王若沖 吳鳳芝 戴 寧 江 洋 廖文勇 張煒悅 李 峰

(北京中醫(yī)藥大學(xué),北京,102488)

脾虛濕盛證,又稱脾虛濕困證、脾虛濕滯證,因飲食不節(jié)、勞倦過度或思慮過度,或年老體弱,久病虛損導(dǎo)致脾胃虛弱,運化水濕功能失常;亦可由久居濕地、涉水淋雨等外濕因素引起,臨床以脘腹痞脹或痛,泛惡欲吐,食少、納呆,頭身困重,倦怠乏力,肢體浮腫,大便糖稀或泄瀉,小便短少,可伴見水腫,腹水等為癥狀[1-2]。現(xiàn)代研究表明,脾虛濕盛證是肥胖癥[3]、支氣管擴張[4]、腹瀉型腸易激綜合征[5]、潰瘍性結(jié)腸炎[6]等多種疾病的主要證型,嚴(yán)重影響人們的生命質(zhì)量;2020年頒布的《疲勞性亞健康的判定及中醫(yī)證候辨識》中指出脾虛濕困證是疲勞型亞健康中醫(yī)基本證型之一[7]。為了深入探討脾虛濕盛證的本質(zhì)及探尋有效的治療與干預(yù)方法,諸多研究者從不同角度構(gòu)建了脾虛濕盛證動物模型。但與脾虛不同,脾虛濕盛的病因、病機更復(fù)雜,導(dǎo)致動物模型的建立也更為復(fù)雜。20世紀(jì)末,開始出現(xiàn)相關(guān)動物模型的文獻報道[8-9],近十年來研究逐步深入、成果逐漸豐富,脾虛濕盛證動物模型的構(gòu)建已成為現(xiàn)代中醫(yī)脾胃病研究與中醫(yī)證候研究的熱點,但目前來看仍不夠完善并存在一些不足。本文對脾虛濕盛證造模思路與方法、脾虛濕盛證動物模型評價指標(biāo)進行梳理、總結(jié)與探討,并對現(xiàn)有問題進行剖析、對研究發(fā)展方向進行展望,以期推動其發(fā)展。

1 脾虛濕盛證造模思路與方法

《素問·至真要大論篇》曰:“諸濕腫滿,皆屬于脾?！毖悦髌⒅\化失司是“濕”產(chǎn)生的關(guān)鍵,但濕為陰邪,易損傷陽氣,濕邪困脾則又會影響脾胃的功能,二者可互為因果、相互作用導(dǎo)致脾虛濕盛證的形成。目前脾虛濕盛證的動物模型即以病因作為切入點與思路構(gòu)建模型,主要以飲食失宜、勞逸失度、久居濕地等作為造模因素。

1.1 單因素法

1.1.1 飲食失宜法 中醫(yī)認(rèn)為,過食肥甘厚味會導(dǎo)致中焦壅遏,脾運失常,濕濁內(nèi)生[1],飲食失宜的單因素法中主要通過對嚙齒類動物進行高脂飼料喂養(yǎng),常應(yīng)用于脾虛濕盛肥胖癥的模型建立。如陳蘭玉等[10]對雄性小鼠連續(xù)10周高脂飼料喂養(yǎng)建立脾虛濕阻盛證肥胖小鼠模型,發(fā)現(xiàn)模型組小鼠體質(zhì)量及糞便含水量明顯增高、轉(zhuǎn)棒儀實驗中表現(xiàn)出明顯疲勞癥狀。

1.1.2 久居濕地法 久居濕地法是通過將實驗動物長期放置于高濕度環(huán)境從而構(gòu)建模型的一種方法,如王昕等[11]將大鼠放于相對濕度90%～100%的自制造模箱內(nèi),每天14 h共持續(xù)45 d,成功建立濕傷脾陽證大鼠模型。張六通等[12]延長了造模時間,將大鼠每天放置于底部有2 cm的厚濕鋸末的自制造模箱內(nèi)12 h(相對達(dá)濕度(90±5)%),造模持續(xù)108 d。實驗結(jié)束后發(fā)現(xiàn),模型組大鼠胃泌素含量下降,胃動素增加,免疫力下降,腸道菌群失衡,且大鼠宏觀體征符合脾虛濕盛證的表現(xiàn)。李蓉[13]將小鼠放置于4 ℃低溫高濕度的環(huán)境下連續(xù)7 d,每天4 h,發(fā)現(xiàn)小鼠不僅出現(xiàn)脾虛癥狀,如毛發(fā)暗淡無光澤且稀疏、體質(zhì)量減少等;還出現(xiàn)濕盛的癥狀,如足背皮膚浮腫,大便糖稀等,并認(rèn)為此方法很好地模擬了外感寒濕損傷脾陽的過程與表現(xiàn)。

