【摘 要】 目的：優(yōu)選地榆消痔栓的提取工藝與成型性考察研究。方法：根據(jù)組方原則及方中藥材的理化特性和各味藥的藥理作用，分為醇提、水煎煮和原生藥直接入藥三部分。以大黃素、虎杖苷含量為綜合指標，采用正交試驗法考察醇提工藝，選擇乙醇濃度、加醇量、提取時間及提取次數(shù)為醇提考察因素；以鞣質(zhì)含量及出膏率為綜合指標，選擇加水量、煎煮時間、煎煮次數(shù)為水提考察因素。將醇提及水煎煮浸膏噴霧干燥，所得干膏溶入基質(zhì)，最后加入冰片。確定地榆消痔栓劑的最終制備工藝。結(jié)果：醇提最佳條件：80%乙醇，加6倍量，回流提取3次，每次1.5 h。水煎煮為10倍量水，煎煮3次，每次2 h。分別濃縮醇提液及水提液，噴霧干燥，所得干粉溶入基質(zhì)，最后加入冰片，注模，脫模即得。結(jié)論：地榆消痔栓制備工藝穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，為后續(xù)的生產(chǎn)開發(fā)和質(zhì)量控制提供了依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】

地榆消痔栓；制備工藝；正交試驗；含量測定；HPLC

【中圖分類號】R284.2

【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2024）12-0040-07

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2024.12.zgmzmjyyzz202412009

Optimization of Preparation Technology of Diyu Xiaozhi Suppository

ZHAGN Yongqiang1 ZHU Ruirui2 YAN Ruonan3 WANG Siwang3 LI JIE1*

1. Department of Chinese Materia Medica and Natural Medicines， School of Pharmacy， Air Force Medical University，

Xi’an 710038，China;2.School of Pharmacy， Henan University， Kaifeng 475004，China;

3.Department of Life Sciences and Medicine， Northwestern University， Xi’an 710069，China

Abstract：

Objective To optimize the extraction process and forming process of Diyu Xiaozhi Suppository. Methods According to the principle of composition， the physical and chemical properties of Chinese medicinal materials and the pharmacological effects of each flavor of medicine， it is divided into three parts： alcohol extraction， water decoction and direct introduction of original medicine. Taking the content of emodin and knotweed as comprehensive indexes， the orthogonal test method was used to investigate the alcohol extraction process， and the ethanol concentration， alcohol addition， extraction time and extraction times were selected as the factors for alcohol extraction investigation. Taking the tannin content and paste yield as the comprehensive indicators， the water added， decoction time and decoction frequency were selected as the water extraction factors. The alcohol decoction extract is spray dried， the resulting dry paste is dissolved into the substrate， and finally ice chips are added. By investigating the formability of the suppository， the final preparation process of Diyu Xiaozhi suppository was determined. Results The optimal conditions for alcohol extraction： 80% ethanol was extracted 3 times with 6-fold reflux for 1.5 h each time. Decoction is 10 times the amount of water， decoction 3 times each for 2 hours. The alcohol is spray-dried with water decoction extract， the resulting dry paste is dissolved into the substrate， and finally ice chips are added. Conclusion The preparation process of Diyu Xiaozhi i suppository is stable and reliable， with good reproducibility， which provides a basis for industrial production.

Key words：

Diyu Xiaozhi Suppository; Preparation Process; Orthogonal Test;Determination;HPLC

