譚均，郭連安，莫讓瑜

（重慶市中藥研究院中藥種植研究所，重慶 400065）

《中華人民共和國(guó)藥典（2020 版）》第一部收載的斑蝥為芫菁科昆蟲(chóng)南方大斑蝥（Mylabris phalerata）或黃黑小斑蝥（Mylabris cichorii）的干燥體，其辛、熱，歸肝、胃、腎經(jīng)，功能破血逐淤，散結(jié)消癥，攻毒蝕瘡，主治癥瘕、經(jīng)閉、頑癬、瘰疬、贅疣、癰疽不潰以及惡瘡死肌[1]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，斑蝥素及其衍生物對(duì)肝癌[2]、胃癌[3]、食道癌[4]、卵巢癌[5]和乳腺癌[6]等癌癥都有顯著療效，且能刺激骨髓細(xì)胞DNA 的合成，促進(jìn)白細(xì)胞數(shù)量增加[7]。張志勇等[8]的研究結(jié)果顯示，在產(chǎn)斑蝥素的昆蟲(chóng)中，南方大斑蝥的經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益分別達(dá)到Ⅰ級(jí)、Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)，綜合利用價(jià)值高。

目前斑蝥素人工合成條件苛刻，市場(chǎng)需求僅依賴于斑蝥野生資源的供給。但因人類對(duì)野生資源的過(guò)度采集，導(dǎo)致南方大斑蝥野生種群越來(lái)越少，一些傳統(tǒng)分布區(qū)甚至絕跡。因此，南方大斑蝥的人工養(yǎng)殖成為解決資源緊缺的有效途徑。而目前對(duì)南方大斑蝥的研究多集中于藥理及應(yīng)用，對(duì)其人工養(yǎng)殖技術(shù)研究較少，特別是幼蟲(chóng)覓食行為未見(jiàn)系統(tǒng)報(bào)道。本文對(duì)南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力、覓食距離和對(duì)食物敏感性等方面進(jìn)行研究，以期為南方大斑蝥的人工飼養(yǎng)提供技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源與飼養(yǎng)

南方大斑蝥成蟲(chóng)來(lái)源于廣西壯族自治區(qū)南寧市武鳴區(qū)，帶回重慶后于網(wǎng)籠（45 cm×45 cm×45 cm）內(nèi)用絲瓜花喂養(yǎng)。卵的收集采用產(chǎn)卵盤（R=8.0 cm，高10 cm，鋪墊含水量為15%～20%的沙壤土8 cm，輕輕壓實(shí)）4 個(gè)，放置于網(wǎng)籠的4 個(gè)角處。觀察有南方大斑蝥成蟲(chóng)產(chǎn)卵后，立即將產(chǎn)卵盤取出，覆蓋保鮮膜（1＃昆蟲(chóng)針扎10 個(gè)透氣孔）保持濕度，置于30 ℃環(huán)境中孵化成幼蟲(chóng)，備用。

棉蝗采自河北省秦皇島市，帶回重慶后于網(wǎng)籠（60 cm×60 cm×60 cm）內(nèi)用葛根葉喂養(yǎng)，放置產(chǎn)卵盆（R=42 cm，高12 cm，鋪墊含水量為15%～20%的沙壤土10 cm，輕輕壓實(shí)）1 個(gè)；待棉蝗產(chǎn)卵1 周后，將卵塊完整取出，備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力試驗(yàn)

將孵化出幼蟲(chóng)的產(chǎn)卵盤置于30 ℃條件下，待其幼蟲(chóng)爬出土面后，隨機(jī)挑選30 頭，飼養(yǎng)于無(wú)蓋培養(yǎng)皿（直徑為15 cm，鋪平含水量為15%～18%的沙壤土0.5 cm）中，用有透氣孔（1＃昆蟲(chóng)針扎孔10 個(gè)）保鮮膜拉平后橡皮筋捆綁，放置于試驗(yàn)溫度下，每周挑出死亡個(gè)體并計(jì)數(shù)。試驗(yàn)溫度分別設(shè)置為10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃和35 ℃，重復(fù)6 次。

1.2.2 南方大斑蝥幼蟲(chóng)覓食敏感性試驗(yàn)

將取出的完整棉蝗卵塊沿透明塑料壁豎立于飼養(yǎng)杯（直徑為8 cm，高為15 cm）中，輕壓填土（沙壤土，含水量為15%～18%）。投入1 頭南方大斑蝥幼蟲(chóng)，用有透氣孔（1＃昆蟲(chóng)針扎孔10 個(gè)）保鮮膜拉平后橡皮筋捆綁，然后置于室溫30 ℃條件下，立即觀察其尋找到食物位置并開(kāi)始挖掘土壤行為的時(shí)間，1 h 后仍未發(fā)現(xiàn)食物位置，則視為不能發(fā)現(xiàn)。卵塊埋沒(méi)深度設(shè)置為土下0 cm、1 cm、3 cm 和6 cm，重復(fù)10 次。

1.2.3 南方大斑蝥幼蟲(chóng)的覓食距離研究

在室外（23 ℃）平整水泥地面上平鋪直徑為6 m、厚2 cm 的沙壤土（含水量為15%～18%），圓心設(shè)置南方大斑蝥幼蟲(chóng)投放點(diǎn)。當(dāng)投放1 頭幼蟲(chóng)后，立即觀察其在2 h 內(nèi)的爬行范圍，當(dāng)?shù)竭_(dá)邊界折返位置時(shí)用一滴滑石粉渾濁液標(biāo)記，試驗(yàn)結(jié)束后測(cè)量其邊界與邊界間的最大距離，重復(fù)30 次。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用SPSS 20統(tǒng)計(jì)軟件中one-way ANOVA（Duncan test）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力

