關(guān)鍵詞 真菌毒素；磁性多壁碳納米管；磁性固相萃取；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜

真菌毒素（Mycotoxins）是各種產(chǎn)毒絲狀真菌在生長(zhǎng)繁殖過程中產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物[1-2]。根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧食農(nóng)業(yè)組織統(tǒng)計(jì)，全球超過25%的農(nóng)作物在生長(zhǎng)、收獲、干燥和儲(chǔ)存期間受到不同真菌毒素的污染，造成數(shù)百億美元的經(jīng)濟(jì)損失[3-4]。目前，已知的真菌毒素有400 多種[5-6]，其中，黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及單端孢霉烯族毒素是常見且危害較大的真菌毒素，具有致癌、致畸、致突變效應(yīng)以及激素毒性和免疫抑制毒性等[7-8]。這些真菌毒素的化學(xué)性質(zhì)多數(shù)較穩(wěn)定，很容易進(jìn)入飼料和食物鏈中，對(duì)動(dòng)物和人類健康造成嚴(yán)重危害[9-10]。因此，亟需建立能夠高效富集凈化且準(zhǔn)確測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品中多種真菌毒素的有效分析方法。

目前，真菌毒素的分析方法主要包括光電化學(xué)分析法[11-14]、免疫分析法[15-16]和儀器分析法[17-21]等。光電化學(xué)分析法和免疫分析法促進(jìn)了真菌毒素快速檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，但其主要用于基于適配體的少數(shù)幾種真菌毒素的檢測(cè)，而且存在重復(fù)性不佳和抗干擾能力差等問題。研究表明，農(nóng)產(chǎn)品中同時(shí)存在的多種真菌毒素會(huì)在生物體內(nèi)產(chǎn)生協(xié)同作用，導(dǎo)致聯(lián)合毒性疊加，極大地增大了人類健康的危險(xiǎn)系數(shù)[22]。因此，對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中的多種真菌毒素進(jìn)行同時(shí)測(cè)定是非常重要和必要的。目前，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）仍然是多種真菌毒素同時(shí)檢測(cè)最有效的技術(shù)方法。

農(nóng)產(chǎn)品樣品的基質(zhì)成分復(fù)雜，并且真菌毒素在農(nóng)產(chǎn)品的污染狀況呈現(xiàn)出低水平、聯(lián)合毒性和分布不均勻等特點(diǎn)。因此，樣品前處理過程是UPLC-MS/MS 分析過程中必要且關(guān)鍵的步驟。目前，農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素的樣品前處理方法主要有免疫親和層析（IAC）[23]、液液萃?。↙LE）[24]、QuEChERS[25]、固相萃?。⊿PE）[26]和磁性固相萃?。∕SPE）[27]等。其中， IAC 前處理效率高，但是操作步驟繁瑣；LLE 需要較多的有機(jī)溶劑；QuEChERS 是應(yīng)用較廣泛的前處理方法，但容易產(chǎn)生較高的基質(zhì)效應(yīng)，而且需要通過高速離心進(jìn)行兩相分離，比較耗時(shí)；SPE 法操作過程復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)且成本高。MSPE 是一種以磁性材料作為吸附劑的固相萃取方法，通過外部磁場(chǎng)即可實(shí)現(xiàn)吸附劑與樣品基質(zhì)的高效分離，具有操作簡(jiǎn)單快速、有機(jī)溶劑消耗少以及目標(biāo)物回收率較高等優(yōu)點(diǎn)。

