【摘 要】目的：探討富含絲氨酸結(jié)構(gòu)域1的RNA結(jié)合蛋白（RNA-binding protein with serine-rich domain 1，RNPS1）在胰腺癌進(jìn)展中的作用及可能分子機(jī)制。方法：免疫組織化學(xué)與免疫熒光檢測RNPS1與Notch3在胰腺癌組織及癌旁組織的表達(dá)；RTqPCR、免疫熒光檢測RNPS1與Notch3在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況；Hoechst與CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測胰腺癌細(xì)胞凋亡與增殖；劃痕實(shí)驗(yàn)與transwell實(shí)驗(yàn)檢測胰腺癌細(xì)胞遷移與侵襲能力；Western blot實(shí)驗(yàn)檢測胰腺癌細(xì)胞中N-Cadherin和E-Cadherin的表達(dá)；Western blot與RT-qPCR實(shí)驗(yàn)檢測胰腺癌細(xì)胞中Notch3與HEY1的表達(dá)。結(jié)果：與癌旁組織與正常細(xì)胞系相比較，RNPS1與Notch3在胰腺癌組織中及胰腺癌細(xì)胞的表達(dá)均增高（F=121.612、34.649，均Plt;0.05）；與對照組相比較，敲低RNPS1抑制生物標(biāo)志物N-Cadherin的表達(dá)（t=39.922，Plt;0.05），促進(jìn)E-Cadherin的表達(dá)（t=8.281，Plt;0.05），敲低RNPS1可減弱癌細(xì)胞的生存、遷移侵襲的能力（t=2.017、4.874、19.747，均Plt;0.05，），促進(jìn)了細(xì)胞凋亡（t=33.673，Plt;0.05）；敲低RNPS1降低了癌細(xì)胞中Notch3與HEY1 的表達(dá)（t=17.546、6.258，均Plt;0.05）。結(jié)論：RNPS1 的表達(dá)與胰腺癌細(xì)胞生存、惡性表型有關(guān)，RNPS1 可能通過調(diào)控Notch3/HEY1信號通路促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的生存及腫瘤進(jìn)展。

【關(guān)鍵詞】選擇性剪切；胰腺癌；富含絲氨酸結(jié)構(gòu)域1的RNA結(jié)合蛋白；生存；進(jìn)展

【中圖分類號】R361+.3 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【收稿日期】2023-10-20

胰腺癌（pancreatic cancer，PC）是一種侵襲性強(qiáng)，致死性高，預(yù)后極差的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，最新的調(diào)查研究顯示PC是世界上癌癥相關(guān)死亡的第四大因素，并且其發(fā)病率每年以1.3% 的速度增長，其5年生存率不足12%[1]，然而，PC的發(fā)生機(jī)制并不明確。研究顯示，選擇性剪接（alternative splic?ing，AS）事件在癌癥組織中比正常組織更常見，剪接因子表達(dá)水平的改變似乎是剪接異常的主要驅(qū)動因素[2]。健康細(xì)胞和惡性細(xì)胞的剪切譜顯示出高度的多樣性，剪切因子的表達(dá)差異是癌癥發(fā)病的重要因素[3]。異常選擇性剪接與癌癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，選擇性剪接不僅在促進(jìn)癌細(xì)胞的侵襲或遷移能力方面[4-6]，在腫瘤代謝、對抗癌藥物的反應(yīng)及對治療藥物的耐藥性中均起著關(guān)鍵作用[7-8]。具有富含絲氨酸結(jié)構(gòu)域1 的RNA 結(jié)合蛋白（RNAbindingprotein with serine-rich domain 1，RNPS1）是剪接過程的重要調(diào)節(jié)因子。RNPS1表達(dá)的增加可能與宮頸癌的腫瘤進(jìn)展有關(guān)[9]，抑制RNPS1的表達(dá)可激活腫瘤細(xì)胞的凋亡、抑制子宮內(nèi)膜癌的進(jìn)展[10]。然而，RNPS1在PC發(fā)生發(fā)展中的作用及其對PC細(xì)胞的影響還未見報(bào)道。本研究從生物信息分析出發(fā)，進(jìn)行數(shù)據(jù)庫分析，確定了RNPS1在PC中的表達(dá)情況，對RNPS1對PC細(xì)胞增殖，遷移，侵襲和凋亡的影響進(jìn)行了更具體的研究，初步分析了其可能的作用機(jī)制，這可能為PC的早期診斷與治療尋找潛在的新靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)與臨床病例

人胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞hTERT-HPNE，人PC HPAC細(xì)胞、BxPC-3 細(xì)胞購自ATCC。培養(yǎng)液為DMEM、RPMI-1640，培養(yǎng)液內(nèi)含10% FBS，100 U/L青霉素、100 μg/mL鏈霉素，培養(yǎng)條件為37 ℃，5% CO2恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每2～3 d傳代1次，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞為對數(shù)生長期細(xì)胞。人PC 標(biāo)本22例，RNPS1與Notch3在癌旁組織中呈陰性表達(dá)，在PC組織表達(dá)陽性比例，RNPS1是14/22，Nocth3是19/22。本研究獲得倫理委員會審核批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 主要試劑

DMEM，RPMI-1640培養(yǎng)基，胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）購自美國Hyclone公司，CCK-8檢測試劑盒（C0038）購自碧云天生物技術(shù)有限公司，RNPS1抗體（PA5-60589）購自美國Thermofisher公司，Notch3抗體，HEY1購自美國Protein?tech公司，E-Cadherin 抗體，N-Cadherin 抗體購自碧云天生物技術(shù)有限公司，GAPDH抗體購自美國SIGMA公司，免疫組化檢測試劑盒（SAP-9100）購自中杉金橋，Western blot專用Ⅱ抗購自美國LI-COR公司，LipofectamineTM 2000轉(zhuǎn)染試劑購自美國Invitrogen公司，RNPS1 siRNA（sc-38309），陰性對照（negative control，NC）siRNA（sc-37007）購自美國SantaCruz公司的。

1.3 方法

1.3.1 免疫組織化學(xué) 常規(guī)脫蠟、水化，熱抗原修復(fù)后，5%驢血清室溫封閉1 h，Notch3（1∶200），RNPS1（1∶200）孵育，4 ℃過夜，按照免疫組化檢測試劑盒操作孵育，DAB顯色，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，脫水、透明，中性樹膠封片后室溫晾干，顯微鏡下觀察，采集圖像。

1.3.2 siRNA轉(zhuǎn)染 取生長狀態(tài)良好的HPAC細(xì)胞，培養(yǎng)板中的細(xì)胞融合度達(dá)70%～80%。利用LipofectamineTM 2 000，轉(zhuǎn)染RNPS1 siRNA（RNPS1：5’-AAGGAAGACCAGTAGGAAA-3’）（終濃度為50 nmol/L）及NC siRNA（終濃度為50 nmol/L）至細(xì)胞中，空白對照組只加1 mL無血清RPMI-1640培養(yǎng)液。37 ℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h后，各組均更換為完全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，轉(zhuǎn)染12 h、24 h、48 h后進(jìn)行下一步的檢測。

1.3.3 RNA提取及RT-qPCR 收集轉(zhuǎn)染48 h后的HPAC細(xì)胞，利用TRLzol試劑提取總RNA，利用NanoDrop? ND-2000檢測RNA濃度及純度，按照逆轉(zhuǎn)錄試劑盒提供的說明書進(jìn)行操作，將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，所用引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，RNPS1引物：5’-AGCTCTTCCTCAGCATCCAG-3’（forward） ，5’ -CACTTTGGTGGGCTTAGGAG-3’（reverse）；Notch3引物：5’-AAGGACGTGGCCTCTGGT-3’（forward），5’-TCAGGCTCTCACCCTTGG-3’（reverse）；HEY1 引物：5’-CCCGCTGAGAGGATCTG-3’（forward），5’-CCCTGTGCATCTCATTTCC-3’（reverse），GAPDH 引物：5’-CATCACCATCTTCCAGGAGC-3’（forward），5’-GGATGATGTTCTGGAGAGCC-3’（reverse）。PCR 反應(yīng)按照說明書采用兩步法進(jìn)行，反應(yīng)條件：94 ℃ 30 s；94 ℃ 5 s；55 ℃ 15 s；72 ℃10 s，共設(shè)置40個(gè)循環(huán)。