由圖1 可知，溫度對(duì)南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力有顯著影響，隨著溫度的降低，其存活時(shí)間顯著延長(zhǎng)。在試驗(yàn)設(shè)置的溫度范圍內(nèi)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)的最長(zhǎng)存活時(shí)間是10 ℃下133 d，個(gè)體死亡時(shí)間分散，主要集中在第70 d 后；15 ℃下南方大斑蝥幼蟲(chóng)在饑餓條件下的死亡規(guī)律與10 ℃基本一致；在20 ℃下，南方大斑蝥幼蟲(chóng)的最長(zhǎng)存活時(shí)間為105 d，死亡高峰期在63 ～98 d；25 ℃下南方大斑蝥幼蟲(chóng)的最長(zhǎng)存活時(shí)間在91 d，死亡高峰期在56 ～84 d；在30 ℃下，南方大斑蝥幼蟲(chóng)的最長(zhǎng)存活時(shí)間為77 d，死亡高峰期在42 ～70 d；在35 ℃下，南方大斑蝥幼蟲(chóng)的最長(zhǎng)存活時(shí)間為63 d，死亡高峰期在第35 ～56 d。

圖1 南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力研究

2.2 食物埋藏深度對(duì)南方大斑蝥幼蟲(chóng)覓食敏感性的影響

由圖2 可知，食物埋藏深度對(duì)南方大斑蝥幼蟲(chóng)覓食能力有顯著影響（df=3，39；F=85.751；P＜0.05），隨著食物埋藏深度的增大，南方大斑蝥幼蟲(chóng)發(fā)現(xiàn)食物的時(shí)間越長(zhǎng)，發(fā)現(xiàn)食物的概率越小。當(dāng)食物與土平齊露出地面時(shí)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)發(fā)現(xiàn)食物的平均時(shí)間為（0.40±0.05）min；當(dāng)食物在土下1 cm位置處時(shí)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)發(fā)現(xiàn)食物的平均時(shí)間為（6.18±0.67）min；當(dāng)食物在土下3 cm 位置處時(shí)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)發(fā)現(xiàn)食物的時(shí)間為（31.88±5.85）min；當(dāng)食物深度達(dá)6 cm 時(shí)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)在試驗(yàn)時(shí)間（60 min）內(nèi)不能發(fā)現(xiàn)食物的位置，食物埋藏深度與南方大斑蝥幼蟲(chóng)覓食敏感性有關(guān)。

圖2 食物埋藏深度對(duì)南方大斑蝥幼蟲(chóng)覓食能力的影響

2.3 南方大斑蝥幼蟲(chóng)的覓食距離

在沒(méi)有投放食物的情況下，南方大斑蝥幼蟲(chóng)在覓食過(guò)程中每天爬行的邊界與邊界間最大距離為211 cm，而多數(shù)個(gè)體爬行的邊界間最大距離主要集中在80 ～160 cm，結(jié)果見(jiàn)圖3。

3 討論與結(jié)論

溫度能顯著影響昆蟲(chóng)行為和生長(zhǎng)發(fā)育。李萬(wàn)梅等[9]研究了溫度對(duì)三星黃螢葉甲幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)取食量的影響，結(jié)果顯示，在15 ～31 ℃條件下，溫度過(guò)高或過(guò)低均能顯著抑制幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)的取食量。陳乾錦等[10]的研究結(jié)果顯示，溫濕度會(huì)顯著影響斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的發(fā)育歷期、取食量和存活率。馮雨艷等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在試驗(yàn)溫度范圍內(nèi)，豆天蛾發(fā)育歷期和取食量均隨溫度的升高呈先升后降趨勢(shì)。馮曉潔等[12]的研究結(jié)果表明，溫度、土壤含水量和食物對(duì)暗黑鰓金龜幼蟲(chóng)的存活和生長(zhǎng)發(fā)育均有顯著影響。本研究的試驗(yàn)溫度范圍內(nèi)，南方大斑蝥幼蟲(chóng)的耐饑力隨著溫度的升高而降低，其存活時(shí)間顯著減少，當(dāng)溫度為10 ℃時(shí)，其最長(zhǎng)存活時(shí)間為133 d，當(dāng)溫度為35 ℃時(shí)，最長(zhǎng)存活時(shí)間僅為63 d，這與張含藻和胡周強(qiáng)[13]的研究結(jié)果（66 ～182 d）基本一致。

此外，本研究結(jié)果顯示，南方大斑蝥幼蟲(chóng)每天外出覓食的最大覓食邊界為211 cm，食物埋藏深度顯著影響南方大斑蝥幼蟲(chóng)的覓食能力，埋藏越淺，食物被發(fā)現(xiàn)的時(shí)間越短，當(dāng)埋藏深度超過(guò)6 cm 后，南方大斑蝥幼蟲(chóng)在1 h 未發(fā)現(xiàn)食物。這些研究數(shù)據(jù)僅為室內(nèi)條件下的研究結(jié)果，是否為最佳的野外行為反應(yīng)，有待進(jìn)一步探索。

綜上可知，在人工養(yǎng)殖中，當(dāng)南方大斑蝥幼蟲(chóng)食物不充足時(shí)，可將其保存在10 ℃或15 ℃下，土壤含水量為15%～18 %的沙壤土中約70 d。在南方大斑蝥幼蟲(chóng)尋找寄主過(guò)程中，食物安放在幼蟲(chóng)孵化點(diǎn)160 cm 內(nèi)，稍微露出地面有利于其寄生行為的發(fā)生。