耿東方

（濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院 檢驗科，河南 安陽 455000）

細(xì)菌性血流感染是由血液中侵入細(xì)菌而引起的全身性炎癥反應(yīng)，病情進(jìn)展迅速，延誤最佳治療時期常?？晌＜吧?］。血培養(yǎng)是臨床診斷細(xì)菌血流感染的主要方法，但其培養(yǎng)周期較長、費用較高、診斷結(jié)果陽性率較低、受污染率較高、采樣過程繁雜且陽性率往往受多種因素影響，給細(xì)菌性血流感染的早期診斷和治療帶來困難［2］。近年來的研究表明，部分炎癥標(biāo)志物的變化與細(xì)菌性血流感染之間存在著顯著的相關(guān)性，可以更可靠地用于人體感染的監(jiān)測［3］。前清蛋白纖維蛋白原比值（PA/FIB）能反映炎癥狀態(tài)，在鑒別和診斷各種病原體方面有重要的臨床價值［4］；血小板計數(shù)（PLT）是一種高效的免疫細(xì)胞，可以對入侵的病原體進(jìn)行動態(tài)的識別和反應(yīng)［5］；降鈣素原（PCT）是一種在正常人體內(nèi)表達(dá)量低的血清蛋白，細(xì)菌感染后其表達(dá)水平會顯著升高，因此臨床上常將其作為早期細(xì)菌感染的指標(biāo)［6］。但是，關(guān)于用PA/FIB、PLT、PCT 聯(lián)合方法對血液感染不同細(xì)菌類型的分析，目前尚未有太多報道［7］。因此，本研究擬通過聯(lián)合檢測血流感染患者的PA/FIB、PLT、PCT，旨在為快速鑒別引起血流感染的細(xì)菌不同種類提供理論依據(jù)，由此進(jìn)行對聯(lián)合檢測血流感染不同細(xì)菌類型進(jìn)行價值評估。

1 資料與方法

1.1 一般資料

對2021 年2 月至2022 年2 月濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院82 例血液感染患者進(jìn)行回顧性分析。根據(jù)細(xì)菌類型將其分成革蘭氏陰性菌組（GNB-BSI 組，38 例）和革蘭氏陽性菌組（GPB-BSI 組，44 例），另取41 例血培養(yǎng)為陰性的住院患者作為對照組。GNB-BSI 組男18 例，女20 例；年齡50～83 歲，平均（66.9±5.9）歲；GPB-BSI 組男30 例，女14例；年齡48～85 歲，平均（66.5±5.8）歲；對照組男32 例，女9 例；年齡50～82 歲，平均（66.0±6.0）歲。三組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)我國衛(wèi)生部發(fā)布的醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)辦法（［2001］2 號），診斷患者為血流感染［8］；②具有完整、詳細(xì)的臨床資料；③都是常見的致病菌，沒有任何真菌感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完整；②年齡18 周歲以下；③各種血液系統(tǒng)疾病并發(fā)；④有過放療和一直在使用激素的患者。

1.2 方法

1.2.1 血培養(yǎng) 本研究所有的血培養(yǎng)標(biāo)本，均為住院當(dāng)日采集，每瓶容量為5 mL。使用美華醫(yī)療全自動血液細(xì)菌培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)，顯示為陽性后，使用哥倫比亞血以及巧克力的瓊脂培養(yǎng)基，在HF240 二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，并使用XK細(xì)菌鑒定儀對菌株進(jìn)行鑒定。

