朱麗麗,洪楚亮,刁秀萍

心肌缺血再灌注損傷是臨床心肺復(fù)蘇術(shù)以及體外循環(huán)術(shù)中較常見的病理過程,可導(dǎo)致炎性因子釋放及大量代謝產(chǎn)物產(chǎn)生,嚴(yán)重者會出現(xiàn)全身炎性反應(yīng),如何防治其發(fā)生一直是臨床研究的重點[1-3]。噴他佐辛是一種人工合成的嗎啡類衍生物,能夠拮抗μ受體并激動σ受體,常用于麻醉后鎮(zhèn)痛治療[4-6]。有研究表明,噴他佐辛用于心肌缺血再灌注患者具有較好的抗炎作用[7-8],但關(guān)于噴他佐辛對心肌缺血再灌注的具體作用機制尚未有明確定論。基于此,本研究旨在探討噴他佐辛對心肌缺血再灌注損傷大鼠的心肌保護作用及機制,以期為臨床提供參考,報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 于2021年5月—2022年5月選取健康成年SD大鼠(廣東醫(yī)科大學(xué)實驗室提供)51只,體質(zhì)量210～250 g,周齡為8～13周,采用隨機數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組及噴他佐辛組,每組17只。大鼠均在相同環(huán)境下飼養(yǎng),包括溫度、進食以及飲水等。

1.2 建模與治療方法

1.2.1 心肌缺血再灌注模型制備:大鼠均予以戊巴比妥鈉溶液50 mg/kg腹腔注射,進行麻醉,之后將其固定于手術(shù)臺,連接心電圖后進行動靜脈穿刺,同時監(jiān)測血壓、心率(HR);切開大鼠氣管行氣管插管后連接呼吸機,進行開胸,對其冠狀動脈左前降支用無損傷線穿線,平穩(wěn)15 min后,在血管以及縫合線之間墊硅膠管,結(jié)扎30 min,大鼠心肌顏色發(fā)紺,心電圖顯示為R波高聳或ST段抬高,表明心肌缺血損傷建模成功,而后予以血流灌注120 min,大鼠缺血組織的顏色恢復(fù)正常,且ST段下降,則表明大鼠心肌缺血再灌注成功。

1.2.2 干預(yù)措施:假手術(shù)組大鼠僅進行開胸穿線但并不結(jié)扎,即并不建立心肌缺血再灌注損傷模型;模型組大鼠進行冠狀動脈左前降支結(jié)扎30 min,之后對其進行血流灌注120 min,期間僅予以0.9%氯化鈉溶液;噴他佐辛組大鼠在進行冠狀動脈左前降支結(jié)扎30 min,之后對其進行血流灌注120 min,在進行血流灌注前15 min注射噴他佐辛注射液(華仁藥業(yè)子公司安徽恒星制藥有限公司生產(chǎn))。

1.3 觀察指標(biāo)與方法

1.3.1 血流動力學(xué)指標(biāo):比較各組大鼠缺血前(T0)、缺血30 min時(T1)、血流再灌注60 min時(T2)及血流再灌注120 min時(T3)的平均動脈壓(MAP)、心率收縮壓乘積(RPP)及HR。

1.3.2 心肌缺血、梗死體積比例:隨機選取每組大鼠6只,對模型組、噴他佐辛組大鼠進行120 min血流再灌注后再次阻斷冠狀動脈,假手術(shù)組不作處理;之后,注射伊文氏藍(lán)溶液使大鼠未缺血組織染至藍(lán)色,剪斷大血管取出心臟,對其左心臟進行分離,制作成組織塊。使用TTC染色法將組織染色后使用甲醛進行固定,在顯微鏡下觀察藍(lán)色(正常區(qū)域)、紅色(缺血未梗死區(qū)域)及灰白色(缺血梗死區(qū)域),對其進行稱重,計算心肌缺血、梗死體積比例。

1.3.3 心肌肌鈣蛋白I(cTnI)及降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)水平:比較各組大鼠各時間點cTnI及CGRP水平。使用酶聯(lián)免疫分析試劑盒進行檢測,所有操作均按試劑盒說明書進行。

