郭寧寧，范 鑫，周 娟，季 晨，周博文，姜宏堯，韓俊平

1 天津嘉立荷牧業(yè)集團(tuán)有限公司，天津 300402

2 樂(lè)陵市畜牧業(yè)發(fā)展中心，山東德州 253607

3 天津津墾牧業(yè)集團(tuán)有限公司，天津 300450

0 引言

在奶牛場(chǎng)中，對(duì)于奶牛的妊娠診斷主要包括直腸觸診法、試紙條檢測(cè)法以及B超聲像技術(shù)（簡(jiǎn)稱“B超”）。直腸觸診法有簡(jiǎn)單便捷的優(yōu)點(diǎn)，但對(duì)于技術(shù)員觸診經(jīng)驗(yàn)有較高的要求，并且在奶牛妊娠早期，直腸觸診法的診斷準(zhǔn)確率較低；試紙條檢測(cè)法主要是通過(guò)對(duì)奶牛妊娠期機(jī)體分泌的相關(guān)特異性糖蛋白或是孕酮進(jìn)行檢測(cè)，從而確定奶牛的妊娠狀態(tài)，試紙條檢測(cè)法具有檢測(cè)快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，但試紙條的一次性使用對(duì)于奶牛場(chǎng)來(lái)說(shuō)是成本相對(duì)較高[1，2]。B超是發(fā)明于20世紀(jì)50年代的超聲聲像技術(shù)，在21世紀(jì)之后逐漸應(yīng)用于奶牛場(chǎng)早期妊娠診斷中，B超具有準(zhǔn)確快速，對(duì)胎兒傷害小的優(yōu)點(diǎn)，對(duì)于對(duì)B超原理熟悉的人員，在經(jīng)過(guò)培訓(xùn)后可以很快掌握，B超診斷儀價(jià)格較為昂貴，但儀器的長(zhǎng)期性和穩(wěn)定性是其不可替代的優(yōu)點(diǎn)[3]。B超不僅應(yīng)用在奶牛早期妊娠診斷工作上，并且在奶牛生殖系統(tǒng)疾病診斷上，同樣作為一種非損傷性的、高確診率的技術(shù)得到了應(yīng)用和發(fā)展[4]。目前，我國(guó)奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅猛，千頭奶牛場(chǎng)、萬(wàn)頭奶牛場(chǎng)的建設(shè)在奶牛管理方面有較大的需求，繁殖工作往往是奶牛場(chǎng)工作的核心，B超可以提高奶牛早期妊娠的準(zhǔn)確率，對(duì)假妊娠和繁殖疾病等牛只及時(shí)干預(yù)或治療，從而降低經(jīng)濟(jì)損失[5，6]。

1 B超的技術(shù)原理

超聲診斷技術(shù)建立于20世紀(jì)50年代，70年代開始逐漸發(fā)展應(yīng)用，B超是利用A型超聲聲像和M型超聲聲像顯示技術(shù)發(fā)展起來(lái)的，將A型的幅度調(diào)制顯示改為輝度調(diào)制顯示，亮度隨著回聲信號(hào)大小而變化，反映動(dòng)物機(jī)體組織二維切面斷層圖像。B超顯示的實(shí)時(shí)切面圖像，真實(shí)性強(qiáng)，直觀性好，容易掌握。B超只有20多年歷史，但發(fā)展十分迅速，儀器不斷更新?lián)Q代，近年每年都有改進(jìn)的新型B超診斷儀出現(xiàn)，B超診斷儀已成為超聲診斷最基本、最重要的設(shè)備[7]。

B超診斷儀的基本原理是利用超聲波的物理特性和動(dòng)物機(jī)體組織的結(jié)構(gòu)特性，通過(guò)超聲探頭發(fā)射超聲，經(jīng)動(dòng)物機(jī)體反射后形成回升，再通過(guò)接收器收集后形成回聲圖像。動(dòng)物機(jī)體的不同部位對(duì)超聲的反射能力不同，因而回聲的強(qiáng)弱也不同，因此在圖像中會(huì)顯示強(qiáng)回聲區(qū)、等回聲區(qū)、低回聲區(qū)和無(wú)回聲區(qū)，從而顯示動(dòng)物機(jī)體的不同結(jié)構(gòu)或是同一部位的不同狀態(tài)，就可以對(duì)組織器官的結(jié)構(gòu)和形態(tài)等進(jìn)行相應(yīng)的判斷[8]。

