田方 耿彥梅 李雪利 高晗 李妍 李軍山

摘 要：

為將少數(shù)民族用藥雙參開(kāi)發(fā)成配方顆粒，建立雙參飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑與配方顆粒的高效液相色譜馬錢苷酸含量測(cè)定方法及薄層色譜鑒別方法，并同時(shí)考察雙參飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—配方顆粒的量值傳遞關(guān)系。采用安捷倫1260Ⅱ液相色譜儀與Waters Symmetry C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為240 nm，流速為1 mL/min，柱溫為30 ℃，建立馬錢苷酸含量測(cè)定方法；以乙酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1）為展開(kāi)劑，置紫外光燈（254 nm）下檢視，建立薄層鑒別方法；以出膏率、馬錢苷酸含量、薄層鑒別圖譜為主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，分析量值傳遞規(guī)律。結(jié)果表明：馬錢苷酸含量測(cè)定、鑒別方法具有較高的穩(wěn)定性、重復(fù)性及可信度；3批雙參配方顆粒出膏率均值為18.7%，馬錢苷酸含量均值為41.1 mg/g，馬錢苷酸含量轉(zhuǎn)移率均值為43.1%，均在15批標(biāo)準(zhǔn)湯劑均值±3SD范圍內(nèi)。馬錢苷酸含量測(cè)定和薄層色譜鑒別方法可用于雙參配方顆粒質(zhì)量評(píng)價(jià)，為進(jìn)一步開(kāi)展雙參配方顆粒研究提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，并促進(jìn)少數(shù)民族用藥現(xiàn)代化。

關(guān)鍵詞：

中藥藥劑學(xué)；雙參；標(biāo)準(zhǔn)湯劑；馬錢苷酸；含量測(cè)定

中圖分類號(hào)：

R283

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

DOI： 10.7535/hbgykj.2024yx03001

收稿日期：2023-11-11;修回日期：2024-04-11；責(zé)任編輯：王海云

基金項(xiàng)目：云南省重大科技專項(xiàng)計(jì)劃項(xiàng)目（202102AA310027）

第一作者簡(jiǎn)介：

田方（1989—），女，河北石家莊人，主要從事中藥配方顆粒工藝方面的研究。

通信作者：

李軍山正高級(jí)工程師。E-mail：swljs@sina.com

田方，耿彥梅，李雪利，等.

雙參飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—成品量值傳遞研究

［J］.河北工業(yè)科技，2024，41（3）：161-168.

TIAN Fang，GENG Yanmei，LI Xueli，et al.

Study on quantity and transfer relationship of Triplostegia glandulifera Wall.ex DC. pieces-standard decoction-finished product

［J］. Hebei Journal of Industrial Science and Technology，2024，41（3）：161-168.

Study on quantity and transfer relationship of Triplostegia glandulifera Wall.ex DC. pieces-standard decoction-finished product

TIAN Fang1， GENG Yanmei1， LI Xueli1， GAO Han1， LI Yan2， LI Junshan1，3，4

（1.Shineway Pharmaceutical Group Limited， Shijiazhuang， Hebei 051430， China；2.School of Foreign Languages， Tangshan University， Tangshan， Hebei 063000， China；3.Yunnan Shineway Spirin Pharmaceutical Company Limited， Chuxiong， Yunnan 675000， China；4.Yunnan Province Formula Granules Key Laboratory， Chuxiong， Yunnan 675000， China）

