何正和，陸井蓮，姜穎慧，魏云計，朱臻怡

（淮安海關綜合技術服務中心，江蘇淮安 223001）

隨著社會的發(fā)展，水產品在人們飲食中的占比逐漸增加。早期五氯苯酚及其鈉鹽作為藥物被廣泛用于除雜草和滅螺[1]，但由于其易溶于水、不易降解，在動植物體內富集[2]。微量五氯苯酚及其鈉鹽即可對人體神經(jīng)系統(tǒng)、肝、腎造成損傷，同時影響內分泌系統(tǒng)，因此水產品中五氯苯酚及其鈉鹽的檢測十分必要。本文介紹了近些年水產品中五氯苯酚及其鈉鹽的常用檢測方法并對其進行了展望。

1 五氯苯酚及其鈉鹽概述

五氯苯酚（Pentachlorophenol，PCP）是一種酚類化合物，具有很強的毒性，因苯環(huán)上的5 個氫被氯取代使其具有較強的酸性。五氯苯酚及其鈉鹽在酸性條件下以五氯苯酚形式穩(wěn)定存在，在堿性條件下能夠以五氯酚鹽的形式穩(wěn)定存在。五氯苯酚及其鈉鹽易溶于水，被廣泛用于除雜草和滅螺，由于其結構穩(wěn)定不易被降解的性質使其容易在動植物體內富集，對動物和人的神經(jīng)系統(tǒng)、相關組織造成損傷。

五氯苯酚及其鈉鹽在被廣泛應用的同時，所造成的環(huán)境問題也日益受到人們的高度重視。20 世紀末，五氯酚及其鈉鹽被國際癌癥研究機構列為致癌物[3]。隨后，許多國家逐漸將其列為禁用藥物。2002年，我國農業(yè)農村部發(fā)布的文件《食品動物禁用的獸藥及其化合物清單》及《無公害食品 漁用藥物使用準則》（NY 5071—2002）中明確對該藥物進行了禁用規(guī)定。2009 年我國將五氯酚及其鈉鹽列為水產品監(jiān)督抽檢的主要參數(shù)之一。由此，水產品中五氯酚及其鈉鹽的準確快速測定顯得就十分有意義。

2 五氯苯酚及其鈉鹽的檢測原理

針對五氯苯酚及其鈉鹽的檢測大致分為兩種，一種是間接測定法，另一種是直接測定法。其中，間接測定法比較常見，運用較為廣泛。該方法是將水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽酸化后全部轉化為五氯苯酚，五氯苯酚與相應的酸酐結合生成相應的五氯苯酚酯。五氯苯酚酯經(jīng)過不同的儀器進行檢測，從而計算出五氯苯酚及其鈉鹽的含量。直接測定法在實際中運用較少，是將目標化合物以五氯苯酚或五氯酚鈉的形式直接采用儀器檢測。這兩個方法各有優(yōu)缺點。間接測定法多一步衍生化反應，前處理相對復雜，且衍生化反應會對化合物造成一定的損失，但是衍生后的產物在儀器上響應較好，靈敏度較高，所以應用較為廣泛。直接測定法的前處理簡單、損失少，但儀器的響應較低，因此應用較少?；诖?，本文對不同儀器方法對水產品中五氯苯酚及其鈉鹽的檢測進行了概述。

3 水產品中五氯苯酚及其鈉鹽的檢測方法

3.1 氣相色譜法

氣相色譜是測定水產品中五氯苯酚及其鈉鹽最為常用的方法，該方法大多數(shù)是將五氯苯酚及其鈉鹽酸化后經(jīng)過衍生化試劑轉化為五氯苯酚酯，最后經(jīng)過氣相色譜進行檢測。例如，研究者們將水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽在酸性條件下轉化為五氯苯酚，再用正己烷萃取后經(jīng)過乙酸酐衍生為五氯苯酚乙酸酯，最后通過配有電子捕獲檢測器的氣相色譜儀進行檢測[4-7]。此方法的應用較為成熟，被廣泛用于水產品中五氯苯酚及其鈉鹽殘留量的測定，同時該方法也被制定了水產檢測的標準[8]。張世娟等[9]采用正己烷提取，濃硫酸凈化等不同前處理方式降低乳化現(xiàn)象后，將樣品經(jīng)過衍生化后用氣相色譜儀進行檢測。梁倩、端禮欽等[10-11]用氣相色譜內標定量法檢測水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽含量，該方法選取2,4,6-三溴苯酚作為內標物。采用該內標法對水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽含量進行檢測可以降低乳化、衍生化等步驟對待測物造成的損失，可增強方法的穩(wěn)定性和準確性。池締萍[12]運用固相微萃取超聲輔助技術聯(lián)合氣相色譜法直接對水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽含量進行檢測，該方法無需進行衍生化操作，具有簡便快速的特點。