1.3.4 劃痕實(shí)驗(yàn)（wound healing assay） 分別將對數(shù)生長期的HPAC細(xì)胞接種于6孔板中，培養(yǎng)6 h后用1 mL的無菌藍(lán)色吸頭在孔的中間劃痕，盡量保證每一個(gè)孔中劃痕的寬度一致。按照上述方法轉(zhuǎn)染RNPS1 siRNA至細(xì)胞中，轉(zhuǎn)染24 h、48 h后鏡下觀察細(xì)胞愈合情況，利用Image J軟件測量愈合面積。

1.3.5 侵襲實(shí)驗(yàn)（invasion assay） 按照約3×105 個(gè)/mL的密度接種于transwell板的上層小室中（包被基質(zhì)膠），按照上述方法轉(zhuǎn)染RNPS1 siRNA至HPAC細(xì)胞中，37 ℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。棄去培養(yǎng)液，用棉簽擦去小室膜上面的HPAC細(xì)胞，4% PFA固定小室膜下面的HPAC細(xì)胞20 min，0.1% 結(jié)晶紫染細(xì)胞20 min，鏡下觀察，采集圖像，計(jì)算穿過小室的細(xì)胞數(shù)目。

1.3.6 CCK-8 實(shí)驗(yàn) 按照上述方法轉(zhuǎn)染RNPS1 siRNA 至HPAC細(xì)胞中，取轉(zhuǎn)染后12 h、24 h、48 h的腫瘤細(xì)胞。棄去孔中的培養(yǎng)液，每孔新加入100 μL培養(yǎng)液。每孔加入10 μLCCK-8溶液，37 ℃，5% CO2 孵育2 h。設(shè)置酶標(biāo)儀，在450 nm處測吸光度（absorbance，A）值。

1.3.7 Hoechst染色 將對數(shù)生長期的HPAC細(xì)胞接種于6孔板中（內(nèi)含無菌蓋玻片）培養(yǎng)12 h，轉(zhuǎn)染RNPS1 siRNA至細(xì)胞中培養(yǎng)48 h，對照組正常培養(yǎng)，按照使用說明書進(jìn)行Hoechst染色，封片，顯微鏡下選擇視野，觀察染色結(jié)果并拍照，每組設(shè)置5個(gè)副孔，計(jì)算凋亡指數(shù)，凋亡指數(shù)=凋亡細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)×100%。

1.3.8 Western blot 取對照組，轉(zhuǎn)染48 h 的RNPS1 siRNA組細(xì)胞，棄去培養(yǎng)液，每皿加入500 μL RIPA裂解液裂解細(xì)胞，提取總蛋白。常規(guī)SDS-PAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，5%脫脂奶粉室溫封閉1 h，RNPS1抗體（1∶1 000），Notch3抗體（1∶500），HEY1抗體（1∶500），E-Cadherin抗體（1∶500），N-Cadherin抗體（1∶500）及GAPDH抗體（1∶10 000）4 ℃孵育過夜（12 h以上），熒光Ⅱ抗室溫孵育2 h后，曝光、拍照，Image J軟件分析灰度值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，3組及3組以上組間比較采用單因素方差分析，2組之間比較采用t 檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)來自3次以上的獨(dú)立重復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 RNPS1與Notch3在PC組織與癌細(xì)胞中的表達(dá)及相關(guān)性

