摘 要：氯丙嗪作為吩噻嗪類藥物的代表性鎮(zhèn)靜劑，在畜禽與漁業(yè)飼養(yǎng)中常被用于限制動(dòng)物活動(dòng)、降低營養(yǎng)素消耗，以促進(jìn)動(dòng)物生長和增重。動(dòng)物性食品中的氯丙嗪殘留對(duì)人類健康具有潛在風(fēng)險(xiǎn)，因此快速而準(zhǔn)確地測定動(dòng)物性食品中的氯丙嗪殘留對(duì)于確保食品安全至關(guān)重要。本文總結(jié)了近年來動(dòng)物性食品中氯丙嗪殘留檢測方法的研究進(jìn)展，包括色譜技術(shù)、色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、免疫分析法、電化學(xué)分析法以及毛細(xì)管電泳法，旨在為動(dòng)物性食品中氯丙嗪殘留檢測提供參考。

關(guān)鍵詞：氯丙嗪；動(dòng)物性食品；殘留檢測

Research Progress in the Detection of Chlorpromazine Residues in Animal Food

MENG Di

（Nanjing Agricultural Product Quality Testing Institute， Nanjing 210000， China）

Abstract： As a representative sedative of phenothiazines， chlorpromazine is often used to limit animal activities and reduce nutrient consumption in livestock and fishery breeding to promote animal growth and weight gain. Chlorpromazine residues in animal foods have potential risks to human health. Therefore， rapid and accurate determination of chlorpromazine residues in animal foods is essential to ensure food safety. This paper summarizes the research progress of the detection methods of chlorpromazine residues in animal foods in recent years， including chromatography， chromatography-mass spectrometry， immunoassay， electrochemical analysis and capillary electrophoresis， aiming to provide reference for the detection of chlorpromazine residues in animal foods.

Keywords： chlorpromazine; animal-derived foods; residual detection

氯丙嗪（Chlorpromazine，CPZ）又被稱為冬眠靈，以鹽酸鹽的形式存在，是吩噻嗪類藥物的代表性鎮(zhèn)靜劑。在畜禽、漁業(yè)飼養(yǎng)過程中添加吩噻嗪類藥物可以限制動(dòng)物運(yùn)動(dòng)、減少營養(yǎng)素消耗，有促進(jìn)動(dòng)物生長和增重催肥的作用。此外，在長途運(yùn)輸食品動(dòng)物時(shí)使用氯丙嗪可以減少動(dòng)物對(duì)環(huán)境的應(yīng)激，減少運(yùn)輸過程中動(dòng)物的死亡率[1]，因此在畜禽、漁業(yè)中存在非法使用氯丙嗪的情況。近年來，我國多地檢出動(dòng)物性食品中氯丙嗪殘留。齊士林等[2]對(duì)廈門口岸進(jìn)出口的100多份豬肉、豬肝、魚肉、牛蛙樣品進(jìn)行檢測，檢出2個(gè)氯丙嗪陽性豬肉樣品，殘留量分別為100 μg·kg-1和130 μg·kg-1。由于吩噻嗪類藥物高脂溶性的特性，其容易在脂肪組織中積聚，且代謝速度相對(duì)緩慢。當(dāng)吩噻嗪類藥物通過食物鏈進(jìn)入人體后，可能導(dǎo)致一系列不良反應(yīng)，如粒細(xì)胞缺乏癥、肝功能障礙等[3]。為了保證食品安全，2020年相關(guān)部門頒布了《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》（GB 31650－2019），明確規(guī)定氯丙嗪只能用于治療，不允許在動(dòng)物性食品中被檢測出[4]。

本文綜述了近年來動(dòng)物性食品中氯丙嗪殘留檢測的研究進(jìn)展，旨在為相關(guān)檢測工作提供參考。目前，動(dòng)物性食品中氯丙嗪殘留的檢測方法主要包括色譜法、色譜質(zhì)譜聯(lián)用、免疫分析方法、電化學(xué)分析法以及毛細(xì)管電泳法等。《豬腎和肌肉組織中乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安殘留量的測定液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20763—2006）[5]規(guī)定氯丙嗪的檢出限為0.5 μg·kg-1。