地榆消痔栓是原第四軍醫(yī)大學藥物研究所研制的6.2類新藥，處方主要由地榆、虎杖、朱砂七、白及、鐵莧菜及冰片六味中藥組成，方中地榆為君藥，具有涼血止血、解毒斂瘡之功［1］，常用于便血、痔血、血痢、崩漏等出血癥。其余虎杖、朱砂七、白及、鐵莧菜和冰片藥材具止血、鎮(zhèn)痛、抗病毒和抗菌等作用［2-8］。地榆消痔栓藥理作用主要用于鎮(zhèn)痛、抗炎和治療局部感染及潰瘍。本實驗通過對制劑工藝及質(zhì)量標準進行全面分析研究，優(yōu)選地榆消痔栓的最佳提取工藝和制劑工藝，提升制劑質(zhì)量，確保地榆消痔栓制備方法穩(wěn)定，質(zhì)量可控。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 美國Beckman高效液相色譜儀，Luna C18（5μm，250 mm×4.6 mm，美國Phenomenex）色譜柱；電子分析天平（型號R200D，德國Sartorius）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置（型號EYELA SB-651，日本）；超聲波浴槽（型號250 LH，上?？茖В?；噴霧干燥機（型號HSD-8，上海金橋噴）。

1.2 藥品與試劑 大黃素對照品（0756-202010中國藥品生物制品檢定所）、虎杖苷對照品（111575-202001中國藥品生物制品檢定所）、無水乙醇（AR級，天津市富宇精細化工有限公司）；甲醇、乙腈（HPLC級，美國Fisher公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 地榆消痔栓提取工藝優(yōu)選

2.1.1 醇提工藝研究

2.1.1.1 評價指標 以大黃素、虎杖苷提取率［9-12］以及干膏最佳得率為綜合指標進行考察。

2.1.1.2 大黃素含量分析方法的建立 ①對照品溶液的制備：取大黃素對照品約10 mg，精密稱定，置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得（每1mL中含大黃素0.1 mg）；②供試品制備：稱取1倍處方量（161.78 g）飲片，濾液濃縮置于250mL量瓶中，得到干浸膏，研磨成細粉，取約0.1 g（平行測定兩份），精密稱定，精密加入25mL甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率59 kHz）10 min，再稱重，加甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm微孔濾膜濾過，即得。③陰性對照溶液的制備：取處方比例除虎杖，朱砂七外的藥材，按照②方法制成陰性對照溶液。④色譜條件及方法學考察：色譜柱Luna C18（5μm，250 mm×4.6 mm，美國Phenomenex公司）；流動相為甲醇-水（85∶[KG-*3/5]15）；流速為1.0mL/min；檢測波長254 nm；柱溫為30℃。大黃素在0.04816～0.2408mg/mL的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。標準曲線方程為：Y=1170.14X+6.1995（R2=0.9993）；理論塔板數(shù)按大黃素峰計算不低于3000。由圖1可知，該方法專屬性良好。精密度及穩(wěn)定性試驗中峰面積RSD值分別為0.749%、0.899%?；厥章试囼炛?，大黃素平均回收率為98.43%，RSD為1.66%，其結(jié)果表明本法具有良好的回收率。

2.1.1.3 虎杖苷含量分析方法的建立 ①對照品溶液的制備：精密稱取虎杖苷對照品，加50%乙醇制成每mL含0.1 mg的溶液作為對照品溶液。②供試品制備：稱取1倍處方量（161.78 g）飲片，濾液濃縮置于250mL量瓶中，得到干浸膏，研磨成細粉，取約10 mg，精密稱定，置10mL量瓶中，加50%乙醇約7mL，超聲處理（功率250 W，頻率59 kHz）10 min，再加50%乙醇稀釋至刻度，用0.45μm微孔膜濾過，作為供試品溶液。③陰性對照溶液的制備：取處方比例除虎杖，朱砂七外的藥材，按照②方法制成陰性對照溶液； ④色譜條件及方法學考察：色譜柱Luna C18（5μm，250 mm×4.6 mm，美國Phenomenex公司）。流動相乙腈-水（25∶[KG-*3/5]75）；流速為1.0mL/min；檢測波長為320 nm；柱溫30℃；虎杖苷在0.04164～0.33312mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系；標準曲線方程為Y=849.7755X－0.2828（r=0.9990）；理論板數(shù)按虎杖苷峰計算不低于4000。由圖2可知，該方法專屬性良好。精密度及穩(wěn)定性試驗中峰面積的RSD值分別為0.772%、0.974%?；厥章试囼炛?，虎杖苷平均回收率為97.90％，RSD為1.28％，結(jié)果表明本法具有良好的回收率。

