摘" " 要" " 目的" " 應(yīng)用超聲測量前額空間比（PFSR），探討其聯(lián)合無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測（NIPT）在早孕期胎兒染色體異常篩查中的臨床應(yīng)用價值。方法" " 選取在我院接受早孕期羊水穿刺染色體核型檢測的高危孕婦80例，均行產(chǎn)前超聲檢查及NIPT，以羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，比較超聲測量PFSR、NIPT及兩者聯(lián)合應(yīng)用篩查早孕期胎兒染色體異常的診斷效能。結(jié)果" " 80例高危孕婦中，羊水穿刺染色體核型檢測篩查胎兒染色體異常11例，其中21-三體綜合征6例，18-三體綜合征2例，13-三體綜合征2例，Turner綜合征1例。超聲測量PFSR篩查早孕期胎兒染色體異常的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為63.64%、86.96%、83.75%；NIPT的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為72.73%、88.41%、86.25%；兩者聯(lián)合應(yīng)用的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為90.91%、98.55%、97.50%，均高于單一方法，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均Plt;0.05）。結(jié)論" " 超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT能提高篩查早孕期胎兒染色體異常的診斷效能，具有較好的臨床應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞" " 超聲檢查，產(chǎn)前；前額空間比；無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測；染色體異常；胎兒

［中圖法分類號］R445.1；R714.5" " " ［文獻標(biāo)識碼］A

Clinical value of ultrasound measurement of prefrontal space ratio combined with non-invasive prenatal testing in screening fetal

chromosomal abnormalities in early pregnancy

ZHANG Yumin，XIE Bin，CHEN Jieneng，ZHAO Xianwei

Department of Ultrasound Medicine，Huanggang Central Hospital，Hubei 438000，China

ABSTRACT" " Objective" " To measure the prefrontal space ratio（PFSR） by ultrasound，and to explore the clinical application value of" the method combined with non-invasive prenatal testing（NIPT） in screening fetal chromosomal abnormalities in early pregnancy.Methods" " A total of 80 high-risk pregnant women who received amniocentesis chromosome karyotype detection in our hospital were selected.All of them underwent prenatal ultrasound examination and NIPT.Amniocentesis chromosome karyotype detection results were taken as the gold standard，the diagnostic efficacy of ultrasound measurement of PFSR，NIPT and their combined application in screening fetal chromosomal abnormalities in early pregnancy were compared.Results" " Among the 80 high-risk pregnant women，11 cases were screened for fetal chromosomal abnormalities by amniocentesis，including 6 cases of trisomy 21 syndrome，2 cases of trisomy 18 syndrome，2 cases of trisomy 13 syndrome，and 1 case of Turner syndrome.The sensitivity，specificity and accuracy of ultrasound measurement of PFSR for screening fetal chromosomal abnormalities in early pregnancy were 63.64%，86.96% and 83.75%，respectively.The sensitivity，specificity and accuracy of NIPT were 72.73%，88.41% and 86.25%，respectively.The sensitivity，specificity and accuracy of the combination of the two methods were 90.91%，98.55% and 97.50%，respectively，which were higher than those of the single method，and the differences were statistically significant（all Plt;0.05）.Conclusion" " Ultrasound measurement of PFSR combined with NIPT could improve the diagnostic efficacy for screening fetal chromosomal abnormalities in early pregnancy，and has good clinical application value.

KEY WORDS" " Ultrasonography，prenatal；Prefrontal space ratio；Non-invasive prenatal testing；Chromosomal abnormality；Fetus

文獻［1］報道，我國新生兒中染色體異常者占比約為0.5%，圍產(chǎn)期致死率較高，且出生后常伴有重要臟器結(jié)構(gòu)、功能異常及智力障礙。早孕期準(zhǔn)確篩查胎兒染色體異常對改善妊娠結(jié)局十分重要［2］。目前臨床篩查胎兒染色體異常的金標(biāo)準(zhǔn)為羊水穿刺染色體核型檢測，但該方法有創(chuàng)，會增加孕婦流產(chǎn)的風(fēng)險，具有一定的局限性［3-4］。無創(chuàng)產(chǎn)前DNA檢測（non-invasive prenatal testing，NIPT）僅需采集孕婦靜脈血，基于高通量基因測序?qū)δ阁w外周血漿中的游離DNA進行提取、分析，從而全面了解胎兒染色體異常情況［5-6］。研究［7］表明，早孕期檢測顏面部相關(guān)參數(shù)可以發(fā)現(xiàn)胎兒染色體異常，其中前額空間比（prefrontal space ratio，PFSR）對21-三體綜合征的篩查價值較高，但目前關(guān)于超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT對胎兒染色體異常的篩查價值尚未明確。基于此，本研究應(yīng)用超聲測量PFSR，并探討其聯(lián)合NIPT篩查早孕期胎兒染色體異常的應(yīng)用價值，以期為臨床提供參考。

