杜微波 陳敬然 萬瑩瑩 李雪 馬智玲 張志強 沈建梅
摘 要:
為了建立基于飲片特征圖譜預(yù)測瞿麥(石竹)配方顆粒質(zhì)量指標(biāo)的方法,探究瞿麥(石竹)配方顆粒質(zhì)量與飲片特征圖譜的相關(guān)性。利用特征圖譜對瞿麥(石竹)原料中不同藥用部位的化學(xué)成分進行表征,明確差異峰,統(tǒng)計15批飲片特征圖譜中差異峰占總特征峰的峰面積比值(α值);同時依據(jù)國藥瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)對制備的15批飲片瞿麥(石竹)配方顆粒總黃酮含量、出膏率、浸出物含量等指標(biāo)進行測定;采用Pearson相關(guān)性分析方法對飲片特征圖譜中的α值與配方顆粒的總黃酮含量、出膏率、浸出物含量進行相關(guān)性分析,建立回歸模型,并采用具有生產(chǎn)規(guī)模的6批瞿麥(石竹)原料、配方顆粒質(zhì)量參數(shù)進行驗證。結(jié)果表明:王不留行黃酮苷峰和皂草苷峰在飲片中不同藥用部位的特征圖譜存在相對峰面積差異,15批飲片中二者峰面積總和的α值為0.45~0.83;通過Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),瞿麥(石竹)配方顆粒的總黃酮含量、出膏率、浸出物含量與α值呈顯著正相關(guān)(P<0.01),總黃酮含量與α值極強相關(guān),出膏率、浸出物含量與α值強相關(guān);依據(jù)相關(guān)性建立的3個回歸模型,所得R2均大于0.7,模型擬合度較高,通過6批數(shù)據(jù)的驗證發(fā)現(xiàn)預(yù)測值和實測值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于15%,說明模型有較好的準(zhǔn)確性。研究利用原料特征圖譜中的α值能夠初步預(yù)測所得瞿麥(石竹)配方顆粒的各指標(biāo)范圍,并可實現(xiàn)源頭控制瞿麥(石竹)配方顆粒質(zhì)量,保證所得配方顆粒質(zhì)量的可控性。
關(guān)鍵詞:
中藥化學(xué);飲片;配方顆粒;特征圖譜;峰面積比值;相關(guān)性;可控性
中圖分類號:
R283
文獻標(biāo)識碼:A
DOI: 10.7535/hbgykj.2024yx03002
收稿日期:2023-08-24;修回日期:2023-12-02;責(zé)任編輯:王海云
第一作者簡介:
杜微波(1990—),女,黑龍江哈爾濱人,工程師,主要從事中藥配方顆粒方面的研究。
通信作者:
沈建梅高級工程師。E-mail:shenjianmei@tcmages.com
杜微波,陳敬然,萬瑩瑩,等.
瞿麥(石竹)配方顆粒質(zhì)量與飲片特征圖譜的相關(guān)性
[J].河北工業(yè)科技,2024,41(3):169-174.
DU Weibo,CHEN Jingran,WAN Yingying,et al.
Correlation between the quality of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) formula granule and characteristic map of decoction pieces
[J]. Hebei Journal of Industrial Science and Technology,2024,41(3):169-174.
