陳東霞 李晨龍 梁鵬

【摘要】 肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的繼發(fā)性惡性腫瘤，目前共識的治療方式是在安全范圍內(nèi)通過手術(shù)最大程度切除腫瘤組織，術(shù)后進(jìn)行化學(xué)治療以及局部或全身放射治療，但其治療效果仍不理想。人源異種移植瘤模型能夠很好地保留患者原發(fā)腫瘤異質(zhì)性、組織學(xué)特性和分子多樣性，能夠?yàn)檠芯啃碌闹委煼椒ㄌ峁┬滤悸芳靶碌难芯抗ぞ?。本文就移植瘤模型的建立、模型在肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤治療中的應(yīng)用研究以及模型的應(yīng)用前景和局限性進(jìn)行綜述。

【關(guān)鍵詞】 肺癌；腦轉(zhuǎn)移瘤；人源異種移植模型

【中圖分類號】 R739.41；R734.2? 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A? 【文章編號】 1672-7770（2024）03-0329-04

肺癌是全球最普遍的惡性腫瘤之一，也是癌癥患者死亡的主要原因［1］。其中非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）的發(fā)病率約占所有肺癌病例的85%［2］。肺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的常見部位包括腦、肝和骨［3］，其中腦部轉(zhuǎn)移發(fā)生率達(dá)30%～50%［4］。腦轉(zhuǎn)移瘤是最常見的顱內(nèi)腫瘤，而在肺癌中NSCLC是腦轉(zhuǎn)移發(fā)生的主要原因，占所有癌癥腦轉(zhuǎn)移的43%左右［5］。目前肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤的治療手段主要有腦放射治療（whole brain radiotherapy，WBRT）、立體定向放射治療（stereotactic radiosurgery，SRS）、外科手術(shù)治療及輔助化療。然而肺癌腦轉(zhuǎn)移患者生存預(yù)后依然不能令人滿意，總生存期（overall survival，OS）僅約7～8個月［6］。由于現(xiàn)階段對癌癥復(fù)雜的異質(zhì)性的研究有限，以及對臨床前癌癥模型的應(yīng)用認(rèn)識不夠透徹，導(dǎo)致很多新型藥物在臨床實(shí)踐中成功率較低。為研究肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤更有效的治療方法，因此需要在能夠充分反映人類癌癥異質(zhì)特性的模型上進(jìn)行深入探索。隨著人源異種移植模型（patient derived xenograft，PDX）在熟知的幾種腫瘤中獲得了較好的研究進(jìn)展，有研究［79］利用肺癌組織，建立小鼠腎包膜下PDX模型，包括中低分化鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、腺鱗癌、小細(xì)胞癌、大細(xì)胞未分化癌和肉瘤。4～12周后，收集移植瘤與原始組織進(jìn)行比較，結(jié)果均提示異種移植瘤與原始腫瘤具有遺傳相似性，并為肺癌治療提供了更多的靶點(diǎn)。PDX模型作為一種更先進(jìn)的臨床前腫瘤模型［1011］引起了人們的關(guān)注。因此構(gòu)建肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤的PDX 模型有望成為臨床前藥物研發(fā)的強(qiáng)大工具。

1 PDX模型的構(gòu)建及應(yīng)用

1.1 PDX模型的建立方法

1.1.1 接種組織、細(xì)胞的處理 PDX模型的建立是通過將患者新鮮的腫瘤組織（含有腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞以及血管成分）、原代細(xì)胞植入到免疫缺陷小鼠體內(nèi)來完成的［1213］。將手術(shù)獲得的新鮮腫瘤組織去除壞死組織切成較小碎片，進(jìn)行原代細(xì)胞處理的細(xì)胞要經(jīng)過化學(xué)消化成單細(xì)胞懸液，用1 640培養(yǎng)基（含有10%胎牛血清、1%青霉素/鏈霉素）置于37 ℃、5% CO2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。穩(wěn)定傳代后以1×105個細(xì)胞每50 μL［14］的1 640接種到免疫缺陷小鼠體內(nèi)。對于直接植入的新鮮腫瘤組織要將其分割成體積1～3 mm3的小塊，用培養(yǎng)液沖洗3～4次。然后在最短時間內(nèi)植入免疫缺陷小鼠體內(nèi)。接受患者腫瘤碎片的第一代小鼠通常記為F0，當(dāng)腫瘤達(dá)到足夠大時，將其解剖并重新植入到其他受體小鼠體內(nèi)，此后的每一代分別記為F1，F(xiàn)2，F(xiàn)3，…，F(xiàn)n。