1.2.2 實驗室指標(biāo)檢測 取患者外周靜脈血樣本進(jìn)行PA/FIB、PLT 和PCT 的檢測。使用全自動熒光免疫分析儀AQT90 進(jìn)行PCT 的檢測，0.5 ng/mL為檢測閾值。應(yīng)用DxH 900 全自動血細(xì)胞分析儀對PLT 進(jìn)行檢測。應(yīng)用免疫投射比濁法，使用優(yōu)利特五分類全自動血液細(xì)胞分析儀對患者血清前白蛋白（PA）含量進(jìn)行檢測。采集2 mL 患者住院時的靜脈血，使用PUN-2048 系列半自動凝血分析儀及相對應(yīng)的試劑檢測纖維蛋白原（FIB）的含量。以上所進(jìn)行的鑒別及相關(guān)操作步驟皆按說明書的內(nèi)容進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用軟件SPSS 22.0 及Medcalc 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及分析。符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較用方差分析，兩組比較用SNK 檢驗；計數(shù)資料以百分率（%）進(jìn)行表示，組間比較用χ2檢驗，采用受試者工作特征（ROC）曲線分析不同指標(biāo)鑒別不同血流感染類型的價值。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組細(xì)菌構(gòu)成情況

在GNB-BSI 組中，菌種主要為大腸埃希菌5例（13.2%）、肺炎克雷伯菌8 例（21.1%）、鮑曼不動桿菌7 例（18.4%）、銅綠假單胞菌10 例（26.3%）、陰溝腸桿菌5 例（13.2%）、黏質(zhì)沙雷菌3 例（7.9%）。在GPB-BSI 組中，菌種主要為金黃色葡萄球菌13 例（29.5%）、表皮葡萄球菌8 例（18.2%）、糞/屎腸球菌6 例（13.6%）、人葡萄球菌7 例（15.9%）、溶血葡萄球菌6 例（13.6%）、頭狀葡萄球菌頭狀亞種4 例（9.1%）。

2.2 三組血清PA/FIB、PLT、PCT 水平比較

GPB-BSI 組、GNB-BSI 組PA/FIB、PLT 水平均低于對照組，PCT 水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；GPB-BSI 組PA/FIB、PCT 水平低于GNB-BSI 組，PLT 水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 三組PA/FIB、PLT、PCT 水平比較（±s）

表1 三組PA/FIB、PLT、PCT 水平比較（±s）

注：1）與對照組比較，P<0.05；2）與GPB-BSI 組比較，P<0.05。

2.3 PA/FIB、PLT、PCT 單獨與聯(lián)合鑒別血流感染不同細(xì)菌類型的價值比較

經(jīng)ROC 曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清PA/FIB 鑒別血流感染不同細(xì)菌類型的曲線下面積（AUC）為0.846（95%CI：0.771～0.982），cut-off 值為4.71，約登指數(shù)為0.571，敏感度為68.42%，特異性為88.64%，PLT 曲線下面積（AUC）為 0.788（95%CI：0.684～0.871），cut-off 值為118.09×109/L，約登指數(shù)為0.469，敏感度為86.36%，特異性為60.53%；PCT 曲線下面積（AUC）為 0.817（95%CI：0.716～0.894），cut-off 值為9.86 ng/mL，敏感度為81.58%、特異性為81.82%。PA/FIB+PLT+PCT 聯(lián)合鑒別診斷血流感染不同細(xì)菌類型的AUC 為0.939，高于單一的PA/FIB、PLT 以及PCT的AUC（0.846、0.788 和0.817），敏感度為97.37%、特異性為84.09%。見表2 與圖1。

圖1 PA/FIB、PLT、PCT 單獨與聯(lián)合鑒別血流感染不同細(xì)菌類型的ROC 曲線

表2 PA/FIB、PLT、PCT 單獨與聯(lián)合鑒別血流感染不同細(xì)菌類型的價值比較

3 討論

細(xì)菌性血流感染是由革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌侵入機(jī)體血液所引起的全身感染類型。在臨床微生物學(xué)中，實驗室血液培養(yǎng)是診斷血流感染的參考標(biāo)準(zhǔn)，但其耗時較長，易錯過最佳治療時期而延誤病情［9］。因此，探尋敏感度高且特異性高的早期診斷方法對于早期發(fā)現(xiàn)和及時治療血流感染顯得尤為重要。

