■ 朱學(xué)芝 姚春鳳 王 昊 胡 蝶 劉麗燕 鄭石軒

（廣東粵海飼料集團(tuán)股份有限公司，廣東湛江，524017）

凡納濱對(duì)蝦是世界上產(chǎn)量最大的對(duì)蝦品種，也是我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一，在對(duì)蝦配合飼料中碳水化合物相較于蛋白、脂肪是廉價(jià)能量來源，是對(duì)蝦配合飼料原料的首要選擇[1]。面粉和玉米淀粉是對(duì)蝦飼料中常用的碳水化合物，且玉米淀粉由支鏈淀粉和直鏈淀粉兩種高分子組成，在對(duì)蝦飼料中玉米淀粉較其他糖源在飼料加工過程中有明顯的優(yōu)勢[2]。對(duì)蝦飼料中主要能源是脂肪，Akiyama 等[3]研究發(fā)現(xiàn)，凡納濱對(duì)蝦商業(yè)飼料中脂肪的推薦量為6.0%～7.5%，最高水平為10%，飼料中過多的脂肪會(huì)影響對(duì)蝦的正常生長。

飼料中非蛋白能量不充足時(shí)，蛋白質(zhì)為能量代謝滿足機(jī)體的需求[4-5]。高效能量飼料包括充足的非蛋白能量（脂肪和碳水化合物），能夠使蛋白質(zhì)更多地用于機(jī)體的生長，而非蛋白能量用于機(jī)體的能量消耗[6-7]。大多數(shù)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)蝦飼料中的脂肪對(duì)蛋白質(zhì)的沉積率沒有太大影響[8-9]，而碳水化合物（如淀粉），作為非蛋白能源對(duì)蛋白卻有一定的節(jié)約作用[10-11]。僅有少量文獻(xiàn)報(bào)道淡水的羅氏沼蝦的最適碳水化合物脂肪比為4∶1[12]，而馬氏沼蝦最適碳水化合物脂肪比為3∶1[13]。

本試驗(yàn)探究鹽度30 mg/kg 時(shí)，飼料中糖和脂肪的比例對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長、生理生化指標(biāo)、體成分的影響，全面分析糖脂的比例對(duì)凡納濱對(duì)蝦的生長作用，以期豐富凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖的實(shí)用資料，并為凡納濱對(duì)蝦飼料研制和飼料配方優(yōu)化提供科學(xué)的參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉、豆粕為主要蛋白源，魚油、磷脂為脂肪源，面粉、玉米淀粉為碳水化合物源配制6 個(gè)等氮等能飼料，蛋白質(zhì)水平為41%，糖脂比分別為4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1、2.21∶1、1.75∶1、1.42∶1，飼料配方見表1。用雙螺桿壓條機(jī)擠壓出直徑分別為1.0 mm和1.5 mm 兩種粒徑的飼料。90 ℃熟化30 min，然后取出飼料，放置陰涼處晾干。晾干后的飼料粉碎成約3 mm 長的顆粒，用封口塑料袋封袋，貯存于-20 ℃的冰柜中待用。

1.2 對(duì)蝦養(yǎng)殖與環(huán)境管理

試驗(yàn)在廣東湛江粵海飼料實(shí)驗(yàn)基地進(jìn)行。試驗(yàn)蝦來自廣東粵海育苗場，平均初始體重為0.81 g，海水鹽度為30 mg/kg。試驗(yàn)共6 個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)3 個(gè)重復(fù)。每天4 次投喂，按體重6%～8%投餌。飼養(yǎng)期間，水溫（26.5±2.0） ℃，連續(xù)充氧，溶氧為6 mg/L 以上，pH為7.8～8.5，氨氮含量小于1 mg/L。

1.3 樣品采集與分析

試驗(yàn)結(jié)束前24 h停止投料，計(jì)數(shù)并稱重。試驗(yàn)結(jié)束后，從每桶中隨機(jī)取8 尾蝦用于體成分分析；隨機(jī)取10 尾蝦稱重后，分離肝胰腺，即刻凍存。飼料和對(duì)蝦常規(guī)分析全部采用AOAC 的方法[14]。將樣品于105 ℃烘至恒重測定水分含量；粗蛋白含量采用半微量凱氏定氮法（總氮×6.25）；粗脂肪含量采用索氏抽提法（以石油醚為提取液）；將樣品在馬福爐中灼燒（550 ℃）24 h 測定灰分含量；淀粉為國標(biāo)方法檢測（GB/T 20194—2018）。成活率（%）=100×試驗(yàn)?zāi)┪r尾數(shù)/試驗(yàn)初蝦尾數(shù)特定生長率（SGR，%/d）=100×ln 末均重-ln 初均重/試驗(yàn)天數(shù)

