邵微 徐國益 于會(huì)麗 謝寧 高登濤 司鵬 吳國良
摘要:【目的】從梨土壤養(yǎng)分與微生物群落方面,探究紅寶石梨樹土壤養(yǎng)分與微生物群落應(yīng)對(duì)低分子有機(jī)酸的變化規(guī)律,并分析梨樹土壤微生物群落與養(yǎng)分吸收及果實(shí)品質(zhì)之間的關(guān)系。【方法】以施用氮磷鉀肥為對(duì)照,設(shè)置5%與10%的蘋果酸(LM與HM)、檸檬酸(LC與HC)、草酸(LO與HO)與氮磷鉀肥配施為處理,測(cè)定梨樹土壤養(yǎng)分與微生物群落功能多樣性等指標(biāo)?!窘Y(jié)果】與對(duì)照相比,低分子有機(jī)酸處理降低了梨園土壤EC值,檸檬酸與草酸顯著降低了梨園土壤pH,而檸檬酸與LO處理顯著降低了有機(jī)質(zhì)含量。LC顯著降低了土壤硝態(tài)氮含量,而LO則顯著升高了土壤銨態(tài)氮含量。與對(duì)照相比,低分子有機(jī)酸顯著降低了0~20 cm土層土壤有效P含量,而LM顯著升高>20~40 cm土層速效K含量。另外,低分子有機(jī)酸顯著改變了梨樹土壤微生物群落多樣性指數(shù)與碳源利用特征,其中HM顯著升高0~20 cm土層多樣性指數(shù),而LO則顯著降低了羧酸類與氨基酸類的利用強(qiáng)度。相關(guān)分析表明,0~20 cm土層微生物群落與果實(shí)維生素C含量、果實(shí)氮磷鉀含量、產(chǎn)量等呈負(fù)顯著相關(guān),而>20~40 cm土層微生物群落與單果質(zhì)量、果實(shí)色澤、果實(shí)鉀含量以及葉片氮含量呈正顯著相關(guān)?!窘Y(jié)論】蘋果酸、檸檬酸及草酸與氮磷鉀配施改變了梨園土壤養(yǎng)分含量與微生物群落碳特征,與0~20 cm土層相比,>20~40 cm土層微生物群落在梨樹養(yǎng)分吸收與果實(shí)品質(zhì)提升方面發(fā)揮著更為重要的作用。
關(guān)鍵詞:梨樹;低分子有機(jī)酸;土壤養(yǎng)分;土壤微生物功能多樣性;相關(guān)分析
中圖分類號(hào):S661.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1009-9980(2023)03-0481-13
梨樹作為我國第三大水果樹種,產(chǎn)量與品質(zhì)已成為影響梨產(chǎn)區(qū)農(nóng)戶收入的重要因素[1-2]。而長期不合理施肥導(dǎo)致梨園土壤板結(jié)、酸化及鹽漬化等問題加劇,進(jìn)而降低肥料利用率[2-4],引發(fā)樹體養(yǎng)分失調(diào)、產(chǎn)量與品質(zhì)的下降[5]。土壤健康與果樹植株健康是果業(yè)可持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)[6],其中土壤健康參與維持水果生產(chǎn)與提供生態(tài)系統(tǒng)等服務(wù)功能,影響果樹養(yǎng)分吸收與果實(shí)品質(zhì)的提升[7]。因此,在守護(hù)土壤健康的前提下,改善梨園土壤環(huán)境與微生物群落結(jié)構(gòu)是提升梨樹養(yǎng)分利用率與果實(shí)品質(zhì)的有效途徑。