2 結(jié) 果

2.1 血流動力學(xué)指標(biāo)比較 T0,3組MAP、RPP、HR比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。T1、T2、T3,模型組、噴他佐辛組MAP、RPP、HR低于T0(P<0.05);T1、T2、T3,模型組、噴他佐辛組MAP、RPP、HR低于假手術(shù)組,但噴他佐辛組T1、T2MAP、RPP、HR低于模型組,T3各指標(biāo)高于模型組(P<0.05),見表1。

表1 3組大鼠不同時間點血流動力學(xué)指標(biāo)比較

2.2 心肌缺血、梗死體積比例比較 3組心肌缺血體積比例比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);模型組及噴他佐辛組心肌梗死體積比例高于假手術(shù)組,但噴他佐辛組低于模型組(P<0.05),見表2。

表2 3組大鼠心肌缺血、梗死體積比例比較

2.3 cTnI及CGRP水平比較 T0、T1、T2,3組cTnI及CGRP水平比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);T3,手術(shù)組cTnI水平及噴他佐辛組CGRP水平高于T0(P<0.05);T3,噴他佐辛組cTnI水平低于假手術(shù)組、模型組,CGRP水平高于假手術(shù)組、模型組(P<0.05),見表3。

表3 3組大鼠不同時間點cTnI及CGRP水平比較

3 討 論

心肌缺血再灌注損傷是臨床心臟手術(shù)后常見的并發(fā)癥,如不能及時處理,易導(dǎo)致炎癥發(fā)生,甚至引發(fā)全身炎性反應(yīng),導(dǎo)致死亡等不良事件,故如何保護心功能是臨床研究的重點。對于心肌缺血再灌注患者的治療方法較多,但關(guān)于其具體作用機制尚未有明確結(jié)論。本研究成功制備了心肌缺血再灌注大鼠模型,經(jīng)過不同干預(yù)后,結(jié)果顯示,T1、T2、T3,模型組、噴他佐辛組MAP、RPP、HR低于假手術(shù)組,表明心肌缺血灌注大鼠模型制備成功,大鼠心臟舒張及收縮功能受損,可能會導(dǎo)致心肌損傷。

噴他佐辛是一種阿片受體激動/拮抗劑,鎮(zhèn)痛效果顯著[9-10]。有研究表明,噴他佐辛可激動患者部分阿片受體[11],藥物進入人體后前期主要通過拮抗μ受體、后期主要通過激動σ受體產(chǎn)生鎮(zhèn)痛效果,而在

機體產(chǎn)生炎癥時,其主要通過激動κ受體發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。本研究結(jié)果顯示,噴他佐辛組T1、T2MAP、RPP、HR低于模型組,T3各指標(biāo)高于模型組,表明在心肌缺血再灌注中應(yīng)用噴他佐辛可減小對大鼠血流動力學(xué)的影響。cTnI僅在心肌細(xì)胞中表達[12],對診斷心肌損傷具有較高的特異度及靈敏度。有研究表明,心肌細(xì)胞可分泌CGRP,且心肌組織中還存在CGRP表達及腎上腺素的細(xì)胞,可同時表達δ阿片受體,刺激CGRP的合成及分泌[13],因此CGRP可作為噴他佐辛保護心肌的途徑。CGRP不僅可擴張血管,還可介導(dǎo)CGRP受體加強心肌收縮[14]。本研究結(jié)果顯示,T3,噴他佐辛組cTnI水平低于假手術(shù)組、模型組,CGRP水平高于假手術(shù)組、模型組,表明在心肌缺血再灌注中應(yīng)用噴他佐辛可通過調(diào)節(jié)CGRP表達明顯減輕模型大鼠心肌損傷。此外,模型組及噴他佐辛組心肌梗死體積比例高于假手術(shù)組,但噴他佐辛組低于模型組,表明心肌缺血再灌注中應(yīng)用噴他佐辛可起到心肌保護作用,減輕心肌梗死。

綜上所述,在心肌缺血再灌注中應(yīng)用噴他佐辛可明顯減輕心肌缺血再灌注損傷,減小對機體血流動力學(xué)的影響,CGRP可能參與其作用機制。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突。