1.1.2 免疫缺陷小鼠的種類及接種部位 可用于PDX模型的免疫缺陷小鼠有多種，嚴(yán)重受損免疫缺陷小鼠（severe combined lmmunodeficient，SCID）、無胸腺裸鼠、非肥胖糖尿病小鼠（non obese diabetes/SCID，NOD/SCID）和白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）受體γ鏈敲除小鼠（NOD-SCID IL-2 receptor gamma，NSG）［15］。有研究表明，小鼠免疫功能缺損程度越高，建模的成功率越高，因此由于NSG小鼠具有高度的免疫缺陷、不受免疫方面的影響的特點(diǎn)，其成為了構(gòu)建PDX模型較受歡迎的選擇［16］。植入方式可分為原位移植和異位移植。在原位移植中，研究者將患者的腫瘤組織種植到小鼠的顱內(nèi)，原位移植既模擬了腫瘤原發(fā)生長的微環(huán)境，又很好地反映了腫瘤的生物學(xué)特征，因此被認(rèn)為是一種理想的模型，但原位移植對實(shí)驗(yàn)操作要求較高，且不易成功。異位移植最常見的植入部位是移植到小鼠的背部皮膚下或者腎包膜下［17］。異位移植的優(yōu)點(diǎn)是操作簡單，腫瘤易觀察，缺點(diǎn)是不能充分還原腫瘤生長微環(huán)境。

1.2 PDX模型構(gòu)建的必要性 改善肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤治療方法的一個障礙是缺乏可靠的臨床前模型。目前，肺癌腦轉(zhuǎn)移細(xì)胞系和體內(nèi)腦轉(zhuǎn)移模型獲取并不廣泛。PDX是一種用于臨床前研究癌癥的成熟模型，研究者通過直接從患者身上獲取腫瘤樣本，然后種植在小鼠的側(cè)翼或后腿，或者腦原位植入。Baschnagel等［18］建立異位和原位顱內(nèi)移植瘤模型，并對患者和配對腫瘤進(jìn)行RNA和DNA測序。從形態(tài)學(xué)上看，模型保留了患者原發(fā)灶較強(qiáng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)特征。通過對轉(zhuǎn)錄組和突變分析顯示匹配的患者和PDX樣本之間高度相關(guān)，檢測到超過95%的變異被保留在匹配的PDX模型中，這為臨床前治療藥物的測試提供了寶貴的資源。研究人員構(gòu)建的肺癌PDX模型［1920］，通過全外顯子組測序（whole exome sequencing，WES ）和RNA-seq證實(shí)了PDX模型能夠準(zhǔn)確復(fù)制原發(fā)腫瘤的分子異質(zhì)性，并驗(yàn)證了標(biāo)準(zhǔn)治療方案在肺癌 PDX模型中的療效。盡管PDX模型的概念和初步建立已經(jīng)存在了幾十年，但隨著個體化治療方法的轉(zhuǎn)變，它們在腫瘤學(xué)藥物開發(fā)中的價值正在逐步實(shí)現(xiàn)，因此構(gòu)建特異性的肺癌腦轉(zhuǎn)移模型是十分必要的。

