摘 要 為加快白及種苗生長速度，縮短成藥周期，分析不同印度梨形孢（serendipita indica）添加濃度及處理方式對白及組培苗馴化階段生長的影響。結(jié)果表明：菌液浸泡的白及苗鮮質(zhì)量及假鱗莖直徑增長倍數(shù)均顯著優(yōu)于對照白及苗，菌液濃度以25 g·L-1浸泡24 h最好，其次為50 g·L-1；孢子液浸泡以2×108 個·L-1最好；菌液兩種處理方式之間不存在顯著差異，而孢子液浸泡則不及澆灌。因此25～50 g·L-1印度梨形孢菌液浸泡24 h或2×108 個·L-1孢子液每株澆灌10 mL均有利于印度梨形孢與白及苗建立共生關(guān)系，促生效果明顯，培養(yǎng)120 d均達到了出圃苗一級苗標準，馴化周期縮短約50 d。

關(guān)鍵詞 白及；印度梨形孢；添加方式；假鱗莖直徑；促生；馴化周期

中圖分類號：R282 文獻標志碼：A DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2024.07.001

白及[Bletilla striata （Thunb.）Reichb.f.]是蘭科白及屬植物白及的干燥塊莖，被歷版《中國藥典》所收錄，用于治療咯血、外傷出血、瘡瘍腫毒[1]，是諸多臨床藥物原料的主要成分，如胃康靈顆粒[2]、及術(shù)顆粒[3]等，也是醫(yī)用材料的原料之一，又可作為食品保鮮劑[4]、日化原料[5]的重要原料。隨著白及重要性的凸顯，野生資源破壞嚴重，被列入了《中國重點保護野生植物名錄》二級保護品種。為加快白及人工栽培進程，保護野生資源，急需解決白及種苗繁育中存在的種苗長勢弱、生長緩慢等問題，而印度梨形孢作為根部內(nèi)生菌，經(jīng)證實能與227種植物建立共生關(guān)系，起到促進生長、提高品質(zhì)產(chǎn)量和抗逆性等作用[6]。本文開展印度梨形孢對白及種苗促生長技術(shù)的研究，以加快白及種苗繁育進程。

1 "材料與方法

1.1 "供試材料

印度梨形孢菌絲和孢子；株高≥8 cm、假鱗莖直徑≥5 mm、根數(shù)3～4根的白及組培實生苗。

1.2 "試驗方法

菌液及孢子液浸泡：孢子液濃度為2×107、2×108、2×109 "個·L-1；菌液濃度為25 、50、100 g·L-1，浸泡白及苗根部24 h后移栽至育苗基質(zhì)中，對照為清水，每個處理15株，3次重復(fù)，120 d起苗測定，其中對照和50 g·L-1菌液浸泡處理均種植30株，120 d取15株測定，剩余15株待苗長至出圃一級苗標準（《白及種苗質(zhì)量分級》DB53/T 901—2019 ）時起苗測定。

孢子液澆灌：每株澆灌2×108 個·L-1孢子液10 mL至幼苗根部。

菌液澆灌：每株澆灌50 g·L-1菌絲懸液10 mL至根部。

培養(yǎng)120 d后統(tǒng)計白及苗的鮮質(zhì)量、假鱗莖直徑、根數(shù)、地上部高度，計算鮮質(zhì)量增長倍數(shù)、假鱗莖直徑增長倍數(shù)。

印度梨形孢定殖情況檢測：各處理均種植30株苗，在處理后7、14、30、60、90、120 d隨機抽取5株，剪取根段用于染色檢測。

2 "結(jié)果與分析

2.1 "印度梨形孢不同濃度菌液和孢子液處理對白及組培苗生長的影響

試驗結(jié)果表明：菌液浸泡的白及苗鮮質(zhì)量及假鱗莖直徑增長倍數(shù)均顯著優(yōu)于對照白及苗，隨著菌液濃度的提高，白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)及假鱗莖直徑增長倍數(shù)呈下降趨勢，以25 g·L-1浸泡處理最好，120 d白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)和假鱗莖直徑增長倍數(shù)分別達到4.353±0.112倍和1.627±0.208倍，假鱗莖直徑達到16.348±0.790 mm（見表1、圖1），地上部平均高度達到21.10±0.69 cm，單株平均根數(shù)達到12.6±0.7根（見表2）；其次為50 g·L-1菌液浸泡，均達到了白及實生苗出圃苗一級苗的標準（《白及種苗質(zhì)量分級》DB53/T 901—2019），大大超過《白及生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》（DB3308/T 052—2018）規(guī)定的出圃標準；而孢子液浸泡則隨著濃度的上升，白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)先升高再下降，鮮質(zhì)量增長倍數(shù)和假鱗莖直徑增長倍數(shù)以2×108 個·L-1最好（見表1、圖1），說明孢子液濃度過低和過高都不利于印度梨形孢與白及苗共生關(guān)系的建立。