2.1.1.4 干浸膏得率 取1～9號正交樣品的稠膏，分別移至經(jīng)105℃干燥至恒重的潔凈的蒸發(fā)皿中，置于真空干燥箱內(nèi)，80℃減壓干燥12 h，取出置干燥器中放置約30 min，迅速稱重，出干膏率（%）=（總干膏量/投料藥材總量）×100%。

2.1.2 正交實驗設(shè)計優(yōu)選乙醇提取條件

2.1.2.1 提取工藝的選擇 根據(jù)處方藥材性質(zhì)，將虎杖、朱砂七粉碎（粗粉）混合后用乙醇提取。以乙醇濃度、用量、提取時間和次數(shù)為考察因素，選擇三水平，綜合評價提取工藝。選用L9（34）正交表，因素水平見表1。以浸膏中大黃素、虎杖苷提取率為考察指標，結(jié)合浸膏得率優(yōu)選最佳工藝。

2.1.2.2 醇提試驗結(jié)果分析 綜合虎杖苷、大黃素提取率結(jié)果，A因素（醇濃度）對大黃素和虎杖苷含量均無顯著性意義，大黃素含量優(yōu)選出的B、C、D因素與虎杖苷含量優(yōu)選結(jié)果一致，確定最佳工藝為A2B2C2D3，即用80%的乙醇6倍量，提取3次，每次1.5 h。詳見表2。

2.1.3 水提工藝研究

2.1.3.1 評價指標 以正交試驗樣品中鞣質(zhì)的含量 ［13-14］以及干浸膏得率為綜合指標進行考察。

2.1.3.2 鞣質(zhì)含量的測定 ①EDTA－2Na的標定：根據(jù)《中華人民共和國藥典》 2020版 一部，乙二胺四醋酸二鈉滴定液項下的配制及標定方法標定。取干浸膏約0.8 g，精密稱重，加30%甲醇約50mL，水浴回流30 min，減壓過濾，濾液用30%甲醇溶液稀釋至200mL，備用；再精密吸取醋酸鋅溶液（1 mol/L）10mL，置250mL量瓶中加氨水7mL，搖勻，使白色沉淀完全溶解，將上述備用溶液移置量瓶中，用水洗滌三角瓶3～4次并入量瓶中，加水至刻度，振搖1 min，置（35±2）℃水浴中溫熱30 min（間歇振搖數(shù)次），取出冷卻至室溫，搖勻后過濾，精密吸取續(xù)慮液20mL，于500mL三角瓶中，加水300mL，再加氨－氯化銨緩沖液（pH＝10）25mL，鉻黑T指示劑少許，搖勻，用標定過的EDTA－2Na滴定液滴定至溶液由紫紅色變?yōu)榛@綠色，記錄消耗的EDTA－2Na體積，鞣質(zhì)含量（％）＝{［0.1556×25×（V空－V樣）×M］/ W樣}×100％ ［0.1556：絡(luò)合沉淀劑（Zn2＋）的消耗與鞣質(zhì)含量的關(guān)系常數(shù)；V空：空白校正試驗消耗的EDTA－2Na體積（mL）；V樣：樣品溶液消耗的EDTA－2Na體積（mL）；M：EDTA－2Na滴定液的摩爾濃度（mol/L）；W樣：干膏取樣量（g）］。計算鞣質(zhì)含量。測定結(jié)果見表4。

2.1.3.3 提取工藝的選擇 根據(jù)處方性質(zhì)地榆、鐵莧菜、白及藥材成分主要為水溶性成分［1，5-7］，故選擇水煎入藥?；⒄瘸S酮類成分外，亦含水溶性成分鞣質(zhì)，所以宜將醇提后藥渣再加水煎煮。以加水量、提取時間和次數(shù)作為考察因素，選擇三個水平， 綜合評價提取工藝。選用L9（34）正交表，具體的因素水平安排見表3。

