周曉瓊　張現(xiàn)娟　王斌

［摘要］目的探討人巨細(xì)胞病毒即刻早期蛋白2（HCMV-IE2）對(duì)果糖誘導(dǎo)的UL122轉(zhuǎn)基因模型小鼠肝臟脂肪變性的影響。方法構(gòu)建UL122轉(zhuǎn)基因小鼠模型作為實(shí)驗(yàn)組，以同齡野生型小鼠作為對(duì)照組，以60%的高果糖飼料飼養(yǎng)8周，監(jiān)測(cè)小鼠體質(zhì)量、血糖的變化，并行葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)和胰島素耐量實(shí)驗(yàn)后處死小鼠，測(cè)定小鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平以及肝臟組織中三酰甘油（TG）和總膽固醇（TC）水平；取小鼠肝臟組織行HE染色和油紅O染色進(jìn)行組織病理學(xué)觀察；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)肝臟組織中巨噬細(xì)胞極化情況；RT-qPCR和Western blot方法檢測(cè)肝臟脂質(zhì)合成相關(guān)基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠體質(zhì)量和空腹血糖水平明顯升高（F=12.78～100.05，P<0.05），出現(xiàn)了明顯的糖耐量異常和胰島素抵抗，GTT和ITT曲線下面積明顯增大（t=3.25、4.70，P<0.05），血清中ALT、AST水平和肝臟中TG、TC水平顯著增高（t=4.52～13.12，P<0.05）。實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織中M1型巨噬細(xì)胞比例明顯升高，而M2型巨噬細(xì)胞比例明顯下降（t=4.81～12.12，P<0.05），肝臟脂質(zhì)合成基因SREBP1c、ACC1、FAS和CD36的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高（t=3.54～9.96，P<0.05）。結(jié)論HCMV-IE2可能通過(guò)誘導(dǎo)肝臟中巨噬細(xì)胞M1型極化影響肝臟脂質(zhì)代謝平衡，從而促進(jìn)果糖誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝的進(jìn)展。

［關(guān)鍵詞］非酒精性脂肪性肝??；果糖；小鼠，轉(zhuǎn)基因；即早蛋白質(zhì)類；葡糖耐受不良；胰島素抵抗；巨噬細(xì)胞

［中圖分類號(hào)］R575.5［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］A

Effect of human cytomegalovirus immediate-early protein 2 on hepatic steatosis induced by fructose in UL122 transgenic model mice ZHOU Xiaoqiong， ZHANG Xianjuan， WANG Bin（School of Basic Medicine， Qingdao University， Qingdao 266071， China）

［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the effect of human cytomegalovirus immediate-early protein 2 （HCMV-IE2） on fructose-induced hepatic steatosis in UL122 transgenic model mice. MethodsThe UL122 transgenic mice were established as experimental group， and age-matched wild-type mice were established as control group. The mice were fed with high-fructose （60%） diet for 8 weeks， and the changes in body weight and blood glucose were monitored. After the glucose tolerance test and the insulin tolerance test were performed， the mice were sacrificed， and the serum levels of alanine aminotransferase （ALT） and aspartate aminotransferase （AST） were measured， as well as the levels of triglyceride （TG） and total cholesterol （TC） in the liver. Liver tissue was collected， and HE staining and oil red O staining were used to observe histopathological changes; flow cytometry was used to observe macrophage polarization in the liver; RT-qPCR and Western blot were used to measure the mRNA and protein expression levels of lipid synthesis-related genes in the liver. ResultsCompared with the control group， the experimental group had significant increases in body weight and fasting blood glucose level （F=12.78-100.05，P<0.05） and significantly impaired glucose tolerance and insulin resistance， with significant increases in the area under the GTT and ITT curves （t=3.25，4.70，P<0.05）. There were significant increases in the serum levels of ALT and AST and the levels of TG and TC in the liver （t=4.52-13.12，P<0.05）. The experimental group had a significant increase in the proportion of M1-type macrophages and a significant reduction in the proportion of M2-type macrophages in liver tissue （t=4.81-12.12，P<0.05）， as well as significant increases in the mRNA and protein expression levels of the lipid synthesis genes SREBP1c， ACC1， FAS， and CD36 in the liver （t=3.54-9.96，P<0.05）. ConclusionHCMV-IE2 affects the balance of liver lipid metabolism by inducing M1 polarization of macrophages in the liver， thereby promoting the progression of fructose-induced nonalcoholic fatty liver disease.

