楊浩東,謝興文,李 寧,△ ,李鼎鵬,丁聚賢,柳 博,袁可馨,劉 凱,姚乾寧

(1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué),蘭州 730000;2.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院,蘭州 730000;3.甘肅省第二人民醫(yī)院,蘭州 730030)

骨肉瘤是臨床常見的骨惡性腫瘤,以兒童和青少年為主要發(fā)病人群,其中男性的發(fā)病率遠(yuǎn)高于女性,患者5年生存率低于50%[1-3]。骨肉瘤的疾病特點(diǎn)為好發(fā)于人體的長(zhǎng)骨干骺端,以股骨遠(yuǎn)端和脛骨近端發(fā)病較為多見,容易發(fā)生局部侵襲和早期肺轉(zhuǎn)移[4]。目前其發(fā)病機(jī)制尚不明確,并且可供選擇的治療方式也十分有限[5-6]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)所采用的新輔助化療結(jié)合保肢術(shù)的治療方式雖提高了骨肉瘤的治療效果,但仍有許多患者療效不佳,經(jīng)常出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)或腫瘤細(xì)胞向肢體遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。這些問題的產(chǎn)生和發(fā)展涉及多基因參與、多信號(hào)通路交叉作用的復(fù)雜過程,同時(shí)與長(zhǎng)期使用化療藥物使得腫瘤細(xì)胞對(duì)藥物的敏感度降低有關(guān)[7]。此外,化療藥物的不良反應(yīng)較大,治療費(fèi)用也較為昂貴,因此,該療法具有一定的局限性。

近年來,中醫(yī)藥在腫瘤相關(guān)疾病的防治中發(fā)揮了越來越重要的作用,并且以其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和確切療效受到了廣泛關(guān)注[8-10]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),中醫(yī)藥具有多生物活性成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同作用、高效價(jià)廉和不良反應(yīng)小等優(yōu)勢(shì),能夠有效抑制腫瘤生長(zhǎng)和新血管的生成并逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗癌藥物的多藥耐藥[11-14]。隨著骨肉瘤發(fā)病機(jī)制研究的日漸深入,近年來已發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的多條信號(hào)通路都與該病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),信號(hào)通路通過改變其下游信號(hào)分子的活化狀態(tài),從而誘導(dǎo)靶基因表達(dá)以影響腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、自噬、侵襲、細(xì)胞周期及腫瘤新生血管的生成[15-16]。本研究通過對(duì)應(yīng)用中醫(yī)藥調(diào)控分泌型糖蛋白(Wnt)、神經(jīng)源性位點(diǎn)缺口同源蛋白(Notch)、核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor,NF)-κB、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, PKB別名Akt)、有絲分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedprotein kinase,MAPK)、Janus激酶(janus kinase,JAK)/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transducer and activator of transcription,STAT)等信號(hào)通路治療骨肉瘤的文章進(jìn)行分析、整理,闡明中醫(yī)藥治療骨肉瘤與相關(guān)信號(hào)通路之間的關(guān)系,以期為中醫(yī)藥治療骨肉瘤提供參考。

1 Wnt 信號(hào)通路

Wnt信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)的一條高度保守的信號(hào)通路,在組織胚胎的發(fā)育過程中扮演著十分重要的角色[17]。Wnt通路根據(jù)下游激活物的不同被分為β-鏈蛋白(β-catenin)激活基因轉(zhuǎn)錄的經(jīng)典Wnt信號(hào)通路、Wnt/Ca2+信號(hào)通路和與細(xì)胞骨架重排相關(guān)的Wnt/平面細(xì)胞極性(planar cell polarity,PCP)通路,其中Wnt/β-catenin是研究最多的一條通路,此條信號(hào)通路能夠調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡和細(xì)胞間質(zhì)化等多個(gè)生物學(xué)功能[18]。相關(guān)研究證實(shí),Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與了腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展以及化療耐藥等過程[19-20]。在骨肉瘤細(xì)胞中,Wnt信號(hào)通路常被異常激活并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和發(fā)生早期肺轉(zhuǎn)移[21],而且常規(guī)化療方案的失敗也與 Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的激活有關(guān),通過抑制Wnt通路的活性可以有效阻止骨肉瘤細(xì)胞自我更新、減緩腫瘤生長(zhǎng)和侵襲等過程。