為了確定RNPS1與Notch3在PC發(fā)生發(fā)展中的作用及它們的相關(guān)性，本研究使用OncoDB web資源。數(shù)據(jù)顯示，與正常組織相比，RNPS1與Notch3在PC樣本中表達(dá)升高，并且二者有一定的相關(guān)性（圖1A）。進(jìn)而本研究利用免疫組織化學(xué)與免疫熒光方法檢測了二者在PC組織與癌旁組織及PC細(xì)胞中的表達(dá)，結(jié)果顯示，與癌旁組織相比較，RNPS1與Notch3在PC組織中的表達(dá)增高，且二者共存于癌細(xì)胞中（圖1B、C）；與胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞（正常對照組）相比較，RNPS1在PC 細(xì)胞HPAC 和BxPC-3 呈高表達(dá)（t=20.940、6.680，Plt;0.001），與胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞（正常對照組）相比較，Notch3在PC 細(xì)胞HPAC 和BxPC-3也呈高表達(dá)（t=8.440、9.700，Plt;0.001）（圖1D、E）。這就提示RNPS1與Notch3可能在PC的進(jìn)展中發(fā)揮作用。

2.2 RNPS1 siRNA 降低HPAC 中RNPS1 mRNA 及蛋白的表達(dá)

為了檢測RNPS1 siRNA 的干擾效果，利用轉(zhuǎn)染試劑將RNPS1 siRNA 轉(zhuǎn)染至HPAC 中，采用Western blot 與RTqPCR的方法檢測RNPS1蛋白水平及mRNA 水平變化。結(jié)果如圖2所示，與對照組相比較，RNPS1 siRNA可顯著降低HPAC 中RNPS1 的表達(dá)（t=50.714，Plt;0.001），說明RNPS1siRNA干擾效果較好。

2.3 敲低RNPS1促進(jìn)PC細(xì)胞HPAC凋亡、抑制其增殖

鑒于RNPS1在PC癌組織的表達(dá)高于其在癌旁組織的表達(dá)，本研究推測RNPS1可能作為致癌基因而發(fā)揮作用，使用siRNA敲低RNPS1基因，利用Hoechst染色與CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測PC 細(xì)胞的凋亡與增殖能力，Hoechst 染色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比較，RNPS1 siRNA組細(xì)胞凋亡指數(shù)升高（圖3A、B）（t=33.673，Plt;0.001）；CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比較，RNPS1 siRNA組細(xì)胞的增殖能力降低（圖3C）（t=2.017，Plt;0.01；t=4.874，Plt;0.05）。這些結(jié)果提示RNPS1可抑制PC細(xì)胞凋亡、促進(jìn)其增殖。

2.4 敲低RNPS1抑制PC細(xì)胞HPAC遷移、侵襲能力

使用siRNA敲低RNPS1基因，利用劃痕實(shí)驗(yàn)與transwell實(shí)驗(yàn)進(jìn)行PC細(xì)胞的遷移、侵襲能力的檢測，結(jié)果顯示如圖4A～C所示，與對照組相比較，RNPS1 siRNA組細(xì)胞遷移的愈合面積降低（t=4.472，Plt;0.053；t=6.354，Plt;0.001），侵襲細(xì)胞的數(shù)目減少（t=19.747，Plt;0.05），細(xì)胞的遷移與侵襲能力顯著降低。這些表明RNPS1參與了PC細(xì)胞侵襲、遷移的正向調(diào)節(jié)。

2.5 敲低RNPS1抑制N-Cadherin表達(dá)、促進(jìn)E-Cadherin表達(dá)