［KEY WORDS］Non-alcoholic fatty liver disease; Fructose; Mice， transgenic; Immediate-early proteins; Glucose intole-rance; Insulin resistance; Macrophages

人巨細(xì)胞病毒（HCMV）是雙鏈DNA病毒，屬皰疹病毒β亞科[1]。研究發(fā)現(xiàn)， HCMV感染期間機(jī)體脂肪酸生物合成增加[2]，可能與糖脂代謝障礙之間存在關(guān)聯(lián)。

近幾年來(lái)，非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）在人群中的患病率呈上升趨勢(shì)，其原因可能與高糖（尤其是高果糖）飲食模式有關(guān)[3]。NAFLD的主要危險(xiǎn)因素為慢性輕度組織炎癥[4]，肝臟是機(jī)體糖脂代謝的關(guān)鍵場(chǎng)所，肝內(nèi)巨噬細(xì)胞的活化和招募直接導(dǎo)致胰島素抵抗（IR），影響肝內(nèi)糖脂代謝，促進(jìn)NAFLD發(fā)展[5]。有研究顯示，M2型巨噬細(xì)胞向M1型巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)化對(duì)IR有促進(jìn)作用[6]。轉(zhuǎn)錄組學(xué)顯示HCMV感染可以上調(diào)與M1型巨噬細(xì)胞表型密切相關(guān)的基因[7]。

HCMV即刻早期蛋白2（HCMV-IE2）由病毒基因組中的UL122基因編碼表達(dá)，是HCMV感染時(shí)關(guān)鍵蛋白，在對(duì)抗宿主免疫能力中發(fā)揮重要作用。IE2蛋白功能的研究有助于深入了解HCMV感染相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制。前期研究表明在正常飲食的小鼠中IE2蛋白可以通過(guò)上調(diào)SREBP1c的表達(dá)促進(jìn)肝臟脂滴的合成[8]，但在果糖攝入條件下的影響尚不明確。

HCMV感染具有嚴(yán)格的種屬特異性，所以至今尚未能成功構(gòu)建感染HCMV的動(dòng)物模型。本課題組前期成功構(gòu)建了能穩(wěn)定表達(dá)IE2蛋白的UL122轉(zhuǎn)基因的小鼠模型[9]，本研究在該模型基礎(chǔ)上，給予了模型小鼠8周高果糖飼料喂養(yǎng)，構(gòu)建高果糖誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝模型，探討IE2對(duì)小鼠肝臟脂肪變性的影響。

1材料和方法

1.1主要試劑

60%高果糖純化飼料購(gòu)自江蘇美迪森生物醫(yī)藥有限公司；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、三酰甘油（TG）和總膽固醇（TC）試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；PCR引物購(gòu)自上海生工生物工程有限公司；兔抗鼠單克隆抗體Rabbit anti-ACC1、Rabbit anti-CD36和Rabbit anti-FASN均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司；多克隆抗體Rabbit anti-SREBP1c購(gòu)自成都正能生物技術(shù)有限公司；流式細(xì)胞術(shù)（FCM）檢測(cè)使用的抗體PE-Cy7-anti-F4/80、FITC-anti-CD11c和PC5.5-anti-CD206購(gòu)自美國(guó)Biolegend公司。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

C57BL/6小鼠購(gòu)自北京斯貝福生物技術(shù)有限公司，依據(jù)文獻(xiàn)[9]的方法獲得UL122轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠。隨機(jī)選取6～8周UL122轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性雄性小鼠（實(shí)驗(yàn)組）和同齡野生型C57BL/6雄性小鼠（對(duì)照組）各12只，適應(yīng)性喂飼1周后，開(kāi)始造模，喂飼60%高果糖飼料56 d，每周定期測(cè)量小鼠體質(zhì)量和血糖。