近年來，WANG 等［10］發(fā)現(xiàn)PA/FIB 比值變化與感染所致炎癥浸潤密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，血流感染患者PA/FIB 水平低于對照組，且GPB-BSI組的PA/FIB 水平低于GNB-BSI 組，這表明PA/FIB 與血流感染發(fā)生及其不同細(xì)菌型的判定具有一定的參考價值，與秦云［11］的研究結(jié)果相同。PA是一種肝臟合成的糖蛋白，也是一種能清除炎癥過程中體內(nèi)毒素的物質(zhì)。血流感染后細(xì)菌定植，造成局部炎癥浸潤，PA 的消耗增多，導(dǎo)致血清PA 水平降低［12］；FIB 是凝血功能中的重要因子，血液凝固時FIB 由可溶性變成不溶性狀態(tài)，F(xiàn)IB 水平升高表示可溶性的含量增加，機(jī)體凝血功能異常［13］。因此，血流感染發(fā)生時，機(jī)體炎癥反應(yīng)加重，導(dǎo)致PA 降低，F(xiàn)IB 上升，故造成PA/FIB 降低。脂多糖（LPS）結(jié)構(gòu)存在于革蘭氏陰性桿菌（GNB）中，導(dǎo)致感染的患者比感染革蘭氏陽性細(xì)菌患者的血凝固障礙程度更嚴(yán)重，則FIB 的分解增加［14］，由此導(dǎo)致PA/FIB 在GNB-BSI 組中高于GPB-BSI 組。

PLT 可作為早期識別和鑒別細(xì)菌感染的指標(biāo)，袁勝男等［15］研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌感染會造成PLT 計數(shù)減少。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GNB-BSI 與GPB-BSI 組PLT 值均低于對照組，與上述研究一致。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，GNB-BSI 組PLT 低于GPB-BSI 組，分析原因為感染革蘭氏陰性菌后，LPS 特異性激活PLT 參與免疫－炎性反，使PLT 減少更快［16］。

PCT 是一種臨床上將其作為檢測細(xì)菌早期感染的血清蛋白質(zhì)標(biāo)志物，其在未感染人體內(nèi)的表達(dá)量非常低，但機(jī)體感染后表達(dá)量則會明顯上升［17］。從本研究中可以得出，血流感染組的PCT值明顯高于對照組，且GNB-BSI 組PCT 值高于較GPB-BSI 組，這提示PCT 在早期診斷不同細(xì)菌類型血流感染中的應(yīng)用價值。判斷這有一種可能性，兩種不同的細(xì)菌會激活不同的炎癥信號通路。革蘭陰性菌侵入機(jī)體后會產(chǎn)生內(nèi)毒素，脂多糖（LPS）是內(nèi)毒素的重要組成部分，與受體結(jié)合后可引起機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生大量的炎性因子如PCT；但由于肽聚糖主要存在于革蘭氏陽性球菌（GPB）的細(xì)胞壁中，其造成炎癥反應(yīng)程度比LPS 低［18］，故PCT 水平顯著高于GNB-BSI 組顯著高于GPBBSI 組。

通過ROC 曲線分析發(fā)現(xiàn)，三種標(biāo)志物單一鑒別血流感染類型時PA/FIB 敏感度較低，PLT 特異性較低，而聯(lián)合鑒別血流感染不同細(xì)菌類型的診斷效能最高，AUC 為0.939，大于單一鑒別診斷效能，且敏感度最高為97.37%，表明聯(lián)合檢測可提高診斷效能，有助于不同血流感染類型的鑒別。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)，血流感染患者血清PA/FIB 比值、PLT 均低于非感染患者，而PCT 明顯高于非感染患者，且GNB-BSI 組感染患者FA/FIB 比值、PCT 水平高于GPB-BSI 組感染患者，而PLT 低于GPB-BSI 感染患者，三者聯(lián)合鑒別不同感染類型價值較高。