2.2 "印度梨形孢不同添加方式對白及組培苗生長的影響

從印度梨形孢添加方式看，菌液浸泡與澆灌處理的白及苗各生長指標間均不存在顯著差異，孢子液浸泡處理的白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)則明顯不及澆灌處理，假鱗莖直徑增長倍數(shù)則不存在顯著差異（見表1、圖1）。25～100 g·L-1及2×108 個·L-1浸泡或澆灌后，根數(shù)增長倍數(shù)均顯著優(yōu)于對照及孢子液2×107 個·L-1和2×109個·L-1浸泡處理，但以50 g·L-1菌液澆灌最佳；地上部生長高度以2×108 個·L-1澆灌增長最多，2×107個·L-1孢子液和清水浸泡最差（見表2、圖1）。

2.3 "印度梨形孢在白及組培苗中定殖的情況

通過對印度梨形孢添加與未添加處理的白及組培苗進行馴化期不同時間的根部染色檢測，發(fā)現(xiàn) 2×108個·L-1孢子液浸泡、 25 g·L-1和50 g·L-1菌液浸泡及50 g·L-1菌液澆灌處理的白及苗在120 d后根部還能檢測到較多的印度梨形孢（見圖2）。

綜上所述，我們認為25 ～50 g·L-1印度梨形孢菌液浸泡24 h或2×108 個·L-1孢子液每株澆灌10 mL均有利于印度梨形孢促生長作用的發(fā)揮，白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)和假鱗莖直徑增長倍數(shù)均顯著優(yōu)于其他處理。

2.4 "印度梨形孢處理對白及組培苗馴化周期的影響

從兩個處理白及苗生長至170 d時測定相關(guān)生長指標來看，發(fā)現(xiàn)對照處理170 d才達到了DB53/T 901—2019出圃一級苗的標準，而50 g·L-1菌液浸泡處理的白及苗培養(yǎng)120 d即達到了一級苗的標準，較對照白及苗馴化周期要縮短約50 d（見表4）。

3 "小結(jié)與討論

印度梨形孢能夠與多種重要的糧食作物和經(jīng)濟作物形成互利共生關(guān)系，從而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著積極的作用。其對植物的促生能力一般在50%左右，但會因作物種類、試驗條件和環(huán)境條件不同而存在較大的差異[7]，如促進番茄葉片生物量增加20%[8]；促進卷心菜根部、葉部鮮質(zhì)量分別增加（38±5）%和（46±6）%[9]；促進玉米干質(zhì)量提高1.8倍[10]等。本試驗中印度梨形孢促進白及苗鮮質(zhì)量增長倍數(shù)及假鱗莖直徑增長倍數(shù)在120 d分別達到4.353 ±0.112倍和1.627 ±0.208倍。

印度梨形孢的添加濃度和添加方式也影響著促生效果。李城采用4個濃度的印度梨形孢菌液對西瓜幼苗進行侵染，發(fā)現(xiàn)各處理對西瓜果實品質(zhì)影響不明顯，對西瓜產(chǎn)量有明顯的提高，其中7.5%處理增產(chǎn)最優(yōu)[11]；吳柳燕等用印度梨形孢處理虎舌紅，發(fā)現(xiàn)其株高、地徑及最長葉寬以稀釋10倍液最好，最長葉長以稀釋50倍液最好[12]。由此可見，印度梨形孢的處理濃度、時間及方式都影響著它與植物之間共生關(guān)系的建立。

本試驗發(fā)現(xiàn)菌液和孢子液濃度過高或過低都不利于與白及組培苗建立共生關(guān)系，篩選出了促生效果好的印度梨形孢添加濃度和方式，可在實際生產(chǎn)中進行應(yīng)用。

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（責任編輯：易 "婧）