許建強(qiáng)，印倩，宋正義，田秀文，謝東升，龔建化

1.長江大學(xué)附屬荊州醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，湖北荊州 434020；2.三峽大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院（國藥葛洲壩中心醫(yī)院）呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，湖北宜昌 443002；3.三峽大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院（國藥葛洲壩中心醫(yī)院）病理科，湖北宜昌 443002；4.三峽大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院（國藥葛洲壩中心醫(yī)院）胸外科，湖北宜昌 443002；5.三峽大學(xué)第三臨床醫(yī)學(xué)院（國藥葛洲壩中心醫(yī)院）老年醫(yī)學(xué)科，湖北宜昌 443002

從基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)角度出發(fā)，進(jìn)行探索分析，是一種快捷的研發(fā)路徑，也是適應(yīng)不同患者個(gè)性化治療需求、解決耐藥問題的重要思路[1-8]。長期以來，胸苷酸合成酶（thymidylate synthase, TS）、酪氨酸激酶（src tyrosine kinase, Src）均是腫瘤化療及抑制微生物生長的重要靶點(diǎn)[9-10]，相關(guān)研究資料逐漸增多，但學(xué)界更關(guān)注相關(guān)機(jī)制、基因多態(tài)性研究，肺腺癌組織及其癌旁組織中TS、Src表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義的研究目前尚處于起步階段。本研究回顧性分析2020年1—12月在國藥葛洲壩中心醫(yī)院行手術(shù)切除治療的肺腺癌116例患者的臨床資料，主要觀察肺腺癌組織及其癌旁組織中TS、Src的表達(dá)情況，并探究TS、Src表達(dá)的臨床意義，以期探索TS、Src作為肺腺癌治療靶點(diǎn)的可行性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析在本院行手術(shù)切除治療的肺腺癌116例患者的臨床資料。其中男47例，女69例；年齡＜60歲76例，≥60歲40例；吸煙史42例；文化水平中學(xué)47例，中專/高中56例，大學(xué)及以上13例；基礎(chǔ)疾?。焊哐獕赫?5例，糖尿病17例，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心?。?例，血脂異常11例。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本涉及肺腺癌組織、癌旁組織（距離肺腺癌組織5 cm的陰性組織標(biāo)本）、均經(jīng)胸外科手術(shù)切除病灶，基因檢測(cè)證實(shí)為驅(qū)動(dòng)基因陰性或未進(jìn)行基因檢測(cè)患者；入組時(shí)未接受任何治療（放療、靶向治療等）；病歷資料齊全，且有超過5年的完整隨訪資料。

排除標(biāo)準(zhǔn)：復(fù)發(fā)性肺癌患者；術(shù)前接受過其他治療患者；確診其他部位惡性腫瘤患者；合并其他肺部疾病患者；臨床資料殘缺患者；精神疾病患者。

1.3 方法

對(duì)TS、Src蛋白均采用微量凱氏（Kjeldahl）定氮法進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)分析其在肺腺癌組織及癌旁組織中的表達(dá)，及其與患者生存時(shí)間的相關(guān)系。

1.4 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)TS及Src在肺腺癌組織及癌旁組織中的表達(dá)情況，分析肺腺癌組織TS及Src表達(dá)與患者總生存期（overall survival, OS）與無病生存期（disease free survival, DFS）的關(guān)系。其中TS及Src蛋白在肺腺癌組織、癌旁組織中均有表達(dá)，相關(guān)表達(dá)均位于細(xì)胞胞漿中，TS及Src蛋白表達(dá)通過免疫組織化學(xué)染色（IHC）以染色劑作用后的顏色變化為標(biāo)準(zhǔn)，如觀察到TS及Src蛋白呈現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒，可認(rèn)為是TS及Src蛋白高表達(dá)，提示為陽性，則納入本研究陽性例數(shù)統(tǒng)計(jì)。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以（）表示，兩組間差異比較用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n）和率（%）表示，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)。采用Pearson 相關(guān)性系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 肺腺癌組織及癌旁組織中TS及Src表達(dá)情況比較

免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，肺腺癌組織中TS表達(dá)陽性率為41.38%，高于癌旁組織的10.34%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。肺腺癌組織中Src表達(dá)陽性率為59.48%，高于癌旁組織的15.52%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 肺腺癌組織及癌旁組織中TS及Src表達(dá)情況比較[n(%)]

2.2 不同TS表達(dá)組OS及DFS比較

TS低表達(dá)組OS及DFS均顯著長于TS高表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同TS表達(dá)組OS及DFS比較[()，年]

表2 不同TS表達(dá)組OS及DFS比較[()，年]