Correlation between the quality of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) formula granule and characteristic map of decoction pieces
DU Weibo1,2,3, CHEN Jingran1,2,3, WAN Yingying1,2,3, LI Xue1,2,3,? MA Zhiling1,2,3, ZHANG Zhiqiang1,2,3, SHEN Jianmei1,2,3
(1.Beijing Tcmages Pharmaceutical Company Limited, Beijing 101301, China; 2.Traditional Chinese Medicine Formula Granule Key Technology National United Engineering Research Center, Beijing 101301, China; 3.Beijing Chinese Medicine Formula Granule Engineering Technology Research Center, Beijing 101301, China)
Abstract:
In order to establish the method of predicting the quality index of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) formula granules based on the characteristic map of decoction pieces, the correlation between the quality of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) formula granules and the characteristic map of decoction pieces was investigated. The chemical components of different medicinal parts in Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) raw materials were characterized by the characteristic atlas, the difference peak was defined, and the peak area ratio (α) of the difference peak to the total characteristic peak in the characteristic atlas of 15 batches of decoction pieces was calculated; At the same time, according to the national standard of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.) formula granules, the total flavonoids content, paste yield, extract and other indexes of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.)formula granules prepared by using the above 15 batches of decoction pieces were determined; Pearson correlation analysis method was used to analyze the correlation between α value in the characteristics of decoction pieces and the total flavonol content, paste yield and extract of formula granules, the corresponding regression model was established, and the quality parameters of six batches of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.)raw materials and formula particles with production scale were used for verification. The result shows that the relative peak area of vaccarin and saponarin in different medicinal parts in decoction pieces was different, and the α ratio of the total peak area of the two peaks was 0.45 ~ 0.83 