢出率更高。