1 氣相色譜及其質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜法利用不同物質(zhì)在固定相和移動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異實(shí)現(xiàn)高效分離，使得復(fù)雜樣品中的氯丙嗪能夠被準(zhǔn)確檢測。由于氣相色譜法具有分析速度快、樣品處理和分析過程相對(duì)簡單、適合大批量樣品的快速篩查等特點(diǎn)，常被用于多種類型動(dòng)物性食品中氯丙嗪的檢測，包括肉類、乳制品、蛋類等[6]。但由于氯丙嗪是極性化合物，在氣相色譜中不易揮發(fā)，因此需要進(jìn)行復(fù)雜的樣品前處理，如衍生化反應(yīng)，以提高其揮發(fā)性，這增加了分析的復(fù)雜性和成本。此外，食品基質(zhì)中的水分和雜質(zhì)可能干擾氯丙嗪的分離和檢測，需要嚴(yán)格控制樣品的水分含量并進(jìn)行適當(dāng)?shù)膬艋幚?，檢測范圍存在一定局限性。氣相色譜與質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)合使用能夠有效提升方法的選擇性、靈敏度和定性分析能力，從而拓展其應(yīng)用范圍。

呂燕等[7]建立了氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定豬肝中氯丙嗪殘留量的方法，樣品利用乙酸乙酯進(jìn)行提取，在40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮，乙腈復(fù)溶后加入正己烷去脂，C18柱凈化，最后通過氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行定性定量分析。氯丙嗪在10～200 μg·L-1線性關(guān)系良好（R2=0.999 8），3種不同添加濃度（1.0 μg·kg-1、5.0 μg·kg-1和10 μg·kg-1）下氯丙嗪的平均回收率在80.2%～97%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.6%～10.3%，檢出限（S/N＝3）為1 μg·kg-1。

時(shí)巧翠等[8]建立了介質(zhì)液液萃取-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析血液中吩噻嗪類藥物的方法。血液樣品經(jīng)乙醚進(jìn)行萃取，通過氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行測定。結(jié)果表明，氯丙嗪在25～1 000 ng·mL-1線性關(guān)系良好（R2=0.999 8），檢出限為1.0 ng·mL-1，以空白血液樣品為基體進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，在3個(gè)添加濃度（50 ng·mL-1、200 ng·mL-1、1 000 ng·mL-1）下，回收率為76.5%～102.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.4%～8.5%。

2 高效液相色譜及其質(zhì)譜聯(lián)用法

氣相色譜法（Gas Chromatography，GC）定性分析易受基質(zhì)干擾；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）前處理過程復(fù)雜，需要除水，耗時(shí)較長；而高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）可分析沸點(diǎn)高的樣品，與質(zhì)譜技術(shù)聯(lián)用可提高測定的靈敏度和特異性，對(duì)于測定組分復(fù)雜的樣品具有較大的優(yōu)勢，應(yīng)用較為廣泛。

吳基任等[9]采用UPLC-MS/MS測定豬肉、牛肉、羊肉中氯霉素類藥物與氯丙嗪的殘留量，樣品經(jīng)1%甲酸乙腈溶液提取，多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯材料的HYPERSEP Retain-PEP固相萃取柱進(jìn)行凈化，多反應(yīng)監(jiān)測方式檢測，氯丙嗪在1.0～100 ng·mL-1線性關(guān)系良好（R2=0.992 6），檢出限為0.03 μg·kg-1，定量限為0.1 μg·kg-1。以空白豬肉和牛肉樣品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，添加濃度為0.2 μg·kg-1、2.0 μg·kg-1、20.0 μg·kg-1，回收率在80.6%～88.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.5%～1.6%。

張璇等[10]建立了液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）法測定水產(chǎn)品中氯丙嗪殘留量的方法。樣品加入200 μL 1 mol·L-1氫氧化鈉溶液后，采用乙酸乙酯進(jìn)行提取，氮吹濃縮后用80%乙腈溶解，用PSA和C18分散固相萃取材料進(jìn)行凈化，內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析，多反應(yīng)監(jiān)測方式進(jìn)行檢測，該方法在0.5～20 μg·kg-1相關(guān)系數(shù)大于0.999，檢出限為0.5 μg·kg-1，定量限為1.0 μg·kg-1，在鳊魚、草魚、大閘蟹等14種水產(chǎn)品中添加水平為1 μg·kg-1、5 μg·kg-1和10 μg·kg-1時(shí)的回收率和精密度均滿足分析要求，對(duì)不同種類的水產(chǎn)品適用性較好。

