孫進(jìn)峰，朱海青，張立超

（上海市中醫(yī)醫(yī)院，上海 200071）

腦卒中具有高死亡率、高致殘率、高發(fā)病率等特點(diǎn)，是全球重要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一[1]。腦卒中分為缺血性腦卒中（ischemic stroke，IS）和出血性腦卒中（hemorrhagic stroke，HS），其中缺血性腦卒中是最常見(jiàn)的一種類型。根據(jù)一項(xiàng)大型流行病學(xué)調(diào)查顯示，全球腦卒中人群中約有84.4%的缺血性腦卒中患者[2]，而我國(guó)缺血性卒中患病率為676.7/10萬(wàn)，其發(fā)生率約為出血性腦卒中的3.8倍[3]。目前西醫(yī)對(duì)IS治療方法有限，僅有美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（food and drug administration，F(xiàn)DA）批準(zhǔn)的重組組織型纖溶酶原激活劑（recombinant tissue-type plasminogenactivator，rt-PA）[4]用于其治療，但仍存在不少副作用[5]。近幾年來(lái)，大量研究證明中醫(yī)藥治療IS有良好的療效，有促進(jìn)炎癥因子釋放、抗氧化、修復(fù)神經(jīng)元等作用[6-7]。而中藥質(zhì)量是保障中藥臨床療效發(fā)揮的基礎(chǔ)，也是治療IS的關(guān)鍵。因此，保證中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、有效性、安全性、合理性是中醫(yī)藥發(fā)展現(xiàn)代化的首要任務(wù)。然而，現(xiàn)行的中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)難以全面客觀地評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量，同時(shí)也不能有效地控制中藥的質(zhì)量。2016年3月，國(guó)務(wù)院發(fā)布的《關(guān)于促進(jìn)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的指導(dǎo)意見(jiàn)》中，提出“完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，健全以《中華人民共和國(guó)藥典》為核心的國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)體系”的要求。2016年劉昌孝院士提出了中藥質(zhì)量標(biāo)記（Q-marker）這一新概念，該理念主要圍繞中藥的生物屬性、制藥過(guò)程、配伍理論等進(jìn)行闡述[8]。他指出Q-marker是一種存在于中藥材和中藥產(chǎn)品本身固有的或加工過(guò)程中所形成的與中藥功能屬性相關(guān)的一種化學(xué)物質(zhì)，對(duì)該成分物質(zhì)可進(jìn)行定性定量分析，并通過(guò)分析反映出藥物安全性和有效性的標(biāo)志物。因此，更好治療缺血性腦卒中的關(guān)鍵之一就是尋找相關(guān)的中藥標(biāo)志物。目前根據(jù)中醫(yī)基礎(chǔ)理論，治療缺血性腦卒中的藥物可分為活血化瘀藥、祛風(fēng)解表藥、益氣活血藥等。臨床常用藥包括川芎、丹參、當(dāng)歸、黃芪、銀杏葉等。本文對(duì)治療缺血性腦卒中的中藥質(zhì)量標(biāo)志物研究進(jìn)行回顧和總結(jié)，并進(jìn)行預(yù)測(cè)，以期為中醫(yī)藥治療缺血性腦卒中的發(fā)展提供一些依據(jù)和思路。