1.3小鼠的葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)（GTT）和胰島素耐量實(shí)驗(yàn)（ITT）

在造模的第52天，兩組小鼠禁食12 h后，灌胃質(zhì)量濃度200 g/L葡萄糖溶液，分別于灌胃后第0、15、30、60、90、120分鐘時(shí)，從尾靜脈取血1～2 μL，用血糖試紙條測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)血糖濃度，并計(jì)算GTT曲線下面積。

在造模的第55天，兩組小鼠禁食4～6 h后，腹腔注射胰島素0.75 U/kg，分別于注射后第 0、15、30、60、90、120分鐘時(shí)，從尾靜脈取血1～2 μL，以血糖試紙測(cè)定各時(shí)間點(diǎn)血糖濃度，并計(jì)算ITT曲線下面積。

1.4酶法檢測(cè)小鼠血清中ALT、AST水平和肝組織中TG、TC水平

在造模后第56天，經(jīng)腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉兩組小鼠，摘眼球取血，室溫靜置2 h，3 000 r/min離心10 min，收集小鼠血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)方法檢測(cè)血清中ALT、AST水平。脫頸處死兩組小鼠，剖取小鼠肝臟，置于－80 ℃保存?zhèn)溆?。稱取新鮮肝臟組織，按照1 mg組織加入20 μL裂解液比例，在冰浴條件下機(jī)械勻漿，根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)要求檢測(cè)組織中TG、TC的水平。

1.5油紅O染色和HE染色觀察小鼠肝臟組織病理學(xué)變化

每組隨機(jī)取3只小鼠肝臟中葉組織，以40 g/L多聚甲基醛固定24 h后，分別進(jìn)行油紅0染色和HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察兩組小鼠肝臟組織病理學(xué)改變情況。

1.6免疫組織化學(xué)染色和FCM檢測(cè)小鼠肝臟組織巨噬細(xì)胞極化情況

每組隨機(jī)取3只小鼠部分肝臟組織，在40 g/L多聚甲醛中固定24 h。梯度乙醇脫水、透明、石蠟包埋、烤片、脫水，抗原修復(fù)后，用血清封閉30 min，加一抗F4/80（1∶500），4 ℃下孵育過(guò)夜，PBS洗滌后加相應(yīng)二抗室溫孵育1 h，DAB辣根過(guò)氧化物酶顯色，封片，顯微鏡下觀察。

每組隨機(jī)取3只小鼠全部肝臟組織，200目尼龍網(wǎng)上低溫研磨新鮮肝臟組織，離心去除雜質(zhì)及肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞，通過(guò)紅細(xì)胞裂解液去除紅細(xì)胞，以40% Percoll梯度分層，800 r/min離心5 min后，收集肝臟單個(gè)核細(xì)胞并計(jì)數(shù)。取1×106個(gè)細(xì)胞，同時(shí)加入相應(yīng)細(xì)胞群的檢測(cè)抗體：以F4/80-PE-Cy7、CD11c-FITC抗體標(biāo)記M1型巨噬細(xì)胞，F(xiàn)4/80-PE-Cy7和CD206-PC5.5抗體標(biāo)記M2型巨噬細(xì)胞。隨后避光染色30 min，PBS洗滌重懸細(xì)胞后200目尼龍網(wǎng)過(guò)濾，經(jīng)FCM檢測(cè)M1型和M2型巨噬細(xì)胞比例。

1.7實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）方法檢測(cè)各組小鼠肝臟組織當(dāng)中的腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、IL-10、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白（SREBP1c）、脂肪酸合酶（FAS）、乙酰輔酶A羧化酶（ACC1）和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（CD36）基因表達(dá)