2.1.3.4 水提取正交試驗結(jié)果分析 綜合兩項指標優(yōu)選結(jié)果，C因素對干膏率有顯著性意義，其他則無顯著性意義，故優(yōu)選出水煎最佳工藝為A1B3C3，即用10倍量水，煎煮3次，每次2.0 h。詳見表4。

2.2 浸膏噴霧干燥工藝的確定

2.2.1 噴霧干燥的進口溫度的確定 分別取上述藥液1000mL在進口溫度300℃、 250℃、200℃、170℃、150℃進行噴霧干燥，發(fā)現(xiàn)250℃、300℃所噴霧干燥時噴頭旁都有焦黑粉末粘結(jié)，而150℃所噴霧干燥時有掛壁現(xiàn)象產(chǎn)生，在200℃和170℃時末發(fā)現(xiàn)上述現(xiàn)象，這主要是250℃和300℃溫度太高易焦化，而180℃時溫度太低，不易及時干燥。因此確定進口溫度為170℃～200℃為佳。

2.2.2 噴霧干燥的出口溫度的確定 取上述藥液5000mL對出口溫度進行選擇，為60℃、70℃、80℃、90℃、100℃，分別取1000mL進行噴霧干燥，60℃得到的粉末有部分粘結(jié)，并有大量結(jié)在出口處。70℃、80℃、90℃、100℃得到的粉末，分別測定含水量，得出以下結(jié)果，見表5。

從以上結(jié)果說明，用80℃、90℃、100℃噴霧干燥得出水分，一般干燥后，含水量都能符合要求（<5％），所以確定出口溫度以80～100℃為佳。

2.3 壓縮空氣的壓力進行的確定 確定了進出口溫度后，對壓縮空氣的壓力進行選擇，在4.5 kg、3.5 kg、2.5 kg壓力的條件下，取上述藥液各1000mL進行噴霧干燥，發(fā)現(xiàn)4.5 kg壓力粉末飛揚太厲害，有粘在噴霧器的現(xiàn)象， 而2.5 kg噴霧所得粉末比3.5 kg大，收集器中不易收集，所以確定壓縮空氣為3.5 kg/cm2。

2.4 出粉率 將醇提浸膏和水煎煮浸膏分別噴霧干燥，因所得粉末較細，在混和時易造成粉末飛揚，且混合后可能產(chǎn)生局部混合不均，所以噴霧干燥時的浸膏為醇提浸膏和水提浸膏混合后的浸膏。分別取同一批且混合均勻的浸膏，分三次噴霧干燥，每次約取1000mL，測定出粉率，結(jié)果見表6。

2.5 成形性研究 本品為中藥浸膏制劑，加入混合脂肪酸甘油酯基質(zhì)，采取熱熔法而制備的栓劑劑型。

2.5.1 藥物中加入的基質(zhì)的量的確定［15-18］ 取基質(zhì)作空白栓，取10粒，稱定重量13.80 g，平均重量（G）為1.38 g/粒。另取基質(zhì)與藥物（0.54 g/粒）混合做成含藥栓，取10粒，稱定重量15.0 g，平均重量（M）為1.50 g/粒。每粒栓劑中藥物的平均重量（W）為0.54 g/粒。將上述測得數(shù)據(jù)帶入DV＝W/G－（M－W）即可求得主藥對基質(zhì)的置換價（displacement value，DV）：DV＝1.2857。用置換價計算出制備這種栓劑需要基質(zhì)的量x＝［G－（y/DV）］×n（y－處方中藥物的劑量；n－擬制備栓劑的粒數(shù)）。所以制備1000粒藥栓需要基質(zhì)的量為：x＝960 g。