李國(guó)湘等[22]的研究表明,半枝蓮堿溶液(scutebarbatine,SBT)能夠減少Wnt/β- catenin信號(hào)通路中關(guān)鍵分子β-catenin的蛋白表達(dá),從而使下游原癌基因和細(xì)胞周期素(Cyclin)D1蛋白質(zhì)表達(dá)水平降低,并且SBT可抑制糖原合成酶激酶(glycogen synthase kinase,GSK)-3β被GSK-3β第9位絲氨酸(Ser9)磷酸化,從而促進(jìn)了GSK-3β對(duì)β-catenin蛋白的降解,通過阻滯Wnt/β- catenin信號(hào)通路的傳導(dǎo)達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的作用。李增等[23]發(fā)現(xiàn)石見穿多糖可以通過降低細(xì)胞中β-catenin mRNA及波形蛋白(Vimentin)等表達(dá),從而促進(jìn)E-鈣黏蛋白(E-cadherin)的表達(dá)來抑制上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過程,從而達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲的作用。董伯升等[24]研究丹參酮ⅡA對(duì)荷骨肉瘤裸鼠的影響,發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA低、中、高劑量各干預(yù)組血清中的白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-2、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的表達(dá)水平、腫瘤組織中Dickkopf相關(guān)蛋白(Dkk)-1和Dkk-1 mRNA的表達(dá)均依次升高,而血清中可溶性血管細(xì)胞黏附因子(soluble vascular cell adhesion molecule,sVCAM)-1表達(dá)水平及腫瘤組織中β-catenin蛋白的表達(dá)依次降低,提示丹參酮ⅡA可通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路的活性發(fā)揮抗骨肉瘤的作用。

2 Notch 信號(hào)通路

Notch信號(hào)通路是重要的細(xì)胞間通信系統(tǒng),可程序性地調(diào)控細(xì)胞命運(yùn)和組織分化。在Notch信號(hào)通路中有4種主要的受體,分別是Notch1、Notch2、Notch3和Notch4。這些受體是跨膜蛋白家族的成員,有著相似的結(jié)構(gòu),包括胞外結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域,它們?cè)诩?xì)胞間的相互作用中起著關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用。除此之外,Notch 信號(hào)通路還擁有 5 種配體:Jagged1、Jagged2,Delta1、3、4[25]。Notch信號(hào)通路的激活是通過配體和跨膜受體的結(jié)合來完成的,一旦配體與受體結(jié)合,跨膜 Notch 受體蛋白會(huì)被γ-分泌酶裂解,使Notch受體的細(xì)胞內(nèi)結(jié)合域(notch intracellular domain,NICD)釋放出來,并遷移到細(xì)胞核,與DNA結(jié)合蛋白胞內(nèi)效應(yīng)分子(CBF-1/Suppressor of hairless/Lag,CSL)、核轉(zhuǎn)錄激活蛋白家族(mastermind-like,MAML)和轉(zhuǎn)錄激活因子相結(jié)合,從而誘導(dǎo)下游Hes等目標(biāo)基因的表達(dá),產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。因此,通常將Hes-1作為Notch1通路激活的生物標(biāo)志物[26]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),Notch信號(hào)通路在不同生理過程中維持穩(wěn)態(tài)對(duì)保證生物體內(nèi)微環(huán)境的正常運(yùn)轉(zhuǎn)至關(guān)重要,一旦 Notch 信號(hào)發(fā)生改變,就會(huì)導(dǎo)致疾病的發(fā)生[27-28]。李珂等[29]觀察Notch信號(hào)通路在γ-分泌酶阻斷劑和激動(dòng)劑Jagged1的影響下對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞的影響,發(fā)現(xiàn)γ-分泌酶阻斷劑能夠明顯抑制143B細(xì)胞和 MG-63細(xì)胞的增殖,且呈現(xiàn)濃度依賴性,而Jagged1能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖,證實(shí)了可以通過抑制Notch信號(hào)通路的激活來影響腫瘤細(xì)胞的增殖,從而達(dá)到治療骨肉瘤的效果。