in 15 batches of decoction pieces; Through Pearson correlation analysis, it is found that the total flavonoids content, paste yield and extract are significantly positively correlated with α value (P < 0.01), total flavonoids content is strongly correlated with α value, and paste rate and extract are strongly correlated with α value; According to the three regression models established according to the correlation, the R2 obtained is all greater than 0.7, and the model has a high degree of fitting. Through the verification of six batches of data, it is found that the relative standard deviation of the predicted value and the measured value is less than 15%, indicating that the model has a good accuracy. In this study, the α value in the characteristic map of raw materials can be used to preliminarily predict the index range of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.)formula granules, and can achieve source control of the quality of Dianthi Herb(Dianthus chinensis L.)formula granules, ensuring the controllability of the obtained formula granules quality.
Keywords:
chemistry of Chinese material medical; decoction pieces; formula granule; characteristic map; peak area ratio; correlation; controllability
瞿麥(石竹)為石竹科植物石竹Dianthus chinensis L.的干燥地上部分[1],其藥用部位包含了莖、葉、實(子、穗),具有抗菌、 腎保護、抗早孕、抗腫瘤、免疫抑制、神經(jīng)保護及成骨細(xì)胞增殖等藥理作用[2-3]。由于不同藥用部位的化學(xué)成分種類及含量存在差異,導(dǎo)致藥效作用也存在差異[4-7]。據(jù)報道[8]瞿麥(石竹)葉能夠治痔漏并瀉血、小兒蛔蟲、眼目腫痛,搗敷治浸淫瘡并婦人陰瘡;子能夠催生,治月經(jīng)不通,破血塊,排膿?;诖耍瑧?yīng)當(dāng)對瞿麥(石竹)不同藥用部位的化學(xué)成分進行分析研究,但目前卻鮮有這方面的文獻報道。
中藥配方顆粒是中藥飲片按傳統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)炮制后經(jīng)提取、濃縮等步驟制成的產(chǎn)品[9-11],在穩(wěn)定的工藝下其飲片質(zhì)量是中藥配方顆粒質(zhì)量控制的關(guān)鍵?;谥兴幉煌幱貌课换瘜W(xué)成分的差異對飲片質(zhì)量的影響[12-13],應(yīng)采取措施對瞿麥(石竹)不同藥用部位進行質(zhì)量控制,增強飲片質(zhì)量的穩(wěn)定性,提高配方顆粒質(zhì)量的可控性,保證臨床用藥藥效的發(fā)揮。
因此,本文采用特征圖譜對瞿麥(石竹)不同藥用部位進行化學(xué)成分分析,基于化學(xué)成分差異情況設(shè)計可用于反映不同部位比例(α值)的公式,明確15批瞿麥(石竹)飲片不同部位比例的情況,并探討飲片特征圖譜α值與同批次制備而成的配方顆粒各指標(biāo)的相關(guān)性,以期為瞿麥(石竹)飲片質(zhì)量的甄選及配方顆粒質(zhì)量的控制提供參考依據(jù)。
1 材 料
1.1 儀 器
Waters ACQUITY UPLC H-Class超高效液相色譜儀(PDA Detector檢測器,Empower 3色譜工作站),沃特世科技(上海)有限公司提供;BSA124S電子天平,賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司提供;ME104E電子天平,梅特勒·托利多儀器(上海)有限公司提供;JY20002電子天平,舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司提供;KQ-300DB超聲波清洗器,昆山市超聲儀器有限公司提供;DZKW-4電子恒溫水浴鍋,北京中興偉業(yè)儀器有限公司提供。
