王福軍

(1.黑龍江民族職業(yè)學(xué)院生物科技系 , 黑龍江 哈爾濱 150000 ; 2. 哈爾濱市福愛寵物醫(yī)院 , 黑龍江 哈爾濱 150000)

犬常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病主要包括腦、脊髓和外周神經(jīng)的損傷,癥狀主要見于疼痛、抽搐、骨骼肌肌肉震顫、癱瘓、神經(jīng)反射減弱或消失等。雖然神經(jīng)系統(tǒng)對損傷有一定的自我修復(fù)能力,但是過程復(fù)雜且漫長,需要把握住最佳治療時間積極的治療[1]。目前,干細(xì)胞治療技術(shù)作為新的治療手段已逐漸應(yīng)用到寵物臨床方面,給神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療開辟了新的方向[2]。干細(xì)胞在一定條件下可以分化成多種功能細(xì)胞或組織器官,醫(yī)學(xué)界稱其為“萬能細(xì)胞”[3],通過靜脈回輸可以遷移到中樞神經(jīng)病變部位,經(jīng)旁分泌作用產(chǎn)生可溶性細(xì)胞因子修復(fù)受損組織。干細(xì)胞因子在體內(nèi)迅速補充細(xì)胞新陳代謝所需的營養(yǎng),靶向修復(fù)受損細(xì)胞,激活休眠的干細(xì)胞,刺激新生組織再生。本文將介紹3例犬急性脊髓神經(jīng)系統(tǒng)疾病,通過結(jié)合臨床癥狀和數(shù)字高清X線或磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)診斷結(jié)果,使用干細(xì)胞因子加以干預(yù)治療,觀察患犬的恢復(fù)效果,以期為犬類似神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷和治療提供參考。

1 病例一

1.1 發(fā)病情況 八哥犬,2歲,雄性,體重10 kg?；既诰驮\前2 d開始出現(xiàn)行動緩慢,運動量少,高處跳躍活動減少,病情漸進加重,臨床表現(xiàn)為雙側(cè)后肢行動困難,勉強支撐身體,就診當(dāng)日突然出現(xiàn)雙側(cè)后肢癱瘓,僅靠兩前肢呈“劃水狀”方式移動?；既疅o既往病史,未受到撞擊和跌落。飲食有所減少,排便困難。

1.2 診斷

1.2.1 一般檢查 該患犬體溫正常,精神狀態(tài)一般,體表毛發(fā)狀態(tài)正常。觸診患犬腰部伴有疼痛反應(yīng),疼痛刺激雙側(cè)后肢,反應(yīng)極不敏感,且雙側(cè)后肢本體反射輕度消失。

1.2.2 影像學(xué)檢查 X線檢查:腰5～腰7椎間隙狹窄,椎間孔狹小灰暗,“馬頭狀”結(jié)構(gòu)外觀消失。

1.2.3 診斷結(jié)果 結(jié)合臨床癥狀和X線影像學(xué)檢查結(jié)果初步診斷患犬為腰5～腰7椎間盤突出癥,壓迫脊髓而導(dǎo)致雙側(cè)后肢癱瘓。

1.3 治療和效果 對患犬使用甲強龍連續(xù)靜脈滴注3 d以消除急性水腫。患犬脊髓神經(jīng)修復(fù)治療:靜脈滴注犬干細(xì)胞因子注射液,1支/d,連用3 d。支持治療時給予患犬靜脈滴注葡萄糖酸鈣;皮下注射維生素B1和維生素B12以營養(yǎng)神經(jīng);皮下注射骨肽,口服康仕健,修復(fù)軟骨,以改善患犬關(guān)節(jié)的靈活性;皮下注射痛立定以緩解其疼痛。

經(jīng)過3 d的綜合治療用藥并結(jié)合犬干細(xì)胞因子注射液靜脈輸注治療后,該患犬的雙側(cè)后肢痛覺逐漸靈敏,本體反射逐漸恢復(fù)正常,并可以正常站立,但行走還未恢復(fù)正常速度。除犬干細(xì)胞因子注射液外,其他藥物繼續(xù)使用。治療第7天,該患犬的癥狀完全消失,走路和跑動恢復(fù)正常。此后每日飼喂康仕健口服藥,半年后回訪,主述該犬平日表現(xiàn)未見異常。