低分子有機(jī)酸(Low molecular weight organicacid, LMWOAs)作為根際常見分泌物[8],通過直接影響根系微環(huán)境以驅(qū)動(dòng)根際微生物群落的改變,促進(jìn)某些難溶性礦質(zhì)養(yǎng)分的溶解,進(jìn)而提高其在根際養(yǎng)分有效態(tài)含量[9- 10]。LMWOAs 具有較強(qiáng)的螯合力,易與多種金屬離子形成復(fù)合物進(jìn)而促進(jìn)植物對(duì)金屬離子的吸收[10]。另外,LMWOAs作為微生物碳源,能夠吸引中性和有益微生物趨向根際,并促進(jìn)益生菌在根際的定殖與增殖,以避免病原菌的入侵[11]:有益微生物參與固氮、溶解及螯合礦質(zhì)元素,分解與轉(zhuǎn)化有機(jī)物等以改善根際養(yǎng)分環(huán)境[12-14];此外,有益微生物產(chǎn)生抗生素、水解酶及揮發(fā)性物質(zhì),直接抑制病原體生長與毒力[15],并通過營養(yǎng)與空間競爭間接抑制病原體[16];有益菌能夠在根部誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性,從而增強(qiáng)植物對(duì)干旱、溫度、鹽及重金屬等的耐受力[17]。因此,LMWOAs具有提升土壤養(yǎng)分環(huán)境與改善土壤微生物群落的潛能,目前其在果樹上應(yīng)用較少[18],而對(duì)梨園土壤質(zhì)量的改良等方面的研究暫未有報(bào)道。
本研究在紅寶石梨樹栽培條件下,研究不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)蘋果酸、檸檬酸及草酸對(duì)梨樹土壤微生物群落及養(yǎng)分的影響,探討LMWOAs 對(duì)梨樹土壤微生物群落及養(yǎng)分的作用效果及其與梨果實(shí)品質(zhì)之間的關(guān)系,從土壤方向解析LMWOAs 對(duì)梨果實(shí)品質(zhì)的作用機(jī)制,為新型果樹專用水溶肥的研發(fā)以及果業(yè)綠色高效發(fā)展提供理論依據(jù)與技術(shù)支撐。
1 材料和方法
1.1 試驗(yàn)地基本情況
試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所國家園藝種質(zhì)資源庫梨分庫(34°42′47″N,113°41′49″E)進(jìn)行。該地區(qū)屬于黃河流域,年平均降水量約為542.15 mm。
1.2 供試材料
供試土壤:表層土壤pH 為7.16,有機(jī)質(zhì)含量(w,后同)0.93%,有效磷含量131.80 mg· kg-1,有效鉀含量241.02 mg· kg-1,銨態(tài)氮含量10.25 mg· kg-1,硝態(tài)氮含量14.85 mg·kg-1。
供試低分子有機(jī)酸:蘋果酸、檸檬酸及草酸的純度≥ 98.0%,購于阿法埃莎(Alfa Aesar)化學(xué)有限公司。
供試肥料:施用氮磷鉀肥由尿素、硝酸鉀及磷酸二氫鉀組成,依據(jù)梨樹產(chǎn)量設(shè)定全年施肥量(kg·hm-2)為N(367.5)-P2O5 (247.5)-K2O(315)。
供試作物:5 年生紅寶石[Bayuehong (hybrid cultivar)×Suli(Pyrus bretschneideri)]梨樹。
1.3 試驗(yàn)處理
2019 年選取長勢(shì)一致供試?yán)鏄洌? m×1 m)為試驗(yàn)材料。試驗(yàn)設(shè)置7 個(gè)處理(如表1),包括對(duì)照(氮磷鉀肥)、LM(氮磷鉀肥+蘋果酸5%)、HM(氮磷鉀肥+蘋果酸10%)、LC(氮磷鉀肥+檸檬酸5%)、HC(氮磷鉀肥+檸檬酸10%)、LO(氮磷鉀肥+草酸5%)和HO(氮磷鉀肥+草酸10%)。其中,5%與10%是指LMWOAs質(zhì)量占LMWOAs與全年施肥量總質(zhì)量的比值(LMWOAs與氮磷鉀肥直接混合稱樣),用量分別為84.72、178.86 kg·hm-2。每個(gè)處理設(shè)置4 個(gè)重復(fù)小區(qū),每個(gè)小區(qū)4 株樹,小區(qū)之間間隔2 株梨樹,各小區(qū)完全隨機(jī)排列。按照梨樹需肥規(guī)律,分別在萌芽期(4 月11 日)、第1 次膨大期(5 月5 日)、第2 次膨大期(6 月14 日)及采摘前20 d(8 月2 日)4 個(gè)時(shí)期施肥,以施肥槍施入樹冠2/3 深度20 cm 處,其他栽培與病蟲害等相關(guān)田間管理均保持一致。2019 年9 月4 日每個(gè)重復(fù)小區(qū)隨機(jī)選擇3 株梨樹,避開施肥區(qū)域采用五點(diǎn)采樣法采集每株樹冠投影2/3 處0~20 cm土層與>20~40 cm 土層土壤,各層土壤樣品混合。
