王洪麥,夏晴晴,蓋祥云,王金宇,趙悅孚
(青海民族大學(xué)藥學(xué)院,青海西寧 810007)
肺動脈高壓(pulmonary hypertension,PH)的肺血管異常收縮和血管重構(gòu),導(dǎo)致右心衰竭,甚至患者死亡[1]。根據(jù)病因可將PH 分為5種類型:動脈性PH(pulmonary arterial hypertension,PAH)、左心疾病所致PH、肺部疾病和(或)低氧所致PH、慢性血栓栓塞性PH 和(或)其他肺動脈阻塞性病變所致PH 及不明原因所致PH[2]。目前治療藥物包括內(nèi)皮素受體拮抗劑、磷酸二酯酶5 抑制劑和前列環(huán)素類似物等[3]。然而這些藥物的治療主要針對前列環(huán)素、一氧化氮和內(nèi)皮素等信號通路,抑制血管異常收縮,改善血管的舒張?zhí)匦院突颊咝姆喂δ埽瑢τ诜窝苤貥?gòu)的影響有限[4]。因此,急需尋求更有效的方法來解決肺血管重構(gòu)問題。
血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cell,VEC)在調(diào)節(jié)血管穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮重要作用,通過釋放多種生長因子和血管活性介質(zhì),調(diào)節(jié)肺血管的生理特性,影響血管收縮性和細(xì)胞生長[5]。內(nèi)皮細(xì)胞暴露于病理性刺激(包括低氧和促炎因子在內(nèi)的多種因素)下可發(fā)生動態(tài)表型轉(zhuǎn)化,低氧可促使內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)樣表型轉(zhuǎn)化,這一過程稱為內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(endothelial-to-mesenchymal transition,EndMT)[6]。
EndMT在多種心血管疾病中發(fā)揮重要作用,如心肌梗死、肺纖維化、動脈粥樣硬化和PH 等[7]。以往研究肺血管重構(gòu)機(jī)制重點(diǎn)關(guān)注內(nèi)皮的作用,近年來EndMT 因其在PH 肺血管重構(gòu)中的潛在作用受到越來越多的關(guān)注[8-9]。本綜述旨在闡明低氧通過轉(zhuǎn)化生長因子β/骨形態(tài)發(fā)生蛋白(transforming growth factor-β/bone morphogenetic protein,TGF-β/BMP)、Notch 和Wnt/β 聯(lián)蛋白信號通路誘導(dǎo)EndMT 參與肺血管重構(gòu)的機(jī)制,以期為研發(fā)治療PH 藥物提供新策略。
低氧是導(dǎo)致EndMT 發(fā)展的重要因素。低氧時,內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)歷向間充質(zhì)表型的轉(zhuǎn)變,并且間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的程度會隨低氧刺激持續(xù)時間變化;EndMT過程中,內(nèi)皮特異性基因的抑制和間充質(zhì)標(biāo)志性基因的激活是由鋅指蛋白SNAI1(zinc finger protein-SNAI1,Snai1)和鋅指蛋白SNAI2(zinc finger protein SNAI2,Slug)及扭曲相關(guān)蛋白(twist-related protein,Twist)等轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控[6,10-11]。EndMT主要是VEC發(fā)生表型變化,同時內(nèi)皮細(xì)胞功能發(fā)生顯著變化[12-13]。EndMT 過程破壞內(nèi)皮的完整性,導(dǎo)致肺VEC 增殖和遷移能力增加,并且可能在將緩慢增殖的肺VEC 轉(zhuǎn)化為高度增殖的細(xì)胞類型(如肌成纖維細(xì)胞)過程中發(fā)揮重要作用[14]。
EndMT 過程導(dǎo)致血管平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞數(shù)量異常增多,并且此過程會導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞黏附的喪失,使得內(nèi)皮細(xì)胞向血管內(nèi)層移動和血管周圍環(huán)境遷移,低氧可顯著增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移能力[15]。低氧誘導(dǎo)間充質(zhì)標(biāo)志物和EndMT 相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子(如Snail 和Twist)上調(diào),且Snail 是EndMT 過程的主調(diào)節(jié)因子[16]。