梅紅軍等[30]探究不同濃度的黃芩素對(duì)143B骨肉瘤細(xì)胞增殖的抑制作用,發(fā)現(xiàn)骨肉瘤細(xì)胞被黃芩素處理后,細(xì)胞中B淋巴細(xì)胞瘤(B cell leukemia iymphoma,Bcl)-2相關(guān)X基因(Bcl-2 associated X protein gene,Bax)水平顯著升高,Bcl-2蛋白水平顯著降低,并且細(xì)胞中的分叉毛發(fā)與增強(qiáng)子(hairy and enhancer of split,Hes)家族成員Hes-1和NICD1的蛋白水平也顯著降低,提示黃芩素可誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯,并能通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡來抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖,其機(jī)制可能與抑制Notch信號(hào)通路活性有關(guān)。徐慧等[31]探究不同濃度的三七總皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)對(duì)人骨肉瘤U2OS細(xì)胞的影響,發(fā)現(xiàn)PNS通過阻斷Notch信號(hào)通路從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、遷移并促進(jìn)其凋亡。亦有研究發(fā)現(xiàn),蟲草素可通過促進(jìn)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞中切割型胱天蛋白酶(cleaved Caspase)-3、9和Bax蛋白的表達(dá),并降低Bcl-2、NICD1和Hes1蛋白的表達(dá),停滯細(xì)胞周期,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡從而起到抗骨肉瘤的作用,這一途徑可能與蟲草素下調(diào)Notch信號(hào)通路的活性有關(guān)[32]。

3 NF-κB 信號(hào)通路

NF-κB轉(zhuǎn)錄因子家族由5個(gè)普遍表達(dá)的成員(p50、p52、p65/RelA、RelB和c-Rel)組成,形成同源或異源二聚體。在正常情況下,非活化狀態(tài)下的NF-κB在胞漿內(nèi)與抑制蛋白κB(inhibitoryκB,IκB)家族的抑制蛋白相結(jié)合[33]。當(dāng)細(xì)胞受到外界刺激,如在機(jī)體發(fā)生炎癥、產(chǎn)生腫瘤以及免疫功能改變的情況下,活化蛋白激酶并釋放NF-κB,自由的NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核,調(diào)控其所編碼的靶基因蛋白轉(zhuǎn)錄表達(dá)。相關(guān)研究表明,骨肉瘤細(xì)胞的增殖與NF-κB蛋白的表達(dá)水平呈正相關(guān),并且能夠促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲[34]。

董嵩等[35]探究不同濃度甘草次酸對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的抑制作用,發(fā)現(xiàn)甘草次酸能夠明顯抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,并且促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡,蛋白印跡檢測(cè)結(jié)果顯示高濃度甘草次酸組中NF-κB蛋白的表達(dá)量明顯低于其他組,提示其抗腫瘤機(jī)制可能通過影響NF-κB信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)。范兆陽等[36]的研究表明石斛酚能夠有效抑制人骨肉瘤U20S細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲,抑制細(xì)胞中TNF-α、IL-6、NF-κB、促肝再生磷酸酶蛋白(phosphatase of regenerating liver,PRL)-3等的表達(dá),減少炎癥因子分泌,其作用機(jī)制與石斛酚調(diào)控NF-κB信號(hào)通路有關(guān)。江波等[37]研究松乳菇多糖對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞Saos-2的影響機(jī)制,發(fā)現(xiàn)松乳菇多糖可以顯著降低細(xì)胞的增殖率和侵襲、遷移數(shù),提高細(xì)胞凋亡率,其抗腫瘤作用機(jī)制可能與下調(diào)NF-κB信號(hào)通路蛋白的表達(dá)水平, 以及抑制COX-2蛋白的表達(dá)有關(guān)。

