成夢(mèng)可，尹秀娥，曹仲杰，奚 望

(沈陽(yáng)沈化院測(cè)試技術(shù)有限公司，遼寧 沈陽(yáng) 110021)

1 前言

溴氰菊酯是一種低毒、高效的擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)殺蟲(chóng)劑，由于具有用量小、對(duì)光穩(wěn)定、低殘留、廣譜性和高效性等特點(diǎn)得到廣泛應(yīng)用于農(nóng)林害蟲(chóng)和衛(wèi)生殺蟲(chóng)的防治中[1-2]?？蓡为?dú)使用，也可與其他有效成分配制成復(fù)配制劑使用。

順式二溴菊酰氯是溴氰菊酯有效成分的相關(guān)雜質(zhì)，而農(nóng)藥產(chǎn)品中的相關(guān)雜質(zhì)是與有效成分相比，對(duì)人類(lèi)和環(huán)境具有明顯毒害、或?qū)κ┯米魑锂a(chǎn)生藥害，或引起農(nóng)產(chǎn)品污染，或影響農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性，或引起其他不良影響，因此，農(nóng)藥中的相關(guān)雜質(zhì)一直是農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量的重要控制指標(biāo)[3-4]。

目前關(guān)于溴氰菊酯有效成分的分析方法有很多，主要有氣相色譜法[5]、正相液相色譜法[6]、反相高效液相色譜法[7]、超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[8]、近紅外光譜法[9]、紫外分光光度法[10]。但是針對(duì)順式二溴菊酰氯雜質(zhì)的分析方法研究較少，只檢索到一種一篇關(guān)于“溴氰菊酯乳油中順式二溴菊酰氯的高效液相色譜分析”[11]的相關(guān)文獻(xiàn)，該文獻(xiàn)中所述方法采用正相高效液相色譜法測(cè)定順式二溴菊酰氯，并且需要使用手性色譜柱，該方法適用范圍較窄，難于在復(fù)雜的制劑劑型和混配制劑中應(yīng)用，且使用手性色譜柱分析成本極高?；诖耍狙芯拷⒘艘环N反相高效液相色譜法對(duì)順式二溴菊酰氯進(jìn)行定量分析，該方法僅需使用極其常見(jiàn)的甲醇和磷酸水溶液流動(dòng)相和普通的C18色譜柱即可對(duì)復(fù)雜制劑中的順式二溴菊酰氯進(jìn)行分離和定量檢測(cè)，大大降低了分析檢測(cè)成本、且具有簡(jiǎn)單快捷、綠色環(huán)保的特點(diǎn)，為溴氰菊酯相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)制定提供了有力的技術(shù)支撐。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 順式二溴菊酰氯標(biāo)樣：質(zhì)量分?jǐn)?shù)為98.2%；

12%氯蟲(chóng)苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑：氯蟲(chóng)苯甲酰胺含量為10%，溴氰菊酯含量為2%；

甲醇：色譜純；磷酸：色譜純；水：超純水；

0.1%磷酸水溶液：移取1.0 mL磷酸于盛有1 000 mL超純水的試劑瓶中，搖勻，超聲脫氣。

2.2 主要儀器 液相色譜儀：Thermo U3000型，具有二極管陣列檢測(cè)器；過(guò)濾器：濾膜孔徑約0.22 μm；

色譜柱：150 mm×4.6 mm (i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝Eclipse XDB C18，5 μm填充物；

分析天平：XS205 DU型，梅特勒-托利多實(shí)驗(yàn)室稱量科技有限公司，精確至0.000 01 g；

超聲波清洗器；移液器。

2.3 色譜操作條件 流動(dòng)相為甲醇和0.1%磷酸水溶液，按照(表1)進(jìn)行梯度洗脫。

表1 流動(dòng)相梯度

流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：220 nm；進(jìn)樣體積：5 μL；保留時(shí)間：11.5 min。

順式二溴菊酰氯標(biāo)樣溶液和12%氯蟲(chóng)苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑試樣溶液的典型色譜圖(圖1、2)。

圖1 順式二溴菊酰氯標(biāo)樣溶液的高效液相色譜圖

圖2 12%氯蟲(chóng)苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑試樣溶液的高效液相色譜圖

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取順式二溴菊酰氯標(biāo)樣0.01 g(精確至0.000 01 g)于50 mL容量瓶中，加入40 mL甲醇超聲振蕩3 min，取出后冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，室溫下衍生化反應(yīng)30 min，搖勻，此為標(biāo)樣母液。移取0.5 mL上述母液于50 mL容量瓶中，甲醇定容，搖勻，此為標(biāo)樣溶液。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取試樣約2 g(精確至0.000 1 g)于50 mL容量瓶中，加入40 mL甲醇超聲振蕩3 min，取出后冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，室溫下衍生化反應(yīng)30 min，搖勻，過(guò)濾。