每個(gè)小區(qū)土壤混成1 個(gè)樣,因此每個(gè)處理相同土層有4 個(gè)重復(fù)土樣。所采集土壤冰上保存送至實(shí)驗(yàn)室,一部分土壤樣品自然風(fēng)干用于測(cè)定土壤養(yǎng)分指標(biāo),另一部分存于-80 ℃用于微生物功能多樣性的測(cè)定。
1.4 測(cè)定項(xiàng)目與方法
1.4.1 土壤養(yǎng)分、pH 及EC 指標(biāo)的測(cè)定 用CleverChem 380(德國)間斷化學(xué)分析儀進(jìn)行土壤硝態(tài)氮與銨態(tài)氮的測(cè)定[19];以中性NH4OAc浸提土壤溶液后上原子吸收測(cè)定土壤速效鉀含量[19];以0.5 mol · L- 1NaHCO3 (pH 8.5)浸提土壤溶液,并用分光光度法測(cè)定有效磷含量[19];采用水土比例為2.5∶1 的水浸提-電位法測(cè)定土壤pH[20];土壤與超純水1∶5 混合后,用電導(dǎo)率儀測(cè)定土壤EC 值[20]。用碳氮分析儀(Primacs100,Skalar,Breda,Netherlands)測(cè)定土壤中的總碳(TC)與無機(jī)碳(IC)含量。土壤有機(jī)質(zhì)(SOM)=1.724×(TC?IC)。
1.4.2 微生物功能多樣性指數(shù)的測(cè)定與計(jì)算 將相當(dāng)于1 g 風(fēng)干土的新鮮土樣以土水質(zhì)量比1∶100用0.85%滅菌NaCl 溶液稀釋,28 ℃ 200 r · min-1 振蕩20 min,4 ℃靜置30 min,每孔取上清液150 μL加入Bio-Eco 微孔板中。25 ℃培養(yǎng)168 h,每24 h用Biolog 自動(dòng)讀取儀1 次,并計(jì)算微生物功能多樣性指數(shù)[21-23]。平均吸光度AWCD值、McIntosh 指數(shù)(U)、Shannon-Wiener 指數(shù)(H)、Simpson 指數(shù)(D)、Pielou 指數(shù)(E)及豐富度指數(shù)S 分別表示微生物群落的利用碳源整體能力、均一性、多樣性、優(yōu)勢(shì)度、均勻度以及利用的碳源的總數(shù)。選取72 h 進(jìn)行數(shù)據(jù)分析微生物功能多樣性指數(shù)與碳源利用強(qiáng)度。根據(jù)31 種碳源化學(xué)性質(zhì)的不同,分為聚合物、碳水化合物、酚類、羧酸、氨基酸及胺類6 類碳源,分別計(jì)算每一類碳源的平均吸光度,用于表示微生物對(duì)于六大碳源的利用強(qiáng)度,以評(píng)估不同處理特異性代謝碳源活性[24-25]。
1.4.3 果實(shí)品質(zhì)與養(yǎng)分含量的測(cè)定 可溶性固形物含量采用手持式數(shù)字折光儀(PR-101;ATAGO)測(cè)定;可溶性糖含量使用蒽酮法測(cè)定[26];維生素C(Vc)含量采用2,6-二氯酚靛酚法測(cè)定[27];可滴定酸(TitratableAcid,TA)含量采用NaOH滴定法測(cè)定[20]。L、a、b、C與h°值均采用便捷式色差儀(CR-400,Konica Minolta,日本)測(cè)定。葉片與果實(shí)氮磷鉀含量采用H2SO4-H2O2消煮[20]。葉片與果實(shí)氮含量采用全自動(dòng)間斷化學(xué)分析儀(Clever Chem 380,德國)測(cè)定;葉片與果實(shí)中的磷含量采用鉬藍(lán)比色法測(cè)定;葉片與果實(shí)鉀含量采用原子吸收(AAS ZEEnit 700P,Jena,德國)測(cè)定。