上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移最常見的原因，在腫瘤細(xì)胞中N-Cadherin的表達(dá)升高，E-Cadherin表達(dá)降低預(yù)示著腫瘤細(xì)胞間接觸的黏附連接性降低，細(xì)胞分離與運(yùn)動能力增強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞遷移能力、侵襲與轉(zhuǎn)移的能力增強(qiáng)，反之則作用相反。為進(jìn)一步檢測癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、侵襲能力，本研究使用siRNA 敲低RNPS1 后，檢測了細(xì)胞中N-Cadherin 和E-Cadherin 表達(dá)的變化，結(jié)果顯示如圖5所示，與對照組相比較，RNPS1 siRNA組細(xì)胞中N-Cadherin 的相對表達(dá)量降低（t=39.922，Plt;0.001），而E-Cadherin 的相對表達(dá)量升高（t=8.281，Plt;0.001）。這就提示，敲低RNPS1抑制了細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力，RNPS1可促進(jìn)PC細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲。

2.6 敲低RNPS1 抑制PC 細(xì)胞中Notch3 與HEY1 mRNA表達(dá)

基于OncoDB web 資源庫的檢測結(jié)果顯示，在PC 中RNPS1與Notch3的表達(dá)存在相關(guān)性（圖1），且在PC組織中RNPS1與Notch3共表達(dá)，為進(jìn)一步探索RNPS1的下游靶點(diǎn)，利用RT-qPCR檢測了敲低RNPS1后Notch3與HEY1 mRNA的表達(dá)變化，方差分析3組中Notch3 mRNA與HEY1 mRNA表達(dá)的差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=20.416，Plt;0.001；F=16.314，Plt;0.01），如圖6 所示，與正常對照組相比較，陰性siRNA 組中Notch3 mRNA 的表達(dá)及其下游靶基因HEY1mRNA 表達(dá)無明顯改變（t=2.988、0.028，均Pgt;0.05），而RNPS1 siRNA 組中，敲低RNPS1 的表達(dá)后下調(diào)了Notch3mRNA 的表達(dá)及其下游靶基因HEY1 mRNA 表達(dá)（t=5.180、6.724，均Plt;0.01）。

2.7 敲低RNPS1抑制PC細(xì)胞中Notch3與HEY1蛋白表達(dá)

利用Western blot檢測了敲低RNPS1后Notch3與HEY1蛋白的表達(dá)變化，結(jié)果顯示如圖7所示，敲低RNPS1的表達(dá)后，HPAC 細(xì)胞中Notch3 蛋白與HEY1 蛋白表達(dá)均降低（t=17.546、6.258，均Plt;0.001），以上結(jié)果提示RNPS1可能通過正向調(diào)控Notch3/HEY1信號通路參與PC的進(jìn)展。

3 討論

PC是一種致死性高，預(yù)后極差的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，目前PC主要的治療方法是根治性手術(shù)切除，然而，由于PC早期缺乏明顯的臨床癥狀，進(jìn)展相對較快，易發(fā)生轉(zhuǎn)移，大多數(shù)患者已無法手術(shù)治療，其生存率及治療效果大大降低[11]。盡管越來越多的關(guān)于PC的遺傳學(xué)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量關(guān)鍵基因的改變[12-13]，但PC發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制仍有待進(jìn)一步的研究。因此，探索PC早期診斷的生物標(biāo)志物及尋找PC潛在治療靶點(diǎn)，有助于早期發(fā)現(xiàn)PC并改善預(yù)后。

AS是真核生物基因表達(dá)的重要調(diào)控機(jī)制，它是一個(gè)高度調(diào)控的過程，該過程的失調(diào)對許多疾病的易感性及發(fā)生發(fā)展都有重要影響，如心血管疾病、免疫疾病、神經(jīng)退行性疾病、代謝性疾病和癌癥等[14-17]。剪接因子的失調(diào)或突變導(dǎo)致的AS失調(diào)已被證明參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展、腫瘤對化療的敏感性，并可作為診斷或預(yù)后的生物標(biāo)志物[18-21]。