EndMT 過程中,內(nèi)皮細(xì)胞失去其特異性標(biāo)志物如CD31和VEC-鈣黏蛋白,并逐漸表達(dá)間充質(zhì)特異性標(biāo)志物如α 平滑肌肌動蛋白(alpha smooth-muscle actin,α-SMA)、鈣調(diào)蛋白、成纖維細(xì)胞特異性蛋白1 和波形蛋白[17]。Yu 等[18]研究芍藥苷(paeoniflorin)對Sugen5416 和低氧誘導(dǎo)的PAH 大鼠的影響,發(fā)現(xiàn)PAH 大鼠肺中內(nèi)皮標(biāo)志物下調(diào),間充質(zhì)標(biāo)志物顯著上調(diào),而芍藥苷處理后抑制肺中的EndMT,改善肺血管重構(gòu)。此外,BMPⅡ型受體(BMP receptor 2,BMPR2)參與芍藥苷抑制低氧誘導(dǎo)的EndMT,用小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)下調(diào)BMPR2 的表達(dá),減弱芍藥苷對低氧誘導(dǎo)的EndMT 的抑制作用。因此,抑制EndMT過程可能成為研究和治療PH 的新方向。
肺血管重構(gòu)最重要的特征是細(xì)胞增殖、遷移和細(xì)胞外基質(zhì)沉積導(dǎo)致的血管內(nèi)膜、中膜和外膜的增厚,涉及VEC、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞等多種細(xì)胞類型[19]。EndMT 過程可引起平滑肌樣細(xì)胞異常增殖,大量的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白表達(dá),導(dǎo)致血管中膜增厚,進(jìn)而引起血管重構(gòu)。低氧條件下,肺VEC 通過EndMT 過程轉(zhuǎn)化為平滑肌樣細(xì)胞,這些平滑肌樣細(xì)胞不僅導(dǎo)致血管的異常收縮,而且具有促增殖、遷移和產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì),導(dǎo)致PH 肺血管重構(gòu)的能力[12,20]。在低氧等因素刺激下,成纖維細(xì)胞過度產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì),可導(dǎo)致組織硬化,影響血管功能;在PH 中,肺VEC 通過EndMT 過程向成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生和膠原沉積,進(jìn)而導(dǎo)致肺血管重構(gòu)[21-22]。Wang 等[23]報道,丹參酚酸B 鎂(magnesium lithospermate B)可抑制肺血管中低氧誘導(dǎo)的EndMT,改善肺血管重構(gòu),進(jìn)而延緩PH的發(fā)展。
PH 中肺血管重構(gòu)的確切機(jī)制尚不清楚,但越來越多的證據(jù)表明,VEC 功能障礙是導(dǎo)致肺血管重構(gòu)的重要因素;VEC 功能障礙導(dǎo)致內(nèi)皮中多種細(xì)胞信號通路激活,進(jìn)而引起VEC、肺血管平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞異常增殖,最終導(dǎo)致肺血管重構(gòu)[24]。EndMT是PH中VEC 功能障礙的誘因之一,低氧刺激引起的血管內(nèi)皮損傷可誘導(dǎo)VEC 通過EndMT過程轉(zhuǎn)化為間充質(zhì)樣細(xì)胞,從而導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙[5,25-26]。EndMT是炎癥和內(nèi)皮功能障礙之間復(fù)雜作用的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。低氧條件下,炎癥介質(zhì)白細(xì)胞介素1β能持續(xù)激活VEC,并通過EndMT過程將其轉(zhuǎn)化為間充質(zhì)樣細(xì)胞,導(dǎo)致正常內(nèi)皮功能改變;此外,低氧可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和EndMT 的發(fā)生,炎癥可導(dǎo)致肺組織氧氣供需失衡,形成局部低氧微環(huán)境,進(jìn)一步加重體內(nèi)低氧程度,協(xié)同促進(jìn)EndMT 的發(fā)展,導(dǎo)致肺血管重構(gòu)[25,27]。Huang 等[28]研究阿司匹林對低氧誘導(dǎo)的PH 的影響,發(fā)現(xiàn)阿司匹林可抑制低氧誘導(dǎo)的EndMT,保護(hù)VEC,進(jìn)一步改善肺血管重構(gòu)。