陳瑩,周華,晏日安

(暨南大學(xué) 理工學(xué)院,廣東 廣州,510632)

氧化白藜蘆醇,又名氧化芪三酚,結(jié)構(gòu)如圖1所示,其分子式為C14H12O4,分子質(zhì)量244.24,熔點(diǎn)199～204 ℃,外觀呈淡黃色非晶型固體,可溶于甲醇、乙醇、二甲基亞砜等有機(jī)溶劑。氧化白藜蘆醇作為天然產(chǎn)物白藜蘆醇2′-位的羥基化衍生物,結(jié)構(gòu)上含4個(gè)酚羥基,具備多種有益的生物和藥理活性(抗腫瘤、抗癌、抗氧化、抗炎和抗肥胖等作用[1-5]),此外還具有保肝、抑制酪氨酸酶和改善帕金森癥等作用[6-8]。大量研究顯示含有氧化白藜蘆醇的食品或者口服藥物安全且低毒,未來將廣泛應(yīng)用于保健品、化妝品及藥品等領(lǐng)域當(dāng)中[9]。

圖1 氧化白藜蘆醇結(jié)構(gòu)Fig.1 Structure of oxyresveratrol

氧化白藜蘆醇主要存在于多種天然植物當(dāng)中,如:桑樹、紫檀科、藜蘆、菠蘿蜜、買麻藤屬、片麻巖科和菝葜屬等[10-11],但含量很低,且分離純化較困難。目前,人們主要通過植物提取法、微生物轉(zhuǎn)化[12-13]和化學(xué)合成法來獲取氧化白藜蘆醇。趙建萍等[14]采用乙醇提取法提取拓木莖粗提液,并使用AB-8大孔樹脂分離純化獲得氧化白藜蘆醇,其提取及精制工藝過程過于復(fù)雜,且未報(bào)道其收率;PARK等[15]運(yùn)用Pectinex?對(duì)桑椹苷A的酶解來產(chǎn)生氧化白藜蘆醇,其中桑椹苷也需從植物中提取,且價(jià)格與氧化白藜蘆醇的市場(chǎng)價(jià)相近,由此可見植物提取法和微生物轉(zhuǎn)化法并不適合于大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)。氧化白藜蘆醇功效強(qiáng)大且毒副作用小,其市場(chǎng)需求大但來源不足,從而導(dǎo)致其價(jià)格昂貴,嚴(yán)重制約了其在保健食品、功能飲料、天然藥物及化妝品等領(lǐng)域內(nèi)的開發(fā)。因此,探索出反應(yīng)條件溫和、簡(jiǎn)潔高效、操作簡(jiǎn)單以及綠色環(huán)保的化學(xué)全合成氧化白藜蘆醇的路線頗有意義。

化學(xué)合成氧化白藜蘆醇的關(guān)鍵點(diǎn)在于其反式二苯乙烯骨架的構(gòu)建,根據(jù)國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn),目前構(gòu)建反式二苯乙烯骨架的方法主要有Perkin反應(yīng)法、Heck反應(yīng)法、Wittig反應(yīng)法以及Wittig-Horner反應(yīng)法,其中,Perkin反應(yīng)得到的雙鍵為順式構(gòu)型,需進(jìn)行異構(gòu)化轉(zhuǎn)化,操作復(fù)雜;Heck反應(yīng)條件苛刻,鹵代物制備污染大;Wittig反應(yīng)選擇性不高,收率低;Wittig-Horner反應(yīng)法是Wittig反應(yīng)法的改良,該反應(yīng)條件溫和、后處理簡(jiǎn)單,得到的雙鍵皆為反式構(gòu)型且收率高[16-17]。2004年CHOI等[18]以3,5-二甲氧基芐基溴與三苯基膦反應(yīng)制得相應(yīng)的Wittig鹽,再與2,4-二甲氧基苯甲醛通過Witing反應(yīng)構(gòu)建雙鍵骨架,經(jīng)碘異構(gòu)化反應(yīng)后,最終以格氏試劑甲基碘化鎂(CH3MgI)脫除甲基制得氧化白藜蘆醇,總收率較低;2010年SUN等[19]以3,5-二羥基苯乙酮經(jīng)甲基化反應(yīng)和Willgerodt-Kindler重排反應(yīng)得到3,5-二甲氧基苯乙酸,再與2,4-二甲氧基苯甲醛發(fā)生Perkin反應(yīng)構(gòu)建雙鍵骨架,經(jīng)脫羧和脫甲基反應(yīng)后,同樣還需異構(gòu)化反應(yīng)才能合成氧化白藜蘆醇,總收率30%;2012年,李曉霞等[20]以3,4-二甲氧基芐醇為原料,經(jīng)溴代、Arbuzov重排反應(yīng)、Wittig-Horner反應(yīng)構(gòu)建二苯乙烯骨架,最后用無水AlCl3脫除甲基獲得白皮杉醇,產(chǎn)率43.7%;2013年鄭群怡等[21]從3,5-二甲氧基苯甲醇出發(fā),經(jīng)HBr于甲苯中溴代,Arbuzov重排反應(yīng)、Wittig-Horner反應(yīng)獲得反式二苯乙烯骨架,最后使用CH3MgI脫除甲基得到氧化白藜蘆醇,脫甲基步驟較為繁瑣,且工藝過程中用到甲苯等有毒試劑,污染大;2016年李志偉等[22]由間苯二酚經(jīng)碘代反應(yīng)、Heck反應(yīng)和脫羧反應(yīng)制得中間體2,4-二羥基苯乙烯,再與3,5-二羥基碘苯在鈀催化下再次發(fā)生Heck反應(yīng)制得氧化白藜蘆醇,該路線條件苛刻且成本高。