1.5 數(shù)據(jù)分析
采用Microsoft Excel 2007 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;SPSS22.0 進(jìn)行單因素方差分析,以p<0.05 作為顯著性的標(biāo)準(zhǔn);主成分分析法(principal component analysis,PCA)采用Canoco 4.5 分析與作圖。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同LMWOAs對(duì)梨土壤pH、EC的影響
不同LMWOAs處理下梨樹土壤pH、EC及有機(jī)質(zhì)含量列于圖1。LMWOAs處理降低了梨樹0~20 cm土壤pH,其中HM、檸檬酸(LC與HC)與草酸(LO與HO)處理較對(duì)照顯著降低,而LM則與對(duì)照無顯著差異。而在>20~40 cm土壤中:檸檬酸與草酸較對(duì)照顯著降低,而蘋果酸處理(LM與HM)與對(duì)照之間無顯著差異,其中HM較對(duì)照升高。LMWOAs處理降低了土壤EC 值,其中HM、檸檬酸與草酸較對(duì)照顯著降低,而LM與對(duì)照之間無顯著差異。比較不同LMWOAs低濃度與高濃度處理對(duì)土壤EC的影響可知,檸檬酸與草酸的高濃度處理土壤EC值較低濃度有所提升,而LM較HM升高了土壤EC值。與對(duì)照相比,LMWOAs處理均降低了0~20 cm土層土壤有機(jī)質(zhì)含量,蘋果酸、檸檬酸以及LO較對(duì)照顯著降低,其中蘋果酸處理(LM與HM)較對(duì)照下降幅度最大,分別降低49.44%與36.52%。在>20~40 cm 土層:檸檬酸與LO 處理土壤有機(jī)質(zhì)含量較對(duì)照顯著下降,而蘋果酸與HO處理較對(duì)照升高,其中HM與HO較對(duì)照顯著升高35.90%與34.62%。
2.2 不同LMWOAs對(duì)梨土壤養(yǎng)分含量的影響
不同LMWOAs處理梨樹土壤養(yǎng)分變化列于圖2。檸檬酸處理較對(duì)照降低了0~20 cm 土壤硝態(tài)氮含量,其中LC較對(duì)照顯著降低34.28%,而蘋果酸與草酸低濃度處理(LM與LO)高于高濃度處理(HM與HO)。HM與LC 顯著降低了>20~40 cm 土壤硝態(tài)氮含量,較對(duì)照降低54.46%與44.22%,HC顯著低于LM,而HC與HO顯著高于LC 及LO。與對(duì)照相比,LMWOAs處理均提高了土壤銨態(tài)氮含量,其中0~20 cm 草酸處理(LO 與HO)較對(duì)照顯著提高49.37%與54.54%,而>20~40 cm 土層LO 較對(duì)照顯著升高51.84%。與對(duì)照相比,LMWOAs顯著降低了0~20 cm土層土壤有效P 含量,其中檸檬酸處理(LC與HC)較對(duì)照減低44.26%與41.93%。LM與HO較對(duì)照顯著提高>20~40 cm 土層土壤有效P,分別升高31.31%與25.18%,而檸檬酸較對(duì)照降低,其中HC較對(duì)照顯著降低31.67%。與對(duì)照相比,LMWOAs顯著降低了0~20 cm 土層土壤速效K 含量,其中HM、檸檬酸及草酸較對(duì)照顯著降低。蘋果酸較對(duì)照提高了>20~40 cm 土壤速效K含量,其中LM較對(duì)照顯著升高37.23%。而檸檬酸與草酸較對(duì)照降低了>20~40 cm 土壤速效K 含量,其中HC、LO 及HO較對(duì)照顯著降低35.60%、38.28%及43.61%。與低濃度LMWOAs相比,高濃度LMWOAs降低了0~40 cm土壤速效K含量。
