摘 要:本文分析了飼喂富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺小鼠的組織硒積累量、有機硒利用率及其對生物學(xué)作用的影響。結(jié)果表明,富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺都是良好的補硒食品,但攝入相同有機硒的水平下,富硒平菇的組織硒積累量更高,這歸因于其更高的有機硒利用率(97.46%)??寡趸福⊿OD、CAT、GPx和POD)、免疫功能因子(IgA、TNF-α和IL-6)及機體衰老特征因子(LPO、MDA和PCOs)的測定結(jié)果表明,兩種硒源都有不錯的生物學(xué)功效,但富硒平菇因其更高的有機硒利用率而表現(xiàn)出更強的抗氧化、免疫調(diào)節(jié)和抗衰老功能。
關(guān)鍵詞:有機硒;抗氧化;免疫調(diào)節(jié)
The Effects of Different Selenium Sources on Selenium Distribution,"Antioxidant and Immune Function in Mouse Tissues
SU Yuanyuan1, WANG Mengmeng2, GONG Yashi2, ZONG Shuai2
(1.Suqian Product Quality Supervision and Inspection Institute, Suqian 223800, China;
2.College of Food Science and Engineering, Yangzhou University, Yangzhou 225127, China)
Abstract: This article analyzes the tissue selenium accumulation, organic selenium utilization rate, and their impact on biological effects in mice fed with selenium rich shiitake mushrooms and selenium rich bottle crushed rice purse. The experimental results showed that both selenium rich shiitake mushrooms and selenium rich pot bottle crushed rice purse were good selenium supplement foods, but under the same level of organic selenium intake, the tissue selenium accumulation of selenium rich shiitake mushrooms was higher, which is attributed to their higher organic selenium utilization rate (97.46%). The measurement results of antioxidant enzymes (SOD, CAT, GPx, and POD), immune function factors (IgA, TNF-α, and IL-6), and body aging characteristic factors (LPO, MDA, and PCOs) indicate that both selenium sources have good biological effects, but selenium rich shiitake mushrooms exhibit stronger antioxidant, immune regulatory, and anti-aging functions due to their higher organic selenium utilization rate.
Keywords: organic selenium; antioxidant; immune regulation
硒是維持機體生命活動的必需微量元素之一,具有多種生物學(xué)功能,對機體免疫應(yīng)答、疾病預(yù)防、抗氧化和抗癌等功能至關(guān)重要[1]。硒不能在體內(nèi)合成,必須通過食物攝取。中國營養(yǎng)學(xué)會已經(jīng)將硒列為
15種需每天補充的膳食營養(yǎng)素之一,推薦成人日攝入量為20~250 μg,并且疾病患者的硒攝入量應(yīng)適度提高[2]。據(jù)統(tǒng)計,我國有2/3的地區(qū)缺硒,約7億人口的硒攝入量遠(yuǎn)低于中國營養(yǎng)學(xué)會的推薦攝入量[3]。因此,通過飲食的方式補硒不僅對個體的健康具有重要意義,還對改善社會健康水平、提高人們生活質(zhì)量、緩解醫(yī)療壓力具有重要的社會價值。經(jīng)過幾十年的發(fā)展,有機硒因其毒性低、安全性高、生物利用度高和補硒效率高等優(yōu)勢,已經(jīng)取代無機硒成為飲食補硒的首選。但是,通過飲食攝入有機硒的吸收效果、組織分布、功能活性如何仍少見。因此,本研究選取市場占有率高、日常易獲取的兩類含有機硒食品(富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺)為研究對象,通過實驗?zāi)┢谛∈蠹S便硒含量測定小鼠對樣品中有機硒的吸收效果;通過測定小鼠心臟、肝臟、腎臟等器官組織中硒含量評價小鼠攝入有機硒后,硒元素在體內(nèi)的分布情況;通過測定抗氧化酶、免疫因子及衰老因子等代表性標(biāo)志物評價有機硒對小鼠機體生物功能的影響。
1 材料與方法
1.1 材料、試劑與儀器設(shè)備
富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺購于阿里巴巴購物平臺。乙醇、正丁醇,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;三氯甲烷,上海阿拉丁生化科技股份有限公司;NaOH,美國西格瑪奧德里奇公司;濃鹽酸,南京化學(xué)試劑股份有限公司;超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)檢測試劑盒、過氧化氫酶(Catalase,CAT)檢測試劑盒、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GPx)檢測試劑盒、過氧化物酶(Peroxidase,POD)檢測試劑盒,美國Sigma-Aldrich公司;免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)檢測試劑盒、腫瘤壞死因子α(Tumor Necrosis Factor α,TNF-α)檢測試劑盒、白細(xì)胞介素6(Interleukin 6,IL-6)檢測試劑盒,上海酶聯(lián)生物科技有限公司;過氧化脂質(zhì)(Lipid Peroxidation,LPO)檢測試劑盒、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)檢測試劑盒、蛋白質(zhì)羰基(Protein Carbonyls,PCOs)檢測試劑盒,南京建成生物工程研究所。pH計,梅特勒托利多國際貿(mào)易有限公司;紫外可見分光光度計,美國PerkinElmer公司;恒溫水浴鍋,江蘇金壇市中大儀器廠;酶標(biāo)儀,賽默飛世爾科技公司。