本研究在國(guó)內(nèi)外已有合成路線的基礎(chǔ)上,為克服這些路線所存在的原料昂貴、路線長(zhǎng)、操作危險(xiǎn)性大、不夠環(huán)保及收率低等缺點(diǎn),對(duì)氧化白藜蘆醇的合成工藝進(jìn)行改進(jìn)。選擇Wittig-Horner反應(yīng)法來構(gòu)建反式二苯乙烯骨架,以3,5-二甲氧基芐醇、2,4-二甲氧基苯甲醛為原料,經(jīng)溴代、Arbuzov重排反應(yīng)、Wittig-Horner反應(yīng)和脫甲基反應(yīng)四步合成氧化白藜蘆醇,對(duì)工藝條件進(jìn)行優(yōu)化,重點(diǎn)對(duì)脫甲基試劑進(jìn)行了優(yōu)選。以維生素C、BHT和TBHQ為參照,通過DPPH自由基清除能力、ABTS陽離子自由基清除能力和鐵離子還原能力評(píng)價(jià)了氧化白藜蘆醇的抗氧化活性,并與同為多酚類的化合物白皮杉醇、白藜蘆醇和茶多酚作對(duì)比,期望為氧化白藜蘆醇的工業(yè)化生產(chǎn)及其未來在食品、化妝品、藥品等領(lǐng)域中的運(yùn)用提供理論與技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 材料與試劑

3,5-二甲氧基芐醇、2,4-二甲氧基苯甲醛、甲醇鈉、N,N-二甲基甲酰胺、無水AlCl3、BBr3(1.0 mol/L CH2Cl2溶液),安徽澤升科技有限公司;PBr3、亞磷酸三乙酯、吡啶、HBr溶液(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%),ABTS、DPPH,上海麥克林生化科技有限公司;吡啶鹽酸鹽、CH3MgI(3.0 mol/L乙醚溶液),上海吉至生化科技有限公司;BCl3(1.0 mol/L CH2Cl2溶液),北京百靈威科技有限公司;氘代氯仿、氘代甲醇,安諾倫(北京)生物科技有限公司;白藜蘆醇、白皮杉醇均為實(shí)驗(yàn)室合成;茶多酚(≥98.0%)、2,6-二叔丁基對(duì)甲酚(2,6-butylated hydroxytoluene,BHT,>99.0%)、特丁基對(duì)苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ,98.0%)、維生素C(99.0%),北京索萊寶科技有限公司;其他所用化學(xué)試劑均為市售化學(xué)純或分析純。

1.1.2 儀器與設(shè)備

手提式紫外分析儀,華睿鼎順(北京)科貿(mào)有限公司;X-5控溫型顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀,北京泰克儀器有限公司;AL204電子天平,瑞士梅特勒-托利多公司;Infinite M200Pro多功能酶標(biāo)儀,瑞士Tecan公司;EQUINOX55紅外光譜儀、AVANCEⅢ型核磁共振波譜儀(600 MHz),布魯克科學(xué)儀器公司;N-1300型低溫反應(yīng)儀,東京理化器械株式會(huì)社;X500R QTOF型高分辨質(zhì)譜儀,上海愛博才思分析儀器貿(mào)易有限公司;MS-H-Pro磁力攪拌器,美國(guó)賽洛捷克公司;N-1300型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,東京理化器械株式會(huì)社。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 合成路線