Abstract：

In order to develop Triplostegia glandulifera Wall.ex DC. into foromula granules， a high performance liquid chromatography method for determination and TLC identification of loganic acid in decoction pieces， standard decoction and formula granules of Triplostegia glandulifera Wall.ex DC. were established， and the quantity-value transfer relationship between Triplostegia glandulifera Wall. ex DC. pieces， standard decoction and formula granules was investigated. The Agilent 1260Ⅱ high performance liquid chromatograph and Waters Symmetry C18 column （4.6 mm×250 mm，5 μm） were used with acetonitrile-0.1%phosphoric acid solution as the mobile phase， the column temperature of 30 ℃， the flow rate of 1 mL/min， and the detection wavelength of 240 nm to establish a gradient elution method. Using ethyl acetate-methanol-water （10∶2∶1）as developer， and examination under UV lamp（254 nm）， a TLC identification method of Triplostegia glandulifera Wall.ex DC. was established. The transfer rule of the quantity value was analyzed by using the extract rate， the content of maggianin and the TLC as the main evaluation indexes. The results show that the method for the determination and identification of maggianin is stable， reproducible and reliable.The average yield of 3 batches is 18.7%， the average loganic acid content is 41.1 mg/g.and the average loganic acid content transfer rate is 43.1%， all within the mean value ±3SD of 15 batches of standard decoction. Those methods for content determination of loganic acid and TLC identification can be used to evaluate the quality of Triplostegia glandulifera Wall. ex DC. formula granules， provide data basis for further research on Triplostegia glandulifera Wall. ex DC. formula granules， and promote the modernization of medicine for ethnic minorities.

Keywords：

pharmaceutics of Chinese medicine; Triplostegia glandulifera Wall.ex DC.; standard decoction; loganic acid; content determination;

雙參，又稱蘿卜參、童子參，羊蹄參、山苦參、子母參、合合參等，始載于《云南中草藥選》［1］，為川續(xù)斷科植物雙參（Triplostegia glandulifera Wall.ex DC.）的干燥塊根，具有調(diào)經(jīng)活血、益腎的功效，主治閉經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、腎虛腰痛、遺精、陽(yáng)痿、不孕癥。雙參一般于秋季采挖，洗凈、干燥而得［2］。

雙參是云南少數(shù)民族的藥用植物，對(duì)其研究的現(xiàn)代文獻(xiàn)較少，已有文獻(xiàn)主要集中在化學(xué)成分的分離鑒定及藥理作用方面［1，3-17］。研究［1，3-11］發(fā)現(xiàn)，雙參藥材中主要含有環(huán)烯醚萜類、三萜類、生物堿類等成分；支雅婧等［18］利用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技術(shù)快速鑒定出雙參藥材含有綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、馬錢苷、馬錢苷酸和樟芽菜苷等化學(xué)成分；另有研究［12-17］證明，雙參具有降血糖、抗腫瘤、抗病毒、抗應(yīng)激和抗氧化等作用。此外，文獻(xiàn)中報(bào)道較多的雙參顆粒 ［19-22］，是由幾種不同的中藥材制成的中成藥復(fù)方制劑［23-24］，并不含雙參藥材。雙參配方顆粒的研究仍處于空白階段。

本研究收集15批不同產(chǎn)地的雙參飲片，制備出雙參的標(biāo)準(zhǔn)湯劑和配方顆粒，并建立馬錢苷酸含量測(cè)定方法及薄層色譜鑒別方法，以標(biāo)準(zhǔn)湯劑為橋接［25-32］，研究雙參飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—成品馬錢苷酸含量和薄層鑒別量值的傳遞規(guī)律，為進(jìn)一步確立雙參配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以及更好地開(kāi)發(fā)雙參配方顆粒提供技術(shù)基礎(chǔ)。

1 主要儀器與材料

1.1 儀 器

高效液相色譜儀：Waters Alliance e2695，沃特世公司提供；LC-15C，島津公司提供；1260 InfinityⅡ，安捷倫科技有限公司提供。色譜柱：Waters Symmetry C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），沃特世公司提供；Agilent Eclipse Plus C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），安捷倫科技有限公司提供；Thermo Scientific AcclaimTM 120 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），賽默飛世爾科技公司提供。

分析天平，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司提供；JM-A5002電子天平（d=0.01 g），余姚市紀(jì)銘稱重校驗(yàn)設(shè)備有限公司提供；水循環(huán)真空泵，上海申生科技有限公司提供；超聲波清洗器（KQ-250型，功率250 W，頻率40 kHz），昆山市超聲儀器有限公司提供；三用紫外分析儀（ZF-2型），上海市安亭電子儀器廠提供；養(yǎng)生藥膳壺，合肥榮事達(dá)小家電有限公司提供；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（RE-3000型），上海亞榮生化儀器廠提供；冷凍干燥機(jī)（FD-1C-50型），北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司提供；UPR-II-20L超純水系統(tǒng)，四川優(yōu)普超純科技有限公司提供。

