商金源,閆曼平,葉京飛,程悅寧,王振軍,馮二凱,王春霞,趙 艷,朱先鵬, 廖遠(yuǎn)軍,羅國良*

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所 農(nóng)業(yè)部經(jīng)濟(jì)動(dòng)物疫病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,長春 130122;2.吉林省通化市柳河縣農(nóng)業(yè) 綜合行政執(zhí)法大隊(duì),柳河 135300;3.湖南省永州市零陵區(qū)畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心,永州 425199)

原細(xì)小病毒(Protoparvovirus,PtPV)屬于細(xì)小病毒科(Parvoviridae)細(xì)小病毒亞科(Parvovirinae),其屬重要病原體包括貓細(xì)小病毒(feline panleukopenia virus,FPV)、犬細(xì)小病毒(Carnivoreprotoparvovirus,CPV)、小鼠微小病毒(minute virus of mice,MVM)、豬細(xì)小病毒(porcine parvovirus,PPV)、布法病毒(bufavirus,BuPV)等。由于PtPV基因組的編碼能力有限且復(fù)制過程以及結(jié)構(gòu)亞基和衣殼組裝的核易位都與宿主細(xì)胞的細(xì)胞周期緊密耦合[1],所以PtPV更容易在分裂旺盛的細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制(如腸隱窩、心肌細(xì)胞和骨髓前體細(xì)胞)。同時(shí),細(xì)小病毒,特別是一些嚙齒類PtPV,如H-1細(xì)小病毒(H-1 parvovirus,H-1PV)、MVM和LuIII細(xì)小病毒(LuIII virus),表現(xiàn)出明顯的嗜瘤性和溶瘤性,并對(duì)人類是非致病性的[2],具有抗腫瘤特性的病毒被稱為溶瘤病毒(oncolytic virus,OVs)。近年來,我國癌癥的發(fā)病率和死亡率都呈現(xiàn)上升趨勢(shì),處于較高水平[3]。動(dòng)物也十分容易患上癌癥,例如,10歲以上的犬中有近一半會(huì)患上癌癥。盡管目前癌癥診斷和治療方案取得了進(jìn)展,但對(duì)惡性腫瘤的治療效果仍不理想。而細(xì)小病毒這一類OVs被看作是癌癥治療的新未來,OVs可以通過細(xì)胞病變作用誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡,而不會(huì)對(duì)正常宿主組織造成重大傷害[4]。目前全球已有4種OVs(Rigvir、Oncorine、Talimogene laherparepvec、DELYTACT)被批準(zhǔn)用于治療,由腺病毒改造的OV-Oncorine在中國獲批上市,是全球第一個(gè)獲批,也是我國唯一批準(zhǔn)的溶瘤病毒藥物[4]。全面了解PtPV與宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制的動(dòng)態(tài)相互作用將有助于更好地了解其感染機(jī)制和抗腫瘤特性。

1 PtPV形態(tài)特征及分類

1.1 病原體結(jié)構(gòu)

PtPV具有直徑18～26 nm的無包膜蛋白衣殼,該衣殼呈T=1二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)。該衣殼由60個(gè)亞基組成,其中VP1和VP2組成比例近似1∶10。PtPV基因組為約5 kb單鏈DNA,DNA的5′端發(fā)夾端粒約為120 nt,呈T型結(jié)構(gòu);而3′端右端發(fā)夾約為250 nt,呈Y型結(jié)構(gòu)(圖1)。PtPV在復(fù)制過程中既會(huì)產(chǎn)生正鏈DNA也會(huì)產(chǎn)生負(fù)鏈DNA,包裝正鏈的顆?？赡苄暂^低。其中MVM主要包裝負(fù)鏈,而LUIII細(xì)小病毒兩種核酸鏈被包裝的概率相似。

1.2 編碼蛋白

細(xì)小病毒基因組在p4和p38啟動(dòng)子的控制下有兩個(gè)主要的開放閱讀框(open reading frame,ORF),它們分別編碼復(fù)制所必需的非結(jié)構(gòu)蛋白(non-structural protein,NS)和結(jié)構(gòu)蛋白——衣殼蛋白(capsid viral protein,VP)(圖1)[5]。