2.3 不同LMWOAs對(duì)梨土壤微生物群落的影響
各LMWOAs處理梨樹土壤微生物功能多樣性指數(shù)列于表1。檸檬酸處理(LC 與HC)與LO 較對(duì)照提高了土壤均勻度指數(shù)E,其中在0~20 cm 土層HC較對(duì)照顯著提高。HM、檸檬酸以及草酸較對(duì)照提高了0~20 cm 土層土壤微生物優(yōu)勢(shì)度指數(shù)D值,其中HM、LC、草酸較對(duì)照顯著升高。在>20~40 cm土層:LO較對(duì)照顯著降低了D值,而其他處理與對(duì)照之間無顯著差異。與對(duì)照相比,LMWOAs升高了0~20 cm 土壤微生物多樣性指數(shù)H值,其中HM、檸檬酸及HO較對(duì)照顯著升高,而LMWOAs降低了>20~40 cm 土壤微生物多樣性指數(shù)H值,其中草酸處理(LO 與HO)較對(duì)照顯著下降。在0~20 cm,LMWOAs處理與對(duì)照的土壤微生物群落均一指數(shù)U無顯著差異,其中HC與LO較LM顯著升高。在>20~40 cm,檸檬酸與草酸較對(duì)照降低,其中LC、HC及LO較對(duì)照顯著升高,而蘋果酸與對(duì)照之間無顯著差異。HM較對(duì)照顯著升高了0~20 cm 土壤微生物豐富度指數(shù)S,而其他處理與對(duì)照無顯著差異。LO較對(duì)照顯著降低了>20~40 cm土壤豐富度指數(shù)S 值,而其他處理與對(duì)照無顯著差異。
不同LMWOAs處理下梨樹土壤微生物群落碳源利用呈現(xiàn)多樣性,選取第一主成分與第二主成分進(jìn)行作圖(圖3),PC1 與PC2 分別為57.8%與8.9%。相同土層土樣成簇,土層差異主要表現(xiàn)在PC1 上,其中0~20 cm土層土樣分布在第2、3 象限,而>20~40 cm土層土樣分布在第1、3及4象限。LM與對(duì)照處理微生物群落碳源代謝相似,因此,在0~20 cm 與>20~40 cm土層中2 個(gè)處理均為相近。LMWOAs添加量的差異主要表現(xiàn)在PC2 上,其中檸檬酸與草酸低濃度處理在PC2 上的得分高于高濃度。
不同LMWOAs處理對(duì)微生物群落碳源利用強(qiáng)度的情況列于圖4。0~20 cm土層中:HM處理下微生物群落對(duì)聚合物的利用強(qiáng)度最高,顯著高于LM與HO,其中LM較對(duì)照顯著降低。HC處理下微生物群落對(duì)碳水化合物的利用強(qiáng)度最高,且顯著高于對(duì)照、LM及LC。LMWOAs處理土壤微生物群落對(duì)酚類的利用與對(duì)照之間無顯著差異,而LO 顯著高于其他LMWOAs 處理。各LMWOAs 處理(除LM外)升高了氨基酸類利用率,其中HM、LO較對(duì)照顯著升高。HC 較對(duì)照顯著升高了胺類的利用率,而LM顯著降低了對(duì)胺類的利用率。>20~40 cm土層中:各處理之間在聚合物的利用強(qiáng)度上無顯著性差異,其中草酸處理較對(duì)照降低。HM較對(duì)照顯著升高了碳水化合物的利用強(qiáng)度,而LC較對(duì)照顯著降低了碳水化合物的利用強(qiáng)度。LMWOAs處理與對(duì)照在酚類的利用強(qiáng)度上無顯著性差異,而HM較LO顯著升高。與對(duì)照相比,LMWOAs處理顯著降低了土壤微生物群落對(duì)羧酸類物質(zhì)的利用率,其中LO 最低。與對(duì)照相比,草酸降低了土壤微生物對(duì)氨基酸的利用強(qiáng)度,其中LO 較對(duì)照顯著降低。各處理對(duì)胺類的利用率無顯著差異。
2.4 LMWOAs處理下微生物群落與土壤養(yǎng)分、微生物群落之間的關(guān)系