1 基于化學(xué)物質(zhì)成分的中藥質(zhì)量標(biāo)志物研究

1.1 基于植物親緣學(xué)及化學(xué)成分特有性的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè) 植物親緣是植物在演變過(guò)程中逐步形成的近或遠(yuǎn)親的緣關(guān)系。植物親緣相近意味著有著類似的形態(tài)和生理特性，因此成分往往也相似[9-10]。藥用植物親緣學(xué)主要研究藥用植物的親緣關(guān)系，該學(xué)科是研究防治腦卒中類中藥質(zhì)量標(biāo)志物的重要學(xué)科之一，同時(shí)可為藥用植物研發(fā)提供最基礎(chǔ)的工具。天南星科（Araceae）是被子植物門（Angiospermae）單子葉植物綱。該科有50%以上的藥用植物，如白附子、石菖蒲等，這兩種植物屬于較近的親緣關(guān)系。白附子為天南星科植物獨(dú)角蓮的干燥塊莖，具有化痰祛風(fēng)止痙、解除體內(nèi)毒素、消散結(jié)節(jié)的功效[11-12]，是我國(guó)貴州等地區(qū)特有的植物。通過(guò)高效液相色譜法、硅膠等方法，從白附子70%乙醇提取物中分離出的小檗堿、白附子腦苷類等化學(xué)成分，可能是其保護(hù)神經(jīng)的有效成分[13]。吳啟端等[14]采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）對(duì)石菖蒲進(jìn)行提取分析，共提取7種成分，包括順式甲基異丁香酚、反式甲基異丁香酚、β-石竹烯、β-細(xì)辛醚和α-細(xì)辛醚等，故上述成分可作為天南星科屬治療腦卒中的Q-marker篩選參考。楊建波等[15]對(duì)傘形科藁本屬植物茶芎進(jìn)行不同組分抗腦卒中的活性篩選，發(fā)現(xiàn)組分B具有較好的活性，包括酞類、有機(jī)酸類、黃酮類、香豆素類和生物堿類等成分，能增加冠狀動(dòng)脈血流量、舒張血管[16-19]。同屬傘形科植物的川芎也具有行氣活血的功效，其主要成分也為生物堿類活性成分川芎嗪[20]。因此，這些成分可用于預(yù)測(cè)傘形科藁本屬中藥植物的質(zhì)量標(biāo)志物。

上述研究顯示，同科屬植物往往具有類似的藥用功效，同時(shí)發(fā)揮治療作用也往往是同科植物共同的化學(xué)成分，因此同種屬中藥對(duì)腦卒中疾病的療效也往往相似，這也是基于植物親緣屬性關(guān)系的原因?？梢?jiàn)，基于親緣關(guān)系與中藥屬性的分析，可作為預(yù)測(cè)中藥質(zhì)量標(biāo)志物的重要手段之一。

1.2 基于化學(xué)成分可測(cè)性的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析 張鐵軍等[21]在提出中藥標(biāo)記物時(shí)，也明確了質(zhì)量標(biāo)志物的基本要求。類成分、全息成分、指標(biāo)性成分等都可以作為判斷的標(biāo)志。指標(biāo)性成分一般是指在中藥中能代表同類結(jié)構(gòu)功效的、含量較大的代表性成分。如燈盞細(xì)辛又稱燈盞花，是菊科植物短葶飛蓬的干燥全草，具有通絡(luò)活血止痛、發(fā)散風(fēng)邪、祛除寒邪的功效，對(duì)中風(fēng)后半身偏癱、胸痹心痛等疾病具有一定的療效[22]。多數(shù)研究均認(rèn)為燈盞細(xì)辛中的燈盞乙素是其主要活性成分。然而楊文宇等[23]采用HPLC（高效液相色譜法）對(duì)燈盞花注射液和燈盞花素片進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，其主要成分還有咖啡?？鼘幩犷惛哂跓舯K乙素占比，占95%以上。任琦等[24]采用HPLC對(duì)燈盞細(xì)辛的總多酚含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其中較高的也為咖啡?？鼘幩犷??？梢?jiàn)，從化學(xué)成分角度來(lái)看，奎寧酸類是燈盞細(xì)辛中含量較大的主要成分，屬于指標(biāo)性成分，可作為中藥質(zhì)量標(biāo)記物進(jìn)行篩選。姚建標(biāo)[25]采用液質(zhì)聯(lián)用分析技術(shù)，對(duì)銀杏葉中的化學(xué)組分進(jìn)行提取，同時(shí)整合核磁共振波譜等技術(shù)，分析得出銀杏葉中的5種有機(jī)酸成分，包括沒(méi)食子酸、原兒茶酸、對(duì)羥基苯甲酸、6-羥基犬尿喹啉酸和莽草酸，并進(jìn)一步考察其對(duì)缺血性腦卒中腦組織損傷的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)銀杏葉中的總有機(jī)酸對(duì)低氧糖剝奪/復(fù)灌后神經(jīng)細(xì)胞ROS水平有顯著降低作用。同時(shí)，50 mg/kg的6-羥基犬尿喹啉酸可顯著降低小鼠腦梗死體積，并顯著改善其爬行錯(cuò)步率。因此，該結(jié)果可為將總有機(jī)酸作為銀杏葉提取物的質(zhì)量控制標(biāo)志提供依據(jù)。類成分反映一類活性的總體功效，在質(zhì)量評(píng)價(jià)中也非常重要。王新娜[26]應(yīng)用全譜分析法（HPLC-MS/MS）對(duì)醒腦健神方的有效活性成分進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其復(fù)方中濃度表達(dá)較高的成分是黃酮榕堿和槲皮素-3,4'-二-O-葡糖苷等。這兩類組分可以顯著改善因缺氧而損傷的細(xì)胞活性，同時(shí)使細(xì)胞發(fā)生三甲基化、乙?；?、乳酸化及泛素化的修飾變化，故這兩類組分能作為醒腦健神方治療缺血性腦卒中的質(zhì)量標(biāo)志物篩選標(biāo)準(zhǔn)。全息成分是在所用分析方法下能夠顯現(xiàn)的成分。如黃明敏[27]采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap MS分析技術(shù)，對(duì)腦脈通提取液進(jìn)行定性分析，識(shí)別出216個(gè)化合物，并在大鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)大黃酸、大黃酸-8-O-葡萄糖苷、葛根素等成分可通過(guò)調(diào)節(jié)缺血性腦中風(fēng)過(guò)程中的PTGS2、AKT1、VEGFA等基因的表達(dá)，調(diào)控PI3K/AKT、TNF信號(hào)通路，激活腦血管生成，抑制細(xì)胞凋亡，治療缺血性腦卒中。所以，這些成分都可作為Q-marker進(jìn)行挑選。