如圖2所示,首先由3,5-二甲氧基芐醇(化合物1)與PBr3發(fā)生溴代反應(yīng)制得3,5-二甲氧基芐溴(化合物2);化合物2與P(OEt)3通過Arbuzov重排反應(yīng)制得Wittig-Horner試劑3,5-二甲氧基芐基磷酸二乙酯(化合物3);化合物3和2,4-二甲氧基苯甲醛(化合物4)通過Wittig-Horner反應(yīng)構(gòu)建反式二苯乙烯骨架制得中間體2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯(化合物5);最后化合物5在無水AlCl3的作用下脫除甲基合成終產(chǎn)物氧化白藜蘆醇(化合物6)。

圖2 氧化白藜蘆醇的合成路線Fig.2 Synthesis route of oxyresveratrol

1.2.2 合成方法

1.2.2.1 3,5-二甲氧基芐溴(化合物2)[23]

取8.00 g(0.048 mol)3,5-二甲氧基芐醇、56 mL無水CH2Cl2于250 mL圓底燒瓶中,N2保護(hù),攪拌溶解。在0 ℃條件下,緩慢滴加含2.60 mL PBr3的CH2Cl2溶液(9.60 mL)于反應(yīng)瓶中,滴加完畢于0 ℃反應(yīng)1 h,轉(zhuǎn)至室溫繼續(xù)反應(yīng)3～4 h,薄層層析色譜(thin layer chromatography,TLC)監(jiān)測(cè)。反應(yīng)結(jié)束后,

將反應(yīng)液緩慢倒入冰水中,分液,水層用CH2Cl2洗滌,合并有機(jī)相,有機(jī)相用飽和NaCl溶液洗滌至中性,無水Na2SO4干燥,過濾,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去CH2Cl2,得到淡黃色固體粗品,用甲醇重結(jié)晶得到白色晶體(2,10.79 g,0.047 mol),收率97.3%。熔點(diǎn)71～73.5 ℃(文獻(xiàn)值[23]72.9～73.8 ℃)。

1.2.2.2 3, 5-二甲氧基芐基磷酸二乙酯(化合物3)[24]

取5.00 g(0.022 mol) 3,5-二甲氧基芐溴、13 mL亞磷酸三乙酯于50 mL圓底燒瓶中,充分?jǐn)嚢?先升溫至100 ℃反應(yīng)約1 h,待溴乙烷等低沸點(diǎn)副產(chǎn)物蒸出后,裝上回流冷凝管,再升溫至130 ℃繼續(xù)回流反應(yīng)4 h,TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)。待反應(yīng)結(jié)束后,停止反應(yīng),使反應(yīng)液冷卻至室溫,于120 ℃條件下進(jìn)行減壓蒸餾,除去未反應(yīng)的亞磷酸三乙酯,得到淡黃色油狀液體(3,5-二甲氧基芐基磷酸二乙酯粗品),無需進(jìn)一步柱層析純化,直接投入下一步反應(yīng)。1H NMR (600 MHz,氘代氯仿) δ 6.46(t,J=2.4 Hz,2H,2×Ar—H),6.35(q,J=2.3 Hz,1H,Ar—H),4.08-3.97(m,4H,2×O—CH2),3.77(s,6H,2×O—CH3),3.11(s,1H,Ar—CH2),3.07(s,1H,Ar—CH2),1.26(t,J=7.1 Hz,6H,2×O—CH3)。MS(ESI),m/z:C13H21O5P [M+H]+,理論值289.119 9,實(shí)測(cè)值289.120 4。

1.2.2.3 2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯(化合物5)[25]

1.2.2.4 氧化白藜蘆醇(化合物6)[20]

1.2.3 抗氧化活性的測(cè)定

參照文獻(xiàn)[26]的方法進(jìn)行測(cè)定,略作修改。分別稱取0.192 g ABTS、0.033 1 g K2S2O8于燒杯中,并用超純水定容至50 mL,將ABTS溶液(7 mmol/L)與K2S2O8溶液(2.45 mmol/L)以體積比1∶1混合均勻,于室溫避光條件下靜置過夜,將生成的ABTS陽離子自由基溶液用無水乙醇稀釋至734 nm處吸光值為0.70±0.02。反應(yīng)體系中,取以上方法配好的ABTS陽離子自由基溶液200 μL于96孔板中,并添加不同濃度的樣品溶液2 μL,充分搖勻,室溫靜置10 min,反應(yīng)液用酶標(biāo)儀在734 nm處測(cè)定吸光值,ABTS陽離子自由基清除能力按公式(1)計(jì)算。

