尚曉東 遼陽市中心醫(yī)院新城醫(yī)院檢驗(yàn)科 （遼寧 遼陽 111000）

內(nèi)容提要： 目的：探究與分析羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測血清甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）在診斷肝癌中的應(yīng)用。方法：選取自2018年7月～2022年7月本院收治的89例肝癌患者作為觀察組，并選擇同期收治的80例健康成年人作為對照組，采用羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀對兩組人員血清AFP、CEA的水平進(jìn)行檢測，同時(shí)對比單獨(dú)檢測及聯(lián)合檢測的敏感性與特異性。結(jié)果：觀察組與對照組相比血清AFP及CEA表達(dá)水平較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。血清AFP與CEA聯(lián)合檢測與單獨(dú)檢測AFP或CEA相比敏感性及特異性均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：肝癌患者腫瘤標(biāo)志物中血清AFP、CEA的水平可作為診斷肝癌的一項(xiàng)重要參考指標(biāo)，利用羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀對二者進(jìn)行聯(lián)合檢測相比于單獨(dú)檢測具有更高的敏感性及特異性。

腫瘤標(biāo)志物作為一類在癌基因及其產(chǎn)物異常表達(dá)刺激下，由腫瘤組織及細(xì)胞相關(guān)組織所分泌產(chǎn)生的物質(zhì)，其在腫瘤患者的體內(nèi)具有較高的表達(dá)水平[1]。另外，有資料顯示，在一般情況下，血清腫瘤標(biāo)志物的水平多與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移之間有著密切的相關(guān)性，通過對其水平進(jìn)行檢測，可通過獲得與惡性腫瘤組織發(fā)生、細(xì)胞功能及分化等相關(guān)信息，以此用于完成對惡性腫瘤的早期診斷及分類，同時(shí)還可對其治療結(jié)局提供可靠的參考依據(jù)[2]。因此，對這些指標(biāo)的表達(dá)水平進(jìn)行有效監(jiān)測在輔助判斷疾病狀態(tài)具有重要意義。羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀作為當(dāng)前檢驗(yàn)工作中較為常用的可用于研究細(xì)胞生物學(xué)的一項(xiàng)重要技術(shù)，具有諸多優(yōu)勢，例如操作簡便快捷，結(jié)果精確等特點(diǎn)，同時(shí)也具有較高的診斷靈敏度及特異性[3]?，F(xiàn)本次研究通過對羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測血清甲胎蛋白（α-Fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（Carcinoembryonic Antigen，CEA）在診斷肝癌中的應(yīng)用進(jìn)行探討，結(jié)果報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取2018 年7 月～2022 年7 月本院收治的89 例肝癌患者作為觀察組，并選擇同期收治的80例健康成年人作為對照組。觀察組中男45 例，女44 例，年齡34～71 歲，平均（58.12±3.44）歲，其中包括肝細(xì)胞性肝癌57例，膽管細(xì)胞性肝癌32例，對照組中男49例，女31例，年齡35～73歲，平均（58.24±3.58）歲。兩組性別及年齡無明顯差異，具有可比性。本次實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)倫理會審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：肝癌患者均符合《中國臨床腫瘤學(xué)會（CSCO）原發(fā)性肝癌診療指南（2018.V1）》[4]中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；均經(jīng)過臨床癥狀判斷及影像學(xué)檢查后確診；進(jìn)入到研究前尚未接受任何的放化療等相關(guān)處理；均簽署了關(guān)于本次實(shí)驗(yàn)的知情權(quán)同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他腫瘤性疾病者、其他原發(fā)性肝臟疾病者；合并其他心腦血管疾病者、過敏性疾病者；臨床資料缺失者等。

1.2 方法

采用羅式E601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀對兩組人員血清AFP、CEA的水平測量，同時(shí)對比單獨(dú)檢測及聯(lián)合檢測的敏感性與特異性。測量操作方法：全部人員在進(jìn)入到研究前，在其安靜空腹的狀態(tài)下抽取3mL的靜脈血，分離血清之后，放置在-20°C中保存?zhèn)溆?，隨后使用羅式E601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀及配套試劑對AFP及CEA的水平測量，其中AFP參考值為0～25μg/L、CEA參考值為0～5μg/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2.結(jié)果

2.1 兩組血清AFP及CEA表達(dá)水平對比

觀察組與對照組相比血清AFP及CEA表達(dá)水平較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1.兩組血清AFP及CEA表達(dá)水平對比(±s,ng/mL)

表1.兩組血清AFP及CEA表達(dá)水平對比(±s,ng/mL)