2 PDX模型在肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤治療的研究

2.1 PDX模型在肺癌腦轉(zhuǎn)移靶向治療中的研究 雖然近幾年醫(yī)療技術(shù)發(fā)展迅速，肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤的患者預(yù)后有所改善，但如何有效地治療及延長患者的OS仍舊是困擾醫(yī)療工作者的一大難題。隨著PDX模型在乳腺癌、胃癌及腦膠質(zhì)瘤［2123］等惡性腫瘤研究領(lǐng)域獲得的成就，有研究者認(rèn)為PDX模型可用于肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤機(jī)制的研究及發(fā)現(xiàn)潛在的治療方案，因?yàn)檫@些模型高度還原了患者對標(biāo)準(zhǔn)化療的臨床反應(yīng)。Masuda等［14］構(gòu)建了肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤的小鼠模型并注射貝伐單抗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)肺癌腦轉(zhuǎn)移小鼠腦內(nèi)的貝伐單抗?jié)舛雀哂谡Ｐ∈?，并且主要在轉(zhuǎn)移病灶中觀察到貝伐單抗，研究者認(rèn)為貝伐單抗在腦轉(zhuǎn)移瘤中的抗增殖作用是通過其滲透到腫瘤中抗腫瘤血管生成實(shí)現(xiàn)的，證明了貝伐單抗對已建立的腦轉(zhuǎn)移瘤模型的抗腫瘤增殖作用。

研究人員篩選了20個肺癌腦轉(zhuǎn)移的PDX模型用于研究MET抑制劑替波替尼的腦滲透能力和顱內(nèi)活動的臨床前試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)替波替尼能夠穿透小鼠的血腦屏障，與腦組織有較高的結(jié)合，對肺癌腦轉(zhuǎn)移有明顯抑制作用［24］。替波替尼在皮下和原位移植兩個模型中均顯示出抗腫瘤活性。Le等［25］的研究結(jié)果提供了MET14號外顯子跳躍突變的肺癌腦轉(zhuǎn)移患者對替波替尼的局部及全身反應(yīng)的臨床證據(jù)［2627］，支持對替波替尼顱內(nèi)療效的進(jìn)一步前瞻性研究。

這些研究結(jié)果體現(xiàn)了用PDX模型來研究肺癌腦轉(zhuǎn)移的靶向治療是一個可靠的方法。PDX腫瘤模型與患者原始腫瘤表現(xiàn)出很強(qiáng)的表型和分子相關(guān)性［7，28］，保留了原始腫瘤的組織學(xué)、生物學(xué)和遺傳學(xué)在內(nèi)的關(guān)鍵特征，建立的PDX模型可以用于闡明腫瘤的發(fā)病機(jī)制，有利于探索新的治療方法。

2.2 PDX模型在肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤放射治療中的研究 放射治療在肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤的治療中起著重要作用，立體定向放射治療和WBRT是許多肺癌腦轉(zhuǎn)移患者的一線治療的標(biāo)準(zhǔn)［29］。盡管如此，患者的生存預(yù)后仍不理想，因此聯(lián)合用藥增強(qiáng)放療效果是肺癌腦轉(zhuǎn)移瘤治療的潛在方法。目前，雖然有多項(xiàng)臨床研究對腦轉(zhuǎn)移瘤患者使用放射增敏劑進(jìn)行研究，但都沒有得到理想結(jié)果［30］。甚至有研究指出，在WBRT過程中添加藥物會產(chǎn)生副作用，可能對患者生存產(chǎn)生不利影響［31］。有研究［18，32］考慮到放射治療是腦轉(zhuǎn)移瘤的主要治療手段，于是測試了PDX對5種標(biāo)準(zhǔn)分割放射治療（UW-lung-2、UW-lung-5、UW-lung-16、UW-lung-18、UW-lung-21）的反應(yīng)；結(jié)果顯示，腫瘤生長抑制率分別為51%、42、53% 、58和92%；之后繼續(xù)總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，使用合適的PDX模型，利用能夠穿透血腦屏障的小分子ATP競爭抑制劑M6620 （VX-970）設(shè)計(jì)試驗(yàn)，研究結(jié)果提示與單獨(dú)放療相比，M6620和放療的結(jié)合提高了小鼠的總存活率，表明M6620在臨床前肺癌腦轉(zhuǎn)移PDX模型中增強(qiáng)了放療效果，對放療起到了增敏作用。Majeed等［33］利用小細(xì)胞肺癌PDX模型評估了泛素樣修飾激活酶1抑制劑TAK-243聯(lián)合奧拉帕尼或放療的療效，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在模型中能夠觀察到TAK-243與奧拉帕尼的協(xié)調(diào)作用及其放射增敏作用，因此認(rèn)為TAK-243是一種潛在改善SCLC患者預(yù)后的治療策略。因此，利用PDX模型來評估腫瘤放射治療療效是一種極具前景的策略。

