陳榮杰,姜芳超,劉 琳,劉圣龍,孫萬(wàn)輝

(萊州市海洋發(fā)展和漁業(yè)服務(wù)中心,山東萊州 261400)

養(yǎng)殖密度決定著魚類的生長(zhǎng)速度、產(chǎn)量及經(jīng)濟(jì)效益,對(duì)于目前集約化的養(yǎng)殖系統(tǒng),養(yǎng)殖者往往是盡可能的提高放養(yǎng)密度,以為這樣就可以獲得高產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)收益,但是卻忽略了過(guò)高的放養(yǎng)密度造成的空間、餌料競(jìng)爭(zhēng)等方面帶來(lái)的應(yīng)激造成的魚類生長(zhǎng)緩慢及死亡的危害[1-2];目前已經(jīng)有相關(guān)研究表明不同的養(yǎng)殖條件和不同的魚類品種對(duì)魚所造成的負(fù)面影響也不同[3];因此對(duì)于養(yǎng)殖的不同魚類品種探討其適宜的養(yǎng)殖密度顯得十分有必要;血液是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的重要組成部分,起著重要的作用,如物質(zhì)運(yùn)輸、防御及生理調(diào)節(jié)等作用,血液指標(biāo)是研究動(dòng)物生理、病理的主要依據(jù)[4-5];草魚(Ctenopharyngodonidella)是目前中國(guó)淡水魚養(yǎng)殖的主要魚類品種之一,是典型的草食魚類,探討?zhàn)B殖密度對(duì)其血清生化指標(biāo)的影響,旨在為漁業(yè)的集約化養(yǎng)殖提供合理的養(yǎng)殖密度作理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)草魚購(gòu)自某草魚養(yǎng)殖基地,共購(gòu)買了4860尾規(guī)格統(tǒng)一為(5.50±0.50)g且體表健康的草魚;試驗(yàn)草魚運(yùn)回后先放入池塘網(wǎng)箱中暫養(yǎng)25d。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)草魚分為4個(gè)養(yǎng)殖密度組,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組,每個(gè)組的養(yǎng)殖密度分別為10.0kg/m3、18.0kg/m3、26.0kg/m3、34.0kg/m3,每個(gè)養(yǎng)殖密度組分別飼養(yǎng)草魚180尾/箱、330尾/箱、480尾/箱和630尾/箱,網(wǎng)箱規(guī)格為1.0m×1.5m×1.0m,每個(gè)密度組各有3個(gè)重復(fù)小組;試驗(yàn)草魚均飼喂配方飼料,配方飼料組分及營(yíng)養(yǎng)成分參見表1。整個(gè)試驗(yàn)為期8周。

表1 基礎(chǔ)飼糧組分及營(yíng)養(yǎng)成分

表2 養(yǎng)殖密度對(duì)草魚血清生化指標(biāo)的影響

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)過(guò)程對(duì)每個(gè)網(wǎng)箱進(jìn)行連續(xù)曝氣;對(duì)水下25cm處的水溫、pH值及溶解氧進(jìn)行監(jiān)測(cè),保持水溫在26℃～28℃,pH值在6.6～7.0之間,溶解氧≥3mg/L,同時(shí)保證水質(zhì)中的氨氮濃度≤0.05mg/L;每個(gè)網(wǎng)箱中設(shè)置一個(gè)圓形懸浮框掛有圓形網(wǎng)盤,用于飼料投喂,試驗(yàn)草魚每天上午8:00和下午17:00進(jìn)行投喂,投喂量為草魚總體質(zhì)量的3%,以每20d進(jìn)行一次體質(zhì)量的稱量,根據(jù)體質(zhì)量對(duì)投喂量進(jìn)行調(diào)整。

1.4 試驗(yàn)樣品的采集及指標(biāo)的測(cè)定

試驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)飼養(yǎng)的草魚進(jìn)行24hrs饑餓處理,然后在每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)挑選5尾草魚,利用75mg/L的MS222麻醉處理,然后尾靜脈采集5mL血液,采集的血液于常溫下靜置2hrs,然后3000rmp/min進(jìn)行離心10mins,分離血清置于4℃冷藏待用。

分離的血清利用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定:谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、人血白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)和總膽固醇(T-CHO)。

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

檢測(cè)的血清生化指標(biāo)數(shù)據(jù)利用Excel表格初步整理后,采用SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)以3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示;最后采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,P<0.05表示組間差異顯著,P<0.01表示組間差異極顯著。

2 結(jié)果

由2數(shù)據(jù)可以看出,4個(gè)試驗(yàn)組的堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、甘油三酯、總膽固醇指標(biāo)沒(méi)有顯著性差異(P>0.05);I組、Ⅱ組、Ⅲ組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、膽固醇、葡萄糖呈上升趨勢(shì);I組、Ⅱ組、Ⅲ組的谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶組間升高對(duì)比達(dá)到顯著性水平(P<0.05);Ⅳ組谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶極顯著地高于I組、Ⅱ組、Ⅲ組(P<0.01);Ⅳ組的甘油三酯、總膽固醇極顯著的高于I組(P<0.01),顯著的高于Ⅱ組和Ⅲ組(P<0.05);Ⅳ組葡萄糖極顯著高于I組、Ⅱ組(P<0.01),顯著地高于Ⅲ組(P<0.05)。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,養(yǎng)殖密度對(duì)草魚血清生化指標(biāo)的影響主要集中于谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、甘油三酯、總膽固醇和葡萄糖。

3 討論

已有相關(guān)研究表明高密度的養(yǎng)殖環(huán)境會(huì)造成擁擠,引起魚體應(yīng)激反應(yīng),從而引起血清生化指標(biāo)的變化[7];ALT和AST是兩種反應(yīng)動(dòng)物機(jī)體肝臟功能的代謝酶,是干細(xì)胞正常的重要指標(biāo),當(dāng)肝臟受損時(shí),這兩種轉(zhuǎn)氨酶釋放到血液中,造成血清中ALT和AST濃度升高;林琳等[8]人研究發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高豹紋鰓棘鱸血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高;董立學(xué)等[9]人在研究不同飼料蛋白源和養(yǎng)殖密度對(duì)草魚血清生化指標(biāo)的影響中也證明了隨著養(yǎng)殖密度的升高草魚血清中的ALT、AST活性顯著升高。該研究利用10.0kg/m3、18.0kg/m3、26.0kg/m3、34.0kg/m3,的養(yǎng)殖密度養(yǎng)殖草魚,發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高,高密度養(yǎng)殖草魚血清中的ALT、AST活性顯著升高,說(shuō)明了高密度應(yīng)激導(dǎo)致肝細(xì)胞受損,從而導(dǎo)致了血清中ALT和AST活性升高。血清中的GLU水平可以作為魚類處于應(yīng)激狀態(tài)的一個(gè)重要指標(biāo)。GLU水平越高,說(shuō)明魚所處的環(huán)境應(yīng)激越大。該研究結(jié)果表明,隨著養(yǎng)殖密度的升高,GLU水平也隨之升高,說(shuō)明密度越高對(duì)魚的應(yīng)激也隨著升高。該研究還發(fā)現(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的升高,TG和T-CHO也隨著升高,這可能和應(yīng)激條件下GLU水平升高增加了糖原分解途徑的糖異生和能量代謝有關(guān)[10]。

綜上所述,隨著養(yǎng)殖密度的升高,對(duì)草魚的應(yīng)激反應(yīng)隨著升高,進(jìn)而導(dǎo)致血清生化指標(biāo)中的ALT、AST、GLU、TG和T-CHO的升高。