(1)

式中,Ao,無水乙醇與ABTS陽離子自由基溶液在734 nm處的吸光值;Ai,測(cè)定液與無水乙醇在734 nm處的吸光值;Aj,測(cè)定液與ABTS陽離子自由基溶液在734 nm處的吸光值。

參照文獻(xiàn)[26-27]的方法對(duì)樣品清除DPPH自由基能力和鐵離子還原能力進(jìn)行測(cè)定。DPPH自由基清除能力按公式(1)計(jì)算。ABTS陽離子自由基清除能力與DPPH自由基清除能力以基于線性回歸方程計(jì)算得到的添加2 μL樣品溶液中的半抑制濃度(half inhibitory concerntration,IC50)值表示,鐵離子還原能力測(cè)定中以維生素C作為標(biāo)準(zhǔn)物并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,所得線性回歸方程為y=0.184 1x-0.328 1,R2=0.999 7. 其中x代表維生素C質(zhì)量濃度(μg/mL),y代表吸光度。鐵離子還原能力以與樣品吸光值相同時(shí)的維生素C當(dāng)量來表示。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

采用Chemdraw 18.1繪制化合物結(jié)構(gòu)式、分析化合物結(jié)構(gòu)以及化學(xué)反應(yīng);采用MestReNova 14.0解析化合物的核磁譜圖、確證化合物結(jié)構(gòu)。采用SPSS 26.0統(tǒng)計(jì)軟件分析差異顯著性,P<0.05,差異顯著;P<0.01,差異極顯著。采用Origin 2019軟件繪制圖表,所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次,結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 溴代反應(yīng)

鹵原子置換羥基是用來制備鹵化物常用的方法之一,其中芐醇的溴代較氯代容易。溴代試劑的種類有很多,本文選用了40%的HBr溶液、HBr氣體以及PBr3作為溴代試劑,綜合操控性、產(chǎn)率以及成本來考慮,采用PBr3作為溴代試劑操作簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高、且價(jià)格便宜易得,更適用于工業(yè)化生產(chǎn),具體對(duì)比結(jié)果如表1所示。選取以無水CH2Cl2為溶劑,反應(yīng)溫度為室溫,反應(yīng)時(shí)間3 h,芐溴收率可高達(dá)97%。

表1 不同溴代試劑的比較Table 1 Comparison of different brominated reagents

2.2 Arbuzov 重排反應(yīng)

表2 反應(yīng)溫度對(duì)產(chǎn)率的影響Table 2 Effect of reaction temperature on yield

反應(yīng)溫度選擇在130 ℃,反應(yīng)4 h時(shí),TLC檢測(cè)原料反應(yīng)較為完全,收率最高,整個(gè)過程反應(yīng)溫和、操作簡(jiǎn)單。此外,應(yīng)注意反應(yīng)剛開始時(shí)如果溫度過高,

反應(yīng)體系會(huì)產(chǎn)生溴乙烷等副產(chǎn)物,在副產(chǎn)物作用下,亞磷酸三乙酯會(huì)發(fā)生異構(gòu)化轉(zhuǎn)變,影響產(chǎn)率,因此我們一開始控溫在100 ℃左右,使溴乙烷以及其他低沸點(diǎn)副產(chǎn)物先行蒸出,以利于原料的充分反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后,只需減壓蒸餾除去未反應(yīng)的亞磷酸三乙酯及其他低沸點(diǎn)雜質(zhì),無需進(jìn)一步柱層析純化,便可直接投入下一步反應(yīng)當(dāng)中,簡(jiǎn)化了后處理,利于工業(yè)化的操作。