4 PI3K/Akt信號(hào)通路

PI3K是一種由調(diào)節(jié)亞基P85和催化亞基P110的異源二聚體構(gòu)成的脂質(zhì)激酶,根據(jù)其結(jié)構(gòu)可分為PI3K Ⅰ,PI3K Ⅱ和PI3K Ⅲ,當(dāng)前對(duì)PI3K Ⅰ的研究最為廣泛,PI3K Ⅰ能被細(xì)胞表面的受體激活,分為IA和IB兩個(gè)亞型,IA在腫瘤細(xì)胞中最為常見,具有蛋白激酶和類脂激酶的雙重活性,在細(xì)胞膜的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、膜轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝等過程中具有十分關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用[38-39]。Akt是PI3K下游非常重要的活性信號(hào)靶點(diǎn),由Pleckstrin同源結(jié)構(gòu)域(pleckstrin homology,PH)、催化域及調(diào)節(jié)域3部分構(gòu)成。PI3K作為脂質(zhì)激酶,與被磷酸化的酪氨酸殘基締合,激活自身的催化亞基p110,將磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol trisphosphate,PIP)2磷酸化生成PIP3[40],誘導(dǎo)Akt三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)象發(fā)生改變,PIP3作為第二信使將Akt轉(zhuǎn)運(yùn)到質(zhì)膜上,將Akt的磷酸化殘基磷酸化,從而完全激活A(yù)kt,使其成為有活性的激酶進(jìn)一步調(diào)節(jié)下游信號(hào)分子[41]。PI3K/Akt信號(hào)通路在細(xì)胞內(nèi)廣泛存在,并能夠被多種蛋白受體激活并參與調(diào)控細(xì)胞內(nèi)的許多過程,包括影響細(xì)胞周期、糖代謝、蛋白質(zhì)合成以及維持基因組的穩(wěn)定性。由于其在癌癥細(xì)胞中最常見且作用關(guān)鍵,PI3K/Akt信號(hào)通路經(jīng)常被作為癌癥、炎癥和其他疾病的治療靶點(diǎn)[42-44]。相關(guān)研究證明,在骨肉瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中PI3K/Akt/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信號(hào)通路經(jīng)常被激活,激活后的信號(hào)通路發(fā)揮相關(guān)調(diào)節(jié)作用,影響腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、自噬和凋亡[45]。

楊志強(qiáng)等[46]探究紫草素(shikonin, SK)對(duì)骨肉瘤的影響,發(fā)現(xiàn)不同濃度的SK對(duì)人骨肉瘤U2OS和MG-63細(xì)胞都有顯著的毒性作用,導(dǎo)致骨肉瘤細(xì)胞的存活率明顯下降,且表現(xiàn)出濃度和時(shí)間依賴性。在SK高濃度組,腫瘤細(xì)胞中Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3比值均顯著上調(diào),PI3K和Akt蛋白磷酸化水平顯著降低,而PI3K激活劑血清胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-like growth factor,IGF)-1能夠顯著逆轉(zhuǎn)上述指標(biāo)的變化,表明紫草素可能通過抑制PI3K/Akt信號(hào)通路途徑抑制U2OS細(xì)胞的生長(zhǎng)并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。杜兵強(qiáng)等[47]用不同劑量的槲寄生溶液處理人骨肉瘤U20S細(xì)胞,結(jié)果顯示高劑量槲皮素組中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白的相對(duì)表達(dá)量以及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B, p-Akt)/Akt表達(dá)水平最低,提示槲寄生素可能通過抑制PI3K/Akt/mTOR通路相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)來抑制細(xì)胞增殖和侵襲能力、促進(jìn)細(xì)胞凋亡, 從而發(fā)揮抗腫瘤作用。Liu等[48]研究人參皂苷(ginseng saponin,GS)Rg5對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖以及凋亡的影響,發(fā)現(xiàn)GS-Rg5能夠降低PI3K、Akt和mTORC1的磷酸化水平,同時(shí)提高微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubuleassociated protein1 light chain 3,LC3)-Ⅱ/LC3-I 水平,有效抑制人骨肉瘤細(xì)胞的增殖,且該作用呈劑量依賴關(guān)系,進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PI3K/Akt通路刺激因子IGF-1能夠逆轉(zhuǎn)GS-Rg5對(duì)MG-63細(xì)胞自噬的誘導(dǎo)作用,證實(shí)GS-Rg5通過自噬相關(guān)蛋白LC3介導(dǎo)的自噬途徑誘導(dǎo)人骨肉瘤細(xì)胞凋亡。