1.2 復(fù)合雙因素法

1.2.1 飲食失宜法聯(lián)合久居濕地法 郭金龍和顏正華[9]于1988年首先采用肥甘厚味飲食法聯(lián)合久居濕地法構(gòu)建大鼠脾虛濕盛證模型,將大鼠連續(xù)5 d飼養(yǎng)于相對濕度(95±3)%的環(huán)境中,并每天給予大鼠含有20%的蜂蜜飲品50 mL,在造模開始及結(jié)束后的第48、96 h給予大鼠豬油灌胃20 g/只,造模結(jié)束后,造模動物出現(xiàn)了不欲飲水,食欲不振,倦怠便溏、體質(zhì)量降低,體溫升高等表現(xiàn)。王劍和趙若龍[14]每天8:00-12:00時及14:00-18:00時將小鼠置于濕度(90±5)%的人工箱內(nèi),并且每天給予小鼠灌胃熟地黃混合液(熟地黃、牡蠣、啤酒、花生油制備)0.5 mL/只,造模共持續(xù)6 d,發(fā)現(xiàn)小鼠出現(xiàn)濕困脾胃證的表現(xiàn),經(jīng)藿香正氣液治療后基本恢復(fù)正常水平。朱夢夢等[15]首先采用高脂飼料喂養(yǎng)小鼠3周,于第4周將墊料加水營造外濕環(huán)境(50 g/100 mL),累計造模10周,將脾虛濕阻證的一般狀態(tài)總結(jié)為模型篩選表,并配合糞便含水量以及疲勞轉(zhuǎn)棒儀實驗對造模小鼠進行篩選,最終發(fā)現(xiàn)脾虛濕阻型單純性肥胖小鼠造模成功率高于80%。

1.2.2 飲食失宜法聯(lián)合勞倦過度法 高潔等[16]為探討脾虛水濕不化大鼠模型的胃腸功能,在每天高脂低蛋白飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上,以負(fù)重力竭游泳作為過勞因素,連續(xù)造模60 d,建立大鼠脾虛水濕不化模型。模型組大鼠血清淀粉酶含量、胃泌素含量及尿中D-木糖的排泄率均顯著降低,表明脾虛水濕不化狀態(tài)下大鼠胃腸功能會出現(xiàn)下降。趙文曉等[17]及楊彬彬等[18]也以高脂低蛋白飼養(yǎng)聯(lián)合負(fù)重力竭游泳的方法,分別對大鼠進行連續(xù)48 d及56 d的實驗后成功構(gòu)建了大鼠脾虛濕困證模型。

此外也有學(xué)者在肥甘厚味的基礎(chǔ)上增加了饑飽無度及過食寒涼的造模因素構(gòu)建動物模型。如劉金蓮等[19]單日以高脂飼料喂養(yǎng)大鼠,雙日對大鼠禁食,并且每天對大鼠進行力竭游泳訓(xùn)練,共持續(xù)28 d。發(fā)現(xiàn)大鼠具備脾虛濕盛證的一般表現(xiàn)與宏觀體征,并以胃泌素、胃動素等作為脾虛相關(guān)指標(biāo),白蛋白、醛固酮等作為濕盛指標(biāo),對模型進行了系統(tǒng)評價。陳浩等[20]首先在高脂飼料喂養(yǎng)的基礎(chǔ)上,對大鼠進行2次/d,2 mL/(次·只)的冰糖水灌胃,同時每天對大鼠進行力竭游泳訓(xùn)練。造模后檢測大鼠脾虛濕盛相關(guān)指標(biāo),并以肝腎功能的多項指標(biāo)作為排除肝郁氣滯、脾腎兩虛等證型的依據(jù),確定此方法建立了脾虛濕阻證肥胖動物模型。