餌料系數(shù)（FCR）=投入飼料量（g）/[末均重(g)-初均重（g）]

蛋白效率（PER）=體重增加量（g）/蛋白質(zhì)攝入量（g）

1.3.1 肝胰腺消化酶及血淋巴生理生化指標(biāo)的測定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)蝦饑餓24 h，用1 mL 的無菌注射器自對(duì)蝦頭胸甲后插入心竇抽取血淋巴，4 ℃靜置過夜，然后4 ℃轉(zhuǎn)速為5 000 r/min冷凍離心10 min，分離的血漿貯存于-70 ℃。肝胰腺中的蛋白酶、己糖激酶、淀粉酶（碘-淀粉比色法）、肝糖原含量使用南京建成生物工程研究所有限公司試劑盒測定,上述各測定方法均有改進(jìn)。血氨（HAC）、血蛋白（HP）由中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)；血漿生化指標(biāo)使用血液自動(dòng)生化分析儀（Hitachi 7170； Hitachi， Tokyo， Japan）測定。

1.3.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 20進(jìn)行處理，經(jīng)單因子方差分析后，采用Duncan’s 進(jìn)行比較檢驗(yàn)均值的差異顯著性。P＜0.05 為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長的影響

由表2 可知，投喂糖脂比為3.29∶1 的飼料組凡納濱對(duì)蝦成活率最高，顯著高于糖脂比為2.21∶1、1.42∶1 的飼料組（P＜0.05）。投喂糖脂比為2.78∶1的飼料組對(duì)蝦有最高的特定生長率，顯著高于糖脂比為4.01∶1、3.29∶1的飼料組（P＜0.05）。

表2 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長的影響

2.2 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦淀粉酶、己糖激酶、肝糖原、血糖、血氨、血蛋白的影響

由表3可知，投喂糖脂比為4.01∶1的飼料組凡納濱對(duì)蝦淀粉酶活性最高，顯著高于糖脂比為1.75∶1、1.42∶1的飼料組（P＜0.05）。投喂糖脂比為4.01∶1的飼料組凡納濱對(duì)蝦己糖激酶活性最高，顯著高于其余各組。投喂糖脂比為3.29∶1的飼料組凡納濱對(duì)蝦肝糖原含量最高，顯著高于糖脂比為1.42∶1的飼料組（P＜0.05）。

表3 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦肝胰腺中淀粉酶、己糖激酶、肝糖原的影響

由表4 可知，飼料中的糖脂比對(duì)血淋巴中的血氨影響不顯著（P＞0.05）。投喂糖脂比為1.42∶1 的飼料組凡納濱對(duì)蝦血蛋白濃度最高，顯著高于糖脂比為1.75∶1 的飼料組（P＜0.05）。投喂糖脂比為4.01∶1的飼料組凡納濱對(duì)蝦血糖含量最高，顯著高于糖脂比為1.42∶1的飼料組（P＜0.05）。

表4 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中血氨、血蛋白和血糖的影響

2.3 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦膽固醇、三酰甘油及體成分的影響。

由表5 可知，投喂糖脂比為1.42∶1 的飼料組凡納濱對(duì)蝦膽固醇含量最高，顯著高于糖脂比為4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1、2.21∶1 的飼料組（P＜0.05）。投喂糖脂比為1.42∶1的飼料組凡納濱對(duì)蝦三酰甘油含量最高，顯著高于糖脂比為4.01∶1和2.21∶1的飼料組（P＜0.05）。

表5 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中膽固醇和三酰甘油的影響

由表6 可知，飼料中的糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦水分、粗蛋白、粗灰分含量影響不顯著(P＞0.05)。投喂糖脂比為1.42∶1 的飼料組凡納濱對(duì)蝦粗脂肪含量最高，顯著高于糖脂比為4.01∶1、3.29∶1、2.78∶1的飼料組（P＜0.05）。