組別低表達(dá)組（n=27）高表達(dá)組（n=33）t值P值DFS 1.46±0.23 1.05±0.21 7.208＜0.001 OS 2.47±0.41 1.92±0.40 5.240＜0.001

2.3 不同Src表達(dá)組OS及DFS比較

Src低表達(dá)組OS及DFS均顯著長于Src高表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同Src表達(dá)組OS及DFS比較[()，年]

表3 不同Src表達(dá)組OS及DFS比較[()，年]

組別低表達(dá)組（n=31）高表達(dá)組（n=56）t值P值DFS 1.49±0.24 1.01±0.25 7.532＜0.001 OS 2.42±0.48 1.75±0.43 5.698＜0.001

2.4 TS及Src表達(dá)情況與DFS、OS相關(guān)性分析

TS及Src蛋白表達(dá)情況與DFS、OS均呈負(fù)相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 TS及Src表達(dá)情況與DFS、OS相關(guān)性分析

3 討論

近年針對(duì)惡性腫瘤靶向治療的興起，并體現(xiàn)出良好應(yīng)用前景，在此背景下，開發(fā)肺腺癌組織靶點(diǎn)，用于治療新型靶向分子治療藥物，對(duì)于提升肺腺癌臨床治療效果，進(jìn)一步延長患者的生命具有重要意義[11-12]。目前，已有大量研究證實(shí)TS、Src可以作為惡性腫瘤治療靶點(diǎn)[13]，有望進(jìn)一步推動(dòng)惡性腫瘤分子治療發(fā)展。現(xiàn)今階段，國內(nèi)外針對(duì)肺腺癌患者TS、Src表達(dá)的相關(guān)研究資料較少，對(duì)于TS、Src具體表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義尚未明確，無法有效指導(dǎo)臨床為肺腺癌患者制訂個(gè)性化治療方案。本研究以116例肺腺癌患者手術(shù)切除病理組織為例，進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)，觀察TS、Src表達(dá)情況，并分析TS、Src表達(dá)與患者生存情況之間的關(guān)系。

本研究以免疫組化實(shí)驗(yàn)方法，分別檢測(cè)116例肺腺癌患者肺腺癌組織、癌旁組織TS、Src表達(dá)情況。觀察肺腺癌組織、癌旁組織中Src表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)均有陽性表達(dá)情況，表達(dá)于細(xì)胞胞漿和/或細(xì)胞核中，以細(xì)胞胞漿為主，呈現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。其中肺腺癌組織中Src表達(dá)陽性率為59.48%，高于癌旁組織的15.52%（P＜0.05）。由此判斷，Src在肺腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)特點(diǎn)。肺腺癌組織中Src陽性表達(dá)率升高，多種生長因子受體信號(hào)通路可以通過激活Src表達(dá)，促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展，參與肺腺癌進(jìn)展過程。由此判斷，Src可以作為肺腺癌治療靶點(diǎn)，抑制Src表達(dá)能夠控制肺腺癌細(xì)胞生長與增殖，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。本研究認(rèn)為肺腺癌組織Src表達(dá)情況與患者的癥狀體征密切相關(guān)，提示Src可能能夠用于評(píng)估肺腺癌患者病情嚴(yán)重程度，進(jìn)而指導(dǎo)臨床合理制訂治療方案。最后本研究發(fā)現(xiàn)116例肺腺癌組織中，TS陽性表達(dá)48例，其中93.75%（45例）同時(shí)Src陽性；TS陰性表達(dá)68例，其中64.71%（44例）同時(shí)Src陰性。該結(jié)果與郭秀華[14]研究認(rèn)為的肺腺癌組織中TS蛋白陽性表達(dá)率為91.73%，同時(shí)Src陽性相一致。由此可知，TS和Src表達(dá)密切相關(guān)，兩者可能共同參與惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過程，相互調(diào)節(jié)，協(xié)調(diào)作用，共同影響患者預(yù)后生存率。

同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)TS和Src低表達(dá)組的OS及DFS均顯著長于TS和Src高表達(dá)組（P＜0.05）。TS蛋白影響肺腺癌患者預(yù)后生存的具體機(jī)制尚不明確，可能與TS的基因多態(tài)性有關(guān)。目前已有大量研究證實(shí)，TS基因多態(tài)性會(huì)影響惡性腫瘤治療（尤其是化療）的敏感性，進(jìn)而影響預(yù)后生存情況。同時(shí)Src參與腫瘤細(xì)胞浸潤、侵襲、轉(zhuǎn)移過程，使腫瘤細(xì)胞進(jìn)展速度加快、惡性程度升高，增加死亡風(fēng)險(xiǎn)，影響臨床預(yù)后[15]。

綜上所述，肺腺癌組織中TS、Src陽性表達(dá)率均升高，且TS、Src表達(dá)水平越高，其DFS和OS均越短。