磁性納米吸附劑的設(shè)計(jì)是MSPE 前處理方法的關(guān)鍵。多壁碳納米管（Multi-walled carbon nanotubes，MWCNTs）具有較大的比表面積、豐富的π電子、獨(dú)特的中空和層狀結(jié)構(gòu)以及豐富的官能團(tuán)，已被成功應(yīng)用于農(nóng)藥和抗生素的富集凈化[28-29]。目前，關(guān)于MWCNTs 用于MSPE 富集凈化真菌毒素的研究較少。本研究將Fe₃O₄ 納米顆粒引入到MWCNT 表面，采用共沉淀法制備Fe₃O₄-MWCNTs，將其作為MSPE 吸附劑，建立了簡(jiǎn)單、高效和環(huán)保的前處理方法，結(jié)合UPLC-MS/MS 分析方法，實(shí)現(xiàn)了農(nóng)產(chǎn)品中常見的22 種真菌毒素的準(zhǔn)確定量分析。對(duì)影響前處理效率的提取溶液、吸附劑類型、吸附劑用量和洗脫溶液類型進(jìn)行了系統(tǒng)性優(yōu)化，對(duì)方法的線性范圍、靈敏度和精密度進(jìn)行了驗(yàn)證，并將其應(yīng)用于實(shí)際樣品的分析。Fe₃O₄-MWCNTs 具有良好的富集凈化效果和磁分離特性，基于Fe₃O₄-MWCNTs 的MSPE 前處理方法為開發(fā)高效的樣品前處理技術(shù)提供了新思路，所建立的分析方法也為農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)和控制提供了技術(shù)支撐。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Waters ACQUITY UPLC I-Class PLUS/XEVO TQ-S 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters 公司）；JEOL 2100 透射電子顯微鏡儀（日本Jeol 公司）；Nicolet iN10 紅外光譜儀（美國(guó)Thermo 公司）；Bruker D8Advance X 射線衍射儀（德國(guó)Bruker 公司）；Buchi-R-210 旋蒸蒸發(fā)儀（瑞士Buchi 公司）；恒溫水浴搖床（中國(guó)Labor Tech 公司）；Milli-Q 超純水儀（美國(guó)Mimpore 公司）；ME104E 電子天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Vortex Genie 2 渦旋儀（美國(guó)Scientific Industries 公司）；N-EVAP 氮吹儀（美國(guó)Organomation 公司）；pHS-3C 精密pH 計(jì)（上海雷磁公司）。

乙腈、甲醇和丙酮（色譜純，美國(guó)Thermo Fisher 公司）；甲酸和乙酸銨（色譜純，美國(guó)Sigma Aldrich公司）；FeCl₂·4H₂O（≥99%）、FeCl₃·6H₂O（≥99%）、NaOH（≥98%）和乙酸（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；不同類型碳納米管（中國(guó)科學(xué)院成都有機(jī)化學(xué)有限公司），包括MWCNTs（直徑8 nm，長(zhǎng)度10～30 μm， 純度＞98%）、羥基多壁碳納米管（Hydroxylated multi-walled carbon nanotubes， MWCNTs-OH）、羧基多壁碳納米管（Carboxyl multi-walled carbon nanotubes， MWCNTs-COOH）和長(zhǎng)多壁碳納米管（Multi-walled carbon nanotubes-2， MWCNTs-2，直徑8～15 nm、長(zhǎng)度50 μm， 純度＞98%）；22 種真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品（純度＞98%，美國(guó)Sigma-Aldrich 公司），詳細(xì)信息見電子版文后支持信息表S1。各標(biāo)準(zhǔn)品用乙腈配制成1 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，于–20 ℃避光密封保存；混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 Fe₃O₄-MWCNTs的制備

采用化學(xué)共沉淀法合成磁性多壁碳納米管（Fe₃O₄-MWCNTs）[30]。首先，將FeCl3·6H2O（0.810 g）和FeCl₂·4H₂O（0.309 g）溶解在300 mL 純水中，然后轉(zhuǎn)移到500 mL 三頸燒瓶中持續(xù)攪拌。取0.3 g MWCNTs加入到上述溶液中，然后向溶液中逐滴添加1% NaOH 溶液，調(diào)節(jié)pH=12，在80 ℃下劇烈攪拌60 min。整個(gè)反應(yīng)過程在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行。待溶液冷卻至室溫后，對(duì)黑色的沉淀產(chǎn)物（Fe3O4-MWCNTs）進(jìn)行磁性收集，然后用純水洗滌數(shù)次，直到洗滌液的pH 值接近中性，于80 ℃下干燥10 h，研磨，備用。采用同樣的方法合成Fe₃O₄-MWCNTs-OH、Fe₃O₄-MWCNTs-COOH 和Fe₃O₄-MWCNTs-2。