圖1 PtPV基因組及編碼蛋白Fig.1 PtPV genome and encoded proteins

NS蛋白是細(xì)小病毒復(fù)制過程中不可或缺的。NS1是一種80 ku左右的核磷蛋白、復(fù)制起始蛋白,含有N端起源結(jié)合結(jié)構(gòu)域、解旋酶結(jié)構(gòu)域和C末端交互結(jié)構(gòu)域,具有特異性DNA結(jié)合位點(diǎn)以及ATP酶、切口酶和解旋酶活性[6],參與調(diào)節(jié)病毒基因表達(dá)、切割病毒DNA基因組,也是細(xì)胞毒性的主要介質(zhì),單純的NS1表達(dá)足以殺死癌細(xì)胞。NS1還參與細(xì)胞周期控制、細(xì)胞凋亡、線粒體呼吸和糖酵解相關(guān)通路[7-8]。而NS2(25 ku)的作用未被清晰確定,其可能在病毒復(fù)制、病毒mRNA轉(zhuǎn)錄、衣殼的組裝與核出口等過程中發(fā)揮作用[9]。FPV的NS2 C末端以及卷曲螺旋區(qū)域被證明可以抑制干擾素的產(chǎn)生(interferon,IFN),其通過靶向絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(threonine-protein kinase,TBK1)并阻止其被干擾素基因刺激物(stimulator of interferon genes,STING)蛋白募集,從而破壞下游蛋白IFN調(diào)節(jié)因子3(IFN regulatory factors 3,IRF3)的磷酸化,抑制IFN以減弱先天免疫反應(yīng)實(shí)現(xiàn)免疫逃避[10]。除了NS1、NS2,PtPV還表達(dá)另一種非結(jié)構(gòu)蛋白SAT(small alternatively translated)蛋白,在PPV感染中誘導(dǎo)不可逆的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡和裂解[11]。

VP蛋白ORF編碼VP1和VP2兩種結(jié)構(gòu)蛋白。VP1蛋白大約80 ku,是較大但數(shù)量很少的衣殼成分,含有獨(dú)特的N端延伸,稱為VP1u;VP2蛋白大約64 ku,是主要的衣殼成分;而對(duì)于該屬的一些成員,例如PPV,會(huì)在基因組包裝后通過水解切割VP2的N末端15～18個(gè)氨基酸產(chǎn)生VP3[5,12]。VP1包含一個(gè)143個(gè)殘基的N末端序列(VP1u),該序列含有參與核定位的堿性氨基酸基序(nuclear localization sequence,NLS)以及會(huì)影響磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)酶活性[13]。VP2與受體識(shí)別和核轉(zhuǎn)位有關(guān)[14],且含有刺激產(chǎn)生中和抗體的主要表位,VP2關(guān)鍵氨基酸位點(diǎn)的突變會(huì)影響其受體結(jié)合、抗原特征和宿主范圍[15]。

1.3 分類學(xué)

依據(jù)國際病毒分類委員會(huì)(The International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)對(duì)細(xì)小病毒的分類報(bào)告[16],可以通過NS1遺傳距離標(biāo)準(zhǔn)來對(duì)細(xì)小病毒進(jìn)行確認(rèn)分類。細(xì)小病毒科成員的基因組序列必須是連續(xù)的,需包含具有高度保守的解旋酶超級(jí)家族3(superfamily 3,SF3)結(jié)構(gòu)域的NS1的完整編碼區(qū)以及VP編碼區(qū),且其基因組應(yīng)該在4～6 kb,其轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合域(motif pattern)也應(yīng)該具有細(xì)小病毒科的特點(diǎn)。而劃分某個(gè)細(xì)小病毒屬于哪個(gè)屬的依據(jù)是在該病毒的SF3結(jié)構(gòu)域,此外,同一屬的成員的NS1蛋白氨基酸序列應(yīng)至少具有35%～40%的相似性且任何兩個(gè)成員之間的相似性應(yīng)該超過80%。同一種的成員則需要NS1氨基酸序列相似性超過85%[17]。

2 PtPV感染機(jī)制

2.1 結(jié)合細(xì)胞機(jī)制

PtPV通過衣殼附著在靶細(xì)胞的特定受體上。其中唾液酸(sialic acid,SA)是MVM、H-1PV、PPV等的結(jié)合受體,結(jié)合位點(diǎn)位于病毒衣殼的二倍軸區(qū)域(圖2),而在腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrin receptor,TfR)為FPV、CPV衣殼三倍軸區(qū)域的結(jié)合受體[15,18]。但體外血凝試驗(yàn)顯示CPV和FPV可以通過SA與紅細(xì)胞結(jié)合,同時(shí)也有研究證明改變或消除TfR的內(nèi)化信號(hào)并不能預(yù)防其感染[2]。另外CPV、FPV的血凝性都受到溶液中鈣離子濃度影響[19]。PtPV結(jié)合SA的能力也使其可以與腸黏液、組織碎片和食物中的SA結(jié)合,使其在環(huán)境中存在時(shí)間更久,也更容易傳播。