中藥理化成分復(fù)雜，“有效作用成分”和“無(wú)效作用成分”還無(wú)法完全清楚?，F(xiàn)有的藥物分析手段尚無(wú)法完全滿足中藥成分的穩(wěn)定性與專屬性的分析。中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)提出通過(guò)建立“點(diǎn)-線-面-體”的質(zhì)量控制模型將中藥化學(xué)成分變?yōu)椤翱蓽y(cè)”。根據(jù)上述文獻(xiàn)回顧，治療缺血性腦卒中的中藥檢測(cè)若基于“點(diǎn)-線-面-體”質(zhì)控模型進(jìn)行高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜等分析，可進(jìn)一步解決復(fù)雜成分中藥質(zhì)量標(biāo)志物的篩選。

1.3 基于藥物動(dòng)力學(xué)的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析 藥物動(dòng)力學(xué)是研究基于藥物原型成分和入血成分以及代謝結(jié)果在體內(nèi)吸收、分布、代謝等過(guò)程（ADME/T）及其動(dòng)力規(guī)律的一門學(xué)科[28]。藥物動(dòng)力學(xué)是中藥有效性物質(zhì)表達(dá)和基礎(chǔ)的客觀證據(jù)。因此，藥動(dòng)學(xué)研究可揭示不同藥物之間的交互作用、傳輸、靶向等規(guī)律及路徑[29]。

米楠[30]采用超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS）分析平臺(tái)結(jié)合UNIFI和智能化統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)大鼠口服復(fù)方丹蛭片后通過(guò)血腦屏障的成分進(jìn)行分析比較，最終篩選出黃酮類、丹參酮類、呋喃磺酸類等成分。此方法可為藥動(dòng)學(xué)研究Q-marker的篩選提供參考依據(jù)。沈曉[31]采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析黃芪桂枝五物湯入腦血成分，根據(jù)測(cè)定結(jié)果建立HPLC-MS/MS測(cè)定血漿中黃芪桂枝五物湯的主要成分毛蕊異黃酮、毛蕊異黃酮苷及芍藥苷的含量。同時(shí)其采用HPLC檢測(cè)方法進(jìn)行黃芪桂枝五物湯藥動(dòng)學(xué)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)增加芍藥苷及6-姜辣素在血液中的含量，降低毛蕊異黃酮苷、毛蕊異黃酮血液中的含量，可影響芍藥苷及毛蕊異黃酮在腦內(nèi)的表觀分布容積。因此，該方法可成為藥動(dòng)學(xué)研究Q-marker篩選工具之一。