1.3 復(fù)合多因素法 復(fù)合多因素法常選用飲食失宜法、勞倦過度法及久居濕地法等中的3～4個造模因素進行模型構(gòu)建,如劉瑤等[21]建立濕困脾胃證亞健康大鼠模型,將模型組大鼠飼養(yǎng)于濕度(90±5)%的實驗室內(nèi),并且每天將大鼠放置于4 cm深的水籠中8 h,飲食為單日禁食,雙日喂養(yǎng)高脂飼料;并于造模的第1天、第4天、第7天強迫大鼠高強度游泳,當(dāng)大鼠頭沉入水面后短暫拿出休息,然后再次放入水中,連續(xù)5次后結(jié)束游泳,共計造模10 d。發(fā)現(xiàn)模型組大鼠與健康大鼠相比出現(xiàn)飲水量下降,大便糖稀,皮毛渾濁,活動能力下降,精神萎靡,體質(zhì)量減輕等癥狀,通過生化指標(biāo)檢測發(fā)現(xiàn)模型組大鼠的免疫及代謝功能下降,并采用藿香正氣散進行藥物反證。孫冬月和高慧[22]使用中間帶有隔板的水籠,使大鼠站立于隔板之上,隔板下水深3 cm,模擬外濕環(huán)境;同時每天強迫大鼠進行20 min的游泳;飲食方面單日正常飲食豬油灌胃,雙日禁食冰水灌胃。通過宏觀體征觀察、胃腸功能檢測及能量代謝等指標(biāo)檢驗?zāi)Ｐ汀?/p>

此外,在脾虛濕盛證動物模型構(gòu)建中,改良多平臺水環(huán)境法與水籠法,可作為一種復(fù)合因素進行造模。改良多平臺水環(huán)境法是將嚙齒類動物放入一個特制水箱的小平臺上,平臺下1 cm由水注滿,強迫實驗動物在平臺上站立[23]。水籠法是將大鼠放置于2～4 cm水深的籠內(nèi)飼養(yǎng)[24],此2種方法利用嚙齒類動物天生畏水習(xí)性,當(dāng)其休息或入睡時即會落入水中驚醒,從而一直保持站立狀態(tài)。改良多平臺水環(huán)境法及水籠法不僅可以模擬外濕侵襲的因素,還可模擬久立勞倦的因素。2008年張豐華等[25]首次應(yīng)用此方法將大鼠放置于4 cm深的水籠中,每天強迫其站立8 h,配合饑飽無度法(單日禁食灌胃4 ℃冰水,雙日大鼠正常飲食灌胃豬油),連續(xù)造模20 d,建立濕困脾胃證大鼠模型,此外張豐華根據(jù)文獻調(diào)研與大鼠生物學(xué)特征,制定了脾虛濕困證模型宏觀癥狀診斷標(biāo)準(zhǔn),此后研究者多以此為標(biāo)準(zhǔn)評價動物模型。熊艷玲等[26]復(fù)制此方法進行模型構(gòu)建,將原本的20 d實驗時長延長到了48 d,并通過改進的脾虛濕困證宏觀標(biāo)準(zhǔn)、脾虛濕困證動物模型癥狀積分評分標(biāo)準(zhǔn)評價模型建立。此外,亦有研究調(diào)整飲食失宜因素,如單日豬油灌胃[27],雙日禁食(但不灌冰水)與水籠法相配合,但方法大同小異此處不再贅述。

改良多平臺水環(huán)境法多應(yīng)用于脾氣虛證的模型構(gòu)建,近年來也有部分研究從理論方面討論了改良多平臺水環(huán)境法聯(lián)合飲食失宜等因素建立脾虛濕盛證動物模型的可能性[28-29]。孟高達(dá)[30]建立脾虛濕阻型功能性腹瀉大鼠模型,給予大鼠高乳糖飼料喂養(yǎng),并采用改良多平臺水環(huán)境法對大鼠進行每天進行10 h的強迫站立,造模時間為兩周,發(fā)現(xiàn)模型組大鼠出現(xiàn)明顯消瘦、便溏、自主活動減少等脾虛濕阻證癥狀,血清中D-木糖含量遠(yuǎn)低于空白組,小腸吸收率下降,并以參苓白術(shù)散作為藥物反證取得良好療效,認(rèn)為采用高乳糖喂養(yǎng)聯(lián)合改良多平臺水環(huán)境法可建立功能性腹瀉脾虛濕證的大鼠模型。

2 脾虛濕盛證動物模型評價指標(biāo)