①PtPV顆粒二十面體結(jié)構(gòu)(紅:五倍軸,綠:三倍軸,藍(lán):二倍軸);②PtPV衣殼與細(xì)胞膜表面一種或多種特定受體結(jié)合;③PtPV衣殼通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞作用內(nèi)化;④病毒通過磷脂酶裂解內(nèi)體膜從內(nèi)體逃逸;⑤PtPV通過核孔復(fù)合體入核;⑥病毒基因組復(fù)制機(jī)制;⑦表達(dá)NS1蛋白并入核參與復(fù)制和衣殼組裝;⑧衣殼包裝基因組;⑨后代病毒通過胞吐或裂解擴(kuò)散 ①PtPV particle has an icosahedral structure (red-colored point: pentameric axis;green-colored point: trimeric axis;blue-colored point: dimeric axis); ②PtPV capsids bind to one or more special receptors exposed on the host cell membrane; ③PtPV capsids are internalized via clathrin-mediated endocytosis; ④Escape from the endosome by cleaving the endosomal membrane with a phospholipase; ⑤PtPV entry into the nucleus through the nuclear pore complex; ⑥Replication of the viral genome; ⑦Expression of the NS1,which enter the nucleus and participate in replication and capsid assembly; ⑧The new capsids package the new genome; ⑨Release of progeny virus through cell lysis or vesicular diffusion圖2 PtPV感染與復(fù)制機(jī)制示意圖Fig.2 Illustration of the infection and replication mechanism of PtPV

PtPV在與功能受體結(jié)合后被宿主細(xì)胞的內(nèi)吞作用內(nèi)化[2]。一般是通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞(clathrin-mediated endocytosis,CME),以CPV為例,部分病毒在形成網(wǎng)格蛋白包被的區(qū)域被捕獲,而另一些病毒則在結(jié)合部位誘導(dǎo)網(wǎng)格蛋白組裝[20]。雖然CME是主要的內(nèi)吞途徑,但也存在其他內(nèi)吞途徑,例如MVM就確定了還有至少3種不同的機(jī)制:小窩蛋白(caveolin)、脂筏(lipid-raft)和網(wǎng)格蛋白非依賴性載體介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑[21]。

2.2 入核途徑

PtPV的內(nèi)體運(yùn)輸過程被認(rèn)為是緩慢的。pH不斷降低的內(nèi)體微環(huán)境會(huì)導(dǎo)致病毒衣殼結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,導(dǎo)致VP1u序列暴露并發(fā)揮磷脂酶活性,從而分解內(nèi)體膜并逃逸(圖2)。因此,一些藥物如巴佛洛霉素 A1(bafilomycin A1)和弱堿二磷酸氯喹(weak base chloroquine diphosphate)可以提高內(nèi)體pH值,從而阻止PtPV的感染[2]。

從內(nèi)體逃逸后,PtPV會(huì)利用細(xì)胞骨架,如微管(microtubules,MTs)、中間纖維(intermediate filament,IF),以及相關(guān)運(yùn)動(dòng)蛋白,如肌動(dòng)蛋白(actin),轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核。PtPV入核過程則需要暴露在外的VP1u序列中的NLS引導(dǎo),NLS是一種核定位信號(hào),有助于將病毒導(dǎo)航到細(xì)胞核,從而導(dǎo)致進(jìn)一步的核易位。而在PPV中發(fā)現(xiàn)另一種NLS是一種新型核定位基序,在感染晚期將VP2三聚體靶向細(xì)胞核[22]。對(duì)于PtPV的入核機(jī)制目前有兩種解釋,一是通過衣殼蛋白VP1的NLS與核轉(zhuǎn)運(yùn)受體輸入蛋白β(importin-β)相互作用[23],結(jié)合核孔復(fù)合物并通過核孔進(jìn)入;二是病毒與核孔的直接作用或者與importin-β間接作用導(dǎo)致核包膜的局部解體使病毒進(jìn)入細(xì)胞核[8-9,23]。在核輸入的經(jīng)典途徑中,importin-β通過importin-α連接到暴露在病毒表面的NLS,病毒隨之結(jié)合核孔復(fù)合物并通過核孔進(jìn)入核籃(nuclear basket),importin-β與病毒解離回到細(xì)胞質(zhì)[23]。MVM在入核過程中甚至可以直接改變核膜的結(jié)構(gòu)并對(duì)核外膜造成損傷[24]。