中藥質(zhì)量標(biāo)志物是以“性-效-物”關(guān)聯(lián)為基礎(chǔ)的中藥核心質(zhì)量控制概念。“性-效-物”分別指的是“藥性”“藥效”“物質(zhì)基礎(chǔ)”，“物質(zhì)基礎(chǔ)”即有效成分關(guān)聯(lián)[21]。一般而言，有效成分進(jìn)入血液后的原型成分和它的代謝產(chǎn)物才是有治療效果的“效應(yīng)成分”。效應(yīng)成分的藥動(dòng)學(xué)規(guī)律不僅將“藥性”和“藥效”進(jìn)行了關(guān)聯(lián)。還對(duì)其藥效學(xué)有著重要意義，因此藥動(dòng)學(xué)研究是Q-marker篩選和確定重要的環(huán)節(jié)。

2 基于生物學(xué)技術(shù)中藥質(zhì)量標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)

中藥治療腦卒中一般很少以單種藥物形式出現(xiàn)，主要以藥物配伍形成方劑的形式出現(xiàn)，根據(jù)不同病證的腦卒中進(jìn)行藥物配伍。方劑往往遵循“君臣佐使”的原則，通過(guò)多種天然產(chǎn)物（如植物、動(dòng)物、礦物質(zhì)等）的結(jié)合，達(dá)到綜合協(xié)同治療的效果。但是中藥組方中含有多種化合物，對(duì)它們的作用機(jī)制和生物活性成分的研究難度很大。

2.1 基于代謝組學(xué)的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析 徐敉等[32]采用線栓法建立缺血性腦卒中大鼠模型，給予血府逐瘀湯液[含生藥10 g/（kg·d）]連續(xù)灌胃2周治療，并建立假手術(shù)組和模型組。其采用超高效液相-四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀（UPLCQ-TOF/MS）檢測(cè)各組大鼠血清代謝譜的變化情況，發(fā)現(xiàn)血府逐瘀湯對(duì)IS發(fā)揮保護(hù)作用的代謝途徑主要有氨基酸代謝，包括丙氨酸代謝、天冬氨酸代謝和谷氨酸代謝、精氨酸代謝等。張聰?shù)萚33]對(duì)急性腦缺血模型大鼠腦組織勻漿液進(jìn)行代謝組學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，塞絡(luò)通組中延胡索酸、谷胱甘肽、脫氫抗壞血酸、天門冬氨酸等異常變化的生物標(biāo)志物水平明顯回調(diào)。陳曦等[33]研究發(fā)現(xiàn)中等劑量腦脈通（3.0 g/kg）能夠有效抑制大腦中動(dòng)脈阻斷（MCAO）模型大鼠血漿中谷氨酰胺、?；撬?、乳酸等物質(zhì)的升高，提高脂類、膽固醇、3-羥基丁酸、乙酰乙酸谷氨酸、膽堿等的水平，使之趨于正常，并能有效緩解模型大鼠腦組織能量代謝紊亂，緩解腦卒中缺血的病理?yè)p傷。郭志麗等[35]給予模型大鼠注射丹紅注射液后，采用代謝組學(xué)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)大鼠血清中絲氨酸、天門冬酰胺、甘氨酸水平指標(biāo)水平明顯回調(diào)。張英豐等[36]采用大腦動(dòng)脈阻塞法復(fù)制缺血性腦卒中模型，在丹參川芎水煎液凍干物末次給藥后進(jìn)行腦組織采集，然后采用UPLC-Q-TOF/MS進(jìn)行脂質(zhì)學(xué)研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)并鑒定了缺血性腦卒中模型中11個(gè)差異的脂類代謝物。說(shuō)明以脂質(zhì)代謝為切入點(diǎn)可進(jìn)一步揭示藥物對(duì)腦卒中模型干預(yù)的機(jī)制，同時(shí)發(fā)現(xiàn)藥物的標(biāo)志物[37]。