組別n AFP CEA對照組80 7.54±1.54 3.65±0.96觀察組89 85.24±10.32 18.89±2.30 t 66.678 55.108 P 0.000 0.036

2.2 單獨(dú)檢測AFP、CEA與二者聯(lián)合檢測的敏感性及特異性對比

血清AFP與CEA聯(lián)合檢測與單獨(dú)檢測AFP或CEA相比敏感性及特異性均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2.單獨(dú)檢測AFP、CEA與二者聯(lián)合檢測的敏感性及特異性對比

3.討論

近年來，隨著調(diào)查研究報(bào)道的不斷深入，發(fā)現(xiàn)肝癌的發(fā)病率以及病死率呈現(xiàn)出了不斷升高的趨勢，作為臨床上一類較為常見的惡性腫瘤性疾病，好發(fā)于各個(gè)年齡層，對患者的生命健康具有較大的威脅，因此，采取早期可靠的方法對肝癌進(jìn)行準(zhǔn)確診斷具有重要意義[5]。當(dāng)前臨床工作中多采用CT、超聲以及病理學(xué)等作為診斷首選，同時(shí)配合可靠的血清腫瘤標(biāo)志物檢測以完成對惡性腫瘤性疾病的早期診斷。羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀作為當(dāng)前檢驗(yàn)科臨床工作中的一種常用的儀器，屬于一種結(jié)合了電化學(xué)以及化學(xué)發(fā)光原理的分析技術(shù)，主要通過電極反應(yīng)激發(fā)化學(xué)物質(zhì)形成光電信號以達(dá)到檢測目的。該技術(shù)最早從20世紀(jì)60年代開始研究，技術(shù)手段相對較為完善。其作用原理在于利用電極加電壓，由此啟動(dòng)電化學(xué)反應(yīng)過程，利用發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕和電子供體三丙胺在陽極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，二價(jià)釕被氧化成了三價(jià)，并由此成為一種強(qiáng)氧化劑。另外，三丙胺被氧化形成一種很強(qiáng)的還原劑，并能夠?qū)⑵浯偈钩蔀榧ぐl(fā)態(tài)的釕，發(fā)射一個(gè)波長為620nm的光子，并由此形成一個(gè)基態(tài)的釕，發(fā)光標(biāo)記物能夠循環(huán)形成發(fā)光，而光的強(qiáng)度與待測抗原的濃度成正比。在循環(huán)過程當(dāng)中，上述化學(xué)發(fā)光過程后，反應(yīng)體系中仍存在二價(jià)的三氯聯(lián)吡啶釕 [Ru(bpy)3]2+和三丙胺，使電極表面的電化學(xué)反應(yīng)和化學(xué)發(fā)光過程可以繼續(xù)進(jìn)行，從而整個(gè)反應(yīng)過程可以循環(huán)進(jìn)行。通過上述循環(huán)過程，測定信號不斷放大，使檢測靈敏度大大提高。

近期隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展以及各類作用機(jī)制的深入研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤分子生物學(xué)、免疫學(xué)以及人類基因組計(jì)劃等獲得了廣泛的應(yīng)用，同時(shí)開始有越來越多的現(xiàn)代新型檢測設(shè)備獲得了更多的應(yīng)用，這也使得血清腫瘤標(biāo)志物以及腫瘤基因含量的測定開始成為了當(dāng)前腫瘤臨床研究以及基礎(chǔ)研究的重點(diǎn)，其監(jiān)測意義主要可總結(jié)為以下幾點(diǎn)：①針對腫瘤病情的篩查以及對腫瘤高危人群的篩查等；②明確對腫瘤性疾病的臨床診斷鑒別以及實(shí)現(xiàn)輔助性的病理診斷等；③分析并判斷手術(shù)治療、放療以及藥物治療等是否具有突出的臨床療效，能夠使得患者獲益；④在腫瘤實(shí)施相應(yīng)的治療及處理后，通過對腫瘤標(biāo)志物指標(biāo)進(jìn)行觀察，也能夠從側(cè)面反映出腫瘤的變化，判斷腫瘤當(dāng)前的殘留情況，是否出現(xiàn)轉(zhuǎn)移以及復(fù)發(fā)等，具有較高的科學(xué)應(yīng)用價(jià)值。