2.3 病毒的復(fù)制與釋放

PtPV復(fù)制依賴于宿主細(xì)胞有絲分裂,且嚴(yán)格依賴于S期細(xì)胞因子。在轉(zhuǎn)錄因子的作用下,p4啟動(dòng)子被激活,并開始表達(dá)NS1。PtPV基因組通過滾動(dòng)發(fā)夾復(fù)制(rolling hairpin replication,RHR)復(fù)制(圖2),這是一種由NS1啟動(dòng)的單向、鏈置換形式的DNA復(fù)制[25],該機(jī)制依賴于發(fā)夾末端的順序展開和重新折疊[16],單向鏈置換合成產(chǎn)生連續(xù)的雙鏈中間體,具有核酸內(nèi)切酶活性的NS1會(huì)周期性地從中切下后代單鏈[26]。同時(shí)NS1激活P38啟動(dòng)子,誘導(dǎo)VP蛋白的表達(dá),并指導(dǎo)衣殼組裝過程。

新合成的衣殼蛋白在細(xì)胞質(zhì)中形成三聚體(1×VP1+2×VP2),并僅在S期通過結(jié)構(gòu)依賴的運(yùn)輸基序轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核中,且該易位依賴于細(xì)胞Raf-1激酶的三聚體磷酸化。之后衣殼蛋白三聚體在細(xì)胞核中組裝為病毒衣殼。通過對(duì)AAV、MVM的研究,新產(chǎn)生的MVM完整衣殼可以從細(xì)胞核中有效輸出,并且受到暴露于外部的磷酸化的VP2 N端序列內(nèi)的Ser和Thr調(diào)節(jié)[27-28]。PtPV后代病毒粒子可以通過囊泡主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外圍,如MVM[29];或是在細(xì)胞核中積累,直到通過細(xì)胞裂解釋放,如FPV[16];亦或是同步存在的。

3 PtPV的細(xì)胞毒性與溶瘤性

3.1 PtPV誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的機(jī)制

PtPV可以誘導(dǎo)細(xì)胞壞死或凋亡,具體機(jī)制因病毒和細(xì)胞類型而異。目前公認(rèn)的是,PtPV的主要調(diào)節(jié)蛋白NS1在病毒的復(fù)制、傳播、胞吐以及誘導(dǎo)細(xì)胞死亡等方面發(fā)揮重要作用,但其誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的分子機(jī)制尚未完全闡明。NS1是PtPV基因組早期表達(dá)產(chǎn)物,其積累將終止宿主細(xì)胞DNA復(fù)制和誘導(dǎo)DNA損傷,并使控制細(xì)胞周期的因子失調(diào)導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯于在S期或G1期[30]。已有研究表明CPV、H-1PV、MVM的NS1可以通過活化多種半胱天冬酶(caspases)、引起線粒體膜去極化、引發(fā)活性氧(reactive oxygen species,ROS)的聚集導(dǎo)致細(xì)胞色素C的釋放、p53非依賴性細(xì)胞凋亡等內(nèi)在凋亡通路[31-34]。嚙齒動(dòng)物PtPV的NS1還會(huì)破壞細(xì)胞骨架,包括微絲(microfilaments)、凝溶膠蛋白(gelsolin)、IF等[30]。在MVM感染細(xì)胞相關(guān)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)NS1細(xì)的胞毒性活性似乎與蛋白激酶2(protein kinase Ⅱ,CKⅡ)復(fù)合物的形成相關(guān),并發(fā)現(xiàn)NS1-CKⅡ復(fù)合物可以磷酸化原肌球蛋白、肌動(dòng)蛋白等導(dǎo)致其重排和降解從而破壞細(xì)胞骨架并刺激和調(diào)節(jié)胞吐作用來控制病毒的傳播與細(xì)胞溶解[31,35]。此外,研究發(fā)現(xiàn)除了通過ROS/線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡外,PPV還可以通過激活TLR2-NF-κB信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[36],在感染早期,NS1激活NF-κB信號(hào)通路并誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子IL-6和TNF-α的分泌,這些炎性細(xì)胞因子進(jìn)一步激活NF-κB通路,從而上調(diào)信號(hào)通路相關(guān)因子和炎性細(xì)胞因子的表達(dá)水平[37]。NS1的活性和功能已被證明受到多種信號(hào)通路的調(diào)控,包括磷脂依賴性激酶、蛋白激酶C、蛋白激酶B(PDK/PKC/PKB)等[30]。NS1上不同氨基酸殘基的磷酸化和乙?；脖徽J(rèn)為是蛋白質(zhì)不同功能的開關(guān)。例如,研究表明H1-PV NS1的K85、K257殘基的乙?；梢栽鰪?qiáng)NS1的細(xì)胞毒性[38-39]。