2 病例二

2.1 發(fā)病情況 雜交蝴蝶犬,10歲,雌性,已絕育,無嚴(yán)重既往病史?；既帘驹壕驮\前3 d突然前后肢均站立不穩(wěn),運動量明顯下降,精神沉郁,食欲下降。主人帶其在家附近寵物醫(yī)院就診并進行血常規(guī)、血清生化和X線檢查,結(jié)果均未見明顯異常。采用激素療法、抗生素治療、降顱內(nèi)壓和皮下注射維生素B1和維生素B12等常規(guī)治療3 d,患犬未見好轉(zhuǎn),遂轉(zhuǎn)至本院。

2.2 診斷

2.2.1 一般檢查 該患犬前后肢均無法站立,本體反射消失,疼痛反應(yīng)輕度敏感,神經(jīng)系統(tǒng)疾病癥狀明顯,結(jié)合其他寵物醫(yī)院的檢查和治療進一步進行MRI檢查。

2.2.2 影像學(xué)檢查 MRI檢查結(jié)果顯示:頸胸腰椎多處椎間盤髓核信號降低,呈脫水變性,椎體背縱韌帶肥厚;其中頸3～頸4椎間隙狹窄,椎間盤背側(cè)纖維環(huán)連續(xù)性中斷,鄰近頸3～頸4椎間盤椎管內(nèi)可見脫出髓核(圖1A);頸2～頸5、頸6～胸1和胸12～腰5椎間盤背側(cè)向椎管內(nèi)改變(圖1B);相應(yīng)段脊髓受壓變形水腫明顯。

圖1 病例二MRI脊髓掃描圖

2.2.3 診斷結(jié)果 患犬頸胸腰椎多處椎間盤退行性改變,頸2～頸3、頸4～頸5、頸6～胸1和胸12～腰5椎間盤突出,頸3～頸4椎間盤髓核脫出,相應(yīng)段脊髓受壓損傷。

2.3 治療和效果 綜合分析該患犬此前治療過程和療效,本院建議對患犬采用常規(guī)用藥和靜脈輸注干細(xì)胞因子注射液進行嘗試治療。

首日采用甲強龍對患犬急性脊髓損傷進行治療以緩解組織水腫,采用抗生素進行抗菌消炎和皮下注射維生素B1和維生素B12營養(yǎng)神經(jīng)藥進行常規(guī)支持治療,但患犬癥狀未見改善。次日對患犬增加靜脈滴注干細(xì)胞因子治療,1支/d,連續(xù)3 d。

干細(xì)胞因子治療期間患犬精神狀態(tài)逐漸改善,飲食飲水增加,攙扶其前肢站立平穩(wěn),本體反射恢復(fù),但仍無法行走,后肢較前肢恢復(fù)緩慢。此后患犬繼續(xù)接受抗菌消炎藥與維生素B1和維生素B12營養(yǎng)神經(jīng)藥支持療法。7 d后對患犬后肢應(yīng)用動物專用輪椅,可支持其前肢正常行走,半個月后患犬行動自如,恢復(fù)其發(fā)病前狀態(tài)。

治療1個月后對患犬進行MRI影像學(xué)復(fù)查,可見椎間盤突出緩解,椎體背縱韌帶肥厚解除,脊髓水腫信號消失,頸3～頸4椎間盤髓核脫出物固化、脫水萎縮,未對脊髓造成明顯壓迫(圖1C),胸12～腰5段脊髓受壓變形水腫明顯緩解(圖1D)。

3 病例三

3.1 發(fā)病情況 雪納瑞,8歲,雄性,患犬無既往病史,飲食和排便均正常。就診1周前患犬出現(xiàn)行動緩慢,安靜時有渾身抖動現(xiàn)象,病情逐漸加重。