1.2 試 劑

馬錢苷酸對(duì)照品（批號(hào)為111865-202005，純度為97.5%），中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；乙腈（色譜純），美國(guó)Fisher公司提供；磷酸（色譜純），美國(guó)ACS公司提供；超純水，自制。

1.3 飲 片

15批雙參藥材經(jīng)河北省藥品檢驗(yàn)研究院孫寶惠主任鑒定為川續(xù)斷科植物雙參的干燥塊根。將雙參藥材除去雜質(zhì)［2］，得到雙參飲片。樣品詳細(xì)信息見(jiàn)表1。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 標(biāo)準(zhǔn)湯劑的制備

雙參可益腎養(yǎng)肝、健脾寧心，屬于滋補(bǔ)用藥，結(jié)合《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求》［33］中關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備的指導(dǎo)原則，將雙參飲片煎煮2次，煎煮時(shí)間分別以60，40 min為宜；同時(shí)，加水量以沒(méi)過(guò)雙參飲片3 cm為宜。

取15批雙參飲片，分別制備標(biāo)準(zhǔn)湯劑。每次稱取雙參飲片100 g，置養(yǎng)生藥膳壺中，第1次加飲片質(zhì)量9倍的水，浸泡30 min，武火煮沸后文火保持微沸60 min，藥液趁熱過(guò)200目（0.075 mm，下同）濾布倒出，置于容器中備用；第2次加飲片質(zhì)量7倍的水，武火煮沸后文火保持微沸40 min，藥液趁熱過(guò)200目濾布倒出，合并2次煎液，快速冷卻，真空低溫濃縮（溫度不超過(guò)65 ℃），濃縮至飲片質(zhì)量（g）與藥液體積（mL）的比約為1∶3，濃縮液冷凍干燥，即得雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑。

2.2 配方顆粒的制備

經(jīng)過(guò)對(duì)不同工藝條件的考察，確定了雙參提取制劑的中試工藝：取適量雙參飲片，加水煎煮2次，第1次加飲片量10倍的水，煎煮90 min；第2次加飲片量8倍的水，煎煮60 min；濾過(guò)，濃縮，噴霧干燥；加適量糊精，制粒。

取序號(hào)1—3的3批雙參飲片，分別制備成雙參配方顆粒。

2.3 含量測(cè)定方法

2.3.1 色譜條件

色譜柱為Waters Symmetry C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1%（體積分?jǐn)?shù)，下同）磷酸為流動(dòng)相，按表2中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫。流速為1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為240 nm，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為10 μL。理論板數(shù)按馬錢苷酸峰計(jì)算，應(yīng)不低于5 000。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備

取馬錢苷酸對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l mL含0.2 mg的溶液，即得對(duì)照品溶液。

2.3.3 供試品溶液的制備

1）標(biāo)準(zhǔn)湯劑供試品溶液的制備 取雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑適量，研細(xì)，取約0.1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%（體積分?jǐn)?shù)，下同）甲醇溶液25 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率為250 W，頻率為40 kHz）20 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用75%甲醇溶液補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2）配方顆粒供試品溶液的制備 因配方顆粒中糊精含量較少，折算后的配方顆粒取樣量與標(biāo)準(zhǔn)湯劑取樣量相近，配方顆粒與標(biāo)準(zhǔn)湯劑物質(zhì)基礎(chǔ)一致，故配方顆粒供試品溶液的制備方法同標(biāo)準(zhǔn)湯劑。

2.4 含量測(cè)定方法學(xué)考察

2.4.1 專屬性考察

取糊精適量，按2.3.3項(xiàng)供試品溶液制備方法進(jìn)行制備，得陰性樣品溶液。吸取對(duì)照品溶液、陰性樣品溶液及供試品溶液，按照含量測(cè)定條件進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，輔料糊精對(duì)含量測(cè)定無(wú)干擾，本文所建立的含量測(cè)定方法專屬性良好，可用于雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑和配方顆粒中馬錢苷酸含量的測(cè)定。