3.2 PtPV的抗腫瘤機(jī)制

溶瘤病毒在抗腫瘤方面具有三個(gè)核心機(jī)制,包括對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞病變作用、刺激免疫系統(tǒng)增強(qiáng)抗腫瘤免疫能力以及與其他腫瘤治療方式的協(xié)同作用。從某些數(shù)據(jù)來看,PtPV與免疫系統(tǒng)之間存在密切的合作,可以協(xié)同抑制腫瘤生長[40]。

嚙齒動(dòng)物以及食肉動(dòng)物PtPV的NS1已被證明具有腫瘤毒性[39],在癌細(xì)胞中NS1可以導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯、細(xì)胞凋亡、壞死、溶酶體樣程序性細(xì)胞死亡或細(xì)胞溶解[30]。此外,NS1的功能還強(qiáng)烈依賴于PDK/PKC/PKB信號(hào)傳導(dǎo),而激活PDK/PKC/PKB通路的突變是繼P53基因失活突變之后第二常見的癌癥相關(guān)基因,在大多數(shù)癌癥中,PDK/PKC/PKB級(jí)聯(lián)反應(yīng)會(huì)被上調(diào),因此NS1的細(xì)胞毒性會(huì)特異性地靶向癌細(xì)胞[41]。NS1對(duì)細(xì)胞骨架的破壞也使得比正常細(xì)胞原肌球蛋白表達(dá)量低的癌細(xì)胞更容易被誘導(dǎo)死亡。隨后NS1裂解癌細(xì)胞釋放腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated antigens,TTA)和損傷、病原體相關(guān)分子模式(danger- and pathogen-associated molecular patterns,DAMPs and PAMPs),激活TAA特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)反應(yīng),從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞被識(shí)別和破壞。這種反應(yīng)還引起樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)交叉遞呈,進(jìn)一步促進(jìn)免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的識(shí)別和激活腫瘤特異性CTL[34]。

3.3 PtPV在抗腫瘤方面的應(yīng)用案例

目前嚙齒動(dòng)物原細(xì)小病毒中H-1PV在臨床試驗(yàn)中表現(xiàn)出較好的抗腫瘤活性和安全性,含有H-1PV的藥物制劑ParvOryx在原發(fā)或復(fù)發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者I/IIa期臨床試驗(yàn)(ParvOryx01)證明了H-1PV的安全性和耐受性[42]。在部分膠質(zhì)瘤細(xì)胞中,H-1PV可導(dǎo)致活性的組織蛋白酶B、L從溶酶體轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì),同時(shí)下調(diào)細(xì)胞質(zhì)中半胱氨酸蛋白酶抑制劑(cystatin)B、C的水平[43]。ParvOryx01成功后,進(jìn)行了H-1PV的第二次臨床試驗(yàn)(ParvOryx02),該試驗(yàn)通過靜脈和瘤內(nèi)注射ParvOryx來評(píng)估該療法在不能手術(shù)且存在肝轉(zhuǎn)移的胰腺癌患者中的安全性、耐受性和療效[44]。在兩項(xiàng)試驗(yàn)中ParvOryx所有劑量水平下均表現(xiàn)安全,患者表現(xiàn)出良好的免疫學(xué)特征,包括腫瘤微環(huán)境的變化和特異性免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)[45],在患者血清中很少檢測(cè)出H-1PV中和抗體陽性[46]。但使用病毒仍存在一定的安全問題。有研究發(fā)現(xiàn)不同F(xiàn)PV/CPV-2毒株在不同宿主細(xì)胞培養(yǎng)物中體外生長時(shí)其VP2具有積累突變的現(xiàn)象[47],細(xì)小病毒的重復(fù)感染與多種細(xì)小病毒的共感染可能會(huì)促進(jìn)病毒的重組和高遺傳異質(zhì)性,使它們?cè)谛颅h(huán)境中具有宿主適應(yīng)性[48]。雖然相對(duì)來說PtPV的遺傳突變非常有限,主要是同義突變,且由于較低的基因突變率和較強(qiáng)的選擇性限制氨基酸突變,使得其跨物種傳播相對(duì)困難。不過,CPV已經(jīng)擴(kuò)展了其宿主范圍至貓科動(dòng)物,并且能導(dǎo)致貓出現(xiàn)貓泛白細(xì)胞減少綜合征[49]。不同的細(xì)小病毒共感染貓科動(dòng)物可能導(dǎo)致病毒基因重組,使宿主范圍進(jìn)一步擴(kuò)大[50]。