模型的評價標(biāo)準(zhǔn)是模型構(gòu)建中至關(guān)重要的一部分,動物模型是否可以良好地模擬出臨床疾病及相關(guān)證型,需要客觀、準(zhǔn)確及科學(xué)的評價標(biāo)準(zhǔn)。目前,脾虛濕盛證動物模型主要從動物模型似人的癥狀表現(xiàn);借助先進技術(shù)檢驗的客觀指標(biāo)2個方面進行模型評價。

2.1 動物模型癥狀及表征評價 臨床中辨證是證型診斷的基礎(chǔ),動物模型中“辨證”則需要將人體癥候表現(xiàn)與模型動物的生物學(xué)特性相聯(lián)系,制定診斷標(biāo)準(zhǔn)。張豐華等[25]根據(jù)《中醫(yī)證候規(guī)范》《中醫(yī)證候病理學(xué)》《中醫(yī)濕病學(xué)》等書籍并結(jié)合大鼠生物學(xué)特征,從模型形成的時間及自然恢復(fù)速度、生活狀態(tài)、食量等8個方面制定了濕困脾胃證大鼠模型的宏觀癥狀診斷標(biāo)準(zhǔn)。此后李姿慧等[31]、熊艷玲等[26]也分別根據(jù)文獻及大鼠生物學(xué)特性制定了脾虛濕困證大鼠模型宏觀體征診斷標(biāo)準(zhǔn)。目前研究者評價脾虛濕盛證模型大鼠的宏觀體征多選用以上3種評價標(biāo)準(zhǔn)。見表1。此外,熊艷玲等[26]還根據(jù)大便、飲食、體質(zhì)量增長率、倦怠表現(xiàn)及皮毛狀態(tài)分為5個評分模塊,每個模塊根據(jù)動物的相應(yīng)狀態(tài)以0～4分進行量化評價,建立了大鼠脾虛濕困模型癥狀量化積分表。當(dāng)總積分≥4分,可視為模型建立成功;當(dāng)4≤總積分≤5視為輕度,6≤總積分≤10分為中度,>10分為重度。見表2。

表1 大鼠脾虛濕困證模型宏觀癥狀常用評價標(biāo)準(zhǔn)

表2 脾虛濕困大鼠模型癥狀量化積分

2.2 客觀評價指標(biāo)

2.2.1 疲勞相關(guān)指標(biāo) 脾虛會表現(xiàn)出神疲乏力、少氣懶言、肢體倦怠等癥狀;濕邪重濁黏滯,可阻礙氣機運行,留滯肢體經(jīng)絡(luò),導(dǎo)致肢體沉重、倦怠乏力等疲勞表現(xiàn)。因此脾虛濕盛證中疲勞是一個重要的評價因素。行為學(xué)實驗中可通過轉(zhuǎn)棒儀疲勞實驗、負(fù)重力竭游泳實驗及抓握力實驗等進行評價,生化指標(biāo)中ATP、乳酸、乳酸脫氫酶、尿素氮及磷酸肌酸激酶等均是判斷脾虛濕盛證模型疲勞狀態(tài)的重要指標(biāo)。研究表明,脾虛濕困證模型組大鼠血清乳酸、乳酸脫氫酶、尿素氮下降,負(fù)重力竭游泳時間減少[32-33]。此外有研究者從能量代謝方面進行研究,發(fā)現(xiàn)脾虛濕盛證大鼠血糖與鈉鉀泵(Na+-K+-ATP酶)、鈣泵(Ca2+-ATP酶)會出現(xiàn)下降[30,34]。

2.2.2 胃腸功能指標(biāo) 脾虛濕盛可導(dǎo)致脾胃運化失司,消化系統(tǒng)功能下降,因此胃腸功能衰退和(或)損傷是脾虛濕盛證評價的重要指標(biāo)之一,多體現(xiàn)于胃腸動力功能下降與胃腸黏膜損傷。胃排空率、小腸推進率,胃動素是判斷胃腸道運動功能的重要指標(biāo)[35],如劉瑤和劉偉[36]通過水籠法聯(lián)合勞倦過度法、飲食失宜法建立亞健康脾虛濕困模型,發(fā)現(xiàn)大鼠胃殘留率升高,小腸推進率減少,經(jīng)灌服藿香正氣散干預(yù)后明顯改善。孫冬月等[22]建立濕困脾胃證大鼠模型后發(fā)現(xiàn)與空白組相比,大鼠胃排空率,腸推進率減少;并通過病理切片,發(fā)現(xiàn)模型組胃黏膜充血嚴(yán)重,出現(xiàn)腫脹及脫落,胃底腺腫脹,黏膜肌增生,形態(tài)與結(jié)構(gòu)上均有改變。王劍和趙若龍[14]對濕困脾胃證小鼠進行胃腸組織病理觀察,發(fā)現(xiàn)胃脹氣明顯,胃黏膜表面液體明顯增多,經(jīng)染色后在顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)腸道組織黏液分泌增多,黏膜層存在充血水腫。