2.4.2 線性考察

精密吸取質(zhì)量濃度為0.201 3 mg/mL的馬錢苷酸對(duì)照品溶液，分別取4，6，10，15，20 μL注入液相色譜儀，按2.3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以馬錢苷酸峰面積值為縱坐標(biāo)Y，馬錢苷酸的進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)X，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為Y=1.395 9×106X-2.924 9×103，R2=0.999 1，表明馬錢苷酸進(jìn)樣質(zhì)量在0.885 2～4.026 μg線性關(guān)系良好。

2.4.3 精密度考察

取批號(hào)為2010101雙參飲片制備的標(biāo)準(zhǔn)湯劑，按上述2.3.3項(xiàng)供試品溶液制備方法制備供試品溶液，分別精密吸取馬錢苷酸的對(duì)照品溶液和供試品溶液10 μL，按確定的色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算馬錢苷酸峰面積的RSD值分別為0.98%，0.64%。結(jié)果表明，儀器精密度良好。

2.4.4 重復(fù)性考察

取批號(hào)為2010101雙參飲片制備的標(biāo)準(zhǔn)湯劑，按上述2.3.3項(xiàng)供試品溶液制備方法平行制備6份樣品，按確定色譜條件進(jìn)樣，計(jì)算馬錢苷酸含量的RSD為0.98%，符合《中華人民共和國(guó)藥典（2020版，四部）》［34］（以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）規(guī)定的≤1.5%。

2.4.5 穩(wěn)定性考察

取批號(hào)為2010101雙參飲片制備的標(biāo)準(zhǔn)湯劑，按2.3.3項(xiàng)供試品溶液制備方法制備供試品溶液，分別在溶液放置0，6，12，18，24 h進(jìn)行測(cè)定。馬錢苷酸峰面積的RSD為1.13%，表明供試品在24 h內(nèi)較穩(wěn)定。

2.4.6 準(zhǔn)確度考察

精密稱定雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑6份，每份約0.05 g，按樣品馬錢苷酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的50%，100%，150%分別精密加入馬錢苷酸對(duì)照品，按供試品制備方法制備供試品溶液。測(cè)定后計(jì)算加樣回收率為98.7%～101.1%，平均回收率為99.50%，RSD為0.98%，符合《中國(guó)藥典》［34］關(guān)于回收率限度為95%～105%的規(guī)定。

2.4.7 耐用性考察

1）不同柱溫考察

分別在柱溫為30，35，40 ℃時(shí)，進(jìn)行馬錢苷酸含量的測(cè)定，考察不同柱溫對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，不同柱溫條件下進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，表明柱溫在（35±5）℃范圍內(nèi)，耐用性符合要求。

2）不同流速考察

分別在流速為0.9，1.0，1.1 mL/min時(shí)，進(jìn)行馬錢苷酸含量的測(cè)定，考察不同流速對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，以不同流速進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，表明流速在（1.0±0.1）mL/min范圍內(nèi)，耐用性符合要求。

3）不同檢測(cè)波長(zhǎng)考察

分別在檢測(cè)波長(zhǎng)為235，240，245 nm時(shí)，進(jìn)行馬錢苷酸含量的測(cè)定，考察不同檢測(cè)波長(zhǎng)對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，以不同檢測(cè)波長(zhǎng)進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，表明波長(zhǎng)在（240±5）nm范圍內(nèi)，耐用性符合要求。

4）不同流動(dòng)相初始比例考察

分別在流動(dòng)相（乙腈-0.1%磷酸溶液）初始比例為8∶92，9∶91，10∶90（體積比，下同）時(shí)，進(jìn)行馬錢苷酸含量的測(cè)定，考察不同流動(dòng)相初始比例對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，不同流動(dòng)相初始比例進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，表明流動(dòng)相溶液中乙腈初始體積分?jǐn)?shù)在（9±1）%范圍內(nèi)，耐用性符合要求。