2.2 基于不同配伍中表達(dá)組分的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)分析《回回藥方》曾記載，藏紅花和石菖蒲所組成的蜜煎菖蒲方，專治面癱、半身不動(dòng)。臨床試驗(yàn)證明，蜜煎菖蒲方能明顯改善腦卒中患者的語(yǔ)言障礙和日常生活能力，還能夠顯著降低患者血清總膽固醇和甘油三酯，對(duì)脂質(zhì)代謝紊亂具有調(diào)節(jié)作用[38]。因此，藏紅花和石菖蒲可作為中藥標(biāo)記物進(jìn)行參考?！凹游稖焯禍盵39]中石菖蒲與半夏、天南星、橘紅等燥濕化痰藥合用，可治中風(fēng)舌強(qiáng)不能言，痰迷心竅，神志混亂。此時(shí)石菖蒲在方劑配伍中所表達(dá)的組分為抗抑郁、抗炎及保護(hù)神經(jīng)組織。因此，以上成分均可納入重要標(biāo)志物進(jìn)行參考?，F(xiàn)代藥理研究表明“加味菖蒲郁金湯”[40]主要用于治腦卒中痰瘀阻竅型睡眠障礙，其中石菖蒲的主要化學(xué)成分β-細(xì)辛醚和-α細(xì)辛醚具有治療神志不清、安神定志等作用，因此可將益智、開(kāi)竅等作用成分作為Q-marker藥方配伍進(jìn)行參考。張偉等[41]觀察了當(dāng)歸芍藥散（當(dāng)歸、川芎、白芍、澤瀉、茯苓、白術(shù)質(zhì)量比例為3∶3∶16∶8∶4∶4）活血利水不同配伍對(duì)雄性小鼠血管新生的影響，發(fā)現(xiàn)活血倍量組（當(dāng)歸、川芎、白芍劑量加倍）對(duì)血管新生的貢獻(xiàn)度最大，故以上成分可作為質(zhì)量標(biāo)記物進(jìn)行篩選參考。

因此，中藥質(zhì)量標(biāo)志物的確定應(yīng)該按照“君藥、臣藥、佐藥、使藥”的代表物質(zhì)，同時(shí)基于“有效、特有、傳遞、傳遞與溯源、可測(cè)與處方”五原則[42]。這不僅能體現(xiàn)中藥成分的專屬性、差異性，更能體現(xiàn)基于方-證的配伍環(huán)境，體現(xiàn)中藥表達(dá)方式及客觀物質(zhì)基礎(chǔ)。