3.2 氣相色譜質譜聯(lián)用法

采用氣相色譜質譜聯(lián)用儀檢測水產品中五氯酚及其鈉鹽含量的實際應用較少，前處理過程和大多數(shù)氣相色譜儀法測定水產品中五氯酚及其鈉鹽含量的前處理方法相差不大，即將樣品中的待測物經(jīng)過酸化，用乙酸酐等衍生化試劑進行衍生化后經(jīng)氣相色譜質譜聯(lián)用儀測定[13-16]。朱曉華等[13]將樣品中的五氯苯酚及其鈉鹽經(jīng)過硫酸酸化，HLB 固相萃取小柱凈化，在碳酸鉀溶液中和乙酸酐生成五氯苯乙酯。含五氯苯乙酯的提取液經(jīng)過TR-5MS 毛細管色譜柱進行氣相色譜分離，采用負化學電離源和選擇性反應監(jiān)測模式進行質譜分析，內標法定量。該方法用于水產品中五氯酚及鈉鹽含量的測定，檢出限為1.0 μg·kg-1。陳紅燕等[14]同樣通過酸化衍生化過程，將五氯苯酚及其鈉鹽的衍生物用氣相色譜-質譜測定。該方法的檢出限為4.0 μg·kg-1，相對標準偏差均小于10%，能夠很好地排除水產品五氯苯酚的假陽性問題。史玉坤等[15]將水產品中的五氯苯酚及其鈉鹽酸化衍生化后的五氯苯乙酯經(jīng)過Thermo TG-SQC色譜柱（15 m×0.25 mm，0.25μm）分離，氣相色譜-質譜測定，方法的測定下限（S/N=10）為1.04 ng·g-1。符昌雨等[16]將待檢水產品中的10 種含氯苯酚經(jīng)過氫氧化鉀溶液超聲提取，乙酸酐衍生，然后正己烷溶液提取，采用氣相色譜-質譜儀進行定量檢測。該方法的定量限為2.5 μg·kg-1，可用于水產品中含氯苯酚及其鹽類的日常監(jiān)測?？傮w來說，氣相色譜-質譜聯(lián)用法檢測水產品中五氯酚及其鈉鹽含量，要通過衍生化后進行測定，前處理要求較高。

3.3 液相色譜法

液相色譜法測定水產品中五氯酚及其鈉鹽的研究較少。劉麗等[17]運用超高效液相色譜法測定了水產品中的酚類物質。該方法采用GX-271 ASPEC 固相萃取小柱進行分離和富集目標化合物，而后經(jīng)過甲醇和乙酸的混合溶液進行梯度洗脫，最后在柱溫30 ，進樣量5 μL，流速0.6 mL·min-1條件下進行檢測。李昌亮[18]運用同樣方法成功對水產品中酚類物質進行了定量檢測。超高效液相色譜法能夠用于水產品酚類物質的測定，該方法不同于大多數(shù)氣相和氣質聯(lián)用法測定衍生后的化合物，而是直接對分離富集后的酚類化合物進行測定。雖然該方法的前處理較為簡單，不需要經(jīng)過衍生化操作，但超高效液相色譜進行酚類化合物的測定中，針對五氯酚及其鈉鹽的含量檢測占酚類化合物的60%以上。目前還沒有采用超高效液相色譜專門針對水產品中五氯苯酚及其鈉鹽進行測定的研究 。

3.4 液相色譜質譜聯(lián)用法

液相色譜質譜聯(lián)用法測定水產品中五氯酚及其鈉鹽的運用比較成熟。2016 年，國家發(fā)布了《食品安全國家標準 動物源性食品中五氯酚殘留量的測定液相色譜- 質 譜法》（GB 23200.92—2016）[19]，該標準中采用液相色譜質譜聯(lián)用法直接對水產品中的五氯酚進行測定，不同于大多數(shù)氣相和氣質聯(lián)用法測定衍生后的化合物。李詩言等[20]對高效液相色譜儀串聯(lián)質譜法測定水產品中五氯酚及其鈉鹽含量的方法進行了優(yōu)化。優(yōu)化后的前處理是將樣品經(jīng)過有機溶劑萃取后進入大粒徑的陰離子交換小柱富集，凈化濃縮。結果表明，該方法在不同水產品基質中的定量限為0.5 μg·kg-1，基質加標回收率為92.4%～102.0%，相對標準偏差為3.21%～9.15%。與標準方法相比，優(yōu)化后的方法能夠減少前處理所需時間，解決了蟹類水產品樣品回收率偏低的問題。

4 結語

隨著水產品在人們食物中占比的增加，水產品的質量越來越備受重視。五氯苯酚及其鈉鹽作為水產品中的禁用藥物，將繼續(xù)被列為監(jiān)督抽檢必檢項目之一?？焖儆行У貙λa品中五氯苯酚及其鈉鹽進行測定，將會是一直被研究的課題。衍生化反應的間接法所得產物的響應雖然較高，但是有些反應的轉化率不高且前處理較為復雜，從實際操作來看，由于實驗室條件的不同，有些檢測實驗室達不到標準或者相關文獻的檢測限量。直接測定法更能反映出樣品中該化合物含量的真實性，具有更好的研究前景。同時，通過調整儀器的檢測器等部件增加其響應的程度也是研究的一個方面。