3 PDX模型在腫瘤中的應(yīng)用前景及局限性

由于PDX模型很好地保留了原發(fā)腫瘤的異質(zhì)性，包括基因表達(dá)譜和藥物反應(yīng)，因此它已經(jīng)成為很有應(yīng)用價值的異種移植瘤模型［34］。近年來免疫治療已成為腫瘤治療領(lǐng)域最具潛力的手段之一。PDX模型具有可重現(xiàn)人體內(nèi)免疫細(xì)胞與腫瘤間相互作用的優(yōu)勢，成為生理和病理?xiàng)l件下模擬人體腫瘤免疫治療療效的新模型［35］。Tsoneva等［36］利用肺癌PDX模型，確定了痘苗病毒（vaccinia virus，VACV）與宿主免疫系統(tǒng)的相互作用，驗(yàn)證了使用CTLA4阻斷抗體和VACV的聯(lián)合治療肺癌的有效性。Sanmame等［37］首次使用胃、腸癌Hu-PBL BRG小鼠模型對臨床級程序性細(xì)胞死亡1（programmed death protein 1，PD-1）抗體和CD137抗體藥物進(jìn)行臨床前藥效評價。研究發(fā)現(xiàn)，藥物阻斷PD-1并同時激活CD137可使腫瘤免疫微環(huán)境中可表達(dá)干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的人源T細(xì)胞數(shù)量增加，抑制了腫瘤的生長，為PDX模型在免疫檢查點(diǎn)抑制劑及藥物聯(lián)用研究中的應(yīng)用提供了依據(jù)。

但是PDX模型存在以下局限性，首先PDX模型的建立成本較高，因?yàn)槊庖呷毕菪∈髢r格較昂貴，建模時間較長，臨床前PDX模型的構(gòu)建大概需要2～8個月［13］。其次，由于原始腫瘤的生長特點(diǎn)及侵襲性的不相同以及不同部位的腫瘤組會降低移植的成功率，其中移植成功率較高的有胃腸道腫瘤［38］，而乳腺部位腫瘤的移植成功率較低。另外，雖然PDX模型可以模擬患者體內(nèi)大部分免疫細(xì)胞（固有免疫、適應(yīng)性免疫）與腫瘤的相互作用，但依然缺乏免疫細(xì)胞與腫瘤之間的MHC相容性差異和部分人源細(xì)胞因子、趨化因子等，導(dǎo)致模型免疫亞群發(fā)育受阻［35］。目前暫無一種模型可以完美模擬人類腫瘤和免疫系統(tǒng)的臨床特征。最后，有研究報(bào)道PDX模型中廣泛存在小鼠病毒，這可能會對模型中的基因表達(dá)產(chǎn)生影響，具體如何影響需進(jìn)一步研究［39］。

4 小 結(jié)

總之，由于PDX模型很好地保留了腫瘤的異質(zhì)性，使其在藥物篩選、藥物療效預(yù)測和聯(lián)合臨床試驗(yàn)等研究中表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢，這對于新型藥物的研發(fā)及研究新療法是十分有幫助的。本文綜述了PDX模型的構(gòu)建及在腫瘤治療應(yīng)用中的研究進(jìn)展，利用PDX模型進(jìn)行臨床前試驗(yàn)，新藥研發(fā)及驗(yàn)證藥物療效，為腫瘤患者制定更加個性化的治療方案提供新思路，是研究NSCLC腦轉(zhuǎn)移及其他腫瘤治療方式的重要手段。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

［參 ?考 ??文 ??獻(xiàn)］

［1］ Bray F，F(xiàn)erlay J，Soerjomataram I，et al.Global cancer statistics 2018：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries［J］.CA Cancer J Clin，2018，68（6）：394424.

［2］ Ferlay J，Colombet M，Soerjomataram I，et al.Cancer incidence and mortality patterns in Europe：Estimates for 40 countries and 25 major cancers in 2018［J］.Eur J Cancer，2018，103：356387.