5 MAPK信號(hào)通路

MAPK信號(hào)通路是一組能夠被細(xì)胞外刺激物激活的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,包括p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinases, p38 MAPK)、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、ERK 5和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun amino-terminal kinase,JNK)等4個(gè)亞族,能夠影響細(xì)胞的增殖、凋亡、分化和生存等活動(dòng)[49-51]。MAPK信號(hào)通路在癌癥的發(fā)生和發(fā)展中有著十分重要的作用,阻斷或抑制MAPK信號(hào)通路已經(jīng)成為腫瘤治療的新方向[52-53]。相關(guān)研究顯示,JNK和p38作為MAPK通路的主要組成部分,與細(xì)胞凋亡過程密切相關(guān),可以通過激活JNK、p38通路活性誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡[54-55]。

黃乾等[56]探究鷹嘴豆芽素A (biochanin-A, BA)對(duì)人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制,發(fā)現(xiàn)BA能夠抑制腫瘤細(xì)胞的活性,通過上調(diào)磷酸化(phosphorylation,p)-p38,p-JNK和p-ERK1/2的表達(dá)水平,下調(diào)Bcl-2和上調(diào)Bax的表達(dá)來誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞的凋亡,而與凋亡相關(guān)的蛋白cleaved Caspase-9、cleaved Caspase-3和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶降解產(chǎn)物cleaved-(poly ADP-ribose polymerase,PARP)都隨著BA濃度的上升而增加,提示骨肉瘤細(xì)胞的凋亡可能與激活MAPK信號(hào)通路有關(guān)。張露露[57]探究小豆蔻明(cardamonin,CAR)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞株143B和MG-63細(xì)胞的抑制作用及相關(guān)機(jī)制,發(fā)現(xiàn)CAR可抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白的表達(dá),并且下調(diào)與腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲相關(guān)蛋白的表達(dá)水平,上調(diào)促凋亡蛋白B淋巴細(xì)胞瘤-2基因相關(guān)啟動(dòng)子(Bcl-xL/Bcl-2 associated death promoter,BAD)、Bax的表達(dá),抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的水平,說明CAR能夠抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖,阻止其遷移和侵襲,并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡,當(dāng)加入p38及JNK通路抑制劑后,可部分逆轉(zhuǎn)CAR對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用,說明CAR抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)其凋亡的機(jī)制與激活MAPK信號(hào)通路有關(guān)。林淼雄等[58]的研究發(fā)現(xiàn)雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide,TPL)能顯著抑制LPS誘導(dǎo)的骨肉瘤MG-63細(xì)胞中TNF-α、IL-6、缺氧誘導(dǎo)因子-1α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)水平,TPL能夠下調(diào)p-p38蛋白的表達(dá)量,提示TPL抗LPS誘導(dǎo)的促血管生成和抗炎作用可能與下調(diào)p38 MAPK信號(hào)通路的活性有關(guān), 表明p38 MAPK可能是TPL作用的靶點(diǎn)。

6 JAK/STAT信號(hào)通路

JAK/STAT信號(hào)通路由JAKs家族和STATs家族組成[59]。JAKs家族擁有JAK1、2、3和Tyk2共4種激酶,除JAK3之外,其余蛋白都在組織細(xì)胞中廣泛存在。STATs家族是JAKs的靶蛋白,共有7種類型的蛋白,分別是STAT1、2、3、4,STAT5a、5b和STAT6。在與之相關(guān)的細(xì)胞活動(dòng)中,被磷酸化激活的JAKs家族蛋白進(jìn)一步與STATs家族蛋白相結(jié)合,將集合在該位點(diǎn)的 STAT蛋白激活,活化的STAT蛋白與其受體形成二聚體進(jìn)入到細(xì)胞核,啟動(dòng)對(duì)應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄,從而調(diào)控下游靶基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)[60]。JAK/STAT信號(hào)通路是重要的細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)途徑,大量研究證明,骨肉瘤的進(jìn)展與JAK/STAT 信號(hào)傳導(dǎo)失調(diào)有關(guān)[61-62],其在腫瘤細(xì)胞中高度活化,能夠?qū)⒓?xì)胞膜感受到的刺激信號(hào)向細(xì)胞核傳遞[63],廣泛參與細(xì)胞增殖、分化、凋亡以及炎癥等過程,抑制JAK/STAT信號(hào)通路的活性能夠抑制腫瘤細(xì)胞的周期進(jìn)程以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等過程從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。