5）不同色譜柱考察

分別采用不同色譜柱（Agilent Eclipse Plus C18，4.6 mm×250 mm，5 μm；Waters Symmetry C18，4.6 mm×250 mm，5 μm；Thermo Scientific AcclaimTM 120 C18，4.6 mm×250 mm，5 μm）對(duì)馬錢苷酸含量進(jìn)行測(cè)定，考察不同色譜柱對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，不同色譜柱進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，耐用性符合要求。

6）不同色譜儀考察

使用不同液相色譜儀（Waters Alliance e2695，LC-15C，1260 Infinity Ⅱ）對(duì)馬錢苷酸含量進(jìn)行測(cè)定，考察不同色譜儀對(duì)含量測(cè)定的影響。結(jié)果表明，不同色譜儀進(jìn)行同一樣品的定量檢測(cè)，馬錢苷酸分離良好，結(jié)果基本一致，耐用性符合要求。

2.5 鑒別方法

2.5.1 對(duì)照品溶液制備

取當(dāng)藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.5.2 供試品溶液制備

取本品標(biāo)準(zhǔn)湯劑0.2 g，研細(xì)，加甲醇5 mL，超聲處理15 min，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。

2.5.3 薄層色譜條件

使用硅膠GF254薄層色譜板作為薄層色譜板，以乙酸乙酯-甲醇-水（體積比10∶2∶1）為展開(kāi)劑，點(diǎn)樣量為2～4 μL，在波長(zhǎng)為254 nm的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)。

2.6 鑒別方法學(xué)考察

2.6.1 專屬性考察

取糊精0.2 g，按照2.3.3項(xiàng)供試品溶液制備方法制備陰性樣品溶液，分別吸取陰性樣品溶液、當(dāng)藥苷對(duì)照品溶液與供試品溶液各3 μL，按上述薄層色譜條件展開(kāi)，檢視，如圖2所示。結(jié)果表明，陰性樣品溶液在對(duì)照品和供試品溶液相對(duì)應(yīng)位置上不顯現(xiàn)相同斑點(diǎn)，故輔料對(duì)雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的薄層色譜鑒別無(wú)干擾，專屬性良好，可用于標(biāo)準(zhǔn)湯劑和配方顆粒的鑒別。

2.6.2 耐用性考察

1）不同品牌硅膠板

采用不同品牌（分別由煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究所、青島海洋化工有限公司、德國(guó)默克公司提供）的硅膠GF254薄層色譜板，考察雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的展開(kāi)情況。結(jié)果表明，不同品牌的薄層色譜板對(duì)雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的鑒別無(wú)影響。

2）不同溫度

分別在展開(kāi)溫度為20，25，30 ℃時(shí)，考察雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑展開(kāi)情況。結(jié)果表明，溫度為20～30 ℃時(shí)對(duì)雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的鑒別無(wú)影響。

3）不同展開(kāi)劑比例

分別使用比例為9∶3∶1，10∶2∶1，11∶1∶1的乙酸乙酯-甲醇-水的展開(kāi)劑，考察雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的展開(kāi)情況。結(jié)果表明，展開(kāi)劑比例微調(diào)對(duì)雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的鑒別無(wú)影響。

4）不同點(diǎn)樣量

分別采用2，3，4 μL點(diǎn)樣量，考察雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的展開(kāi)情況。結(jié)果表明，點(diǎn)樣量的微小變化對(duì)雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的鑒別無(wú)影響。

1 鑄造工藝設(shè)計(jì)

3 結(jié)果分析及討論

3.1 馬錢苷酸含量測(cè)定結(jié)果

取15批雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑膏粉，分別按2.3.3項(xiàng)方法制備供試品溶液，測(cè)定結(jié)果如表3所示。

3.2 鑒 別

各取3批雙參飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒，分別按2.5項(xiàng)方法進(jìn)行薄層展開(kāi)，測(cè)定結(jié)果如圖3所示。

由圖3顯示，雙參飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、配方顆粒的薄層色譜鑒別圖譜斑點(diǎn)和位置一致，表明從飲片到配方顆粒薄層色譜鑒別圖譜物質(zhì)傳遞一致。