資料與方法

一、研究對象

選取2020年1月至2023年2月我院接受早孕期羊水穿刺染色體核型檢測的高危孕婦80例，年齡23～35歲，平均（30.15±2.73）歲，孕11～13+6周，平均孕（12.3±1.2）周，孕次1～3次，平均（1.52±0.33）次；產(chǎn)次0～2次，平均（0.86±0.15）次。納入標(biāo)準(zhǔn)：①存在高體質(zhì)量、高齡、胚胎移植、不良孕史等羊水穿刺指征的高風(fēng)險孕婦；②于我院行規(guī)律產(chǎn)前檢查，臨床資料完整；③于孕17～24周接受羊水穿刺染色體核型檢測。排除標(biāo)準(zhǔn)：①孕婦自身染色體核型檢測結(jié)果異常；②存在妊娠期合并癥；③有唐氏綜合征家族史。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號：HGSZXYY-YLJS-2023-004），所有孕婦或家屬均簽署知情同意書。

二、儀器與方法

1.超聲檢查：使用GE Voluson E10彩色多普勒超聲診斷儀，C9-2探頭，頻率2～9 MHz。孕婦取仰臥位，宮內(nèi)胎兒身體處于自然屈曲狀態(tài)，檢查時適當(dāng)調(diào)節(jié)探頭方向，沿胎兒下頜骨前緣垂直于牙床處至上頜骨前緣勾畫下頜-上頜線，并延伸至前額處，分別測量額骨前緣至皮膚距離（d1）及前額皮膚至下頜-上頜線距離（d2），并計算PFSR，公式為：PFSR=d2/d1；若下頜-上頜線低于前額皮膚，則PFSR=-d2/d1［8］。當(dāng)PFSRlt;第5百分位數(shù)時判為胎兒染色體異常［9］。

2.NIPT方法：孕婦于早孕期采集空腹肘靜脈血5 ml，將其置于抗凝管中離心10 min，分離血漿，提取DNA進行PCR擴增后獲得樣本的DNA文庫，使用基因測序儀（DA8600，廣州達安基因股份有限公司 ）行高通量檢測，并將測得的基因序列結(jié)果與人類基因參考序列進行比對分析。當(dāng)樣本第13、18及21號染色體Z值gt;3時判為三體型；羊水染色體核型為45，XO時判為Turner綜合征。

3.羊水穿刺染色體核型檢測：規(guī)范消毒后于超聲引導(dǎo)下（RAB4-8-D探頭，頻率4～8 MHz）行羊膜腔穿刺，采集羊水約20 ml，離心10 min棄上清液，留取0.5 ml置入羊水培養(yǎng)基中制備為細胞懸液，置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，7 d后換液繼續(xù)培養(yǎng)，監(jiān)測羊水細胞的生長情況。加入適量秋水仙素（陜西森元生物科技有限公司）使細胞分裂處于中期，制作羊水細胞標(biāo)本并進行染色體核型分析。

4.聯(lián)合檢測標(biāo)準(zhǔn)：超聲測量PFSR與NIPT篩查胎兒染色體其中一種檢查結(jié)果異常定義為聯(lián)合篩查結(jié)果陽性。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，計量資料以x±s表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以頻數(shù)或率表示，采用χ2檢驗。以羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，分析超聲測量PFSR、NIPT及兩者聯(lián)合應(yīng)用篩查早孕期胎兒染色體異常的診斷效能。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)" 果

一、羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果

80例孕婦中，羊水穿刺染色體核型檢測篩查胎兒染色體異常11例，其中21-三體綜合征6例，18-三體綜合征2例，13-三體綜合征2例，Turner綜合征1例。

二、超聲檢查結(jié)果

超聲測量PFSR篩查胎兒染色體異常16例，PFSR為0.35±0.08。其中7例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符，包括21-三體綜合征4例，18-三體綜合征2例，13-三體綜合征1例；其余64例超聲篩查胎兒染色體均未見異常，PFSR為0.70±0.11，其中60例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符。超聲測量PFSR篩查早孕期胎兒染色體異常的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為63.64%、86.96%、83.75%。見表1。染色體異常胎兒PFSR低于正常胎兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.937，Plt;0.05）。見圖1，2。

三、NIPT結(jié)果

NIPT篩查胎兒染色體異常16例，其中8例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符，包括21-三體綜合征6例，18-三體綜合征2例；其余64例NIPT篩查胎兒染色體均未見異常，其中61例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符。NIPT篩查早孕期胎兒染色體異常的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為72.73%、88.41%、86.25%。見表2。

表2" " NIPT篩查胎兒染色體異常情況 例

[NIPT 羊水穿刺染色體核型檢測 合計 陽性 陰性 陽性 8 8 16 陰性 3 61 64 合計 11 69 80 ]