1.2 試劑與試藥
王不留行黃酮苷(批號為111853-202205,純度為97.1%),中國食品藥品檢定研究院提供;皂草苷(批號為CAS No.20310-89-8,純度為93.5%),上海烜雅生物科技有限公司提供;色譜級乙腈(批號為209296),德國默克公司提供;醋酸(色譜級,批號為193296),美國Fisher化學(xué)公司提供;乙醇(分析純,批號為20230115),國藥集團化學(xué)試劑有限公司提供;甲醇(分析純,批號為20220905),國藥集團化學(xué)試劑有限公司提供;水為蒸餾水,屈臣氏集團提供。瞿麥(石竹)飲片(編號為YP1—YP21)、瞿麥(石竹)配方顆粒(編號為KL1—KL21),均由北京康仁堂藥業(yè)有限公司提供。
2 方法與結(jié)果
2.1 不同藥用部位特征峰的差異
基于瞿麥(石竹)全草所含莖、葉、實的臨床作用差異,對瞿麥(石竹)飲片進行不同藥用部位的挑揀,分別挑揀出莖、葉、實,獲得不同藥用部位的樣品。參照國家藥典委員會公布的《中藥配方顆粒國家藥品標(biāo)準(zhǔn)(第二批)》中瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn) [14](以下簡稱國藥瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)) 項下特征圖譜方法對不同藥用部位樣品進行測定(結(jié)果見圖1),并比較特征圖譜中特征峰的差異,明確特征峰。
由圖1可知,瞿麥(石竹)不同藥用部位所含化學(xué)成分基本相同,但各成分的相對含量、相對比例差異較大。其中,特征峰3(王不留行黃酮苷,以下簡稱峰3)、特征峰4(皂草苷,以下簡稱峰4)的差異尤為明顯,為不同藥用部位的主要差異峰??紤]到峰3、峰4的相對峰面積較高且在不同藥用部位中差異較大,因此采用峰3、峰4峰面積的和占總特征峰峰面積的比值(α值)來區(qū)分3個藥用部位,計算公式見式(1)。
α=S3+S4S1+S2+S3+S4+S5。(1)
經(jīng)計算、比較可知,瞿麥(石竹)不同藥用部位的α值的由大到小順序為α(葉)>α(實)>α(莖)。
2.2 飲片特征圖譜α值與配方顆粒指標(biāo)的相關(guān)性
2.2.1 飲片特征圖譜α值范圍
取15批瞿麥(石竹)飲片(編號為YP1—YP15),參照國藥瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)[14]項下特征圖譜方法進行測定,獲得其特征圖譜,并計算15批飲片特征圖譜的α值(以下簡稱飲片α值),結(jié)果見圖2,由圖可知,15批瞿麥(石竹)飲片特征圖譜的α值為0.45~0.83。
2.2.2 配方顆粒質(zhì)量評價指標(biāo)范圍
參照國藥瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)[14] 測定15批瞿麥(石竹)配方顆粒(編號為KL1—KL15)的出膏率、浸出物含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同)、總黃酮含量(質(zhì)量分?jǐn)?shù),下同),結(jié)果見圖2,由圖可看出,15批瞿麥(石竹)配方顆粒的出膏率為12.1%~20.6%,浸出物含量為21.2%~58.3%,總黃酮含量為7.91~17.9 mg/g。
2.2.3 相關(guān)性分析
利用SPSS統(tǒng)計學(xué)軟件,采用Pearson相關(guān)性分析方法對配方顆粒質(zhì)量評價指標(biāo)與飲片α值的相關(guān)性進行分析,結(jié)果如表1所示。
由表1可知:瞿麥(石竹)配方顆粒中總黃酮含量、出膏率、浸出物含量與瞿麥(石竹)飲片α值均呈顯著正相關(guān)(P<0.01);其中,總黃酮含量與飲片α值的相關(guān)系數(shù)為0.840,在0.8~1.0范圍內(nèi),表明總黃酮含量與飲片α值為極強相關(guān);出膏率、浸出物含量與飲片α值的相關(guān)系數(shù)分別為0.723,0.726,在0.6~0.8范圍內(nèi),表明出膏率、浸出物含量與飲片α值均為強相關(guān)[15]。
2.3 定量模型
2.3.1 定量模型的建立
依據(jù)相關(guān)性,采用曲線評估,分別建立飲片α值與配方顆粒含量、出膏率、浸出物含量的定量模型,利用定量模型進行計算,結(jié)果見表2—表4。
根據(jù)表2—表4可知:瞿麥(石竹)配方顆??傸S酮含量(Y1)與飲片α值(X)的定量模型回歸方程為Y1=21.221X-2.502,回歸模型的標(biāo)準(zhǔn)系數(shù)R2=0.840;配方顆粒的出膏率(Y2)與飲片α值(X)的定量模型回歸方程Y2=16.233X+5.824,回歸模型的標(biāo)準(zhǔn)系數(shù)R2=0.723;配方顆粒浸出物含量(Y3)與飲片α值(X)的定量模型回歸方程Y3=69.951X-15.072,回歸模型的標(biāo)準(zhǔn)系數(shù)R2=0.726;這說明3個模型與數(shù)據(jù)擬合程度較高,可利用飲片α值預(yù)測配方顆粒的總黃酮含量、出膏率及浸出物含量。
2.3.2 定量模型的驗證