1.2.2 樣品前處理

首先，稱取5.0 g 玉米粉（購(gòu)于北京當(dāng)?shù)啬吵校┲糜?0 mL 聚丙烯離心管中，加入25 mL 提取液（含1%乙酸的乙腈-水（80∶20， V/V）溶液），置于旋渦混合器中劇烈振蕩1 min，超聲提取20 min， 8000 r/min離心5 min。然后，取5 mL 上清液在50 ℃下氮吹至干，加入5 mL 乙腈-水（5∶95，V/V）復(fù)溶，加入20 mgFe₃O₄-MWCNTs，在旋渦混合器中劇烈振蕩吸附3 min 后磁分離，去除上清液。最后，加入10 mL 甲酸的丙酮溶液（0.5%， V/V）進(jìn)行洗脫，磁分離，去除上清液后，在50 ℃下進(jìn)行氮吹干燥，加入1 mL 乙腈-水（50∶50， V/V）復(fù)溶，過0.22 μm PTFE 濾膜至進(jìn)樣瓶中，采用UPLC-MS/MS 分析檢測(cè)。

1.2.3 UPLC-MS/MS分析

采用Waters Acquity UPLC 系統(tǒng)進(jìn)行液相分離， Acquity Cortecs UPLC C18 色譜柱（100 mm × 2.1 mm，1.6 μm）的柱溫為40 ℃， 樣品室溫度4 ℃， 進(jìn)樣量5 μL， 流速為0.3 mL/min， 梯度洗脫（梯度洗脫程序見電子版文后支持信息表S2）。質(zhì)譜分析使用Waters XEVO TQ-S質(zhì)譜儀，采用電噴霧電離源（ESI），在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式下進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)分析物的結(jié)構(gòu)特征選擇正離子或負(fù)離子模式（具體見電子版文后支持信息表S3）。參數(shù)如下：離子源溫度為150 ℃， 脫溶劑氣溫度為500 ℃， 毛細(xì)管電壓為2.5/–0.8 kV， 錐孔氣流速為150 L/h， 去溶劑氣體流量為1000 L/h。采用MassLynx v4.1和Targetlynx（Waters）進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

1.2.4 UPLC-MS/MS分析方法的評(píng)價(jià)

根據(jù)歐盟法規(guī)401/2006/EC[31]和歐洲SANCO 指南12571/2013[32]對(duì)所建立的方法進(jìn)行驗(yàn)證，包括基質(zhì)效應(yīng)（Matrix effect， ME）、線性范圍、檢出限（Limit of detection， LOD）、定量限（Limit of quantitation，LOQ）、準(zhǔn)確度和精密度等。將22 種真菌毒素分為4 組進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)：A 組（0.1～5 ng/g）：AFB1、AFB2、AFG1、AFG2、OTA、OTB 和TEN；B 組（1～50 ng/g）：ALT、T-2、α-ZOL、α-ZAL、β-ZAL、β-ZOL、ZAN 和ZEN；C 組（5～250 ng/g）：3-ADON、15-ADON、FUS-X、HT-2 和DAS；D 組（10～500 ng/g）：DON 和NEO。

2 結(jié)果與討論

2.1 Fe3O4-MWCNTs復(fù)合材料的表征

通過透射電子顯微鏡（TEM）、X 射線衍射（XRD）和紅外光譜（FT-IR）考察了Fe₃O₄-MWCNTs 的形貌、結(jié)構(gòu)和光譜特性。如圖1 所示， Fe₃O4 納米顆粒的平均直徑約為150 nm。采用共沉淀法將Fe₃O₄ 納米顆粒復(fù)合到MWCNTs 表面， Fe₃O₄-MWCNTs 和MWCNTs 的XRD 表征如圖2 所示。Fe₃O₄-MWCNTs 在25.80°附近的峰值歸因于MWCNTs，其它6 個(gè)典型的衍射峰分別位于31.04°、35.58°、43.15°、53.78°、57.25°和63.03°處，對(duì)應(yīng)于（220）、（311）、（400）、（422）、（511）和（440）晶面，與JCPDS 文件（PDFNo.65/3107）中的數(shù)據(jù)庫一致，表明Fe3O4-MWCNTs 上的Fe₃O₄ 呈立方晶型。在Fe₃O₄-MWCNTs 中， Fe₃O₄和MWCNT 的峰共存，表明Fe₃O₄-MWCNTs 被成功制備[33]。