2 B超診斷的檢查方法

目前，在奶牛場(chǎng)中主要使用兩種類型的B超儀器，分為手持式B超診斷儀和頭戴式B超診斷儀，兩種儀器的主要不同點(diǎn)在于顯示屏，使用方法是一致的。B超掃描法在奶牛上的應(yīng)用根據(jù)目的主要包括3種：體外掃描法、陰道掃描法和直腸掃描法。在奶牛場(chǎng)繁殖工作中主要應(yīng)用的方法是直腸掃描法。

直腸掃描法診斷時(shí)，首先將待檢奶牛保定在頸夾或臥床上，使用清潔劑清洗奶牛肛門四周，檢查手佩戴長(zhǎng)臂手套后，涂抹潤(rùn)滑劑，五指并攏旋轉(zhuǎn)穿過(guò)肛門，進(jìn)入直腸后，手心隆起，一點(diǎn)點(diǎn)向外掏出但手切勿伸出直腸避免直腸充氣，清除直腸糞便后，將涂抹耦合劑的超聲探頭放入檢查手中，超聲探頭朝向手外，小心操作避免損傷直腸黏膜，將探頭緊貼子宮頸、子宮體和兩側(cè)子宮角橫向縱向進(jìn)行掃描，通過(guò)顯示屏觀察結(jié)果。探查卵巢時(shí)，則需要緊貼直腸外壁繼續(xù)向深向下探入進(jìn)行掃描檢查，對(duì)卵巢檢查時(shí)更需要小心謹(jǐn)慎，避免損傷[9]。

3 B超的早期妊娠診斷

目前，在不返情的條件下，奶牛一般在配種后第30天開始進(jìn)行早期妊娠檢查，青年?？梢蕴崆爸?6～28 天。妊娠檢查主要分為兩種：手檢和B超檢查。直腸檢查法主要采用的方法為胎膜滑動(dòng)技術(shù)，使用大拇指和食指輕握子宮角，抬起后慢慢松手，子宮角內(nèi)部有墜落感則表明存在胎膜，奶牛是妊娠狀態(tài)，但手檢錯(cuò)誤率較高，并且對(duì)檢查人的經(jīng)驗(yàn)技術(shù)水平有較高的要求，所以目前大部分奶牛場(chǎng)采用的是B超檢查。B超檢查主要是檢查羊水和胎兒，在不清楚的情況下檢查卵泡和黃體。羊水是均勻液性無(wú)回聲區(qū)，在B超聲像上呈現(xiàn)均勻黑色圓形；卵泡為無(wú)回聲區(qū)，卵泡壁為強(qiáng)回聲區(qū)，在B超聲像上呈現(xiàn)邊緣清晰光滑的圓形或不規(guī)則圓形；黃體在不同時(shí)期有著不同的構(gòu)造，因此其B超聲像也根據(jù)其不同時(shí)期存在區(qū)別，發(fā)育期黃體內(nèi)為血管破裂后形成的血凝塊，因此在B超聲像上呈現(xiàn)不規(guī)則的灰黑色，中期黃體的主體部分為顆粒細(xì)胞吸收脂質(zhì)后增生肥大形成的黃體細(xì)胞，在B超上呈現(xiàn)顆粒的黑色狀結(jié)構(gòu)，外緣有明顯的分界線，當(dāng)黃體退化后邊緣線則不再明顯[10]。

3.1 未妊娠奶牛

未妊娠奶牛正常子宮B超聲像見圖1（橫切）和圖2（縱切），如圖所示，正常未妊娠奶牛子宮為閉合狀態(tài)，其B超聲像橫切面類似于胡蘿卜橫切，縱切面與胡蘿卜縱切類似，在B超聲像上可見緊密的低回聲區(qū)，外層為回聲較強(qiáng)的子宮肌肉層，內(nèi)層為回聲稍強(qiáng)的子宮腔。未妊娠時(shí)，奶牛子宮肌肉層較薄，回聲較為均勻，而當(dāng)奶牛妊娠后，子宮壁則會(huì)變粗變厚，回聲變得不再均勻。

圖1 未妊娠奶牛正常子宮B 超聲像圖（橫切面）

圖2 未妊娠奶牛正常子宮B 超聲像圖（縱切面）

正常奶牛卵巢B超聲像見圖2左，如圖所示，正常奶牛卵巢呈扁圓形，邊緣致密，回聲強(qiáng)且邊緣明顯，B超聲像顯示為實(shí)質(zhì)性回聲，在卵巢上可見大小不等的不同發(fā)育階段的卵泡，B超聲像顯示為低回聲的液性暗區(qū)，液性暗區(qū)的大小取決于卵泡發(fā)育階段。如圖3所示為多卵泡發(fā)育的卵巢B超聲像圖。