3.3 雙參飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—配方顆粒量值傳遞分析

3批雙參飲片、15批標(biāo)準(zhǔn)湯劑、3批配方顆粒的出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率均值見(jiàn)表4和表5。由表4中15批標(biāo)準(zhǔn)湯劑數(shù)據(jù)分析可知，不同產(chǎn)地的雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率均存在較大差異；表5中3批配方顆粒出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率結(jié)果表明，雙參配方顆粒出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率均較穩(wěn)定，且雙參成品的馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率均高于標(biāo)準(zhǔn)湯劑。

由表6可知，除云南雙柏外，由相同產(chǎn)地不同批次的雙參飲片制得的標(biāo)準(zhǔn)湯劑，其出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率均較穩(wěn)定；云南雙柏不同批次的飲片制得的標(biāo)準(zhǔn)湯劑出膏率較穩(wěn)定，而馬錢苷酸在飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑中的含量及含量轉(zhuǎn)移率均差異較大。

3批雙參配方顆粒的出膏率均值為18.7%，馬錢苷酸含量均值為41.1 mg/g，馬錢苷酸含量轉(zhuǎn)移率均值為43.1%，均在15批標(biāo)準(zhǔn)湯劑均值±3SD范圍內(nèi)。

4 結(jié) 語(yǔ)

本文通過(guò)采用高效液相色譜法和薄層色譜法，首次建立了彝藥雙參中馬錢苷酸含量測(cè)定方法和薄層色譜鑒別方法，明確了飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—配方顆粒的物質(zhì)基礎(chǔ)傳遞規(guī)律，為雙參配方顆粒質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了方法，可為雙參配方顆粒質(zhì)量控制的完善、科學(xué)提供技術(shù)支持。具體結(jié)論如下。

1）采用安捷倫1260Ⅱ高效液相色譜儀與Waters Symmetry C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-0.1％磷酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為240 nm，流速為1 mL/min，柱溫為30 ℃，建立馬錢苷酸含量測(cè)定方法；以當(dāng)藥苷為對(duì)照品，以乙酸乙酯-甲醇-水（體積比為10∶2∶1）為展開(kāi)劑，置于紫外光燈（254 nm）下檢視，建立薄層色譜鑒別方法。以上方法均具有較高的穩(wěn)定性及可信度。

2）取15批雙參飲片進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)湯劑制備，確定了雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率（13.7%～20.1%）、馬錢苷酸含量（25.7～53.1 mg/g）及含量轉(zhuǎn)移率（28.8%～47.3%）；進(jìn)行3批雙參配方顆粒的中試制備，配方顆粒出膏率均值為18.7%，馬錢苷酸含量均值為41.1 mg/g，馬錢苷酸含量轉(zhuǎn)移率均值為43.1%，均在15批標(biāo)準(zhǔn)湯劑均值±3SD范圍內(nèi)；3批配方顆粒出膏率、馬錢苷酸含量及含量轉(zhuǎn)移率同其標(biāo)準(zhǔn)湯劑基本一致，飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—配方顆粒薄層色譜物質(zhì)傳遞一致，表明從雙參飲片—標(biāo)準(zhǔn)湯劑—配方顆粒有合理的物質(zhì)傳遞規(guī)律。

3）彌補(bǔ)了雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑和配方顆粒研究的空白，以標(biāo)準(zhǔn)湯劑為橋接，初步探索了制備雙參配方顆粒的可行性，為少數(shù)民族用藥現(xiàn)代化提供了較好的范例。

15批雙參標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率、馬錢苷酸含量及其轉(zhuǎn)移率均存在較大差異，這表明云南省不同地區(qū)間的藥材存在較大差異，這可能是受地理環(huán)境、生長(zhǎng)條件的影響［18-23］，今后將對(duì)不同產(chǎn)地造成差異的影響因素做進(jìn)一步探究。另外，由于時(shí)間和條件所限，筆者未對(duì)指紋/特征圖譜進(jìn)行研究，也有待進(jìn)一步探索。

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