Cai等[29]研究發(fā)現(xiàn),低氧誘導(dǎo)的PH小鼠肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中過氧化物酶增殖物激活受體γ共激活物1α(peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1α,PGC-1α)表達(dá)降低,而內(nèi)皮特異性過表達(dá)PGC-1α 抑制肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞的EndMT,PGC-1α 過表達(dá)可通過抑制肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞的EndMT,恢復(fù)內(nèi)皮功能,改善肺血管重構(gòu),緩解PH發(fā)展。絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase 1,Akt1)對內(nèi)皮屏障的完整性至關(guān)重要。Sabbineni 等[30]研究Akt1 介導(dǎo)的β 聯(lián)蛋白信號通路在EndMT 和病理性肺血管重構(gòu)中的作用,發(fā)現(xiàn)抑制Akt1 可導(dǎo)致EndMT,并加劇肺血管重構(gòu),使用β 聯(lián)蛋白抑制劑ICG-001 可對EndMT 和肺血管重構(gòu)進(jìn)行靶向治療。因此,可以將PGC-1α 和β聯(lián)蛋白作為治療PH肺血管重構(gòu)的潛在靶點(diǎn)。
低氧誘導(dǎo)EndMT參與肺血管重構(gòu)不是一個單獨(dú)的過程,而是與多種信號通路相互作用,如TGF-β[14]、Akt/糖原合成酶激酶3β[31](glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)、Wnt[32]、Jagged/Notch[33]和NF-κB[34]等,這些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)控低氧誘導(dǎo)End-MT 的具體機(jī)制尚不清楚,目前研究主要集中在低氧條件下信號通路中相關(guān)介質(zhì)所發(fā)生的變化。本文重點(diǎn)討論參與EndMT過程的TGF-β/BMP,Notch和Wnt信號通路及相關(guān)介質(zhì)。
BMPR2 通路的異常和TGF-β/Smad 信號通路的激活是肺血管重構(gòu)的驅(qū)動因素[35]。BMP是TGF-β超家族配體之一,BMP 與其受體結(jié)合觸發(fā)受體調(diào)節(jié)Smad1/5/8磷酸化,磷酸化的Smad1/5/8與Smad4形成異寡聚復(fù)合物,該復(fù)合物轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核與其他轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,啟動BMP/Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[36]。低氧顯著降低人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中BMPR2 的表達(dá);抑制Smad1/5 的磷酸化水平,導(dǎo)致BMPR2 信號功能轉(zhuǎn)導(dǎo)異常,從而引起肺動脈高壓中EndMT 的發(fā)生(圖1)[18]。Yuan等[37]發(fā)現(xiàn),丹參(Salvia miltiorrhizaBge.)中的活性成分丹酚酸A 可提高Smad1/5 的磷酸化水平,激活BMPR2/Smad 通路,抑制低氧誘導(dǎo)的人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中EndMT。
圖1 低氧條件下誘導(dǎo)內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EndMT)的轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)/Smad、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)、Wnt/β 聯(lián)蛋白(catenin)和Notch 信號通路. P:磷酸化;×:缺乏;BMPR:骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體;FGFR:成纖維細(xì)胞生長因子受體;CoA:共激活劑;RBPJ:重組信號結(jié)合蛋白J;HES:發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子;Frizzled:跨膜受體卷曲蛋白;LRP5/6:低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6;GSK-3β:糖原合成酶激酶-3β;APC:腺瘤性激素蛋白;AXIN :軸蛋白;CK1:酪蛋白激酶1;TCF:T 細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子;LEF:淋巴增強(qiáng)結(jié)合因子;↑:誘導(dǎo),促進(jìn)或增加;↓:降低;⊥:抑制.