AFP這種應(yīng)用較為廣泛的血清學(xué)檢測指標(biāo)，在臨床工作中用于診斷肝癌，作為一種最特殊的標(biāo)志物，具有較強(qiáng)的早期診斷，評價(jià)療效以及復(fù)發(fā)等問題的諸多優(yōu)勢，因其合成基因在相應(yīng)的腫瘤細(xì)胞中被激活而產(chǎn)生大量的AFP，從而使其在腫瘤患者血中呈現(xiàn)出較高的表達(dá)水平，因此，多被當(dāng)作是早期篩查及診斷原發(fā)性肝癌的一種可靠指標(biāo)[6]。有調(diào)查資料顯示，因?yàn)锳FP由肝癌細(xì)胞產(chǎn)生，因此，當(dāng)體內(nèi)僅有少量癌變細(xì)胞時(shí)，AFP即可升高[7]。根據(jù)AFP升高對肝癌作出診斷，可早于肝癌癥狀出現(xiàn)6～12個(gè)月，有助于對肝癌作出早期診斷，從而早期治療，有助于改善肝癌的治療效果。另外，肝癌血清中的AFP主要由肝癌細(xì)胞產(chǎn)生，因此AFP含量在一定程度上可反映腫瘤的情況。臨床研究發(fā)現(xiàn)，AFP的濃度及其動(dòng)態(tài)變化與肝癌患者的癥狀、預(yù)后和肝癌分化程度有關(guān)[8]。單獨(dú)使用AFP檢測原發(fā)性肝癌的準(zhǔn)確率在60%～70%，且靈敏度也維持在70%左右，與本次研究研究結(jié)果中單獨(dú)使用AFP的敏感性及特異性結(jié)果84.27%（75/89）、66.67%（66/99）基本一致。原因是AFP也會在一些良性肝病患者的體內(nèi)呈現(xiàn)出較高的表達(dá)水平，因此，從實(shí)驗(yàn)角度出發(fā)無法通過單獨(dú)檢測AFP以完成對肝癌的早期診斷，容易出現(xiàn)一定的漏診率及誤診率。CEA作為一種與AFP相類似的腫瘤基因表型標(biāo)志物，是一種相對分子質(zhì)量為1.8×103的糖蛋白，在胚胎時(shí)期或者胎兒期即可產(chǎn)生，不過在新生兒出生之后，這類抗原則開始受到抑制，因此，在正常人的體內(nèi)很少能被檢測到，但是在異常的癌細(xì)胞之上，CEA的含量則會明顯提升，同時(shí)CEA還可對癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移產(chǎn)生一定的促進(jìn)作用[9]。最初在胃、腸道癌癥患者的血清中可測到CEA的異常表達(dá)，后又逐步在肺癌、肝癌、乳腺癌及胰腺癌患者的血清中測出。同時(shí)，有研究資料顯示，在原發(fā)性肝癌中，由于其對肝癌細(xì)胞的敏感性及特異性不如AFP，因此CEA臨床多與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測來提高肝癌的診斷價(jià)值[10]。不過，在隨后的研究中也發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)檢測CEA用于肝癌的早期診斷同樣無法獲得滿意的準(zhǔn)確率，與本次結(jié)果基本一致，即單獨(dú)檢測CEA的敏感性為86.52%（77/89）、特異性為68.69%（68/99）。因此，開始有越來越多的研究通過二者聯(lián)合檢測可通過減少對肝癌的漏診率及誤診率，而獲得更高的肝癌診斷靈敏度及特異度。本次結(jié)果顯示，血清AFP與CEA聯(lián)合檢測與單獨(dú)檢測AFP或CEA相比敏感性96.63%（86/89）及特異性80.81%（80/99）均較高，符合上述有關(guān)研究及報(bào)道[11,12]。

另外，本次研究中所使用的羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀在檢測血清腫瘤標(biāo)志物診斷肝癌等疾病中具有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢：①可充分用于對臨床免疫學(xué)相關(guān)指標(biāo)的檢測，最大程度地拓展了臨床診斷及治療所需的檢測項(xiàng)目；②具有較高的準(zhǔn)確度，且檢測操作的工作效率也較高；③收集樣本的方法較為簡單，不會對患者造成不必要的損傷，易于被接受及認(rèn)可[13-15]。

綜上所述，肝癌患者腫瘤標(biāo)志物中血清AFP、CEA的水平可作為診斷肝癌的一項(xiàng)重要參考指標(biāo)，利用羅式全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀對二者進(jìn)行聯(lián)合檢測相比于單獨(dú)檢測具有更高的敏感性及特異性。在今后的研究中，可進(jìn)一步擴(kuò)大研究樣本量，深入探討及分析血清AFP、CEA水平的檢測價(jià)值，為接下來疾病的診斷及治療提供有利的參考價(jià)值以及臨床研究依據(jù)。