2.5.2 基質(zhì)溫度的控制 熔化混合脂肪酸甘油酯基質(zhì)時， 溫度不宜過高， 在熔融至三分之二或四分之三時， 應停止加熱， 讓其自行熔化， 使完全熔融后的溫度在60℃左右為宜，這樣能使之全部融熔而避免過熱，基質(zhì)熔融后加入上述藥粉， 應立即攪拌使其混合均勻。在注入栓模前應將溫度控制在40～50℃之間。溫度過高則會延長冷卻時間， 藥粉就會沉淀， 使栓劑藥物含量不勻， 影響栓劑的質(zhì)量; 溫度過低則會使基質(zhì)產(chǎn)生少量的凝固， 生產(chǎn)出的栓劑就會變花， 也會影響栓劑的質(zhì)量。栓模在注入藥物之前， 應在冷柜中冷卻10～20 min， 使栓模的溫度保持在10℃左右為宜。栓模太涼， 會吸收空氣中的水份，使栓模表面產(chǎn)生水層， 給灌裝帶來不便。

2.5.3 冷卻時間的掌握 灌好的栓劑在冷柜中冷卻的時間應在20～30 min之間為宜。時間過長則溢出部分不易刮去，且容易斷裂;時間太短則未能完全冷卻， 刮去溢出部分時， 會使栓劑底部不光滑， 不但影響美觀而且影響質(zhì)量。刮去溢出部分后在冷柜中冷卻時間應掌握在15～20 min左右。

2.6 中試放大驗證 根據(jù)上述正交試驗優(yōu)選結(jié)果分別按處方量的20倍、20倍、20倍進三批藥材進行中試放大試驗；分別測定中間體即醇提浸膏，水提浸膏中大黃素、鞣質(zhì)的含量及出膏率。樣品制備過程、色譜條件及測定方法均同前面一致。

結(jié)果三批樣品醇浸膏中大黃素含量依次為2.69%、2.81%、2.88%，虎杖苷含量分別為1.62%、1.79%、1.52%，水提浸膏中鞣質(zhì)含量分別為22.14%、23.58%、24.04%。試驗結(jié)果表明本工藝重現(xiàn)性好，可靠， 從而為工業(yè)化生產(chǎn)提供了依據(jù)。中試中間體和成品的收得量及成分測定結(jié)果見表7。

3 結(jié)論

當前使用的痔瘡治療藥物主要以外用劑型為多，地榆消痔栓是由地榆、虎杖、朱砂七、白及、鐵莧菜及冰片組成的復方純中藥制劑，具有清熱解毒、利濕消腫、止血止痛之功。方中虎杖、朱砂七主要成分為蒽醌類衍生物及游離大黃素、大黃素甲醚、大黃酚等，并含縮合鞣質(zhì)，而上述成分主要為脂溶性成份［2-4］，故將虎杖、朱砂七進行醇提，以大黃素和虎杖苷含量為指標進行考察試驗。方中地榆、鐵莧菜、白及藥材成分主要為水溶性成分，故均選擇水煎入藥?；⒄瘸S酮類成分外，亦含水溶性成分鞣質(zhì)，所以宜將醇提后藥渣再加水煎煮。同時結(jié)合浸膏得率和鞣質(zhì)含量優(yōu)選水煎煮制備工藝。合并上述浸膏，噴霧干燥，得細粉備用。冰片易揮發(fā)，不宜受熱，故直接入藥，最后將上述所得細粉及冰片加入基質(zhì)中，制成栓劑。其具體工藝流程如圖3所示。本實驗根據(jù)組方原則及方中藥材中成分的理化特性以及對有效成分和藥理作用的分析，確定了醇提、水煎、直接入藥三種入藥工藝，利用熱熔法得到地榆消痔栓，最終確定了最佳制備工藝，為地榆消痔栓院內(nèi)制劑的生產(chǎn)提供了依據(jù)。

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（收稿日期：2023-10-11 編輯：劉 斌）