每組隨機(jī)取3只小鼠部分肝臟組織，用Trizol法提取小鼠肝臟總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，RT-qPCR方法檢測(cè)小鼠肝臟組織中M1型、M2型巨噬細(xì)胞極化基因的mRNA表達(dá)，引物序列詳見(jiàn)表1。RT-qPCR的反應(yīng)條件如下：95 ℃預(yù)變性30 s；然后95 ℃變性10 s，65 ℃退火30 s，共進(jìn)行40個(gè)循環(huán)。以GAPDH作為內(nèi)參基因，目的基因的相對(duì)表達(dá)水平通過(guò)2^－△△CT計(jì)算。

1.8Western blot方法檢測(cè)小鼠肝臟組織之中SREBP1c、FASN、ACC1和CD36蛋白的表達(dá)

每組隨機(jī)取3只小鼠部分肝臟組織，用RIPA抽取總蛋白，取蛋白樣品行SDS-PAGE凝膠電泳，濕電轉(zhuǎn)印至PVDF膜，將PVDF膜在含體積分?jǐn)?shù)為0.05的脫脂牛奶中封閉2 h；加入兔抗鼠SREBP1c多克隆抗體（1∶1 000）、兔抗鼠FASN單克隆抗體（1∶1 000）、兔抗鼠ACC1單克隆抗體（1：1000）、兔抗鼠CD36單克隆抗體（1∶1 000），于4 ℃下孵育過(guò)夜；以TBST溶液清洗后，加入相應(yīng)的羊抗兔二抗（1∶5 000），室溫下孵育2 h；洗膜，以化學(xué)發(fā)光劑處理，顯影，用Image J軟件分析條帶灰度值，計(jì)算目的蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用Graphpad prism 5和SPSS 26軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析，組間比較采用非配對(duì)的t檢驗(yàn)和重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1HCMV-IE2對(duì)小鼠體質(zhì)量、血糖和IR的影響

重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)方差分析顯示，時(shí)間、組別及時(shí)間與組別交互作用對(duì)兩組小鼠體質(zhì)量及空腹血糖水平均有顯著影響（F組別=10.81～67.13，F(xiàn)時(shí)點(diǎn)=93.80～154.50，F(xiàn)時(shí)點(diǎn)*組別=17.13～19.92，P<0.05）；單獨(dú)效應(yīng)分析顯示，第5周以后，實(shí)驗(yàn)組小鼠體質(zhì)量明顯大于對(duì)照組（F=12.78～45.00，P<0.05），見(jiàn)圖1A。第6周以后，實(shí)驗(yàn)組小鼠空腹血糖水平明顯高于對(duì)照組（F=36.89～100.05，P<0.05），見(jiàn)圖1B。在灌胃葡萄糖后，實(shí)驗(yàn)組小鼠血糖水平較對(duì)照組小鼠明顯升高，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組小鼠的GTT曲線下面積分別為2 100.66±279.65、2 856.33±289.54，兩組比較差異有顯著性（t=3.25，P<0.05），見(jiàn)圖1C。在腹腔注射胰島素后，與對(duì)照組小鼠比較，實(shí)驗(yàn)組血糖水平下降幅度較小，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的ITT曲線下面積分別為860.03±35.30、1 082.00±73.72，兩組比較差異有顯著性（t=4.70，P<0.01），見(jiàn)圖1D。

2.2高果糖條件下HCMV-IE2對(duì)小鼠肝臟組織病理學(xué)的影響

HE染色結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織出現(xiàn)大面積脂肪樣空泡，細(xì)胞核被擠向邊緣；對(duì)照組小鼠僅出現(xiàn)一些散在的、面積較小的空泡；油紅O染色結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟切面可見(jiàn)大面積的脂滴分布，而對(duì)照組小鼠肝臟僅出現(xiàn)了大小不等的散在紅色脂滴（圖2）。實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織TG、TC水平和血清ALT、AST水平均顯著高于對(duì)照組（t=4.52～13.12，P<0.01），見(jiàn)表2。