3 基于腸道菌群的治療缺血性腦卒中的質(zhì)量標(biāo)志物研究

西醫(yī)認(rèn)為腸道菌群分解代謝產(chǎn)物短鏈脂肪酸（short-chain fatty）可產(chǎn)生降低血脂和血壓的作用，同時(shí)腸道微生物代謝產(chǎn)物三甲胺-N-氧化物（trimethy lamine N-oxide，TMAO）與動(dòng)脈粥樣硬化程度呈正相關(guān)[43-44]。腸道菌群失調(diào)還可以激活傳入神經(jīng)影響大腦活動(dòng)，激活下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPA軸）[45]。以上研究可證明IS的預(yù)后與腸道菌群有著密不可分的關(guān)系。中醫(yī)理論也認(rèn)為“腸腦相通”，脾胃為氣血之源，后天之本，即調(diào)節(jié)腸胃亦能治療IS。近代張錫純《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》[46]中腦充血頭疼篇描述：“治療這種癥狀，首先考慮通大便，等到服藥后，大便通暢時(shí)，那么這個(gè)病就好了一半”?？梢?jiàn)腸道健康與否與腦部疾病有著密切關(guān)聯(lián)。而腸道菌群與腸道功能不可分割，多種細(xì)菌在腸道內(nèi)形成平衡狀態(tài)，互相依存、互相制約，維持機(jī)體胃腸道的正常運(yùn)作[47]。一旦這種平衡被打破，出現(xiàn)菌群失調(diào)，機(jī)體會(huì)出現(xiàn)納差、便溏、便秘等情況[48]。另外，《脾胃論》曰：“脾胃不和，則易生痰、濕、瘀、毒等”。這些都是IS發(fā)病的原因。中醫(yī)學(xué)中“脾”具有維持腸道菌群穩(wěn)定的重要功能，因此菌群失調(diào)是中醫(yī)脾虛的生物學(xué)基礎(chǔ)[49]。由此可見(jiàn)腸道菌群的變化可作為預(yù)測(cè)中藥質(zhì)量標(biāo)志物的一種方法，菌群是否平衡可以檢驗(yàn)藥效[50]。汪戎錦[51]探究了五加科植物刺五加葉主要成分對(duì)IS的治療作用，發(fā)現(xiàn)刺五加葉主要成分黃酮苷類化合物在刺五加葉中含量為37.25%。該成分能夠有效提高動(dòng)物對(duì)低壓、缺氧的耐受能力，同時(shí)具有調(diào)節(jié)脂代謝紊亂、修復(fù)過(guò)氧化損傷、增加Bcl-2蛋白水平、抑制缺血區(qū)細(xì)胞凋亡等作用。王柯威等[52]發(fā)現(xiàn)在刺五加葉中提取的總黃酮可以改善實(shí)驗(yàn)鼠的腦梗死面積，通過(guò)抑制TNF-α表達(dá)，升高腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平從而保護(hù)腦組織，且與蛋白去乙?；负蚄+-Cl-共轉(zhuǎn)運(yùn)體的mRNA及蛋白表達(dá)水平有關(guān)。所以，刺五加科治療缺血性腦卒中的質(zhì)量篩選標(biāo)志范圍可將黃酮納入其中。LI H F等[53]等發(fā)現(xiàn)中藥三七成分中的三七皂苷與腸道菌群有潛在的互作效應(yīng)。三七皂苷能夠抑制腦缺血/再灌注損傷（I/R）誘發(fā)的腸道菌群減少，同時(shí)能夠使I/R損傷的SD大鼠海馬區(qū)γ氨基丁酸表達(dá)上調(diào)，保護(hù)無(wú)菌鼠大腦神經(jīng)，所以三七皂苷質(zhì)量也可以作為腦卒中質(zhì)量標(biāo)志物篩選依據(jù)。

目前，有多項(xiàng)研究證實(shí)腦卒中的患病機(jī)制與腸道菌群有關(guān)。腦卒中治療藥物與腸道菌群呈現(xiàn)相互影響的態(tài)勢(shì)，藥物會(huì)影響菌群，反之菌群也會(huì)影響藥物藥性的發(fā)揮。基于腸道菌群的腦卒中治療相關(guān)研究較少，還不夠成熟，但基于此種方式仍不失為篩選腦卒中中藥質(zhì)量標(biāo)志物的一種手段。

4 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的中藥質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測(cè)研究