圖3 多卵泡發(fā)育卵巢B 超聲像

圖4 奶牛正常卵巢B 超聲像圖

3.2 妊娠奶牛

早期妊娠診斷可以對(duì)奶牛進(jìn)行分群飼養(yǎng)管理，從而降低飼養(yǎng)成本，減少奶牛應(yīng)激，有效預(yù)防奶牛的早期胚胎死亡、流產(chǎn)以及難產(chǎn)等，從而提高胎牛的成活率，減少經(jīng)濟(jì)損失。

奶牛進(jìn)行B超的早期妊娠檢查一般是在配種后30天左右，育成牛的早期妊娠檢查可提前至26～28 天，通過(guò)B超進(jìn)行早期妊娠診斷不僅可以判斷奶牛與否妊娠，還可以通過(guò)聲像去判定母牛懷胎數(shù)、胎兒日齡以及胎兒性別。正常情況下，在B超聲像上可以觀察到胎兒的心跳位點(diǎn)和胎體個(gè)數(shù)，通過(guò)對(duì)心跳位點(diǎn)或是胎體個(gè)數(shù)的檢查可以推斷出母牛的懷胎數(shù)。當(dāng)對(duì)母牛懷胎數(shù)有診斷后，可以在分娩時(shí)提前做好準(zhǔn)備，減少難產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。

B超妊娠診斷還可以對(duì)胎兒的日齡進(jìn)行判斷，胎兒在生長(zhǎng)發(fā)育的第2周左右，胚胎內(nèi)細(xì)胞群增殖分化，逐漸在外圍形成內(nèi)胚層和外胚層，外胚層的近滋養(yǎng)層會(huì)與內(nèi)胚層共同形成一個(gè)腔，為羊膜腔，腔壁為羊膜，羊膜會(huì)將胚胎完全包裹，羊膜腔內(nèi)充滿羊水，而胚胎腹側(cè)繼續(xù)向外膨出，包裹羊膜囊，形成尿囊，尿囊與胚胎的消化管相連，起到排泄器官的作用。

如圖5所示，為妊娠30 天左右奶牛子宮B超聲像圖，此時(shí)在B超聲像上外圍高回聲區(qū)為擴(kuò)張的子宮角壁，而子宮內(nèi)致密的高回聲亮點(diǎn)則為正在發(fā)育的胚胎，胚胎外圍和子宮角內(nèi)的低回聲區(qū)則為胚液，這個(gè)階段，胚胎的子葉胎盤發(fā)育不完全，在B超聲像上較難顯示。

圖5 妊娠30 天奶牛子宮B 超聲像圖

如圖6所示為妊娠50 天左右的奶牛子宮B超聲像圖，子宮中心致密高回聲區(qū)為胚胎，此時(shí)已經(jīng)能清晰地看到初具成形的胚胎輪廓，在胚胎外圍有一圈高亮的回聲輪廓為羊膜囊，羊膜囊外圍的低回聲區(qū)為尿囊腔，胚胎左上低回聲區(qū)為另一側(cè)未孕的子宮角。如圖7所示為妊娠50 天左右的小牛胚胎，此時(shí)胚胎被完全包裹在羊膜囊和尿囊中，羊膜囊中充滿羊水，此時(shí)胎盤子葉仍未發(fā)育完全。

圖6 妊娠50 天奶牛子宮B 超聲像圖

圖7 妊娠50 天左右胚胎

如圖8所示為妊娠60 天左右的奶牛子宮B超聲像圖，子宮中心致密高回聲區(qū)為胚胎，此時(shí)胚胎的頭部、軀干以及肢蹄部分均十分清晰，在胚胎最右側(cè)高亮強(qiáng)回聲區(qū)分別為羊膜囊和尿囊部分，聲像中黑色低回聲區(qū)分別為羊膜囊包裹的羊水和尿囊包裹的尿囊液，胚胎上方除肢蹄部分外也可看到臍帶部分，此時(shí)，胎盤子葉已經(jīng)開始逐漸發(fā)育，在尿囊外圍看到微微隆起的部分即為子葉。如圖9所示為妊娠60 天左右小牛胚胎，此時(shí)可以看出胚胎的頭部、眼部、軀干以及四肢均已初步成形，胚胎腹部有臍帶與胎盤連接，胎衣上的點(diǎn)狀的粉白色部分即為胎盤子葉[11]。