Fe₃O₄-MWCNTs 的FT-IR 光譜如圖3所示，位于3420、1735 和1620 cm^–1 處的峰分別歸屬于—OH、—C=O 和—COOH 的拉伸振動(dòng)， 1381 和1173 cm^–1 處的峰歸屬于O—H 的彎曲振動(dòng)和C—O 的拉伸振動(dòng)， 582 cm^–1 處的峰歸屬于Fe—O[34]。以上結(jié)果表明， Fe₃O₄ 吸附在MWCNTs 表面， Fe₃O₄-MWCNTs 納米材料被成功制備。

2.2 前處理方法的優(yōu)化

通過樣品前處理過程能夠有效富集目標(biāo)物，減少樣品的基質(zhì)效應(yīng)干擾，顯著提高方法的準(zhǔn)確度和靈敏度，是建立靈敏且高效的方法的基礎(chǔ)和前提。對(duì)影響前處理富集凈化效率的提取溶液類型、吸附劑類型、吸附劑用量和洗脫溶液類型進(jìn)行了系統(tǒng)性優(yōu)化，在優(yōu)化樣品制備過程中，采用外標(biāo)基質(zhì)匹配法計(jì)算回收率。

2.2.1 提取溶液類型的優(yōu)化

提取溶液是影響前處理效率的首要因素。研究表明，乙腈-水混合液是常用的真菌毒素分析提取溶液，在提取溶液中加入適量的酸可以提高提取效率[25，33]。Wang 等[35]研究表明，在提取溶液中加入檸檬酸可以螯合重金屬，提高真菌毒素的回收率。Myresiotis 等[36]研究表明，在提取溶劑中加入1%乙酸可以提高AFs、TEN、DON、HT-2 和T-2的回收率。因此，對(duì)提取溶劑中酸的類型和用量（0%、1%、3%乙酸和10 mmol/L 檸檬酸）進(jìn)行了優(yōu)化。研究結(jié)果表明，含1%乙酸的乙腈-水（80∶20，V/V）溶液對(duì)22 種目標(biāo)真菌毒素的提取效率最高（72.3%～109.8%），隨著乙酸濃度增加，提取溶液中的基質(zhì)干擾物增加將導(dǎo)致回收率降低，而添加檸檬酸并不能提高大多數(shù)目標(biāo)真菌毒素的回收率（見電子版文后支持信息圖S1）。因此，本研究選擇含1%乙酸的乙腈-水（80∶20，V/V）溶液作為提取溶液。

2.2.2 富集凈化材料類型的優(yōu)化

吸附材料的選擇在MSPE 樣品前處理過程中具有重要意義。MWCNTs 的中空管狀結(jié)構(gòu)具有質(zhì)量密度小、比表面積大、氫鍵和π-π堆積作用較強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)復(fù)雜基質(zhì)具有很好的富集凈化性能，而不同基團(tuán)修飾的MWCNTs 富集凈化效果不同。本研究考察了不同類型磁性碳納米管的MSPE 前處理富集凈化效率，包括Fe₃O₄-MWCNTs、Fe₃O₄-MWCNTs-OH、Fe₃O₄-MWCNTs-COOH 和Fe₃O₄-MWCNTs-2。結(jié)果表明， Fe₃O₄-MWCNTs 的富集凈化效果最好，對(duì)22 種目標(biāo)真菌毒素的回收率為72.3%～109.8%（見電子版文后支持信息圖S2）。樣品經(jīng)Fe₃O₄-MWCNTs-OH、Fe₃O₄-MWCNTs-COOH 和Fe₃O₄-MWCNTs-2 富集凈化后，目標(biāo)真菌毒素的回收率分別為42.2%～139.2%、30.5%～142.3%和20.3%～142.9%，這可能是由于MWCNTs-OH、MWCNTs-COOH 和MWCNTs-2 表面的羥基和羧基等活性基團(tuán)與基質(zhì)干擾物表面的氨基和羰基相互作用導(dǎo)致基質(zhì)干擾增強(qiáng)，回收率降低。因此，本研究選擇Fe₃O₄-MWCNTs 作為MSPE 樣品前處理的富集凈化材料。