NS1也已被證明具有抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用,能夠靶向腫瘤細(xì)胞而不傷害正常細(xì)胞,并誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答。異位過表達(dá)NS1被視為抑制腫瘤的新策略,CPV2 NS1曾在小鼠乳腺腫瘤模型中表達(dá)并表現(xiàn)出抑制作用[32],因此已在肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中進(jìn)行表達(dá)試驗(yàn)[51]。

4 小結(jié)與展望

PtPV表現(xiàn)出廣泛的病理變化,盡管一些PtPV感染是無癥狀的,但有一些PtPV,如FPV、CPV和PPV等,具有顯著的致病性,例如,FPV可以引起貓科動(dòng)物泛白細(xì)胞減少綜合征;PPV可以引起豬死產(chǎn)-木乃伊胎-胚胎死亡-不育綜合征。PtPV對(duì)環(huán)境因素抵抗力強(qiáng),可以在環(huán)境中長期存在,并通過與感染動(dòng)物或其體液的直接接觸以及與受污染的表面或物體的間接接觸傳播,對(duì)動(dòng)物的健康和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)產(chǎn)生不良影響。本綜述總結(jié)了目前已知的PtPV感染和復(fù)制機(jī)制的信息,闡述了病毒如何進(jìn)入宿主細(xì)胞、如何繁殖和復(fù)制、以及如何通過裂解細(xì)胞或囊泡擴(kuò)散釋放后代病毒,但對(duì)于新出現(xiàn)的PtPV,如布法病毒、Cutavirus、Tusavirus等還知之甚少。有效的疫苗接種依舊是預(yù)防PtPV的重要手段,通過深入了解PtPV的感染機(jī)制和生物學(xué)特征,可以更好地預(yù)測(cè)和預(yù)防未來的病毒感染,進(jìn)而保障公共衛(wèi)生和農(nóng)業(yè)安全。

PtPV在抗腫瘤方面具有很大的潛力。一方面,它可以選擇性地感染某些腫瘤細(xì)胞,而對(duì)正常細(xì)胞的影響較小,從而減少了對(duì)患者的副作用;另一方面,PtPV具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性和免疫刺激作用,能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和激活免疫系統(tǒng),從而進(jìn)一步增強(qiáng)其抗腫瘤效應(yīng)。目前除了對(duì)病毒或是NS1本身的優(yōu)化,也許可以進(jìn)一步改善相關(guān)佐劑和載體(如脂質(zhì)體、病毒載體、細(xì)胞穿膜肽等)。同時(shí)細(xì)小病毒作為生物制劑的開發(fā)還集中在其衣殼蛋白上,其衣殼蛋白可用作基因遞送應(yīng)用中的病毒載體,基于細(xì)小病毒的基因工程病毒已經(jīng)被設(shè)計(jì)出來用于攜帶和輸送藥物、腫瘤相關(guān)抗原和免疫調(diào)節(jié)基因等。但在具體應(yīng)用時(shí)需要進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)其生物學(xué)特性和安全性的研究。

因此,對(duì)PtPV的研究有助于更深入地理解它們的感染機(jī)制、病原學(xué)和分子生物學(xué)特征,從而為PtPV感染的預(yù)防和治療提供新的思路和方法。此外,對(duì)于PtPV感染的研究,以及對(duì)病毒和宿主之間相互作用的深入研究,也有望為癌癥治療提供新的策略和可能性,這些研究將為人們提供更為科學(xué)和樂觀的前景。