2.3 Wittig-Horner反應(yīng)

Wittig-Horner反應(yīng)條件溫和,不需無水無氧條件,操作簡(jiǎn)單,立體選擇性高,反應(yīng)所產(chǎn)生的次膦酸或膦酸陰離子都溶于水,易于分離提純。在進(jìn)行Wittig-Horner反應(yīng)時(shí),3,5-二甲氧基芐基磷酸二乙酯與2,4-二甲氧基苯甲醛兩者使其中之一微微過量,便可使反應(yīng)順利。以N,N-二甲基甲酰胺為溶劑,選擇廉價(jià)易得的甲醇鈉來代替以往所用昂貴的氫化鈉作為反應(yīng)所需的堿,實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)甲醇鈉的用量對(duì)產(chǎn)物的產(chǎn)率及純度影響較大,因此考察了甲醇鈉用量對(duì)產(chǎn)率的影響,結(jié)果如表3所示。當(dāng)甲醇鈉與反應(yīng)物物質(zhì)的量比例為3∶1時(shí),室溫反應(yīng)過夜(約12 h),通過重結(jié)晶純化后得到的2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯的產(chǎn)率可達(dá)87%以上。

表3 甲醇鈉用量對(duì)產(chǎn)率的影響Table 3 Effect of sodium methoxide dosage on yield

2.4 脫甲基反應(yīng)

甲基醚性質(zhì)穩(wěn)定,不容易裂解脫除,這一步反應(yīng)制約著氧化白藜蘆醇總產(chǎn)率的提高,因此選擇合適的脫甲基試劑是提高總產(chǎn)率的關(guān)鍵。本文嘗試了使用吡啶鹽酸鹽、格氏試劑CH3MgI、路易斯酸(BBr3、BCl3、AlCl3)、48% HBr和對(duì)甲苯磺酸來脫甲基,各試劑的脫甲基效果如表4所示。

表4 脫甲基試劑對(duì)產(chǎn)率的影響Table 4 Effect of demethylation reagents on yield

通過對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果,吡啶鹽酸鹽以及CH3MgI價(jià)格昂貴、脫甲基所需條件苛刻、操作困難;BBr3是最常用的脫甲基試劑,雖然收率可觀,但試劑不易保存且成本偏高,需低溫反應(yīng)、操作危險(xiǎn)性大,不利于工業(yè)化生產(chǎn);BCl3和對(duì)甲苯磺酸脫除甲基的收率極低,48% HBr脫甲基產(chǎn)率不高。我們最終選取了價(jià)格便宜的AlCl3來脫甲基,并且以無水吡啶作為反應(yīng)溶劑時(shí)脫除甲基效率較好。本文進(jìn)一步對(duì)AlCl3的用量和反應(yīng)溫度進(jìn)行優(yōu)化,優(yōu)化結(jié)果如表5、表6所示。

表5 AlCl3用量對(duì)產(chǎn)率的影響Table 5 Effect of AlCl3 dosage on yield

表6 溫度對(duì)產(chǎn)率的影響Table 6 Effect of temperature on yield

無水AlCl3與2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯的物質(zhì)的量比和反應(yīng)溫度對(duì)收率影響較大,當(dāng)AlCl3用量過少,溫度較低時(shí),脫甲基不完全;溫度過高,AlCl3用量過多時(shí),副產(chǎn)物增多,產(chǎn)物易發(fā)生異構(gòu)化,增加了純化的難度。由表5和表6可知,通過優(yōu)化反應(yīng)條件,當(dāng)n(AlCl3)∶n(2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯)=8∶1,溫度為160 ℃時(shí),反應(yīng)時(shí)間為4 h時(shí),脫甲基較為完全,收率為76.2%。

2.5 抗氧化活性

2.5.1 清除ABTS陽離子自由基的能力

由圖3可知,氧化白藜蘆醇清除ABTS陽離子自由基的IC50值為(0.17±0.01) mg/mL,其清除ABTS陽離子自由基能力僅次于白皮杉醇,大于白藜蘆醇以及茶多酚。通過方差分析得到白藜蘆醇與茶多酚在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒有顯著性差異(P>0.05),氧化白藜蘆醇與白藜蘆醇之間存在顯著性差異(P<0.05),與其余各樣品之間存在極顯著性差異(P<0.01),各樣品清除ABTS陽離子自由基能力大小依次為:白皮杉醇>氧化白藜蘆醇>白藜蘆醇≈茶多酚>維生素C>TBHQ>BHT。

圖3 各樣品ABTS陽離子自由基清除能力Fig.3 ABTS cation radical scavenging ability of each sample注:P<0.05時(shí),不同字母表示差異性顯著;誤差線代表標(biāo)準(zhǔn)偏差,n=3(下同)。