將6批瞿麥(石竹)飲片(編號為YP16—YP21)α值代入定量模型中,計算所得配方顆粒出膏率、浸出物含量、總黃酮含量的預(yù)測值與實際值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差,結(jié)果見表5。
由表5可知,6批瞿麥(石竹)配方顆粒(編號為KL16—KL21)的總黃酮含量預(yù)測值和實測值的RSD為3%~12%,出膏率預(yù)測值和實測值的RSD為2%~13%,浸出物含量預(yù)測值和實測值的RSD為0.4%~14%,三者的RSD均小于15%,說明預(yù)測結(jié)果準(zhǔn)確性較高。
3 討 論
本研究利用瞿麥(石竹)飲片特征圖譜分析了不同藥用部位化學(xué)成分的差異,建立了不同藥用部位化學(xué)成分差異的計算公式,并以此得到α值,明確了α值范圍。研究所建立的方法可用于評價瞿麥(石竹)莖、葉、實各部位的質(zhì)量差異,能夠?qū)柠湥ㄊ瘢┎煌幱貌课坏幕瘜W(xué)成分差異研究提供數(shù)據(jù)支持,指導(dǎo)瞿麥(石竹)資源的合理利用。
3.1 瞿麥(石竹)不同藥用部位的差異
關(guān)于瞿麥(石竹)藥用部位的記錄,首載于東漢《神農(nóng)本草經(jīng)》,為“實(子、穗)”,之后依次有:南北朝《本草經(jīng)集注》載:“實中子至細(xì),燥熟便脫盡。今市人惟合莖葉用,而實正空殼,無復(fù)子爾”;宋《紹興本草》載“雖云采實陰干,今方家入藥,莖、葉、實皆用,但去其根矣”;清《本草述鈞元》載:“只用蕊殼,不雜莖葉”。近現(xiàn)代的藥學(xué)家基于全草類中藥傳統(tǒng)用藥習(xí)慣,規(guī)定瞿麥(石竹)藥用部位為干燥地上部分。因此,瞿麥(石竹)藥用部位經(jīng)歷了“實”“子、葉”“莖葉實合用”“只用蕊殼,不用莖葉”“地上部分”等衍變,古代本草通常認(rèn)為“實”好,但“合莖葉用”亦可。[16-17]
通過對瞿麥(石竹)飲片不同藥用部位的特征圖譜研究發(fā)現(xiàn),不同藥用部位所含化學(xué)成分基本相同,但各成分的相對含量差異較大,其中王不留行黃酮苷、皂草苷差異較為明顯。因此,王不留行黃酮苷、皂草苷的峰面積總和α值可作為飲片質(zhì)量控制點。經(jīng)分析,不同藥用部位的α值排序為α(葉)>α(實)>α(莖),說明:瞿麥(石竹)的實、莖、葉均可作為藥用部位,這符合瞿麥(石竹)藥用部位變遷的規(guī)律;瞿麥(石竹)藥材以葉多、實多為佳,建議瞿麥(石竹)藥材在葉、實茂盛時采收,提高藥材的質(zhì)量和藥效。
3.2 瞿麥(石竹)飲片的代表性
瞿麥(石竹)道地產(chǎn)區(qū)主要分布于山東、山西、河南、湖北、安徽等省份,而現(xiàn)代主產(chǎn)區(qū)主要分布在河北、湖北、江蘇、廣西等省份[17-18]。本研究選用包含了湖北、山東、河南、河北等道地產(chǎn)區(qū)及主產(chǎn)區(qū)共計21批瞿麥(石竹)藥材,并按中華人民共和國藥典[1]規(guī)定進行統(tǒng)一炮制,保證了研究所用瞿麥(石竹)飲片的規(guī)范性、代表性。由15批飲片特征圖譜得到的α值為0.45~0.83,與目前瞿麥(石竹)飲片的實際質(zhì)量情況基本一致。
3.3 瞿麥(石竹)飲片特征圖譜α值與配方顆粒評價指標(biāo)的相關(guān)性
通過對瞿麥(石竹)配方顆粒評價指標(biāo)與其飲片α值的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),配方顆??傸S酮含量、浸出物含量、出膏率與飲片α值顯著正相關(guān),其中總黃酮含量與α值極強相關(guān),出膏率、浸出物含量與α值強相關(guān)。這說明隨著飲片α值增大,配方顆粒含量、出膏率、浸出物含量隨之增加。因此,飲片α值在一定程度上可以表征瞿麥(石竹)配方顆粒質(zhì)量的差異,用于配方顆粒的質(zhì)量控制。
反之,國家配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)中瞿麥(石竹)配方顆粒的總黃酮含量范圍為5.0~18.0 mg/g,根據(jù)總黃酮含量與飲片α值定量模型回歸方程,可計算出飲片α值應(yīng)在0.35~0.97 范圍內(nèi);瞿麥(石竹)配方顆粒的浸出物含量范圍為不得低于12% ,根據(jù)浸出物含量與飲片α值定量模型回歸方程,可計算出飲片α值應(yīng)不得低于 0.39 ;瞿麥(石竹)配方顆粒的出膏率范圍為12%~19%,根據(jù)出膏率與飲片α值定量模型回歸方程,可計算出飲片α值應(yīng)在 0.38~0.81 范圍內(nèi)。因此,根據(jù)上述建立的定量模型回歸方程,亦可按照國藥瞿麥(石竹)配方顆粒標(biāo)準(zhǔn)對飲片質(zhì)量進行初步甄選。
本研究所建立的瞿麥(石竹)飲片特征圖譜及其α值,可輔助提升藥材原料質(zhì)量和安全性,并為其他全草類中藥產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。后期研究將增加瞿麥(石竹)道地產(chǎn)區(qū)藥材和具有生產(chǎn)規(guī)模配方顆粒的樣本量,對樣本進行檢測分析,進一步提高線性回歸模型的準(zhǔn)確性和適用性。
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