2.3高果糖條件下HCMV-IE2對(duì)肝臟組織中巨噬細(xì)胞M1/M2型極化的影響

免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組肝臟組織中巨噬細(xì)胞（F4/80）浸潤(rùn)明顯多于對(duì)照組（圖3）。同時(shí)，F(xiàn)CM和RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織中M1型巨噬細(xì)胞的比例及相關(guān)標(biāo)志物TNF-α和IL-6 mRNA的水平顯著增高（t=4.87～9.65，P<0.05），而M2型巨噬細(xì)胞的比例及其相關(guān)標(biāo)志物IL-10? mRNA的水平顯著降低（t=4.81～12.12，P<0.05），見(jiàn)表3。

2.4高果糖條件下HCMV-IE2對(duì)肝臟脂質(zhì)代謝相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響

RT-qPCR檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織中SREBP1c、ACC1、FAS、CD36 mRNA表達(dá)水平均上調(diào)（t=3.54～5.69，P<0.05），見(jiàn)表4。Western blot結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組小鼠肝臟組織中SREBP1c、ACC1、FASN和CD36的蛋白表達(dá)水平均上調(diào)，SREBP1c、ACC1和FASN蛋白表達(dá)水平顯著升高（t=7.94～9.96，P<0.05），見(jiàn)表4、圖4。

3討論

由于HCMV感染具有高度的種屬特異性，目前尚未建立感染HCMV的動(dòng)物模型。目前關(guān)于HCMV與糖脂代謝紊亂機(jī)制的研究主要還是局限在細(xì)胞水平方面，很難進(jìn)行體內(nèi)研究。UL122轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建克服了物種特異性難題，為研究IE2對(duì)機(jī)體代謝紊亂的影響提供了有效的途徑。本研究結(jié)果顯示，在果糖誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝模型小鼠中，IE2加速了血糖的升高，促進(jìn)了IR和肝臟脂肪變性。在果糖喂養(yǎng)的UL122轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟組織中，巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)明顯多于對(duì)照組，且表現(xiàn)出獨(dú)特M1/M2極化現(xiàn)象，趨向于向M1型巨噬細(xì)胞極化。以上結(jié)果表明HCMV編碼的IE2蛋白可通過(guò)誘導(dǎo)M1型巨噬細(xì)胞極化促進(jìn)果糖誘導(dǎo)的肝脂肪病變。

臨床研究表明，HCMV感染的肥胖和肝損傷患者通常伴有脂質(zhì)代謝紊亂。然而，HCMV感染引起人體脂質(zhì)代謝紊亂的分子機(jī)制尚不清楚。HCMV感染的一個(gè)特征是它以有利于病毒復(fù)制的方式調(diào)節(jié)感染細(xì)胞的新陳代謝，HCMV感染已被證明可誘導(dǎo)機(jī)體葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（GLUT4）的表達(dá)及其易位到細(xì)胞表面，從而導(dǎo)致用于脂肪酸從頭合成的細(xì)胞質(zhì)葡萄糖增加[10-11]。生物體合成的過(guò)多脂肪酸為病毒包膜的形成提供了充足的條件[2，12]。

巨噬細(xì)胞是機(jī)體最重要的免疫細(xì)胞之一，對(duì)于穩(wěn)定機(jī)體內(nèi)部環(huán)境和保護(hù)身體免受外界入侵具有至關(guān)重要的作用，它可極化為不同的類型并發(fā)揮不同的功能。其中M1型巨噬細(xì)胞在促炎方面起到了非常重要的作用，而M2型巨噬細(xì)胞則表現(xiàn)出抗炎、促進(jìn)組織重塑等特點(diǎn)[13]。研究顯示，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）模型小鼠肝臟中常伴隨著M1/M2型巨噬細(xì)胞百分比的增高。也有研究顯示，清除小鼠肝臟巨噬細(xì)胞可以減少因高脂肪飲食而導(dǎo)致的肝臟脂質(zhì)積累和IR，從而降低NASH的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[14]。因此肝臟巨噬細(xì)胞所特有的M1/M2型極化狀態(tài)在NAFLD的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色。

