王海波,楊 杰,蔣崇輝
(衡陽(yáng)市中心醫(yī)院,湖南 衡陽(yáng) 421001)
金蓮花來(lái)源于毛茛科植物金蓮花TrolliuschinensisBge.的干燥花,《中國(guó)藥典》一部收載品[1]。金蓮花作為藥用,始載于《本草綱目拾遺》,該藥味苦、寒、無(wú)毒,主治口瘡、耳和目痛,具有明目、解嵐瘴等功效[2]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)金蓮花的藥理作用還具有消炎、止痛、抑菌、抗氧化、抗病毒、抗癌等多種功效。
755型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(全自動(dòng)掃描波長(zhǎng)),上海菁華儀器有限公司;BK-RE-2A 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海申勝生物科技有限公司;GSC-10L型磁力攪拌水浴鍋,常州朗越儀器有限公司;SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵,鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;HC2006G型分析天平,天津市天馬儀器廠;ZRS-8G型溶出度儀,天津天光儀器有限公司;101-A5型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,無(wú)錫瑪瑞特科技有限公司;膠囊填充板,湖南常宏制藥機(jī)械設(shè)備廠。
1~2號(hào)膠囊殼,蘇州膠囊有限公司;微粉硅膠、糊精、硬脂酸鎂、乳糖、可溶性淀粉等藥用物質(zhì),安徽山河藥用輔料有限公司;YZ-100080蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,北京索萊寶有限公司;金蓮花總黃酮,南方醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)藥中藥制劑學(xué)教研室自制;所用化學(xué)試劑均為分析純,南京化學(xué)試劑股份有限公司。
采用纖維素酶輔助超聲波提取金蓮花黃酮,最佳工藝條件為:料液比1∶40,pH為4,超聲功率90 W,酶添加量量為1.4%,乙醇濃度47.0%,提取溫度39.0 ℃,提取時(shí)間30.0 min,再濃縮至無(wú)醇味,經(jīng)HP 20樹(shù)脂純化,最后濃縮至一定體積,置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中40 ℃烘干,過(guò)篩(80目),即得。
輔料種類篩選在查閱文獻(xiàn)[3-9]和預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上,本次實(shí)驗(yàn)選擇了以下6種常用輔料:分別是羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)、可溶性淀粉、乳糖、微粉硅膠、糊精、硬脂酸鎂,按表1中各配方量進(jìn)行篩選試驗(yàn)。
表1 不同輔料與主藥的配方比例Table 1 Different proportions of excipients to main drug formulations (g)
2.2.1 吸濕率
將底部盛有NaCl過(guò)飽和溶液的燒杯,置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中24 h,樣品平鋪于干燥至恒重的稱量瓶中,厚度約2 mm,精密稱定,打開(kāi)瓶蓋,置于培養(yǎng)箱中,于0、3、6、12、24、48、72 h稱定,計(jì)算其吸濕率,計(jì)算公式為:吸濕率=[(吸濕后藥粉質(zhì)量-吸濕前藥粉質(zhì)量)/吸濕前藥粉質(zhì)量]×100%。結(jié)果見(jiàn)表2。由此可知,乳糖、硬脂酸鎂、微粉硅膠、糊精均具有良好的抗?jié)裥浴?/p>
表2 不同輔料與主藥配方比例的休止角和平衡吸濕率Table 2 The angle of repose and equilibrium hygroscopicity of different proportion of excipients and main drug formula
2.2.2 休止角
采用固定漏斗法[10]測(cè)定休止角,平行測(cè)定5次,計(jì)算休止角的平均值。其結(jié)果見(jiàn)表2。
由表2可知,加入可溶性淀粉、微粉硅膠有助于改善藥粉的流動(dòng)性,乳糖、微粉硅膠還可以降低藥粉吸濕性,故選擇微粉硅膠、乳糖、可溶性淀粉作為輔料。
乙醇體積分?jǐn)?shù)篩選按照主藥、可溶性淀粉、乳糖、微粉硅膠1∶2∶2∶1的比例稱取6份樣品,分別加入10%、30%、50%、70%、90%乙醇制成相應(yīng)的軟材,過(guò)篩(20目),置于恒溫鼓風(fēng)干燥箱中,溫度調(diào)至40 ℃,干燥30 min后,進(jìn)行整粒。然后取能通過(guò)1號(hào)篩,但不能通過(guò)5號(hào)篩的顆粒,再計(jì)算其成型率,計(jì)算公式為:成型率=(合格顆粒的質(zhì)量/過(guò)篩前顆粒的質(zhì)量)×100%,其結(jié)果見(jiàn)表3。