四、超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT結(jié)果

超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT篩查胎兒染色體異常11例，其中10例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符，包括21-三體綜合征6例，18-三體綜合征2例，13-三體綜合征2例；其余69例兩種方法聯(lián)合篩查胎兒染色體均未見異常，其中68例與羊水穿刺染色體核型檢測結(jié)果相符。超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT篩查胎兒染色體異常的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為90.91%、98.55%、97.50%，均高于單一方法，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均Plt;0.05）。見表3。

討" 論

胎兒染色體異常是導(dǎo)致胎兒出生缺陷及死亡的主要原因，具體表現(xiàn)為染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)發(fā)生畸變［10］。隨著我國二胎政策開放，加之環(huán)境、遺傳等因素影響，使胎兒染色體異常的發(fā)生率呈逐年上升趨勢。染色體異常胎兒出生后常伴有嚴(yán)重智力障礙及多臟器或部位發(fā)育不良，給家庭及社會帶來沉重負擔(dān)［11-12］。目前臨床上產(chǎn)前篩查方法多為中孕期行血清學(xué)檢查和超聲檢查，對于篩查結(jié)果為異常的孕婦則進一步行羊水穿刺，從而降低染色體異常胎兒的出生率［13］。但中晚孕期終止妊娠對孕婦身心影響較大，采用合適的方法于早孕期準(zhǔn)確篩查胎兒染色體異常有助于減輕孕婦身心負擔(dān)［14］。超聲測量PFSR和NIPT均為常用的產(chǎn)前診斷方法，能反映宮內(nèi)胎兒發(fā)育情況，進而達到降低染色體異常胎兒出生率的目的，本研究旨在探討兩者聯(lián)合應(yīng)用對早孕期胎兒染色體異常的篩查價值。

本研究納入80例高危孕婦，羊水穿刺染色體核型檢測篩查胎兒染色體異常11例，其中21-三體綜合征6例，18-三體綜合征2例，13-三體綜合征2例，Turner綜合征1例，與既往研究［15］報道的常見胎兒染色體異常類型一致。羊水穿刺染色體核型檢測是目前診斷胎兒染色體異常的金標(biāo)準(zhǔn)，但在取樣過程會增加羊膜腔感染及胎膜早破的發(fā)生風(fēng)險，對孕婦身體造成一定程度的損傷，因此部分孕婦對該方案的接受度不高，亟需探尋一種無創(chuàng)、準(zhǔn)確篩查胎兒染色體異常的手段。超聲是臨床產(chǎn)前檢查的常用方法，隨著超聲儀器分辨率的提高，早孕期胎兒結(jié)構(gòu)的顯示清晰度也隨之提高。研究［16］表明，染色體異常胎兒多會出現(xiàn)顏面扁平及眼距、眼眶過窄或過寬，以及耳位偏低等異常表現(xiàn)。本研究結(jié)果顯示，染色體異常胎兒PFSR低于正常胎兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=11.937，Plt;0.05）。分析原因為PFSR是基于下頜-上頜線及鼻前皮膚厚度測得，可反映胎兒上下頜骨與前額之間的空間關(guān)系，當(dāng)下頜-上頜線與前額距離較近時，染色體異常胎兒易出現(xiàn)皮膚水腫及鼻前皮膚厚度增加等表現(xiàn)。本研究超聲測量PFSR篩查胎兒染色體異常存在9例假陽性，4例假陰性，其靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為63.64%、86.96%、83.75%；提示僅依靠超聲測量PFSR篩查胎兒染色體異常具有一定的誤診率，這是因為超聲測量PFSR雖能準(zhǔn)確反映宮內(nèi)胎兒鼻骨結(jié)構(gòu)，但部分唇腭裂、Binder綜合征或下小頜畸形等顏面部異常胎兒也會出現(xiàn)PFSR異常。

NIPT是通過提取母體外周血漿中的游離DNA進行篩查，有效基因信息的濃度高，高通量檢測結(jié)果高效、可靠，使得NIPT應(yīng)用廣泛，且具有重復(fù)性好、無創(chuàng)、操作簡便等優(yōu)點。本研究結(jié)果顯示，NIPT篩查胎兒染色體異常存在8例假陽性，3例假陰性，其靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為72.73%、88.41%、86.25%；提示NIPT篩查胎兒染色體異常的診斷效能雖較超聲測量PFSR略高，但仍無法滿足臨床需求。本研究進一步將兩種方法聯(lián)合應(yīng)用篩查胎兒染色體異常，結(jié)果顯示其靈敏度、特異度及準(zhǔn)確率分別為90.91%、98.55%、97.50%，均高于單一方法，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均Plt;0.05）。分析原因可能為PFSR有效彌補了NIPT篩查13-三體綜合征及Turner綜合征的不足，NIPT也彌補了PFSR對顏面部異常胎兒的誤診情況，二者互為補充，從而提高了診斷效能。

綜上所述，超聲測量PFSR聯(lián)合NIPT能提高篩查早孕期胎兒染色體異常的診斷效能，可為早孕期診斷和臨床決策提供參考。但本研究樣本量較少，后續(xù)有待擴大樣本量深入驗證。

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（收稿日期：2023-05-30）