宋奇等[64]研究不同濃度的山竹醇抗骨肉瘤U2OS細(xì)胞的作用機(jī)制,發(fā)現(xiàn)隨著藥物作用時(shí)間和濃度的增加,腫瘤細(xì)胞的活力逐漸降低,大多數(shù)細(xì)胞周期停滯于S期。檢測(cè)結(jié)果表明山竹醇能使U2OS細(xì)胞中p-JAK2、p-STAT3、B細(xì)胞淋巴瘤(B cell leukemia iymphoma,Bcl)-xl等蛋白的表達(dá)水平下調(diào),Bax蛋白的表達(dá)水平上調(diào),且呈現(xiàn)濃度依賴性,從而有效促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生凋亡,證明山竹醇抗腫瘤機(jī)制可能與抑制JAK/STAT信號(hào)通路的活性有關(guān)。Lu等[65]的研究表明,姜黃素類似物可有效抑制人骨肉瘤U2OS細(xì)胞和MG-63細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、遷移和侵襲,能夠降低腫瘤細(xì)胞中STAT3、JAK1、JAK2 和 JAK3 等蛋白的磷酸化,但不影響ERK、JNK、p38 和 Akt 等的磷酸化,當(dāng)應(yīng)用STAT3激活劑后,由姜黃素類似物誘導(dǎo)的尿激酶纖溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)的降低以及遷移侵襲潛力的下降可以被抵消,表明姜黃素類似物可以通過抑制uPA表達(dá)和JAK/STAT 信號(hào)傳導(dǎo)來發(fā)揮抗骨肉瘤細(xì)胞遷移和侵襲的作用。吳倩等[66]探究二氫楊梅素(dihydromyricetin,DMY)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63的影響,發(fā)現(xiàn)DMY可呈時(shí)間和濃度依賴性地抑制細(xì)胞生長(zhǎng),阻止細(xì)胞的侵襲和遷移,上調(diào)促凋亡蛋白Bax、Bak的表達(dá),減少抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá),從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,JAK2、STAT3的磷酸化水平降低說明DMY可通過調(diào)控JAK2/STAT3信號(hào)通路抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

7 結(jié)語

骨肉瘤作為臨床常見的原發(fā)性骨惡性腫瘤,具有較高的肺轉(zhuǎn)移率和病死率,嚴(yán)重危害患者的生存質(zhì)量,但其發(fā)病機(jī)制尚不明確,故現(xiàn)有的治療方式并未取得理想的治療效果。在現(xiàn)今的腫瘤防治領(lǐng)域,中醫(yī)藥以其多生物活性成分、多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同作用的治療優(yōu)勢(shì)被社會(huì)各界廣泛關(guān)注,其通過對(duì)腫瘤細(xì)胞中的多條信號(hào)通路進(jìn)行有效調(diào)控從而發(fā)揮抗腫瘤的作用,在抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖、促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞自噬和抑制血管化進(jìn)程等方面具有良好的效果,并對(duì)減輕家庭、社會(huì)負(fù)擔(dān)和提高患者的生存質(zhì)量具有較大的意義。因此,基于信號(hào)通路探究中醫(yī)藥治療骨肉瘤擁有廣闊的發(fā)展前景。

但是,現(xiàn)有的研究主要停留在中藥單體及其提取物治療骨肉瘤的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究階段,多為藥物作用于體外骨肉瘤細(xì)胞系的研究,未在實(shí)際的臨床應(yīng)用中考量其治療效果,并且忽略了中醫(yī)辨證論治的特點(diǎn)以及組方中藥和方劑配伍的治療優(yōu)勢(shì)。因此,今后的研究應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注中醫(yī)藥應(yīng)用于骨肉瘤患者的臨床治療效果,并且基于中醫(yī)辨證論治理論以及從方藥配伍角度探討中醫(yī)藥對(duì)骨肉瘤進(jìn)行靶向治療的可能性,以期為中醫(yī)藥更好地應(yīng)用于腫瘤疾病的防治提供新的治療思路。