低氧通過誘導(dǎo)TGF-β 信號通路加劇EndMT,TGF-β通路的下游介質(zhì)Smad在PH發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用;低氧促進(jìn)TGF-β 誘導(dǎo)的磷酸化Smad2/3在細(xì)胞核中積累,導(dǎo)致Twist,Snail和Slug轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá),進(jìn)一步導(dǎo)致EndMT發(fā)展(圖1)。研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)皮細(xì)胞中成纖維細(xì)胞生長因子受體功能下調(diào),可促進(jìn)低氧誘導(dǎo)的PH中EndMT過程,并增強(qiáng)TGF-β/Smad2/3 信號,而內(nèi)皮細(xì)胞中成纖維細(xì)胞生長因子受體信號的激活可抑制EndMT 過程[38-40]。Tang等[27]報道,人參皂苷Rg1 可通過增加富半胱氨酸蛋白61 表達(dá),抑制TGF-β 信號通路激活,進(jìn)而抑制低氧誘導(dǎo)EndMT 的發(fā)生,改善肺血管重構(gòu)。TGF-β超家族包括TGF-β1,TGF-β2和TGF-β3,3 種亞型均能誘導(dǎo)EndMT,但TGF-β2是最有效的誘導(dǎo)劑[16];TGF-β 信號通路參與低氧誘導(dǎo)的EndMT 過程,TGF-β2表達(dá)顯著增加,且Smad2 和Smad3 磷酸化水平均升高[41],表明抑制TGF-β2誘導(dǎo)的EndMT 可能有利于改善PH 肺血管重構(gòu)。Twist1通過TGF-β/Smad 通路調(diào)控低氧誘導(dǎo)的EndMT,過表達(dá)的Twist1可上調(diào)TGF-β2表達(dá)和Smad2磷酸化水平,誘導(dǎo)EndMT 發(fā)生;用SB525334(Smad2 磷酸化抑制劑)處理人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞時,Smad2 的磷酸化水平降低,VEC-鈣黏蛋白表達(dá)上調(diào),α-SMA 的表達(dá)下調(diào),抑制Twist1 過表達(dá)誘導(dǎo)的EndMT[42]。內(nèi)皮細(xì)胞特異性Twist1缺陷小鼠可免受慢性低氧對PH 和肺血管重構(gòu)的影響[43]。因此,對Twist1 表達(dá)的調(diào)節(jié)可能是改善肺血管重構(gòu)的有效策略之一。
調(diào)節(jié)TGF-β/BMP 信號通路可能是一種潛在治療PH的方法,目前認(rèn)為激活BMPR2 或抑制TGF-β/Smad 信號通路可改善肺血管重構(gòu)。但是由于BMP/Smad 和TGF-β/Smad2/3 信號途徑均需要Smad4 才能發(fā)揮正常的功能,因此需要深入了解Smad4 在TGF-β/BMP 信號通路中的作用[44]。此外,BMP 信號通路在實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的PH 中的作用可能與人類疾病中觀察到的不同,甚至可能在模型之間也會有所不同,這也限制了藥物的開發(fā)[45]。研究表明,上調(diào)或下調(diào)的微RNA(microRNA,miRNA)通過靶向血管細(xì)胞BMPR2 的表達(dá)抑制BMP 信號,但miRNA治療PH 的潛力相對有限,靶向BMP 信號的miRNA 抑制劑或miRNA 模擬物在臨床研究中仍然具有挑戰(zhàn)性。miRNA 應(yīng)用于臨床的前提是其可靶向與疾病相關(guān)的組織細(xì)胞,由于肺部的復(fù)雜性,還需進(jìn)一步研究miRNA 進(jìn)入肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性、安全性、效率和穩(wěn)定遞送。外源性BMPR2 基因傳遞可恢復(fù)BMPR2 信號,但需進(jìn)一步改進(jìn)載體技術(shù)才能轉(zhuǎn)化到臨床治療肺血管疾病。不同的治療方法取決于患者的特殊遺傳背景,為了更有效治療,還必須考慮導(dǎo)致疾病的其他遺傳和環(huán)境因素[46]。