此外,血清胃泌素與D-木糖的濃度是判斷脾虛證或脾虛濕盛證胃腸道功能的“金標(biāo)準(zhǔn)”[37-38],胃泌素可作用于消化系統(tǒng)平滑肌上的受體,產(chǎn)生三磷酸肌醇,從而激發(fā)胃平滑肌收縮行為,另外胃泌素是主要調(diào)劑胃酸分泌的激素。D-木糖是一種在血液中不含有的五碳糖,口服D-木糖后血液和尿液中的濃度可反應(yīng)小腸吸收功能,同時胃泌素的分泌可促進D-木糖吸收。因此,胃泌素及D-木糖濃度是評價脾氣虛或脾虛濕盛證的嚴(yán)重程度及干預(yù)后療效的重要指標(biāo)。楊彬彬等[19]通過飲食失宜法聯(lián)合勞倦過度法建立脾虛濕困證大鼠模型,檢測后發(fā)現(xiàn)血清中胃泌素、D-木糖、胃動素濃度下降明顯,經(jīng)過黃芪多糖干預(yù)后可明顯改善。

2.2.3 水液代謝異常相關(guān)指標(biāo) 脾虛濕盛證的另一大表現(xiàn)是水液代謝失常,這是脾虛濕盛證與單純脾虛證相鑒別的重要指標(biāo)。研究者可通過糞便含水量及腸管含水量的測定進行鑒別,亦可通過水通道蛋白中白蛋白、醛固酮、血管活性腸肽等含量進行評判。白蛋白是血漿中含量最多的蛋白質(zhì),具有維持血液膠體滲透壓的功效,是判斷水液代謝及水腫狀態(tài)的一個重要的指標(biāo)[39]。此外醛固酮、血管活性腸肽是參與水液代謝的重要激素,也與人體水液代謝相關(guān),血管活性腸肽與其受體結(jié)合后,可刺激結(jié)腸黏膜,增加水和電解質(zhì)的分泌而導(dǎo)致腹瀉。因此,有學(xué)者認(rèn)為該指標(biāo)可在一定程度上反映脾虛濕盛證大便溏稀的微觀變化[40]。如,王彥芳等[41]檢測脾虛水濕不化模型發(fā)現(xiàn)血清中的白蛋白、血管活性腸肽含量明顯升高,提示機體出現(xiàn)水液代謝紊亂,濕邪偏盛。

3 研究的不足

近年來對于脾虛濕盛證動物模型構(gòu)建方面的研究取得了一定進展,但是仍存在一些問題與不足之處。

3.1 動物模型證型命名 以脾為病位濕為病性的證型文獻中記載較多,命名又較為相近,十分繁瑣,給研究者帶來了諸多不便。1)根據(jù)國家技術(shù)監(jiān)督局頒布的國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16751.2-2021《中醫(yī)臨床診療術(shù)語·證候部分》[1]將脾為病位、濕為病性的證候分為6種證型(不以寒熱病性為主),可見表3,部分證候如脾虛濕盛證又有多種同義命名,而這6類證型臨床表現(xiàn)又較為相同。在臨床中此6類證型的病機及表現(xiàn)即有較高的重合,辨證存在難度,故在動物模型中的辨證則更加困難,這就導(dǎo)致動物模型構(gòu)建中此6類證型的造模思路相同,方法相近,評判標(biāo)準(zhǔn)較為一致,但其動物模型證型命名卻十分混亂,如參與措施運用水籠法聯(lián)合飲食不節(jié)法(干預(yù)方法與持續(xù)天數(shù)均相同),但模型卻有濕困脾胃證、脾虛濕盛證、脾虛濕阻證等多種證候命名。2)此外,研究者在動物模型命名時未以標(biāo)準(zhǔn)化證型命名,如脾虛水濕不化模型、濕傷脾陽證及濕滯脾胃模型等。這些命名較為口語化,未使用證候標(biāo)準(zhǔn)化用語,使原本就多樣的證候命名更加繁雜,也給研究者帶來很多困難。