1.2 動物實驗
本實驗由揚州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供24周齡ICR雄性小鼠(30只)。小鼠飼養(yǎng)于SPF級動物房,動物房溫度為23~25 ℃,相對濕度為50%~60%,12 h光照-黑暗循環(huán),并保證環(huán)境清潔,食物及飲用水充足,可自由取食。小鼠適應(yīng)環(huán)境一周后,將小鼠隨機分為3組(每組10只),即正常對照組、富硒平菇處理組和富硒壺瓶碎米薺處理組。富硒平菇處理組小鼠每日灌胃富硒平菇粉0.5 g(含有機硒約120 μg);富硒壺瓶碎米薺處理組小鼠每日灌胃富硒壺瓶碎米薺0.08 g(含有機硒約120 μg);正常對照組小鼠灌胃相同體積的生理鹽水。在樣品處理61 d時,將小鼠用舒泰麻醉后,收集小鼠糞便、外周血和心臟、肝臟、腎臟、肌肉等組織器官備用。所有動物實驗按照中華人民共和國法律和道德準(zhǔn)則進(jìn)行,并通過揚州大學(xué)實驗動物護(hù)理倫理委員會批準(zhǔn)(許可證標(biāo)號SYKX2022-0044)。
1.3 硒含量測定
組織中硒含量參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中硒的測定》(GB 5009.93—2017)進(jìn)行測定。有機硒利用率=[120-糞便平均硒含量(μg·g-1)×糞便質(zhì)量(g)]/120(μg)×100%。
1.4 生理生化指標(biāo)測定
SOD通過基于黃嘌呤氧化酶顯色的方法進(jìn)行測定;CAT、POD、LPO和MDA通過比色法進(jìn)行測定;GPx通過檢測NADPH吸光度的方法進(jìn)行測定;IgA、TNF-α和IL-6通過雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)進(jìn)行測定;PCOs通過分光光度法進(jìn)行測定。所有實驗過程均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。
1.5 數(shù)據(jù)分析
采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析,并表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。
2 結(jié)果與分析
2.1 組織硒含量及有機硒利用率
由表1可知,相較于正常對照組小鼠,富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺處理都能明顯提高小鼠各組織器官的硒含量,尤其是肝臟和腎臟組織。相較于正常對照組小鼠,富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺處理對于肝臟中硒含量分別能提高208.93%和139.29%,對于腎臟中硒含量分別能提高106.82%和77.27%,這說明兩種硒源都是良好的膳食硒營養(yǎng)補充劑。此外,相較于富硒壺瓶碎米薺,富硒平菇處理后組織器官中的硒含量更高,說明富硒平菇的補硒效果更好、效率更高,這可能是由于食用菌相較于植物通常含有更多的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)是硒元素主要的有機化形式之一。另外,富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺的有機硒利用率分別為97.46%和67.71%,這也證明了富硒平菇中的有機硒更容易被機體利用。這與之前文獻(xiàn)報道的富硒壺瓶碎米薺體外消化過程中總硒釋放量[4]及大鼠對富硒平菇的生物利用率接近[5]。
2.2 富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺對小鼠機體抗氧化、免疫功能和衰老指征的影響
SOD、CAT、GPx和POD是動物體內(nèi)主要的抗氧化酶,其活性的高低能直接反映機體的抗氧化能力[6]。肝臟是最容易受到氧化損傷及氧化產(chǎn)物積累的器官。由表2可知,富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺處理都能提高肝臟的抗氧化酶活性,尤其是富硒平菇處理后,相較于正常對照組,SOD、CAT、GPx和POD的活性分別增加了179.68%、133.11%、108.39%和19.10%。這些結(jié)果與肝組織中硒含量的增加相關(guān),也印證了硒能影響機體內(nèi)抗氧化酶功能的共識。TNF-α和IL-6分別是Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,兩類細(xì)胞分別介導(dǎo)細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答。IgA是由漿細(xì)胞分泌的一種具有抗病毒、抗菌、免疫調(diào)節(jié)作用的免疫球蛋白。實驗證明兩種硒源都能提高機體細(xì)胞免疫和免疫球蛋白水平,但從細(xì)胞因子提升幅度看,富硒平菇具有更強的免疫調(diào)節(jié)能力。機體內(nèi)LPO會分解為醇類和醛類等物質(zhì),其中MDA是一種生物毒性物質(zhì),會導(dǎo)致細(xì)胞死亡并促進(jìn)人體衰老。PCOs的產(chǎn)生是蛋白質(zhì)分子被自由基氧化修飾的一個重要標(biāo)記,會隨年齡的增長而上升。兩種硒源都能不同程度地降低機體衰老指標(biāo)水平,富硒平菇可能因其更高的有機硒利用率而有更強的功效。
3 結(jié)論
本研究結(jié)果表明富硒平菇和富硒壺瓶碎米薺都是良好的膳食硒源,均能起到補硒作用并調(diào)節(jié)機體功能。但是,攝入相同有機硒水平時,富硒平菇具有更高的有機硒利用率和組織硒積累水平,因而在機體抗氧化系統(tǒng)、免疫功能和對抗機體衰老方面具有更強的效果。
參考文獻(xiàn)
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基金項目:揚州大學(xué)高層次引進(jìn)人才科研基金(137012023);江蘇省產(chǎn)學(xué)研合作項目(BY20221437);揚州大學(xué)大學(xué)生學(xué)術(shù)科技創(chuàng)新基金資助項目(XCX20231064)。
作者簡介:蘇媛媛(1981—),女,江蘇宿遷人,本科,高級工程師。研究方向:食品加工及質(zhì)量檢測。