2.2.3 Fe₃O₄-MWCNTs用量的優(yōu)化

考察了吸附材料Fe₃O₄-MWCNTs 的用量對(duì)目標(biāo)真菌毒素回收率的影響。隨著Fe₃O₄-MWCNTs 用量從10 mg 增至20 mg， 22 種目標(biāo)真菌毒素的回收率從14.7%～102.5%增至72.3%～109.8%；但是，當(dāng)Fe₃O₄-MWCNTs 用量增至30 mg 時(shí)，目標(biāo)真菌毒素的回收率反而降低，這是由于過量的Fe₃O₄-MWCNTs 會(huì)吸附基質(zhì)干擾成分，導(dǎo)致目標(biāo)真菌毒素回收率降低（見電子版文后支持信息圖S3）。因此，確定在MSPE樣品前處理中，F(xiàn)e₃O₄-MWCNTs 的用量為20 mg。

2.2.4 洗脫溶液類型的優(yōu)化

在MSPE 前處理過程中，解吸溶液可以破壞π-π作用、氫鍵和分子間作用力而解吸目標(biāo)分析物[37]。乙腈、甲醇和丙酮是最常用的解吸溶劑，在有機(jī)溶劑中加入甲酸可以提高其解吸性能[38-39]。考察了含0.5%（V/V）甲酸的乙腈、甲醇和丙酮對(duì)22種目標(biāo)真菌毒素的洗脫效果，結(jié)果表明，采用含0.5%（V/V）甲酸的丙酮溶液進(jìn)行解吸， 22種目標(biāo)真菌毒素的回收率最好（72.3%～109.8%），而經(jīng)乙腈和甲醇洗脫后，真菌毒素的回收率低于40%（圖4）。因此，在MSPE 樣品前處理中選擇含0.5%（V/V）甲酸的丙酮進(jìn)行解吸。

2.3 方法驗(yàn)證

2.3.1 基質(zhì)效應(yīng)

在UPLC-MS/MS 分析過程中，樣品基質(zhì)及外源組分會(huì)干擾目標(biāo)物的電離，使目標(biāo)物質(zhì)譜響應(yīng)增高或降低，產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)（ME）[40]。因此，采用基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)于UPLC-MS/MS 準(zhǔn)確定量分析多種真菌毒素至關(guān)重要。本研究以空白樣品基質(zhì)提取液和乙腈-水（50∶50，V/V）為溶劑，分別構(gòu)建了基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線和溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線，其相應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)的計(jì)算公式為ME（%）=（A–B）/A ×100，其中，A為基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率， B 為溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。當(dāng)ME在?20%～+20%范圍內(nèi)時(shí)，認(rèn)為基質(zhì)效應(yīng)不顯著；當(dāng)MEgt;+20%時(shí)，表示存在基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)；當(dāng)MElt;?20%時(shí)，表示存在基質(zhì)抑制效應(yīng)[41-42]。如圖5 所示，玉米樣品基質(zhì)通過Fe₃O₄-MWCNTs 富集凈化后， 22 種目標(biāo)真菌毒素的基質(zhì)效應(yīng)為–27.7%～9.8%，優(yōu)于Fe₃O₄-MWCNTs-OH（–57.8%～17.3%）、Fe₃O₄-MWCNTs-COOH（–69.5%～30.7%）和Fe₃O₄-MWCNTs-2（71.3%～33.3%）的凈化效果。此外，16 種真菌毒素經(jīng)Fe₃O₄-MWCNTs 富集凈化后，基質(zhì)效應(yīng)在–20%～20%之間，表明Fe₃O₄-MWCNTs 在農(nóng)產(chǎn)品真菌毒素多殘留凈化過程中具有良好的基質(zhì)凈化效果，是理想的MSPE 前處理吸附劑。盡管如此，本研究仍采用基質(zhì)匹配曲線以獲得更準(zhǔn)確的定量分析結(jié)果。