1999年RNPS1被鑒定并純化，為剪接過程的重要調(diào)節(jié)因子，在mRNA代謝調(diào)控中起重要作用[22-23]。敲低RNPS1可加重缺血誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡，并下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-xL和Mcl-1的表達(dá)，提示RNPS1可能是減輕缺血性卒中神經(jīng)元死亡的潛在治療靶點(diǎn)[24]。近年來，RNPS1在惡性腫瘤的作用受到研究者的關(guān)注，通過全基因組分析確定AS事件，并構(gòu)建子宮內(nèi)膜癌（endometrial cancer，EC）的預(yù)后模型，結(jié)果顯示，RNPS1可能是EC治療的新靶點(diǎn)[25]。通過對467 例肺鱗癌患者的基因測序及臨床分析顯示，RNPS1是基因相互作用網(wǎng)絡(luò)中的樞紐基因[26]。與正常卵巢上皮相比較，RNPS1在卵巢癌細(xì)胞的表達(dá)降低，功能研究表明，RNPS1在卵巢癌細(xì)胞中具有多種抗腫瘤作用[27]。而在宮頸癌中，RNPS1表達(dá)升高，其介導(dǎo)的選擇性剪接有利于激活Rac1b/RhoA信號軸，進(jìn)而參與宮頸癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[9]。RNPS1在PC中發(fā)生發(fā)展中的作用尚不明確。

為了確定RNPS1是否在PC的發(fā)生和發(fā)展中起作用，本研究使用OncoDB web 資源，數(shù)據(jù)顯示，與正常組織相比，RNPS1在PC樣本中表達(dá)升高，本研究進(jìn)一步驗(yàn)證了RNPS1在PC組織、癌旁組織及PC細(xì)胞與胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，與數(shù)據(jù)庫資源一致，與正常組織及細(xì)胞系相比，RNPS1在PC細(xì)胞中表達(dá)升高。

為了解RNPS1 在PC 中的作用，本研究利用siRNA靶向敲低PC細(xì)胞系HPAC中RNPS1的表達(dá)，本研究發(fā)現(xiàn)RNPS1的下調(diào)可以抑制PC細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡。N-Cadherin 和ECadherin是腫瘤細(xì)胞EMT重要的標(biāo)記物，RNPS1敲低后，N-Cadherin蛋白表達(dá)降低，E-Cadherin蛋白表達(dá)升高，進(jìn)一步提示RNPS1在PC細(xì)胞生存、遷移、侵襲中起到正向調(diào)節(jié)作用。

Notch3是在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的4種Notch受體之一，在不同的腫瘤中發(fā)揮著不同的作用，激活Notch3/Hey1促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、存活和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT），從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展[28]。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，沉默Notch3可以抑制PC細(xì)胞的生長、遷移和侵襲[29]。OncoDB web資源數(shù)據(jù)顯示，Notch3在PC樣本中過表達(dá)，并且與RNPS1的表達(dá)有相關(guān)性，本研究結(jié)果也顯示，與正常組織及細(xì)胞系相比，Notch3在PC細(xì)胞中表達(dá)升高。RNPS1是否是通過調(diào)節(jié)Notch3信號通路而發(fā)揮作用還不清楚。本研究利用siRNA靶向敲低PC細(xì)胞系HPAC中RNPS1的表達(dá)后，結(jié)果顯示，Notch3及其下游靶基因HEY1的mRNA及蛋白水平均降低，提示RNPS1 通過正向調(diào)控Notch3/HEY1信號通路參與PC的進(jìn)展。

在本研究中，檢測了RNPS1與PC的進(jìn)展的關(guān)系，研究結(jié)果揭示了RNPS1在調(diào)節(jié)PC的關(guān)鍵標(biāo)志，如生存、遷移和侵襲等中發(fā)揮重要作用，RNPS1可通過Notch3/HEY1信號通路調(diào)節(jié)PC的腫瘤進(jìn)展，這些結(jié)果將為通過調(diào)節(jié)Notch信號通路延緩PC的發(fā)展提供了新的方法和策略，有助于PC早期診斷或預(yù)后的生物標(biāo)志物及潛在治療靶點(diǎn)的尋找。

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（責(zé)任編輯：曾 玲）