梨樹土壤微生物群落與土壤養(yǎng)分之間的相關(guān)性分析列于表2。0~20 cm 土層的微生物群落與土壤養(yǎng)分含量均呈顯著負(fù)相關(guān),而>20~40 cm土層微生物群落(除E 外)與有機(jī)質(zhì)、速效K含量呈顯著正相關(guān),與銨態(tài)氮含量呈顯著負(fù)相關(guān)。
0~20 cm:pH 與碳水化合物的利用強(qiáng)度呈顯著負(fù)相關(guān),系數(shù)為-0.52。EC 與氨基酸的利用強(qiáng)度、awcd 呈顯著負(fù)相關(guān),而與指數(shù)D 呈極顯著負(fù)相關(guān)(r = -0.60),硝態(tài)氮、銨態(tài)氮含量分別與指數(shù)D 及聚合物利用強(qiáng)度呈顯著負(fù)相關(guān),系數(shù)分別為-0.47與-0.48。速效K含量與碳水化合物及氨基酸類利用強(qiáng)度呈顯著負(fù)相關(guān),與指數(shù)D及H呈極顯著負(fù)相關(guān)(r = -0.73 與-0.66)。
>20~40 cm:pH 與碳水化合物、酚類利用強(qiáng)度呈顯著正相關(guān)(r = 0.69 與0.49),與微生物指數(shù)U、S及awcd 呈顯著正相關(guān),與E呈顯著負(fù)相關(guān)。有機(jī)質(zhì)含量與碳水化合物、羧酸類及氨基酸類的利用強(qiáng)度呈顯著正相關(guān),與微生物指數(shù)(除E 外)呈顯著正相關(guān)。銨態(tài)氮含量與聚合物、羧酸類及氨基酸類利用強(qiáng)度呈顯著負(fù)相關(guān),與指數(shù)D、H及S 呈顯著負(fù)相關(guān)(系數(shù)分別為-0.58、-0.59 及-0.51)。速效K含量與六大碳源(除胺類外)均呈顯著正相關(guān),其中與聚合物、酚類及氨基酸類呈極顯著正相關(guān),系數(shù)分別為0.59、0.62 及0.59。速效K 含量與微生物群落指數(shù)(除E外)呈顯著正相關(guān)。
比較不同土層土壤養(yǎng)分含量與微生物群落之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn),>20~40 cm土層微生物群落與養(yǎng)分的關(guān)系更為緊密,而速效鉀含量與0~20 cm 土層微生物群落指數(shù)的關(guān)系均為顯著負(fù)相關(guān),與>20~40 cm土層微生物群落的關(guān)系呈顯著正相關(guān)。
梨樹0~20 cm 土層微生物群落與果實(shí)品質(zhì)及養(yǎng)分含量之間的關(guān)系如表3 所示。聚合物利用強(qiáng)度與Vc 含量呈極顯著負(fù)相關(guān)(r = -0.61),與果皮著色L 與b 呈顯著正相關(guān)。碳水化合物利用強(qiáng)度與可溶性糖含量、果實(shí)N含量、果實(shí)K含量呈顯著負(fù)相關(guān),與可滴定酸含量呈極顯著正關(guān)。酚類利用強(qiáng)度與果實(shí)N含量呈顯著負(fù)相關(guān)。氨基酸利用強(qiáng)度與Vc 含量及果實(shí)氮含量呈顯著負(fù)相關(guān),系數(shù)分別為-0.46 與-0.58。胺類利用強(qiáng)度與可溶性固形物、Vc、果實(shí)K、果實(shí)P 含量以及公頃產(chǎn)量呈顯著負(fù)相關(guān),與可滴定酸含量呈顯著正相關(guān)。微生物指數(shù)E與果品著色a、葉片P 含量呈顯著正相關(guān),與果皮著色H°呈顯著負(fù)相關(guān)。指數(shù)U與可溶性糖、Vc、果實(shí)N、果實(shí)K 含量呈顯著負(fù)相關(guān),與可滴定酸含量呈顯著正相關(guān)。指數(shù)S 與葉片P 含量呈顯著負(fù)相關(guān)。awcd 與可溶性糖、Vc、果實(shí)N、果實(shí)K 含量呈顯著負(fù)相關(guān)。