藥理學(xué)家HOPKINS于2007年10月首次提出網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)（network pharmacology）這一概念[54]。目前這一概念被廣泛應(yīng)用于中藥、復(fù)方藥物等研究中[55-56]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是融合了計(jì)算機(jī)生物、藥理學(xué)、網(wǎng)絡(luò)分析等多學(xué)科內(nèi)容所構(gòu)建的一種多層次網(wǎng)絡(luò)，通過(guò)分析中藥化合物、靶點(diǎn)、疾病和基因之間的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系網(wǎng)，解讀疾病與中藥基因?qū)用娴南嗷プ饔肹57-58]。這一方法也加速了對(duì)中藥藥效成分及質(zhì)量標(biāo)志物的篩選與考察。朱秋燕等[59]通過(guò)TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)益氣活血開(kāi)竅中藥有效成分，通過(guò)整合GEO、Gene Cards和CTD數(shù)據(jù)庫(kù)獲得疾病靶基因，并使用STRING繪制成分-靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)，采用大鼠腦缺血再灌注模型進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷、人參皂苷RgI、人參皂苷RbI、三七皂苷RI[60]等可能是黃芪、三七發(fā)揮治療腦卒中藥效的主要成分。所以冰片、黃芪、三七等治療腦卒中的Q-marker可能是黃芪甲苷、人參皂苷RgI、人參皂苷RbI、三七皂苷RI、左旋龍腦。劉夢(mèng)等[61]利用TCMSP、swisstargetprediction數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出川芎-紅花的作用靶點(diǎn)，利用Genecard等數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出缺血性腦卒中疾病靶點(diǎn)，同時(shí)進(jìn)行GO分析及KEGG信號(hào)通路富集分析來(lái)預(yù)測(cè)川芎紅花對(duì)疾病作用靶點(diǎn)結(jié)合性，得出黃芩素、β-谷甾醇、豆甾醇、木脂素、紅花素、川芎萘呋內(nèi)酯為治療疾病的主要核心成分。因此，該研究結(jié)果可作為Q-marker的篩選依據(jù)。蔣峰等[62]探究葛根姜黃散治療缺血性腦卒中的有效成分、作用靶點(diǎn)及作用機(jī)制，通過(guò)TCMSP與Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出了中藥復(fù)方葛根姜黃散的有效成分，最終獲得交集基因55個(gè)及5個(gè)有效成分，并通過(guò)進(jìn)一步分析得出芒柄花黃素和β-谷甾醇為主要治療疾病的有效成分，因此上述成分可作為Q-marker篩選依據(jù)。鄧小芳等[63]基于超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法，利用UNIF軟件借助質(zhì)譜儀建立本地?cái)?shù)據(jù)庫(kù)，并基于“疾病-方劑”關(guān)聯(lián)分析，拓?fù)涮卣髦岛Y選核心靶標(biāo)，通過(guò)分子對(duì)接軟件分析膽南星防治缺血性腦卒中的質(zhì)量標(biāo)志物，得出沒(méi)食子酸、芹菜素-6，8-二-C-葡萄糖苷、芹菜素、膽酸可作為Q-marker。

目前，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)被認(rèn)為是一種融合高質(zhì)量生物系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)分析、計(jì)算機(jī)計(jì)算和網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)的高效分析策略，能夠有效地反映中藥成分與靶點(diǎn)性質(zhì)。限定條件下的網(wǎng)絡(luò)藥理分析可發(fā)現(xiàn)中藥質(zhì)量標(biāo)志物，是一種有效的方法。

5 總結(jié)與展望

由于中醫(yī)藥發(fā)揮治療作用是利用中藥“多成分，多靶點(diǎn)，多途徑”的藥理學(xué)特征和其強(qiáng)調(diào)的整體觀、辨證論治的思想[64]，現(xiàn)行的質(zhì)量控制方法存在一定的缺陷，無(wú)法達(dá)到全面評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的效果。質(zhì)量標(biāo)志物正是基于此提出的。經(jīng)過(guò)近十年的發(fā)展，目前中藥質(zhì)量標(biāo)志物研究仍以中藥化學(xué)物質(zhì)研究為主，同時(shí)結(jié)合多種學(xué)術(shù)理論研究，包括采用藥動(dòng)學(xué)、代謝組學(xué)、腸道菌群等方式進(jìn)行研究，并配合以網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，探究中藥治療疾病的機(jī)制，并在機(jī)制層面層層挖掘與篩選其質(zhì)量標(biāo)志物?，F(xiàn)有研究在數(shù)據(jù)處理上采用藥性藥效與化學(xué)成分相關(guān)或成分作為衡量中藥等級(jí)及篩選的標(biāo)志因素。目前中藥治療缺血性腦卒中的文獻(xiàn)主要還是集中在藥物的藥效及藥物機(jī)制上，質(zhì)量控制及質(zhì)量標(biāo)志物研究仍舊較少。但中藥標(biāo)志物是目前公認(rèn)的中藥產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵。本文對(duì)目前中藥治療缺血性腦卒中質(zhì)量標(biāo)志物研究的思路和方法進(jìn)行回顧與總結(jié)，以期為該類研究提供一定的方向和研究思路。