摘 要：【目的】研究棉花苗期響應(yīng)鹽脅迫的應(yīng)答機(jī)制，為棉花耐鹽品種篩選提供依據(jù)?！痉椒ā繉?duì)耐鹽型棉花和敏感型棉花三葉期幼苗進(jìn)行200 mM NaCl脅迫處理，觀察NaCl處理下0、48 h和復(fù)水48 h的棉花葉片顯微結(jié)構(gòu)并分析生理生化指標(biāo)?！窘Y(jié)果】耐鹽型和敏感型棉花幼苗在NaCl脅迫0～48 h葉片和莖稈逐漸軟化，敏感型幼苗在NaCl處理下子葉枯萎并凋落，真葉葉緣輕微焦化。NaCl處理下，棉花葉片丙二醛濃度顯著升高，葉綠素含量和超氧化物歧化酶活性均顯著降低。經(jīng)復(fù)水處理，耐鹽型和敏感型棉花均得到一定的恢復(fù)，丙二醛濃度降低，而葉綠素含量、超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性均升高。鹽脅迫條件下，耐鹽型和敏感型的棉花葉片厚度、柵欄組織厚度和海綿組織厚度均下降，且敏感型材料SS型下降幅度較大，與正常條件下差異顯著，但2個(gè)材料在復(fù)水后均有所恢復(fù)，且耐鹽型材料恢復(fù)更好?！窘Y(jié)論】NaCl處理48 h不僅對(duì)棉花的生理生化水平有影響，還誘導(dǎo)細(xì)胞和組織發(fā)生結(jié)構(gòu)性的改變，復(fù)水能有效緩解鹽脅迫下棉花的生理生化水平。耐鹽型棉花材料比敏感型材料具有更強(qiáng)的耐鹽性和復(fù)水后恢復(fù)更快。

關(guān)鍵詞：棉花；耐鹽性；生理生化；顯微結(jié)構(gòu)；復(fù)水

中圖分類號(hào)：S562 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-4330（2024）10-2351-07

收稿日期（Received）：2024-04-06

基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃子項(xiàng)目（2021YFD1900802-4）