3.2 診斷

3.2.1 一般檢查 患犬就診當(dāng)日雙側(cè)后肢行走時不受支配,人為攙扶下勉強支撐其身體,腰間無力,身體前傾,頭伸直,兩前肢呈強力支撐狀態(tài)。疼痛刺激雙側(cè)后肢反應(yīng)不敏感,按壓其胸腰椎,多處有疼痛反應(yīng)。

3.2.2 影像學(xué)檢查 X線檢查未見明顯異常,需MRI檢查進一步確診。MRI檢查結(jié)果顯示:胸10～胸11和胸12～腰1椎間盤背側(cè)向椎管內(nèi)改變,腰1～腰2椎間盤背側(cè)向椎管內(nèi)改變,背側(cè)纖維環(huán)呈“鋸齒樣”改變(圖2A);患犬胸腰椎多處椎間盤髓核T2信號減低,椎體背縱韌帶肥厚;胸13～腰5椎體終板腹側(cè)少量增生和鈣化(圖2B);鄰近腰1～腰2椎間盤右側(cè)椎管內(nèi)見少量等T1和等T2髓核脫出物;相應(yīng)段脊髓受壓變形水腫明顯。

圖2 病例三MRI脊髓掃描圖

3.2.3 診斷結(jié)果 患犬椎體和椎間盤退行性改變;胸13～腰5椎體終板腹側(cè)增生和鈣化;胸10～胸11和胸12～腰1椎間盤突出;腰1～腰2椎間盤髓核脫出;相應(yīng)段脊髓受壓損傷。

3.3 治療和效果 綜合分析該患犬病情發(fā)展時長,采用常規(guī)用藥結(jié)合靜脈輸注犬干細(xì)胞因子注射液進行治療。

治療方案:給予患犬非甾體抗炎藥止疼,糖皮質(zhì)激素甲強龍進行抗炎消除患部水腫,維生素B1和維生素B12用來營養(yǎng)神經(jīng),干細(xì)胞因子靜脈輸注以恢復(fù)其受損神經(jīng)細(xì)胞,連續(xù)治療3 d。

該患犬表現(xiàn)出精神狀態(tài)逐日改善,疼痛緩解,后肢逐日站立平穩(wěn)。經(jīng)3 d治療后該患犬走路基本無異常,相較以往未用干細(xì)胞因子注射液用藥治療的患犬恢復(fù)迅速。

患犬康復(fù)后10 d復(fù)查MRI可見椎間盤突出得到緩解,椎體背縱韌帶肥厚解除,脊髓水腫信號消失,腰1～腰2脫出椎間盤髓核固化并脫水萎縮,未對脊髓造成壓迫(圖2C和2D)。

4 討論

干細(xì)胞具有再生為各種組織的潛能,在傳統(tǒng)醫(yī)療手段束手無策的疾病方面顯示出了奇跡般的治療效果。在體內(nèi)或體外特定的誘導(dǎo)條件下,干細(xì)胞可分化為多種組織細(xì)胞,可作為理想的種子細(xì)胞用于衰老和病變的組織器官損傷修復(fù)中。神經(jīng)干細(xì)胞具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力,是一種能自我更新的細(xì)胞[4]。患病部位組織損傷后釋放各種趨化因子,吸引神經(jīng)干細(xì)胞聚集到損傷部位,并在局部微環(huán)境的作用下分化為不同種類的細(xì)胞,修復(fù)并補充損傷的神經(jīng)細(xì)胞。干細(xì)胞增殖分化過程中分泌干細(xì)胞因子,干細(xì)胞因子經(jīng)血液循環(huán)進入組織,迅速補充細(xì)胞新陳代謝所需的全部營養(yǎng),靶向激活休眠的干細(xì)胞,促進損傷細(xì)胞的修復(fù),增強神經(jīng)突觸之間的聯(lián)系,建立新的神經(jīng)通路[5]。目前,干細(xì)胞的來源、分離、培養(yǎng)和鑒定還有許多工作要做,尤其體外培養(yǎng)的干細(xì)胞輸入體內(nèi)后還不能控制其生長分化,極大地增加了臨床應(yīng)用的風(fēng)險,注射干細(xì)胞還有一定的副作用,加重免疫系統(tǒng)的負(fù)擔(dān)。雖然干細(xì)胞的作用越來越被認(rèn)可,但是其高昂的價格讓很多人望而卻步。干細(xì)胞因子富含多種有效成分,可以刺激自體內(nèi)源性干細(xì)胞生長,也是體外培養(yǎng)干細(xì)胞必不可少的物質(zhì)。本文應(yīng)用的犬干細(xì)胞因子注射液為北京京蒙細(xì)胞生物科技股份有限公司生產(chǎn),3 mL/支,主要成分有:神經(jīng)生長因子、上皮細(xì)胞生長因子、粒細(xì)胞集落刺激因子、促干細(xì)胞生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、白細(xì)胞介素4、白細(xì)胞介素10、趨化因子、細(xì)胞間黏附分子-1和各種溶菌酶等100余種有效活性成分。干細(xì)胞因子進入機體后,休眠干細(xì)胞被大量激活,細(xì)胞分化速度達到生長期的水平,全面修復(fù)和補充受損、老化或病變的細(xì)胞。