表3 脾為病位濕為病性之證型標(biāo)準(zhǔn)

3.2 模型證候評價標(biāo)準(zhǔn) 合理的證候模型需要科學(xué)的評價體系,但現(xiàn)階段脾虛濕盛證動物模型的評價體系仍然存在一些問題:1)雖然脾虛濕盛證動物模型癥狀及表征的評價經(jīng)總結(jié)與量化,已形成較好的評判體系及量化標(biāo)準(zhǔn),但如倦怠、懶動、蜷縮聚堆,毛色枯槁等的評價仍較為主觀。2)脾虛濕盛證的客觀指標(biāo)主要集中在疲勞狀態(tài)、胃腸功能、代謝功能等方面,這些指標(biāo)與脾虛證的指標(biāo)重合度較高。雖然目前已經(jīng)發(fā)展出了一些濕盛相關(guān)的指標(biāo),但仍有不足,缺乏與“濕”相關(guān)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。3)以方驗證是證候模型評價的一個重要方法,以方藥治療效果為依據(jù)具有良好的客觀性。但動物模型證型命名的混亂,造成方藥選擇的困難,上述研究選用方藥既有單味藥又有復(fù)方,各方思路互不一致,標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一。

3.3 構(gòu)建模型的方法 近年來,脾虛濕盛證模型構(gòu)建已從單因素法造模逐步轉(zhuǎn)變?yōu)橐燥嬍呈б朔楹诵牡膹?fù)合型造模法。這從病因角度更貼合當(dāng)代人產(chǎn)生脾虛濕盛證的過程,但在具體的方法上仍存在一些不足:1)現(xiàn)在較主流的飲食失宜法是對嚙齒類動物進行單日禁食冰水灌胃、雙日正常飲食豬油灌胃的饑飽無度法[42-43],但再加上每天藥物灌胃治療,這就會導(dǎo)致實驗動物一日之內(nèi)被多次灌胃,造成食管及咽喉部的損傷,這些與實驗無關(guān)的因素則會或多或少地影響實驗結(jié)果。2)造模因素的表述錯誤,這主要出現(xiàn)在水籠法及改良多平臺水環(huán)境法中的造模。因在此類方法中實驗動物需保持站立,而無法休息或者入睡,因此部分研究者將此因素定義為睡眠剝奪。但嚙齒類動物每天的睡眠時間為12～13 h[44-45],脾虛濕盛證造模中的水籠法和改良多平臺水環(huán)境法站立的時間通?？刂圃?～10 h,遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法達(dá)到睡眠剝奪的要求。因此,這種復(fù)合造模方法主要是通過外濕侵襲、久立勞倦的因素進行模型構(gòu)建而并非睡眠剝奪。3)脾虛濕盛證模型的形成應(yīng)該是一個長時間、慢性的過程,因此造模時間不應(yīng)太短,實驗時間在2周以上才可較好地模擬臨床上發(fā)病的過程。但部分實驗造模周期較短,這則與臨床病史不太相符合[46]。

4 未來的展望

上述問題是研究的難點,更應(yīng)是解決與發(fā)展的重點,今后可從以下幾方面進行改進及發(fā)展:1)將傳統(tǒng)較為復(fù)雜的證型,根據(jù)實驗動物的生物學(xué)特性進行標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的簡化,并減少一些非標(biāo)準(zhǔn)化的證型命名使用,如可在動物模型建立中將脾虛濕盛證、脾虛水泛證等相近病因、病機及癥狀的證型規(guī)范為一種具有概括性的證型。2)完善證候評價體現(xiàn),將主觀的證候表現(xiàn)客觀化,如便溏的程度,就可以通過糞便含水量來評判;神疲乏力的程度也可通過動物行為學(xué)中疲勞的實驗或自主活動的指標(biāo)進行客觀評價;皮毛色澤,舌象等也可與現(xiàn)代科技結(jié)合,運用比色及圖像分析等技術(shù)進行分析。3)完善模型構(gòu)建方法,如單日禁食冰水灌胃,雙日正常飲食豬油灌胃會導(dǎo)致無關(guān)因素影響實驗,研究人員可以改為單日禁食不禁水提供冰水飲用,雙日高脂飼料飼養(yǎng),這樣就會減少對實驗動物的非必要損傷。

利益沖突聲明:無。