梨樹>20~40 cm 土層微生物群落與果實(shí)品質(zhì)及養(yǎng)分含量之間的關(guān)系如表4 所示。聚合物利用強(qiáng)度與單果質(zhì)量呈顯著正相關(guān),系數(shù)分別為0.49 與0.45。碳水化合物與葉片N含量呈顯著正相關(guān)。羧酸類利用強(qiáng)度與果實(shí)著色指數(shù)H°、L 及b 呈顯著正相關(guān),系數(shù)分別為0.54、0.51 及0.56。果實(shí)K含量與微生物群落呈顯著正相關(guān),其中與聚合物、氨基酸類利用強(qiáng)度的相關(guān)系數(shù)分別為0.45 與0.65,與微生物群落指數(shù)D、H、U、S 及awcd 呈顯著正相關(guān),系數(shù)分別為0.65、0.46、0.51、0.49、0.48 及0.53。
3 討論
3.1 LMWOAs改變梨園土壤養(yǎng)分吸收
LMWOAs作為植物根際常見的分泌物,與植物養(yǎng)分的吸收密切相關(guān),原因是改變根系周圍pH,提升某些難溶性養(yǎng)分的溶解度[9-10],通過其較強(qiáng)的螯合力,與多種金屬離子形成復(fù)合物進(jìn)而促進(jìn)植物對(duì)金屬離子的吸收[10]。
pH 作為影響土壤礦質(zhì)元素有效態(tài)的因素之一,作用于植物養(yǎng)分吸收與利用[28]。筆者在本研究中發(fā)現(xiàn),草酸與檸檬酸顯著降低了梨樹土壤pH,而蘋果酸對(duì)土壤pH 的影響與土層深度及添加量有關(guān)。有機(jī)物添加后,土壤氮循環(huán)涉及的硝化作用會(huì)導(dǎo)致土壤pH值的下降,這與本研究結(jié)果保持一致,即HO顯著降低了土壤pH,而HO在>20~40 cm 土壤中硝態(tài)氮含量高于對(duì)照[29-30]。另外,蘋果酸與氮磷鉀復(fù)配降低了葡萄根際土壤pH[31]。而諸多文獻(xiàn)表明,有機(jī)酸的添加提高了土壤pH,可能是由于有機(jī)酸添加后土壤微生物群落在降解羧酸的同時(shí),消耗了H+并釋放出OH-與CO2[32-34]。土壤電導(dǎo)率EC為評(píng)價(jià)土壤鹽漬化的重要指標(biāo)[35],而LMWOAs 則降低了梨園土壤EC 值,其中5%檸檬酸與草酸處理EC值顯著降低。而蘋果酸則升高了葡萄根際土壤EC 值,其中5%蘋果酸處理顯著高于對(duì)照與10%蘋果酸處理[31]。
LMWOAs作為碳氮代謝偶聯(lián)的樞紐,與植物氮素代謝相關(guān)。蘋果酸作為固氮菌呼吸的重要能量來源,為氮固定提供了大量的碳骨架[36-38]。氮礦化受土壤中有機(jī)質(zhì)降解控制[39],而根際有機(jī)酸為微生物群落提供了大量能量,以生產(chǎn)催化有機(jī)物分解的胞外酶[40]。另外,有機(jī)酸的累積有助于土壤有機(jī)質(zhì)從礦化物中的釋放,進(jìn)而進(jìn)一步加速了氮素礦化[41]。因此蘋果酸、檸檬酸及草酸提高了土壤銨態(tài)氮的含量,同時(shí)5%蘋果酸提高了土壤硝態(tài)氮的含量。
速效磷含量影響著植物對(duì)磷的攝取[42],Wang等[43]發(fā)現(xiàn)低分子質(zhì)量有機(jī)酸能夠同時(shí)增強(qiáng)無機(jī)磷(Pi)與有機(jī)磷(Po)釋放到土壤中。根際產(chǎn)生蘋果酸、檸檬酸以及草酸等,用于溶解微溶性磷酸巖中的磷元素,而比較各有機(jī)酸的溶磷效率發(fā)現(xiàn),草酸>檸檬酸>蘋果酸[44]。因此,10%草酸處理顯著提高了>20~40 cm 土層速效磷含量。植物根際分泌的蘋果酸與土壤中磷含量密切相關(guān),土壤磷缺乏時(shí)構(gòu)樹、桑樹、諸葛菜以及歐洲油菜根際蘋果酸分泌量較低磷與磷含量豐富狀態(tài)下顯著升高[45]。因此,5%蘋果酸處理下梨樹土壤有效磷含量較對(duì)照顯著升高。