圖8 妊娠60 天奶牛子宮B 超聲像圖

圖9 妊娠60 天左右胚胎

在如今的獸用B超中，顯示屏上一般都有網(wǎng)格標(biāo)記，每1 格均為1 cm×1 cm的方格，在網(wǎng)格線中胚胎的大小可以很明顯地看出，通過(guò)觀察胚胎的大小，就可以大致推斷胚胎的日齡。如表1與表2所示即為B超診斷時(shí)胚胎頂臀長(zhǎng)和胚胎腦直徑與胚胎日齡的關(guān)系[12]。

表1 胚胎頂臀長(zhǎng)與胚胎日齡的關(guān)系

表2 胚胎腦直徑與胚胎日齡的關(guān)系

4 B超在奶牛繁殖障礙疾病上的應(yīng)用

B超在奶牛場(chǎng)的作用不僅僅在于對(duì)奶牛早期妊娠的診斷，對(duì)于奶牛繁殖障礙疾病上同樣有著提高診斷率的作用，當(dāng)奶牛生殖系統(tǒng)存在疾病時(shí)，子宮或是卵巢的形態(tài)結(jié)構(gòu)就會(huì)產(chǎn)生不同程度的變化，在B超的聲像圖上也會(huì)與正常生殖器官存在較大的差異，結(jié)合臨床診斷便可以提高疾病診斷的準(zhǔn)確率。

4.1 卵巢靜止

卵巢靜止是由于卵巢機(jī)能暫時(shí)受到擾亂，長(zhǎng)期處于靜止?fàn)顟B(tài)，母牛持久性不發(fā)情，卵巢的形狀、大小、質(zhì)地正常，但觸摸卵巢無(wú)卵泡和黃體，不出現(xiàn)周期性活動(dòng)。因此，有人將卵巢靜止定義為沒(méi)有卵泡的卵巢，其實(shí)這種說(shuō)法是不準(zhǔn)確的，卵巢靜止?fàn)顟B(tài)下的卵巢卵泡較小無(wú)法通過(guò)直腸檢查觸摸到，并不是沒(méi)有卵泡發(fā)育。B超聲像下的卵巢靜止卵巢較為致密，看不到明顯的成熟卵泡或是黃體，在相隔5～7 天后再次進(jìn)行B超重復(fù)檢查，超聲像圖未見明顯變化，即可確診為卵巢靜止[13]。

4.2 卵巢囊腫

卵巢囊腫是指在奶牛的卵巢上形成囊性腫物，主要分為卵泡囊腫和黃體囊腫兩種。

卵泡囊腫一般認(rèn)為是由奶牛機(jī)體的促卵泡素分泌過(guò)多或是黃體激素分泌不足引起的，還有一些影響卵巢排卵的因素，如日糧中缺乏維生素A，同期發(fā)情期間激素制劑使用不當(dāng)，生殖系統(tǒng)疾病如子宮炎、子宮內(nèi)膜炎、胎衣不下以及其他卵巢疾病繼發(fā)引起的。囊腫狀態(tài)下卵泡比一般的卵泡要大，囊腫數(shù)量表現(xiàn)為單個(gè)或是多個(gè)，一側(cè)卵巢或兩側(cè)同時(shí)發(fā)生，大小不等，與核桃或是拳頭相當(dāng)，囊腫壁薄而致密，其內(nèi)充滿囊腫液，如圖10為卵泡囊腫的B超聲像圖，具體表現(xiàn)為一個(gè)或多個(gè)較大面積的液性低回聲暗區(qū)，卵泡壁邊緣光滑，厚度小于或等于0.3 cm，無(wú)小梁結(jié)構(gòu)[14]。

圖10 卵泡囊腫的B 超聲像圖

正常黃體本身就為囊性結(jié)構(gòu)，當(dāng)囊性黃體持續(xù)存在增長(zhǎng)或是黃體內(nèi)血腫含血量較多，血液被吸收后，均會(huì)導(dǎo)致黃體囊腫，黃體囊腫一種是由于促性腺激素分泌紊亂，黃體過(guò)量發(fā)育，尤其是妊娠黃體，腔較大，含有較多的液體，即被認(rèn)為是黃體囊腫，另一種是在黃體退化為白體的過(guò)程中，由于某種原因?qū)е履夷[。如圖11為黃體囊腫的B超聲像圖，具體表現(xiàn)為有大面積的無(wú)回聲液性暗區(qū)，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)一些薄而亮的白線，黃體壁邊緣光滑，輪廓清晰，厚度多大于0.3 cm，會(huì)出現(xiàn)小梁結(jié)構(gòu)[10]。