表6 飼料糖脂比對(duì)凡納濱對(duì)蝦體成分的影響（%）

3 討論

通過8周的養(yǎng)殖試驗(yàn)，對(duì)蝦投喂糖脂比為2.78∶1的飼料組有較高的特定生長率，同時(shí)有較低的餌料系數(shù)和較高的蛋白效率。本試驗(yàn)得到的適宜糖脂比為2.78∶1，這和其他甲殼類動(dòng)物研究的一致。飼料中碳水化合物與脂肪的比率為3∶1 時(shí)，能夠節(jié)省飼料的蛋白促進(jìn)對(duì)蝦機(jī)體的生長[15]，在羅氏沼蝦[12]、馬氏沼蝦[13]、斑節(jié)對(duì)蝦（Penaeus monodon）[16]和南美藍(lán)對(duì)蝦（Litopenaeus stylirostis）生產(chǎn)中也有類似研究。糖脂比率的減小，表明了飼料中淀粉含量的降低和脂肪的升高，從本試驗(yàn)結(jié)果看出，凡納濱對(duì)蝦優(yōu)先利用飼料中的淀粉。在本試驗(yàn)條件下，飼喂同一蛋白水平的等氮等能的飼料，凡納濱對(duì)蝦優(yōu)先利用飼料中的淀粉作為能量。提示在對(duì)蝦商業(yè)配方飼料中，配方蛋白一定的情況下，可適量增加配方中的淀粉含量，降低配方中的脂肪，可達(dá)到節(jié)約配方成本的作用。

淀粉酶活性和飼料中的淀粉水平有著十分緊密的關(guān)系，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，淀粉酶活性都隨著飼料中淀粉水平的降低而降低，類似的研究見于美國龍蝦(Homarus americanus)[17]、鋸齒長臂蝦(Palaemon serratus)[18]，南美藍(lán)對(duì)蝦（L.stylirostris）[19]飼料中淀粉經(jīng)淀粉酶的消化，最終產(chǎn)物是葡萄糖[20-21]。Rosas等[22]研究表明，南美藍(lán)對(duì)蝦（L.stylirostris）葡萄糖和淀粉酶有一定的線性關(guān)系，飼料中的碳水化合物影響對(duì)蝦血淋巴中的葡萄糖，葡萄糖的濃度和飼料中的碳水化合物水平呈正相關(guān)。

食物一旦進(jìn)入內(nèi)臟，在內(nèi)腔消化吸收食糜并運(yùn)送到消化腺內(nèi)部的小管內(nèi)，消化腺就開始積存肝糖原[23]。Rosas 等[22]發(fā)現(xiàn)南美藍(lán)對(duì)蝦（L.stylirostris）肝糖原的含量受飼料中的碳水化合物的影響，當(dāng)飼料中碳水化合物水平達(dá)到21%～33%時(shí)，南美藍(lán)對(duì)蝦（L.stylirostris）儲(chǔ)存肝糖原能力達(dá)到飽和，而當(dāng)飼料中碳水化合物水平達(dá)到23%時(shí)，凡納濱對(duì)蝦儲(chǔ)存肝糖原的能力達(dá)到飽和。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，肝糖原濃度有先升高后降低的趨勢，都在飼料中淀粉含量為20.82%時(shí)達(dá)到最大值，超過此淀粉水平，肝糖原濃度反而降低，可能是飼料中淀粉含量為20.82%是凡納濱對(duì)蝦承受的最大閾值，與Rosas等[22]研究的結(jié)果一致。

己糖激酶是糖酵解第一個(gè)酶類，但磷酸化葡萄糖的能力很低，生物體能通過糖酵解獲得部分能量，可以調(diào)節(jié)葡萄糖的代謝。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，血糖濃度和己糖激酶隨著飼料糖脂比的降低而降低，這與飼料中的淀粉含量有直接關(guān)系[24]。飼料中的糖脂比對(duì)血淋巴中的血氨影響不顯著，可能是飼料中蛋白穩(wěn)定，飼料中的不同的糖脂水平對(duì)其影響不大。在本試驗(yàn)中，血淋巴中膽固醇和三酰甘油和蝦體脂肪與對(duì)蝦飼料脂肪水平有關(guān)，血淋巴中三酰甘油、總膽固醇和蝦體脂肪有隨飼料脂肪含量的升高而升高的趨勢，可能是飼料中高脂肪水平影響了對(duì)蝦正常的機(jī)體代謝，多余的脂肪被沉積在血淋巴、肝胰腺和肌肉[25]。結(jié)合生長性能和消化酶活性變化趨勢來看，適宜糖脂比能增強(qiáng)肝臟分解脂肪的能力，但隨著飼料糖脂比降低至一定限度，凡納濱對(duì)蝦對(duì)脂肪的分解能力達(dá)到最高值，從而導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)利用率降低，生長性能下降。

4 結(jié)論

綜上所述，飼料糖脂比對(duì)于凡納濱對(duì)蝦生長性能及相關(guān)酶活性具有顯著的影響，當(dāng)飼料中蛋白質(zhì)水平在41%，凡納濱對(duì)蝦最適淀粉和脂肪需求分別為18.97%和6.83%，最適糖脂比為2.78∶1。