病例一患犬通過急性雙側(cè)后驅(qū)癱瘓等癥狀和X線檢查結(jié)果診斷為急性椎間盤突出壓迫脊髓癥。對患犬采用緊急抗水腫治療,解除壓迫神經(jīng)的不利因素,恢復(fù)神經(jīng)細(xì)胞的功能。同時配合靜脈輸注干細(xì)胞因子對受損神經(jīng)細(xì)胞進行治療,促進神經(jīng)元的發(fā)育和分化,并恢復(fù)其正常功能,防止發(fā)生退行性病變。輔以其他藥物支持治療,將神經(jīng)細(xì)胞損傷程度降到最低?；既唐谥委熜Ч黠@,后期預(yù)后良好。另有2例結(jié)合臨床癥狀和MRI影像學(xué)檢查結(jié)果確診患有急性椎間盤疾病繼發(fā)急性脊髓神經(jīng)損傷,患犬臨床癥狀嚴(yán)重,在接受常規(guī)治療效果不明顯后,依靠干細(xì)胞因子靜脈輸注治療達到了理想的康復(fù)效果,而且未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng),因此認(rèn)為干細(xì)胞因子在修復(fù)神經(jīng)損傷方面有一定療效。目前,藥物仍是治療急性脊髓損傷的主要措施,關(guān)鍵是通過消除水腫和控制炎癥保護部分正常的神經(jīng)功能,并通過修復(fù)受損神經(jīng)實現(xiàn)神經(jīng)功能改善。

近些年中國小動物診療行業(yè)發(fā)展迅速,高清數(shù)字X光線、計算機斷層掃描(Computed tomography,CT)和MRI高端影像診斷技術(shù)逐漸被應(yīng)用和推廣,極大的提高了影像學(xué)診斷的準(zhǔn)確性。MRI診斷技術(shù)具有高軟組織分辨率優(yōu)勢,既可以顯示解剖結(jié)構(gòu)和病理改變,又可以清晰顯示出患犬椎間盤的退變情況和脊柱形態(tài)等,明顯優(yōu)于CT檢查和X線檢查[6]。本文應(yīng)用的犬干細(xì)胞因子注射液含有多種有效活性成分,包括多種干細(xì)胞因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長因子和神經(jīng)保護因子,對中樞和周圍神經(jīng)元的發(fā)育、分化、生長、再生和功能特性的表達均具有重要的調(diào)控作用[7]。通過靜脈注射干細(xì)胞因子可以治療患犬神經(jīng)損傷后出現(xiàn)的姿勢和行動異常、精神萎靡以及神經(jīng)性抽搐等癥狀。本文報道均為寵物醫(yī)院臨床治療病例而非造模病例,臨床每個病例脊髓損傷位置和程度均有差異性,因此未使用干細(xì)胞因子注射液的病例沒有進行描述,希望通過后期增加對類似病例患犬使用該藥物,從而完善對干細(xì)胞因子的應(yīng)用體會。