王旭峰等[11]建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）法測定水產(chǎn)品中氯丙嗪殘留量的方法。樣品利用1%氨水-乙酸乙酯進(jìn)行提取，KNORTH m-PFC SPE小柱進(jìn)行凈化，洗脫液在氮吹濃縮后，用0.5 mL乙腈溶解殘?jiān)捎肬PLC-MS/MS測定。氯丙嗪在0.5～50 ng·mL-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.999 1，檢出限為0.1 μg·kg-1，定量限為0.3 μg·kg-1。在草魚、對(duì)蝦、牡蠣和牛蛙4種基質(zhì)中進(jìn)行0.3 μg·kg-1、1.5 μg·kg-1、6.0 μg·kg-1濃度水平下的加標(biāo)回收試驗(yàn)，平均加標(biāo)回收率為87.8%～107.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）為3.2%～7.7%。該方法具有高靈敏度和廣泛適用性，能夠有效地應(yīng)用于不同水產(chǎn)品基質(zhì)中鎮(zhèn)靜劑及其代謝物殘留的分析。

3 免疫分析法

免疫分析法是利用抗原與抗體之間的特異性結(jié)合建立的一種檢測分析方法，通過免疫放大技術(shù)產(chǎn)生肉眼或者儀器可以分辨的形態(tài)。免疫學(xué)分析技術(shù)的獸藥殘留快速檢測中，應(yīng)用最為廣泛的有酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）和膠體金免疫層析法，由于操作簡便、技術(shù)成熟，在食品安全、醫(yī)學(xué)診斷等領(lǐng)域具有不可取代的地位。

WANG等[12]基于單克隆抗體和納米球結(jié)合進(jìn)行時(shí)間分辨熒光免疫分析（nano-TRFIA），用于快速定量豬肉中的氯丙嗪殘留物，檢出限為0.32 μg·kg-1，線性范圍為0.46～10.0 μg·kg-1，適用于豬肉中氯丙嗪的快速測定。GAO等[13]建立了廣譜的ELISA法檢測豬組織中吩噻嗪類藥物，檢出限在0.2～0.4 ng·mL-1，回收率在73.8%～96.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.1%～14.3%。SHI等[14]開發(fā)了一種異種競爭性間接酶聯(lián)免疫吸附測定法，用于測定肉及動(dòng)物飼料中氯丙嗪的殘留量。在雞肉和豬肉中氯丙嗪的檢測限在0.5～0.8 ng·g-1，回收率在74.1%～96.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.4%～15.1%。YIN等[15]基于氯丙嗪單克隆抗體建立了雞和豬肝臟中的氯丙嗪殘留ELISA法，由陽離子牛血清白蛋白與氯丙嗪偶聯(lián)形成的免疫原產(chǎn)生的抗體對(duì)氯丙嗪表現(xiàn)出高靈敏度，IC50為0.73 μg·kg-1，在雞和豬肝中的回收率分別為88%～95%和86%～95%，測定內(nèi)變異系數(shù)分別小于15.3%和13.5%。王敏等[16]建立了豬肉組織中氯丙嗪的ELISA法，IC50為15.38 ng·mL-1，最低檢測限為0.51 ng·mL-1，線性范圍為1.37～111.11 ng·mL-1。

4 電化學(xué)分析法

電化學(xué)分析法的原理是目標(biāo)物與工作電極上的電活性物質(zhì)接觸后，產(chǎn)生化學(xué)氧化還原反應(yīng)，進(jìn)而引發(fā)電流信號(hào)的改變，從而進(jìn)行選擇性分析。這種方法結(jié)構(gòu)簡單，易于操作，并且成本相對(duì)較低。