［3］ Ko J，Winslow MM，Sage J.Mechanisms of small cell lung cancer metastasis［J］.EMBO Mol Med，2021，13（1）：e13122.

［4］ Hubbs JL，Boyd JA，Hollis D，et al.Factors associated with the development of brain metastases：analysis of 975 patients with early stage nonsmall cell lung cancer［J］.Cancer，2010，116（21）：50385046.

［5］ Lamba N，Wen PY，Aizer AA.Epidemiology of brain metastases and leptomeningeal disease［J］.Neuro Oncol，2021，23（9）：14471456.

［6］ Hung YP，Sholl LM.Diagnostic and predictive immunohistochemistry for non-small cell lung carcinomas［J］.Adv Anat Pathol，2018，25（6）：374386.

［7］ Cutz JC，Guan J，Bayani J，et al.Establishment in severe combined immunodeficiency mice of subrenal capsule xenografts and transplantable tumor lines from a variety of primary human lung cancers：potential models for studying tumor progression-related changes［J］.Clin Cancer Res，2006，12（13）：40434054.

［8］ Augert A，Eastwood E，Ibrahim AH，et al.Targeting NOTCH activation in small cell lung cancer through LSD1 inhibition［J］.Sci Signal，2019，12（567）：eaau2922.

［9］ Li L，Ng SR，Colón CI，et al.Identification of DHODH as a therapeutic target in small cell lung cancer［J］.Sci Transl Med，2019，11（517）：eaaw7852.

［10］Izumchenko E，Paz K，Ciznadija D，et al.Patient-derived xenografts effectively capture responses to oncology therapy in a heterogeneous cohort of patients with solid tumors［J］.Ann Oncol，2017，28（10）：25952605.

［11］Invrea F，Rovito R，Torchiaro E，et al.Patient-derived xenografts（PDXs） as model systems for human cancer［J］.Curr Opin Biotechnol，2020，63：151156.

［12］Jin KT，Teng LS，Shen YP，et al.Patient-derived human tumour tissue xenografts in immunodeficient mice：a systematic review［J］.Clin Transl Oncol，2010，12（7）：473480.

［13］Jung J，Seol HS，Chang S.The generation and application of patient-derived xenograft model for cancer research［J］.Cancer Res Treat，2018，50（1）：110.

［14］Masuda C，Sugimoto M，Wakita D，et al.Bevacizumab suppresses the growth of established non-small-cell lung cancer brain metastases in a hematogenous brain metastasis model［J］.Clin Exp Metastasis，2020，37（1）：199207.

［15］Choi Y，Lee S，Kim K，et al.Studying cancer immunotherapy using patient-derived xenografts（PDXs） in humanized mice［J］.Exp Mol Med，2018，50（8）：19.

［16］Panaampon J，Sasamoto K，Kariya R，et al.Establishment of nude mice lacking NK cells and their application for human tumor xenografts［J］.Asian Pac J Cancer Prev，2021，22（4）：10691074.

［17］Hidalgo M，Amant F，Biankin AV，et al.Patient-derived xenograft models：an emerging platform for translational cancer research［J］.Cancer Discov，2014，4（9）：9981013.

［18］Baschnagel AM，Kaushik S，Durmaz A，et al.Development and characterization of patient-derived xenografts from non-small cell lung cancer brain metastases［J］.Sci Rep，2021，11（1）：2520.

［19］Caeser R，Egger JV，Chavan S，et al.Genomic and transcriptomic analysis of a library of small cell lung cancer patient-derived xenografts［J］.Nat Commun，2022，13（1）：2144.

［20］Chen XM，Shen C，Wei Z，et al.Patient-derived non-small cell lung cancer xenograft mirrors complex tumor heterogeneity［J］.Cancer Biol Med，2021，18（1）：184198.

［21］Charbonneau M，Harper K，Brochu-Gaudreau K，et al.The development of a rapid patient-derived xenograft model to predict chemotherapeutic drug sensitivity/resistance in malignant glial tumors［J］.Neuro Oncol，2023，25（9）：16051616.

［22］Kang W，Maher L，Michaud M，et al.Development of a novel orthotopic gastric cancer mouse model［J］.Biol Proced Online，2021，23（1）：1.