2.5.2 清除DPPH自由基的能力

由圖4可知,氧化白藜蘆醇清除DPPH自由基的IC50值為(16.80±0.65) μg/mL,通過方差分析得到氧化白藜蘆醇和白皮杉醇在統(tǒng)計(jì)學(xué)上沒有顯著性差異(P>0.05),與其余各樣品之間存在極顯著性差異(P<0.01)。各樣品清除DPPH自由基能力的大小依次為:茶多酚≈維生素C≈TBHQ>氧化白藜蘆醇≈白皮杉醇>BHT>白藜蘆醇。DPPH是一種以氮為中心的很穩(wěn)定的自由基,易與含多羥基的化合物結(jié)合,達(dá)到清除自由基的作用。茶多酚結(jié)構(gòu)末端連接多個(gè)羥基,因此清除DPPH自由基能力最強(qiáng),白皮杉醇和氧化白藜蘆醇結(jié)構(gòu)上均帶有4個(gè)酚羥基,比白藜蘆醇多一個(gè)酚羥基,因此白皮杉醇和氧化白藜蘆醇的DPPH自由基清除能力大于白藜蘆醇。

圖4 各樣品DPPH自由基清除能力Fig.4 DPPH free radical scavenging ability of each sample

2.5.3 鐵離子還原能力

由圖5可知,氧化白藜蘆醇和各樣品的鐵離子還原能力隨濃度的增大而增大。由表7可知,在質(zhì)量濃度為8 μg/mL時(shí),各樣品的鐵離子還原能力大小依次為:白皮杉醇>茶多酚>TBHQ>氧化白藜蘆醇>BHT>白藜蘆醇。由方差分析得知,當(dāng)樣品質(zhì)量濃度為2 μg/mL時(shí),氧化白藜蘆醇與TBHQ在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P>0.05);當(dāng)樣品質(zhì)量濃度為4 μg/mL時(shí),氧化白藜蘆醇與TBHQ存在顯著性差異(P<0.05),與其余樣品之間存在極顯著性差異(P<0.01);當(dāng)樣品質(zhì)量濃度為6、8、10 μg/mL時(shí),氧化白藜蘆醇與其他樣品之間皆存在極顯著性差異(P<0.01)。

表7 各濃度樣品所對(duì)應(yīng)的鐵離子還原能力Table 7 Ferric reducing antioxidant power of samples with different concentrations

圖5 各樣品鐵離子還原能力Fig.5 Ferric reducing antioxidant power of each sample

3 結(jié)論

以3,5-二甲氧基芐醇、2,4-二甲氧基苯甲醛為原料,通過Wittig-Horner反應(yīng)法四步合成氧化白藜蘆醇,改進(jìn)了合成工藝并優(yōu)化了反應(yīng)條件,合成總產(chǎn)率為64.6%。重點(diǎn)對(duì)2,3′,4′,5-四甲氧基二苯乙烯的脫甲基試劑進(jìn)行了篩選,最終,對(duì)比一系列脫甲基試劑后,選取廉價(jià)易得的無水AlCl3作為脫甲基試劑,并確定最佳反應(yīng)條件為:在無水吡啶中,n(AlCl3)∶n(2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯)=8∶1,反應(yīng)溫度160 ℃,反應(yīng)時(shí)間4 h。

與現(xiàn)有的合成工藝相比,本文選擇以Wittig-Horner反應(yīng)為特征的路線合成氧化白藜蘆醇,避免了使用Perkin反應(yīng)需進(jìn)行的異構(gòu)化轉(zhuǎn)化、Heck反應(yīng)所需的苛刻條件以及Wittig反應(yīng)導(dǎo)致的副產(chǎn)物不易分離等問題,反應(yīng)中所使用的原料價(jià)格便宜且來源廣泛,其中使用AlCl3脫甲基大大降低了生產(chǎn)成本,反應(yīng)路線簡(jiǎn)短,操作方便,反應(yīng)條件溫和,總產(chǎn)率較高,具有潛在的工業(yè)利用價(jià)值。氧化白藜蘆醇的抗氧化活性測(cè)定結(jié)果表明其具備很強(qiáng)的抗氧化性,其ABTS陽離子自由基清除能力遠(yuǎn)大于維生素C、BHT、TBHQ,DPPH自由基清除能力以及鐵離子還原能力均強(qiáng)于白藜蘆醇和BHT,未來可作為優(yōu)良的天然抗氧化劑應(yīng)用于食品添加劑、化妝品等鄰域當(dāng)中。