5%蘋果酸促進(jìn)了梨樹對(duì)鉀元素的吸收,而檸檬酸與草酸阻礙了梨樹對(duì)鉀的吸收。在葡萄上的研究也發(fā)現(xiàn)了蘋果酸與氮磷鉀復(fù)配有助于葡萄對(duì)于鉀的吸收[31]。而高濃度草酸易與土壤中金屬離子發(fā)生化學(xué)反應(yīng),形成草酸鈣等沉淀[46],降低了金屬離子的移動(dòng)性,進(jìn)而造成土壤板結(jié)等現(xiàn)象,最終抑制植物對(duì)于鉀元素的吸收。
3.2 LMWOAs改變梨園土壤微生物群落
LMWOAs作為植物根際常見的一類根際分泌物,對(duì)根際微生物群落有篩選作用[11,17,47-49],而LMWOAs與氮磷鉀復(fù)配顯著改變了梨樹土壤微生物群落特征。而5%草酸與氮磷鉀復(fù)配降低了梨樹土壤微生物群落的多樣性指數(shù)與豐富度。Li 等[50]在研究草酸對(duì)富多環(huán)芳烴土壤微生物群落的影響時(shí)發(fā)現(xiàn),草酸處理降低了土壤細(xì)菌群落的多樣性指數(shù)。Ma等[51]發(fā)現(xiàn)10 mmol·kg-1草酸與蘋果酸均能顯著升高富鉻土壤微生物群落多樣性指數(shù)。
3.3 LMWOAs處理下微生物群落與土壤養(yǎng)分、微生物群落之間的關(guān)系
筆者在本研究中發(fā)現(xiàn)梨樹>20~40 cm 土層微生物群落與土壤養(yǎng)分及果實(shí)品質(zhì)密切相關(guān)。這可能與梨樹根的分布相關(guān),在研究梨樹施肥與其根系發(fā)育時(shí),發(fā)現(xiàn)梨樹根系在土壤中扎根較深,更易于吸收深層土壤的養(yǎng)分[52]。李宏等[53]在研究庫爾勒香梨時(shí)發(fā)現(xiàn),與0~20 cm土層相比,>20~40 cm土層吸收根與疏導(dǎo)根的根長密度明顯增加。伍從成等[54]研究發(fā)現(xiàn),梨樹根尖數(shù)量隨著土壤的垂直深度的增加呈先增加后減少的趨勢(shì),其中30~60 cm土層深度的根尖分布最多。因此,在本研究中>20~40 cm土層土壤與梨果實(shí)品質(zhì)之間關(guān)系更為密切。
鉀肥與根際微生物群落的多樣性密切相關(guān),Wei 等[55]發(fā)現(xiàn)葡萄根際土壤的速效鉀含量作用于細(xì)菌群落結(jié)構(gòu),與Chloroflexi、Rokubacteria 及Nitrospirae等呈顯著負(fù)相關(guān)。筆者在研究蘋果酸與葡萄果實(shí)品質(zhì)關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)[31],蘋果酸處理下根際微生物群落的差異擁有提升葡萄果實(shí)品質(zhì)的潛質(zhì),即葡萄根際Woeseiaceae、Bacillaceae 含量與果實(shí)鉀及可溶性糖含量呈顯著正相關(guān)。
4 結(jié)論
LMWOAs與氮磷鉀復(fù)配顯著影響紅寶石梨園土壤有效態(tài)養(yǎng)分含量與微生物群落,其中5%蘋果酸與氮磷鉀肥復(fù)配明顯改善了梨樹土壤養(yǎng)分環(huán)境。另外,LMWOAs與氮磷鉀肥配施下梨園土壤微生物群落與梨養(yǎng)分含量及果實(shí)品質(zhì)之間密切相關(guān)。與0~20 cm 土層相比,>20~40 cm 土層梨園土壤微生物群落在梨樹養(yǎng)分吸收與果實(shí)品質(zhì)提升方面發(fā)揮更為重要的作用。
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