師文竹,舒敏,余澤文,張運(yùn)海
(四川律貝生物科技有限公司,四川 成都 610000)
2021 年4 月13、22 日。試驗(yàn)地位于觀音巖增殖放流站。
催產(chǎn)藥物選擇寧波第二激素廠生產(chǎn)的鯉魚(yú)腦垂體(PG)、絨毛膜促性腺激素(HCG)、促黃體素釋放激素類似物(LHRH-A3)進(jìn)行搭配。精子保存液為0.9%的生理鹽水。
親魚(yú)進(jìn)入室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)后,按照四川律貝生物科技有限公司《室內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)的操作規(guī)程》,早、中、晚測(cè)量水溫、水質(zhì)參數(shù)??刂扑疁刈兎? ℃,ρ(溶解氧)≥5 mg/L,pH 值為7.5~8.5,ρ(氨氮)<0.1 mg/L,ρ(亞硝酸鹽氮)<0.04 mg/L,及時(shí)清污。
1.4.1 親本選擇
1.4.2 人工催產(chǎn)
1.4.3 人工授精
雄魚(yú)腹部,使精液流出,用干燥的吸管吸取精液于精子保存液中。
固定雌魚(yú),擦干生殖孔周圍的水分,并將尾部略朝魚(yú)體的一側(cè)彎曲,避免魚(yú)卵擠出后沿尾部方向流失。沿著胸部向生殖孔方向推壓雌魚(yú)的腹部,同時(shí)取吸管放置于雌魚(yú)肛門(mén)處,使魚(yú)卵順吸管而下,擠入干燥的白瓷盆中,避免魚(yú)卵黏在其體表。通過(guò)對(duì)親魚(yú)腹部連續(xù)推壓,直至魚(yú)卵不再排出為止。推壓時(shí)應(yīng)注意力度,避免對(duì)親魚(yú)造成損傷。
將保存液中的精子放入采集的魚(yú)卵中,并加入魚(yú)卵量2 倍左右的清水,用羽毛或手輕輕攪拌1~2 min,使精液充分均勻分散于水中,便于魚(yú)卵充分受精,再使用清水漂洗魚(yú)卵,直至水體干凈為止。
1.4.4 人工孵化及胚胎發(fā)育
圖1 孵化桶孵化
表1 長(zhǎng)鰭吻繁殖結(jié)果
批次 催產(chǎn)日期 針次 催產(chǎn)時(shí)間 水溫/℃ 效應(yīng)時(shí)間/h孵化率/%104-13119:0019.6151.501.2885.331.2093.75 04-14207:00 204-22119:0021.311.50.900.8493.330.8095.23 04-23207:00獲得卵數(shù)/萬(wàn)粒受精卵數(shù)/萬(wàn)粒受精率/%出苗數(shù)/萬(wàn)尾
圖2 長(zhǎng)鰭吻胚胎發(fā)育過(guò)程
魚(yú)類性腺發(fā)育通常由內(nèi)源性因素(性激素水平)和外源性因素(營(yíng)養(yǎng)、光照水溫、水流等)共同決定[7]。鯉科魚(yú)類人工繁殖過(guò)程中,一般采用2 次注射法進(jìn)行催產(chǎn),且效果較好[8-9]。管敏等[6]研究認(rèn)為,長(zhǎng)鰭吻對(duì)催產(chǎn)劑的敏感性較差,需要采用較高劑量3 針注射的催產(chǎn)方式,但是催產(chǎn)率較低,僅有8.1%。采用1 次注射人工催產(chǎn)藥物PG(mg)+LHRH-A(2μg),對(duì)細(xì)鱗裂腹魚(yú)的人工催產(chǎn)效果較好[10]。本試驗(yàn)選擇人工催產(chǎn)藥物PG+HCG+LHRH-A3搭配,采用2 針注射,催產(chǎn)率、受精率和孵化率均達(dá)到較高水平,說(shuō)明了2 針注射催產(chǎn)方式,可成功對(duì)長(zhǎng)鰭吻進(jìn)行人工繁殖,同時(shí)還減小了親魚(yú)的機(jī)械損傷,提升了產(chǎn)后親魚(yú)的成活率。
魚(yú)類受精卵在孵化過(guò)程中,會(huì)受到諸多外部環(huán)境因素的影響,主要有溫度、pH 值、氨氮、水溫等,水溫對(duì)魚(yú)類胚胎發(fā)育影響較大。尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)胚胎發(fā)育的最佳溫度為28~30 ℃[11];倒刺鲃(Spinibarbus denticulatus)胚胎發(fā)育的最佳溫度為24~29 ℃,在最佳孵化溫度范圍內(nèi),孵化率也會(huì)隨溫度升高而升高[12]。點(diǎn)帶石斑魚(yú)(Epinephelus malabaricus)的孵化水溫,對(duì)胚胎發(fā)育有顯著的影響[13]。黃姑魚(yú)(Nibea albiflora)在32 ℃<水溫<17 ℃時(shí),不能孵化;在海水鹽度2.5%時(shí),孵化適宜水溫為20~29 ℃,最佳水溫為20~23 ℃[14]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),長(zhǎng)鰭吻受精卵在19~22.5 ℃時(shí),均可以成功孵化,且保持較高的孵化水平,隨著水溫升高,孵化時(shí)間會(huì)相應(yīng)縮短,但對(duì)孵化率的影響不大。