2.3.2 方法的分析性能

利用空白玉米基質(zhì)提取液配制22 種真菌毒素的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，以質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線，并計(jì)算每種真菌毒素的校準(zhǔn)曲線方程和相關(guān)系數(shù)（R2）。結(jié)果表明，采用本方法測(cè)定22 種真菌毒素時(shí)，在各自的線性范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系（R2≥0.9966）；以3倍信噪比（S/N=3）計(jì)算得到LOD 為0.0008～1.6337 ng/g，以10 倍信噪比（S/N=6）計(jì)算得到LOQ 為0.0025～5.4457 ng/g，表明本方法具有良好的靈敏度（見電子版文后支持信息表S4）。

在空白玉米樣品基質(zhì)中分別添加2 倍LOQ、5倍LOQ 和10 倍LOQ 濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，室溫下靜置2 h，待真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品被樣品充分吸收后進(jìn)行提取、凈化和UPLC-MS/MS分析，每個(gè)加標(biāo)水平均進(jìn)行日內(nèi)實(shí)驗(yàn)（重復(fù)6 次）和日間實(shí)驗(yàn)（連續(xù)3d， 每天重復(fù)3 次），結(jié)果見電子版文后支持信息表S5。22種目標(biāo)真菌毒素在低、中、高3 個(gè)濃度添加水平下的回收率分別為71.5%～118.4%、72.3%～109.8%和73.9%～111.4%，日內(nèi)和日間精密度（RSD）分別為1.3%～10.9%（n=6）和2.3%～11.6%（n =3）。以上結(jié)果表明，本方法具有較高的回收率、良好的準(zhǔn)確度和靈敏度，適用于多種真菌毒素的準(zhǔn)確定量分析。

將本方法與之前的研究工作進(jìn)行比較（表1），本方法具有更寬的線性范圍、較高的回收率和較低的定量限，可以實(shí)現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品中22 種常見真菌毒素的同時(shí)檢測(cè)。

2.4 實(shí)際樣品的測(cè)定

采用建立的MSPE-UPLC-MS/MS 方法對(duì)玉米樣品中的真菌毒素進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表2，在5 個(gè)玉米樣品中共檢出8種真菌毒素（AFB1、AFB2、15-ADON、OTA、TEN、DON、ZEN 和β-ZAL），其中有2種真菌毒素（OTA 和ZEN）超標(biāo)：在樣品2和3中測(cè)得的OTA 含量分別為12.1 和15.6 ng/g，超過國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)（5 ng/g）[46]；在樣品1、2和4 中測(cè)得的ZEN含量分別為83.7、74.4和79.3 ng/g，超過國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)（60 ng/g）[46]。以上結(jié)果表明，農(nóng)產(chǎn)品中存在多種真菌毒素共同污染及真菌毒素超標(biāo)問題，需要加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品中多種真菌毒素的同時(shí)監(jiān)測(cè)。

3 結(jié)論

本研究制備了Fe₃O₄-MWCNTs，并將其作為MSPE 吸附劑用于農(nóng)產(chǎn)品中真菌毒素的前處理過程。對(duì)提取溶液類型、吸附劑類型、吸附劑用量和洗脫溶液進(jìn)行了系統(tǒng)性優(yōu)化，在最佳前處理?xiàng)l件下，將MSPE 技術(shù)與UPLC-MS/MS 技術(shù)相結(jié)合，建立了可同時(shí)測(cè)定農(nóng)產(chǎn)品中22種真菌毒素的方法。基于Fe₃O₄-MWCNTs 的MSPE 前處理技術(shù)既發(fā)揮了Fe₃O₄-MWCNTs良好的富集凈化能力，又可以實(shí)現(xiàn)樣品溶液的磁性分離。本方法具有簡(jiǎn)單、快速、靈敏和高效的特點(diǎn)，可用于大批量農(nóng)產(chǎn)品中多種真菌毒素的同時(shí)檢測(cè)，對(duì)于保障糧食安全具有重要參考意義。