2.5 測(cè)定 在上述條件下，待儀器穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針順式二溴菊酰氯衍生物的峰面積相對(duì)變化<5.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.6 計(jì)算 試樣中順式二溴菊酰氯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

ω——試樣中順式二溴菊酰氯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

A2——試樣溶液中順式二溴菊酰氯的峰面積的平均值；

m1——標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

p——標(biāo)樣中順式二溴菊酰氯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；

A1——標(biāo)樣溶液中順式二溴菊酰氯的峰面積的平均值；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

100——標(biāo)樣溶液的稀釋倍數(shù)。

3 結(jié)果與討論

3.1 溶劑的選擇 本方法選用甲醇作為溶劑，同時(shí)作為順式二溴菊酰氯的衍生化試劑，順式二溴菊酰氯性質(zhì)活潑，在甲醇溶液中很快轉(zhuǎn)化為順式二溴菊酰氯衍生物，通過(guò)測(cè)定順式二溴菊酰氯衍生物峰面積來(lái)計(jì)算順式二溴菊酰氯的含量。

3.2 色譜條件的選擇 通過(guò)二極管陣列檢測(cè)器的光譜數(shù)據(jù)采集功能獲得順式二溴菊酰氯衍生物的紫外吸收光譜圖(圖3)。選擇順式二溴菊酰氯衍生物的最大吸收波長(zhǎng)(220 nm)作為檢測(cè)波長(zhǎng)，以甲醇和0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度比例篩選。本研究最終確定的方法，空白溶劑和助劑在待測(cè)組分出峰位置不干擾檢測(cè)，待測(cè)組分峰純度值為99.9%，符合定量分析要求。

圖3 順式二溴菊酰氯標(biāo)樣溶液的紫外吸收光譜圖

3.3 分析方法的特異性試驗(yàn) 稱取約2 g的試樣(試樣中不含順式二溴菊酰氯)，加入已知量的順式二溴菊酰氯標(biāo)樣，配制成一個(gè)含有已知順式二溴菊酰氯質(zhì)量的模擬試樣溶液。對(duì)該模擬試樣溶液用二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行光譜掃描，通過(guò)工作站軟件得到待測(cè)組分色譜峰純度為99.9%，表明分析方法的特異性符合要求(圖4)。

3.4 分析方法的線性關(guān)系試驗(yàn) 配制一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)樣溶液，按2.3方法進(jìn)行測(cè)定，以順式二溴菊酰氯質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，順式二溴菊酰氯衍生物峰面積為縱坐標(biāo)繪制線準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程為Y=8.394 1X+1.367 5，相關(guān)系數(shù)r=0.998 8。結(jié)果表明順式二溴菊酰氯在測(cè)試濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(表2)。

3.5 分析方法的檢出限和定量限 將順式二溴菊酰氯標(biāo)樣溶液按照一定的比例進(jìn)行稀釋，直到待測(cè)組分的信號(hào)值為基線噪音的10倍時(shí)作為定量限濃度，繼續(xù)將定量限濃度的順式二溴菊酰氯標(biāo)樣溶液進(jìn)行稀釋，直到待測(cè)組分的信號(hào)值為基線噪音的3倍時(shí)作為檢出限濃度。

順式二溴菊酰氯的定量限濃度為0.599 μg/mL，檢出限濃度為0.200 μg/mL，定量限和檢出限譜圖(圖5、6)。

圖5 順式二溴菊酰氯的定量限譜圖

3.6 分析方法的準(zhǔn)確度和精密度試驗(yàn) 稱取試樣2 g，置于50 mL容量瓶中，再加入已知量的標(biāo)樣，按2.4.2方法配制成一個(gè)含有已知量順式二溴菊酰氯的模擬試樣溶液，按2.3的方法測(cè)定試樣溶液中順式二溴菊酰氯的質(zhì)量，將測(cè)得質(zhì)量與理論加入質(zhì)量進(jìn)行比較，計(jì)算添加回收率。順式二溴菊酰氯的回收率在98.6%～102.7%之間，平均回收率為99%(表3)。

表3 順式二溴菊酰氯回收率試驗(yàn)結(jié)果

將上述測(cè)定結(jié)果以順式二溴菊酰氯占試樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示，計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.000 09%，變異系數(shù)為1.9%，<霍爾茲方程計(jì)算值6.0%，結(jié)果表明該方法的精密度可以滿足定量分析要求(表4)。

表4 順式二溴菊酰氯精密度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了高效液相色譜法測(cè)定12%氯蟲(chóng)苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑中的順式二溴菊酰氯雜質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法操作簡(jiǎn)便，具有良好的線性關(guān)系、精密度和準(zhǔn)確度，且靈敏度高，適用于12%氯蟲(chóng)苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑中順式二溴菊酰氯相關(guān)雜質(zhì)的質(zhì)量控制。本文建立的分析方法，也可作為其他農(nóng)藥產(chǎn)品中順式二溴菊酰氯檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)依據(jù)。