［23］Tentler JJ，Tan AC，Weekes CD，et al.Patient-derived tumour xenografts as models for oncology drug development［J］.Nat Rev Clin Oncol，2012，9（6）：338350.

［24］Friese-Hamim M，Clark A，Perrin D，et al.Brain penetration and efficacy of tepotinib in orthotopic patient-derived xenograft models of MET-driven non-small cell lung cancer brain metastases［J］.Lung Cancer，2022，163：7786.

［25］Le XN，Sakai H，F(xiàn)elip E，et al.Tepotinib efficacy and safety in patients with MET exon 14 skipping NSCLC：outcomes in patient subgroups from the VISION study with relevance for clinical practice［J］.Clin Cancer Res，2022，28（6）：11171126.

［26］Paik PK，F(xiàn)elip E，Veillon R，et al.Tepotinib in non-small-cell lung cancer with MET exon 14 skipping mutations［J］.N Engl J Med，2020，383（10）：931943.

［27］Tanaka H，Taima K，Makiguchi T，et al.Activity and bioavailability of tepotinib for leptomeningeal metastasis of NSCLC with MET exon 14 skipping mutation［J］.Cancer Commun，2021，41（1）：8387.

［28］Liao H，Zhou SX，Chen S，et al.Establishment and characterization of patient-derived xenograft model of non-small-cell lung cancer derived from malignant pleural effusions［J］.Cancer Manag Res，2023，15：165174.

［29］Baschnagel A，Wolters PL，Camphausen K.Neuropsychological testing and biomarkers in the management of brain metastases［J］.Radiat Oncol，2008，3：26.

［30］Mehta MP，Rodrigus P，Terhaard CH，et al.Survival and neurologic outcomes in a randomized trial of motexafin gadolinium and whole-brain radiation therapy in brain metastases［J］.J Clin Oncol，2003，21（13）：25292536.

［31］Knisely JP，Berkey B，Chakravarti A，et al.A phase III study of conventional radiation therapy plus thalidomide versus conventional radiation therapy for multiple brain metastases（RTOG 0118）［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2008，71（1）：7986.

［32］Baschnagel AM，Elnaggar JH，VanBeek HJ，et al.ATR inhibitor M6620（VX-970） enhances the effect of radiation in non-small cell lung cancer brain metastasis patient-derived xenografts［J］.Mol Cancer Ther，2021，20（11）：21292139.

［33］Majeed S，Aparnathi MK，Nixon KCJ，et al.Targeting the ubiquitin-proteasome system using the UBA1 inhibitor TAK-243 is a potential therapeutic strategy for small-cell lung cancer［J］.Clin Cancer Res，2022，28（9）：19661978.

［34］Okada S，Vaeteewoottacharn K，Kariya R.Application of highly immunocompromised mice for the establishment of patient-derived xenograft（PDX） models［J］.Cells，2019，8（8）：889.

［35］李宏偉，高先春，竇建華，等.人源免疫重建PDX模型構(gòu)建及其在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用進(jìn)展［J］.中國腫瘤臨床，2022，49（11）：541547.

Li HW，Gao XC，Dou JH，et al.Application progress of humanized patient-derived xenograft models in tumor im-munotherapy［J］.Chin J Clin Oncol，2022，49（11）：541547.

［36］Tsoneva D，Minev B，F(xiàn)rentzen A，et al.Humanized mice with subcutaneous human solid tumors for immune response analysis of vaccinia virus-mediated oncolysis［J］.Mol Ther Oncolytics，2017，5：4161.

［37］Sanmamed MF，Rodriguez I，Schalper KA，et al.Nivolumab and urelumab enhance antitumor activity of human T lymphocytes engrafted in Rag2-/-IL2Rγnull immunodeficient mice［J］.Cancer Res，2015，75（17）：34663478.

［38］Siolas D，Hannon GJ.Patient-derived tumor xenografts：transforming clinical samples into mouse models［J］.Cancer Res，2013，73（17）：53155319.

［39］Yuan ZH，F(xiàn)an XJ，Zhu JJ，et al.Presence of complete murine viral genome sequences in patient-derived xenografts［J］.Nat Commun，2021，12（1）：2031.