圖11 黃體囊腫的B 超聲像圖

4.3 持久黃體

正常奶牛卵巢的活動(dòng)是周期性的，卵泡生長(zhǎng)發(fā)育排出后，卵泡壁塌陷逐漸黃體化發(fā)育為黃體，當(dāng)黃體存在時(shí)，黃體會(huì)分泌黃體酮，抑制卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育，而當(dāng)卵子未受精時(shí)，黃體則會(huì)逐漸退化，從而開始新的卵泡生長(zhǎng)發(fā)育階段，若卵子成功受精，則黃體會(huì)發(fā)育未妊娠黃體，一方面抑制卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育，一方面起到維持妊娠的作用。而當(dāng)排卵后周期性黃體或是當(dāng)奶牛分娩后的妊娠黃體持續(xù)存在于卵巢中，抑制卵泡正常的生長(zhǎng)發(fā)育和抑制奶牛發(fā)情的現(xiàn)象，就被稱為持久黃體，持久黃體會(huì)引起奶牛的卵巢性不孕癥。在B超檢查時(shí)，在卵巢上會(huì)發(fā)現(xiàn)邊緣清晰的較低回聲包裹著一圈無(wú)回聲的區(qū)域或是中等強(qiáng)度回聲的圓形或橢圓形區(qū)域，此為有腔黃體的B超聲像圖（圖12）。而有時(shí)表現(xiàn)為邊緣輪廓清晰，內(nèi)部為帶狀或絲狀的不均勻的低強(qiáng)度回聲，則為實(shí)性黃體的聲像圖。當(dāng)相隔5～7 天進(jìn)行連續(xù)2～3 次B超檢查時(shí)，奶牛卵巢上在同一部位觀察到同樣大小、同樣形態(tài)的黃體，則可以診斷為持久黃體[15]。

圖12 有腔黃體的B 超聲像圖

4.4 子宮炎

子宮炎是奶牛在分娩后最為常見的生殖系統(tǒng)疾病，奶牛在產(chǎn)后，通常需要2～3 個(gè)情期去進(jìn)行生殖系統(tǒng)的恢復(fù)，但當(dāng)其出現(xiàn)子宮炎癥時(shí)，往往會(huì)造成奶牛發(fā)情延遲，從而延后首配天數(shù)，且配種后不孕率高，造成奶牛泌乳期延長(zhǎng)，淘汰率增加。如圖13所示為奶牛子宮炎的B超聲像圖，奶?；甲訉m炎后，子宮內(nèi)膜分泌炎性滲出物，因此在子宮的B超聲像圖上可見子宮角內(nèi)的帶狀、點(diǎn)狀或是雪花狀的無(wú)回聲暗區(qū)，子宮壁有所增厚，直腸檢查可見陰門流出粉紅色或是灰白的炎性分泌物和分泌液[16]。

圖13 子宮炎的B 超聲像圖

5 小結(jié)

本文闡述了B超在奶牛場(chǎng)繁殖工作中的應(yīng)用。相比于傳統(tǒng)的直腸檢查法，B超在奶牛中的推廣與應(yīng)用，較大地提前了奶牛早期妊娠診斷的時(shí)間，提高了奶牛早期妊娠診斷的準(zhǔn)確率，其快速、安全、準(zhǔn)確和有效的特點(diǎn)已經(jīng)成為奶牛場(chǎng)不可或缺的一部分。本文介紹了奶牛場(chǎng)兩種早期妊娠的檢查方法：直腸檢查法和B超診斷法，并對(duì)B超技術(shù)的原理進(jìn)行了簡(jiǎn)單介紹，接著對(duì)B超技術(shù)在奶牛早期妊娠診斷上的應(yīng)用進(jìn)行了詳細(xì)介紹，隨后以奶牛生殖系統(tǒng)中卵巢和子宮作為重點(diǎn)，介紹了奶牛生殖系統(tǒng)疾病的B超聲像圖的基本特征。B超在奶牛場(chǎng)的應(yīng)用不僅在早期妊娠的診斷，還可以應(yīng)用在奶牛生殖系統(tǒng)疾病的檢查上，而這些都需要建立在對(duì)奶牛未妊娠和妊娠狀態(tài)下的子宮和卵巢聲像圖特點(diǎn)進(jìn)行了解，這樣才可以有效提高早期妊娠診斷和生殖系統(tǒng)疾病檢查的診斷率。