在HCMV感染期間，巨噬細(xì)胞是其作用的第一個(gè)靶標(biāo)，對(duì)HCMV持久存在和傳播是必不可少的[15-16]。CHAN等[17]發(fā)現(xiàn)HCMV感染單核細(xì)胞4 h后，與經(jīng)典M1型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)的65%的基因被上調(diào)，而與經(jīng)典M2型巨噬細(xì)胞極化相關(guān)的基因只有4%被上調(diào)。另外有研究顯示，NF-κB活性對(duì)于受HCMV感染的單核細(xì)胞偏向M1型促炎巨噬細(xì)胞極化至關(guān)重要，約79%的HCMV誘導(dǎo)的M1型巨噬細(xì)胞表型相關(guān)基因以NF-κB依賴性方式調(diào)節(jié)[7]。本研究結(jié)果顯示，與喂養(yǎng)高果糖的野生型小鼠相比，喂養(yǎng)高果糖的UL122轉(zhuǎn)基因小鼠的巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出獨(dú)特的M1/M2極化現(xiàn)象，在肝臟組織中趨向于M1型巨噬細(xì)胞極化。因此可以推測(cè)，這種獨(dú)特的M1型極化可能是由IE2誘導(dǎo)的，但其具體機(jī)制還有待后續(xù)實(shí)驗(yàn)深入研究。M1型巨噬細(xì)胞可釋放多種炎性遞質(zhì)，如促炎細(xì)胞因子和趨化因子等[18]。因此本研究又進(jìn)一步檢測(cè)了肝組織中M1型巨噬細(xì)胞標(biāo)志物TNF-α和IL-6 mRNA的水平，結(jié)果顯示，喂養(yǎng)高果糖的UL122轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織中TNF-α以及IL-6 mRNA的表達(dá)均顯著升高。SREBP1c是參與調(diào)控脂肪酸、TG和TC合成的轉(zhuǎn)錄因子，該因子能夠激活其下游的目標(biāo)基因，并且增強(qiáng)FASN、ACC1、CD36等多種參與脂肪酸從頭合成的基因的表達(dá)[19]。SREBP1c及其下游靶基因FASN以及ACC1在NAFLD患者的肝臟組織中表達(dá)水平高于正常人群[20]。本研究發(fā)現(xiàn)喂養(yǎng)高果糖的UL122轉(zhuǎn)基因小鼠肝組織當(dāng)中的SREBP1c、FASN和ACC1的mRNA表達(dá)水平明顯上調(diào)。推測(cè)IE2誘導(dǎo)的MI型巨噬細(xì)胞極化可能與此有關(guān)，可能是由于其促進(jìn)了炎癥細(xì)胞因子的分泌，并同時(shí)上調(diào)了脂質(zhì)生成相關(guān)基因的表達(dá)所致，進(jìn)一步促進(jìn)了脂肪從頭合成，增強(qiáng)了肝細(xì)胞的脂質(zhì)合成代謝，最終導(dǎo)致更多的脂質(zhì)沉積。

綜上所述，HCMV-IE2通過(guò)誘導(dǎo)肝組織中巨噬細(xì)胞向M1型極化影響肝臟脂質(zhì)代謝平衡，從而促進(jìn)果糖誘導(dǎo)的NAFLD的進(jìn)展，這一發(fā)現(xiàn)為HCMV感染引起的糖脂代謝紊亂機(jī)制的研究提供了新的研究方向。

倫理批準(zhǔn)和動(dòng)物權(quán)利聲明：本研究涉及的所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均已通過(guò)青島大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn)（20220308C57402022-0907107）。所有實(shí)驗(yàn)過(guò)程均遵照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》的規(guī)定進(jìn)行。

作者聲明：周曉瓊、王斌均參與了研究設(shè)計(jì)；周曉瓊、張現(xiàn)娟、王斌參與了論文的寫(xiě)作和修改。所有作者均閱讀并同意發(fā)表該論文，且均聲明不存在利益沖突。

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（本文編輯 耿波 厲建強(qiáng)）