表3 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)成型工藝的影響Table 3 Effect of ethanol volume fraction on molding process
由此可知,用70%乙醇作為潤(rùn)濕劑時(shí),符合最佳要求。
將主藥與輔料分別按1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5比例混合均勻,以70%乙醇為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制粒,以吸濕率、休止角、顆粒成型率為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行篩選,其結(jié)果見(jiàn)表4。
表4 主藥與輔料比例對(duì)成型工藝的影響Table 4 Effect of ratio of main drug and excipient on molding process
由此可知,主藥與輔料比例為1∶4時(shí),制粒效果最為理想,吸濕率較低,流動(dòng)性較好,顆粒成型率較高。
將主藥與輔料按1∶4比例混合均勻,以70%乙醇為潤(rùn)濕劑進(jìn)行制粒,以休止角、吸濕率、顆粒成型率、堆密度等作為評(píng)價(jià)指標(biāo),進(jìn)行計(jì)算并綜合評(píng)分,其公式為:綜合評(píng)分=(25/最大成型率)×成型率+(20/最大堆密度)×堆密度+(最小休止角×20)/休止角+(最小吸濕率×35)/吸濕率,其中堆密度采用量筒法[11]進(jìn)行測(cè)定,公式為堆密度=樣品質(zhì)量/樣品體積,其結(jié)果見(jiàn)表5。
表5 輔料用量比例對(duì)成型工藝的影響Table 5 The influence of the proportion of excipients on the molding process
由此可知,處方6的綜合評(píng)分最高,故可確定乳糖與可溶性淀粉最佳比例為2:1,微粉硅膠用量為20%。
根據(jù)上述結(jié)果,本次實(shí)驗(yàn)選擇乳糖與可溶性淀粉比例(A)、主藥與輔料比例(B)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(C)、微粉硅膠用量(D)作為影響因素,測(cè)定主藥與輔料按照不同的比例進(jìn)行混合,以休止角和平衡吸濕率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),計(jì)算綜合評(píng)分,其公式為:綜合評(píng)分=(休止角/最大休止角×50%+平衡吸濕率/最大平衡吸濕率×50%)×100%,采用L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)化成型工藝,其結(jié)果見(jiàn)表6。
表6 正交試驗(yàn)與結(jié)果Table 6 Orthogonal test and results
由此可知,各因素影響程度依次為乙醇體積分?jǐn)?shù)>主藥與輔料比例>微粉硅膠用量>乳糖與可溶性淀粉比例,最優(yōu)工藝為乳糖與可溶性淀粉比例2∶1,主藥與輔料比例1∶4,乙醇體積分?jǐn)?shù)70%,微粉硅膠用量20%。
2.7.1 裝量差異
隨機(jī)抽取10粒膠囊,按照《中國(guó)藥典》規(guī)定進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果平均裝量為0.4370 g±10%,符合2020年版《中國(guó)藥典》規(guī)定。
2.7.2 含水量
精密稱取顆粒2.0 g,置稱量瓶中,按照《中國(guó)藥典》規(guī)定進(jìn)行測(cè)定,平行測(cè)定3次。結(jié)果含水量分別為2.00%、4.34%、3.70%,符合2020年版《中國(guó)藥典》的規(guī)定。
將顆粒干燥至恒重,取7份,每份約1 g,平鋪于稱量瓶底部,精密稱定質(zhì)量,分別置于55%、50%、45% H2SO4及NaBr、NaCl、KCl、KNO3過(guò)飽和鹽溶液(相對(duì)濕度分別為29.45%、41.52%、48.52%、59.70%、75.29%、84.26%、97.48%)的干燥器內(nèi),室溫下放置7 d,取出,稱定質(zhì)量,計(jì)算吸濕率。其結(jié)果見(jiàn)圖1。
圖1 臨界相對(duì)濕度曲線Fig.1 The critical relative humidity curve
中藥是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中獨(dú)具特色的瑰寶。隨著現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)國(guó)際化、全球化的發(fā)展,中藥制劑的研制不能適應(yīng)中醫(yī)發(fā)展的需求。為此,大力研發(fā)新型的中藥制劑具有一定價(jià)值意義。