Notch 信號通路在低氧誘導(dǎo)EndMT 中具有重要意義,Notch 通路的異常與PH 相關(guān)。低氧條件下,內(nèi)皮細(xì)胞中Notch2 表達(dá)受到抑制,而內(nèi)皮細(xì)胞中其他Notch 受體家族成員Notch1、Notch4 和平滑肌細(xì)胞中Notch3 表達(dá)均上調(diào)[47-49]。Sahoo 等[47]發(fā)現(xiàn),低氧刺激下人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中Notch2 mRNA 和蛋白表達(dá)均下調(diào),且抑制Notch2 導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移能力增加,肺血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移能力增加是EndMT 的重要特征,且肺血管重構(gòu)涉及血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的增殖,遷移等過程[14,19]。Qiao 等[48]發(fā)現(xiàn),Notch 信號通路在肺血管重構(gòu)中具有重要作用,低氧誘導(dǎo)的PH 大鼠肺組織中Notch1、Notch3和Notch4mRNA 水平均升高,并且Notch1 和Notch 3 促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞向平滑肌樣細(xì)胞轉(zhuǎn)化,Notch 1和Notch 4誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移增加,血管內(nèi)皮穩(wěn)態(tài)失衡;用γ-分泌酶抑制劑(2S)-N-〔N-(3,5-二氟苯乙?;?L-丙氨酰〕-2-苯基甘氨酸叔丁酯{N-〔N-(3,5-difluorophenacetyl)-L-alanyl〕-Sphenylglycine t-butyl ester,DAPT}處理低氧條件下的大鼠離體血管條,發(fā)現(xiàn)PH 血管壁厚度下降,且DAPT抑制Notch通路可抑制PH大鼠血管平滑肌細(xì)胞增殖和表型轉(zhuǎn)化,最終改善肺血管重構(gòu)。
生理條件下,Notch1 信號通路處于靜息狀態(tài),但在低氧等應(yīng)激情況下,Notch1 信號通路短暫激活。Notch 受體(Notch1,2,3 和4)與配體(如Jagged-1 和Jagged-2 蛋白)相互作用觸發(fā)γ-分泌酶,介導(dǎo)跨膜Notch 受體裂解并釋放Notch 胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域(notch intracellular domain,NICD),NICD 轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核,與重組信號結(jié)合蛋白J 或其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用,啟動Notch靶基因轉(zhuǎn)錄,激活下游靶基因發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子(hairy and enhancer of split,HES)(圖1)[50-51]。Wang 等[13]發(fā)現(xiàn),低氧可激活Notch3 信號通路,并誘導(dǎo)Notch3,Jagged-1和HES1 高表達(dá),促進(jìn)肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞向間充質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化,用Notch 信號抑制劑DAPT 和敲低Jagged-1 均可抑制低氧誘導(dǎo)的EndMT,導(dǎo)致細(xì)胞活力和遷移能力顯著降低,表明Notch3 在低氧誘導(dǎo)EndMT參與肺血管重構(gòu)中具有重要作用。
上述研究表明,Notch 信號通路在低氧誘導(dǎo)EndMT 致肺血管重構(gòu)中可能發(fā)揮關(guān)鍵作用。然而Notch 通路較復(fù)雜,不同細(xì)胞上表達(dá)的Notch 受體和配體相互作用,可反向激活Notch信號通路;同一細(xì)胞上表達(dá)的受體和配體相互作用,可激活或順式抑制Notch 信號通路;Notch 信號通路的激活或抑制取決于配體;此外該通路激活或抑制可能受到受體和配體結(jié)合的親和力以及它們相對量的影響,詳細(xì)機(jī)制還需進(jìn)一步研究。Notch 靶向治療研究未能達(dá)到預(yù)期,可能是由于非特異性Notch 抑制劑親和力低或者其會引起機(jī)體毒副反應(yīng)等[52-53]。開發(fā)針對特定Notch 蛋白的高選擇性抑制劑和影響Notch配體-受體相互作用的藥物可能是理想的PH 治療方法。