鄒玉婷[6]利用多巴胺的自聚反應(yīng)，在納米銀（AgNPs）和玻碳電極（Glassy Carbon Electrode，GCE）表面形成了聚多巴胺（Polydopamine，PDA）膜，成功實(shí)現(xiàn)了納米銀在玻碳電極表面的均勻分散，進(jìn)而制備了PDA@AgNPs/GCE修飾電極。采用方波伏安法建立了電化學(xué)快速檢測方法，并驗(yàn)證了該方法的準(zhǔn)確性和可靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在濃度為5.0×10-8～1.0×10-5 mol·L-1時(shí)，氯丙嗪呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，線性系數(shù)高達(dá)0.991。同時(shí)，該方法的檢出限（S/N=3）為1.7×10-8 mol·L-1，在空白豬肉、雞肉和牛肉基質(zhì)中進(jìn)行濃度分別為0.05 μmol·L-1、0.50 μmol·L-1、5.00 μmol·L-1的加標(biāo)回收試驗(yàn)，加標(biāo)回收率在79.8%～93.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.93%～6.85%。

5 毛細(xì)管電泳法

毛細(xì)管電泳法是一種基于電場驅(qū)動(dòng)、樣品組分淌度、分配行為差異的高效、快速微分離分析技術(shù)。毛細(xì)管電泳法不僅分離效率極高、分析速度快，而且操作簡單，試劑消耗量極少。因此，它在生命科學(xué)、藥物分析、環(huán)境科學(xué)、食品科學(xué)等領(lǐng)域中都發(fā)揮著重要作用。

王濤等[17]采用高效毛細(xì)管電泳法對(duì)飼料中鹽酸氯丙嗪、地西泮、艾司唑侖等4種鎮(zhèn)靜類藥物進(jìn)行了檢測，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了緩沖液種類及pH值、表面活性劑十二烷基硫酸鈉的濃度、添加劑、毛細(xì)管長度、檢測波長等參數(shù)，最終確定磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉為緩沖液，pH值為8.6，表面活性劑十二烷基硫酸鈉濃度為15 mmol·L-1，選擇7.5%的甲醇作為添加劑，毛細(xì)管長度為37 cm，檢測波長257 nm時(shí)，4種鎮(zhèn)靜類藥在11 min內(nèi)可以實(shí)現(xiàn)分離檢測，線性范圍為5～50 μg·mL-1，相關(guān)系數(shù)≥0.947 9。氯丙嗪的檢測限為2 mg·kg-1，樣品回收率為67.5%～98.2%，精密度為5.7%～12.3%。梁鑫等[18]采用彈性石英毛細(xì)管（31.5 cm，25 μmi.d.，360 μmo.d.），以4.90×10-3～7.80×10-3 mol·L-1 NaH2PO4（pH=7）為緩沖液，碳纖維電極作為工作電極（長200 μm，直徑8 μm），檢測電勢為0.72 V。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，氯丙嗪在5.0×10-7～1.0×10-4 mol·L-1表現(xiàn)出良好的線性，相關(guān)系數(shù)為0.999 8，檢測限為1.0×10-7 mol·L-1，回收率為96.0%。

6 結(jié)語

畜產(chǎn)品的質(zhì)量安全與人體健康緊密相關(guān)，隨著食品標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量體系的持續(xù)改進(jìn)與提升，對(duì)畜產(chǎn)品中各類殘留物的限制要求也日益嚴(yán)格。目前，高效快速的檢測方法主要包括色譜類技術(shù)和免疫化學(xué)法，特別是液相色譜法及其與多種提取技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用，展現(xiàn)出極高的準(zhǔn)確率和快速檢測能力，為畜產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)控提供了有力支持。液相色譜法是食品安全檢測的主要技術(shù)手段，操作簡便、靈敏度高、精密度強(qiáng)，在基層食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)中廣泛應(yīng)用，但其定性能力較差。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析吩噻嗪類藥物殘留效果良好，但儀器昂貴、維護(hù)成本高、體積大，且需高技能操作人員，基層推廣存在困難。綜上所述，氯丙嗪在畜產(chǎn)品中的殘留檢測直接關(guān)系到廣大消費(fèi)者的食品安全與身體健康。因此，選擇合適的快速檢測方法對(duì)于推動(dòng)養(yǎng)殖業(yè)的綠色健康發(fā)展和保障食品安全具有極其重要的意義。

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作者簡介：孟迪（1994—），女，安徽阜陽人，碩士，助理農(nóng)藝師。研究方向：農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測。