Wnt 信號通路大致分為2 大類:經(jīng)典Wnt/β 聯(lián)蛋白通路和非經(jīng)典的Wnt 信號通路,兩者均參與PH的發(fā)生發(fā)展。經(jīng)典Wnt/β-聯(lián)蛋白信號通路異常調(diào)控在肺血管重構(gòu)過程中發(fā)揮重要作用;Wnt缺失情況下,GSK-3β磷酸化β聯(lián)蛋白,并與軸蛋白、腺瘤性激素蛋白和酪蛋白激酶1(casein kinase 1,CK1)結(jié)合降解β 聯(lián)蛋白,從而抑制Wnt 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。有研究報道,PAH 患者和低氧誘導(dǎo)的PH 模型肺組織中β聯(lián)蛋白的表達(dá)水平顯著升高,β 聯(lián)蛋白積累并易位到細(xì)胞核,在核中與T細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子/淋巴增強(qiáng)結(jié)合因子相互作用以調(diào)節(jié)EndMT 調(diào)控基因Twist,Snail和Slug等的表達(dá)(圖1)[54-58]。研究報道,Wnt5a 表達(dá)上調(diào)可能拮抗Wnt/β 聯(lián)蛋白信號通路[59],Zhang 等[60-61]發(fā)現(xiàn),Wnt5a/BMP 信號通路可能是PH 肺血管重構(gòu)的潛在機(jī)制,野百合堿(monocrotaline,MCT)誘導(dǎo)的PH 大鼠肺組織Wnt5a 和Wnt11 表達(dá)水平顯著降低,而β 聯(lián)蛋白表達(dá)水平顯著升高。且低氧條件培養(yǎng)的肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中Wnt5a和Wnt11表達(dá)顯著降低,β聯(lián)蛋白表達(dá)增加;更重要的是,在MCT 誘導(dǎo)的PH 大鼠和低氧條件培養(yǎng)的肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中CD31 和VEC-鈣黏蛋白表達(dá)顯著降低,α-SMA 表達(dá)顯著升高;此外,與低氧條件培養(yǎng)的肺動脈平滑肌細(xì)胞相比,低氧條件培養(yǎng)的肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞中沉默Wnt5a基因,BMPR2 表達(dá)和Smad1/5/8磷酸化水平顯著降低,TGF-β1表達(dá)和Smad2/3 磷酸化水平顯著增加。帕納替尼(ponatinib)是一種酪氨酸激酶抑制劑。Kang 等[62]發(fā)現(xiàn),帕納替尼可抑制人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞中TGF-β1誘導(dǎo)的EndMT,且帕納替尼可通過抑制低氧誘導(dǎo)的人肺動脈平滑肌細(xì)胞中Wnt/β聯(lián)蛋白信號通路和改善肺血管重構(gòu),延緩PH 發(fā)展。研究報道,Wnt/β 聯(lián)蛋白信號通路抑制劑和激動劑包括LRP5/6 抑制劑、散亂蛋白抑制劑、CK1 激動劑和靶向β 聯(lián)蛋白/TCF轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的抑制劑(如4-硫脲基-苯磺酰胺衍生物L(fēng)F3)等[63],但僅有少部分在PH模型中進(jìn)行了測試,如LF3。Lei等[64]發(fā)現(xiàn),LF3 可通過抑制平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖改善PH,表明LF3 可能對肺血管重構(gòu)有潛在的治療作用。但Wnt 激活劑和抑制劑之間存在相互作用,可能導(dǎo)致不良事件發(fā)生,因此藥物的安全性方面也值得進(jìn)一步研究。考慮到Wnt信號通路的復(fù)雜性、信號組分的大量存在及其與其他信號通路(如Notch和BMP信號)的串?dāng)_程度,目前很難找到疾病中特異性靶向Wnt 信號通路的安全有效的藥物[65-66]。
PH 是一種破壞性血管疾病,其特征是肺血管異常收縮和血管重構(gòu),導(dǎo)致肺動脈壓力升高、右心室肥厚,最終導(dǎo)致右心室功能衰竭,甚至患者死亡。肺血管重構(gòu)包括VEC 功能障礙、肺動脈平滑肌細(xì)胞過度增殖、細(xì)胞外基質(zhì)沉積和炎癥等。目前,許多針對PH的藥物研究傾向于擴(kuò)張血管,提高患者生存率,臨床上尚無有效改善PH肺血管重構(gòu)的藥物。如前所述,許多體外和體內(nèi)研究均表明EndMT通過多種信號通路參與肺血管重構(gòu),促進(jìn)PH 的發(fā)展,因此抑制EndMT 可能是改善PH 的有效策略。但PH 病理機(jī)制復(fù)雜,還需深入研究肺血管重構(gòu)中TGF-β,Wnt 和Jagged/Notch 信號通路之間及它們與其他信號通路的相互調(diào)節(jié)作用,從而發(fā)現(xiàn)更多藥物靶點(diǎn)和有效的疾病防治策略。同時研究表明,一些天然產(chǎn)物在PH 實(shí)驗(yàn)?zāi)P椭携熜Т_切,但缺乏有效的臨床實(shí)踐,不能準(zhǔn)確指導(dǎo)臨床治療,對具開發(fā)潛力的天然產(chǎn)物,如芍藥苷、丹酚酸A 和人參皂苷Rg1 等進(jìn)行更深入研究有望研發(fā)出安全、有效的PH 臨床治療藥物。