作者簡(jiǎn)介：趙康（1998-），男，新疆人，碩士研究生，研究方向?yàn)樽魑镞z傳育種，（E-mail）zhaokang07@yeah.net

通訊作者：高文偉（1973-），男，新疆人，教授，博士，碩士生/博士生導(dǎo)師，研究方向作物遺傳育種，（E-mail）280594606@qq.com

0 引 言

【研究意義】土壤鹽漬化嚴(yán)重影響糧食安全^［1-2］ 。全球約有80×10⁴ hm²的灌溉土壤受到土壤鹽漬化的影響，約占總灌溉面積的40%^［3］。據(jù)估計(jì)至2050年世界上50%的農(nóng)業(yè)用地將會(huì)發(fā)生不同程度的土壤鹽漬化^［4］。我國(guó)干旱和半干旱地區(qū)次生鹽漬化發(fā)生面積逐年增加^［5］。我國(guó)新疆降水稀少，蒸發(fā)量大，土壤中無(wú)機(jī)鹽聚集，濃度升高，容易發(fā)生土壤鹽漬化^［6］。鹽堿土是不同鹽漬化土壤的總稱，包括鹽土、堿土、堿化土壤和其他表現(xiàn)出不同程度鹽堿化的土壤^［7-8］。鹽土含有高含量中性鹽，主要包括NaCl和Na₂SO₄，通過(guò)影響滲透平衡、離子毒害、營(yíng)養(yǎng)吸收合成和呼吸影響作物生長(zhǎng)及發(fā)育等^［9-13］。棉花（Gossypium hirsutum L.）屬錦葵科，是一種具有較好抗旱、耐鹽、耐瘠薄能力的農(nóng)作物，是開(kāi)發(fā)利用鹽堿地的“先鋒作物”^［14］。棉花也是我國(guó)主要的經(jīng)濟(jì)作物之一^［15-16］。高鹽脅迫影響葉綠素合成，使得幼苗生長(zhǎng)緩慢，且葉片畸形生長(zhǎng)，子葉難以平展^［17］。棉花幼苗二葉期、三葉期時(shí)，體內(nèi)已開(kāi)始花芽分化，對(duì)鹽較敏感^［18］。通常鹽脅迫下的棉花植株與干旱脅迫下的植株相似，表現(xiàn)出葉緣焦化、葉片顏色變暗、子葉脫落和植株萎蔫等癥狀，由于土壤溶液中的滲透壓增加，導(dǎo)致生理干旱和離子積累，阻礙養(yǎng)分和水分的吸收^［19］。因此，提高棉花對(duì)鹽堿環(huán)境的耐受性尤為重要?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】關(guān)于耐鹽機(jī)理研究，前人從膜脂過(guò)氧化與抗氧化酶，如丙二醛（MDA）、過(guò)氧化氫酶（CAT） 、超氧化物歧化酶（SOD）和過(guò)氧化物酶（POD）等進(jìn)行了研究^［20］。鹽脅迫下植物細(xì)胞內(nèi)過(guò)量累積Na⁺，誘導(dǎo)活性氧（ROS）過(guò)度產(chǎn)生，并啟動(dòng)膜脂過(guò)氧化和膜脂脫脂作用，導(dǎo)致膜蛋白和膜脂損失，從而破壞膜結(jié)構(gòu)，影響生長(zhǎng)發(fā)育^［21-22］。植物也會(huì)將葉肉細(xì)胞中過(guò)多的Na⁺轉(zhuǎn)運(yùn)至葉脈，減少細(xì)胞質(zhì)中的Na⁺毒害，因此植物葉綠素合成受阻，進(jìn)而降低葉綠素含量^［23-24］。為了適應(yīng)鹽脅迫，植物展現(xiàn)出了多種適應(yīng)性策略^［6］。耐鹽型植物在鹽脅迫下可能會(huì)增加葉片厚度^［25］和根系發(fā)育^［26］，以提高吸收水分和營(yíng)養(yǎng)元素。牧草Imperata cylindrica（L.Raeuschel）的鹽田生態(tài)型較正常無(wú)鹽環(huán)境生態(tài)型，鹽堿脅迫下角質(zhì)層增厚，葉片肉質(zhì)化，柵欄組織發(fā)達(dá)，氣孔下陷^［27］?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】植物在鹽脅迫下的顯微結(jié)構(gòu)和生理生化變化可反映該植物對(duì)鹽的敏感性，而鹽脅迫對(duì)棉花解剖結(jié)構(gòu)的影響研究較少^［28］。鹽脅迫下植物復(fù)水是恢復(fù)其表型、生理和基因表達(dá)的有效措施。復(fù)水可以降低植物受鹽度影響的程度，但是目前有關(guān)復(fù)水如何影響植物應(yīng)對(duì)鹽脅迫的研究還比較有限^［29］，因此，棉花的耐鹽性仍有待探究?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】試驗(yàn)通過(guò)形態(tài)學(xué)、生理及微觀結(jié)構(gòu)觀察，研究棉花對(duì)鹽脅迫的響應(yīng)及其復(fù)水后的適應(yīng)性，為探究棉花耐鹽機(jī)理提供理論參考。

新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)第61卷 第10期趙 康等：鹽脅迫及復(fù)水對(duì)棉花葉片生理生化和顯微結(jié)構(gòu)的影響

1 材料與方法

1.1 材 料

選用2個(gè)耐鹽性差異較大的棉花材料^［30］：鹽敏感型52-128（salt sensitive，SS）和耐鹽型涇斯棉（salt tolerant，ST），將種子用5%次氯酸鈉（NaClO）消毒20 min，無(wú)菌水沖洗3次，在發(fā)芽盒（12.4 cm×17.5 cm）中播種，置于受控條件下（儲(chǔ)存在晝夜溫度26℃/18℃，相對(duì)濕度65%，晝夜時(shí)長(zhǎng)為8 h/16 h，光照強(qiáng)度12 000 lx的人工氣候箱中）。待子葉完整展開(kāi)后，轉(zhuǎn)移置于1/2 Hoaglands營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng)至三葉期。對(duì)棉花三葉期幼苗在200 mmol/L NaCl溶液中生長(zhǎng)48 h，于在1/2 Hoagland營(yíng)養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h（RW，re-watering）。在0、48 h、復(fù)水48 h（0、48和營(yíng)養(yǎng)液中培養(yǎng)即復(fù)水48 h）分別取樣，幼苗為3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6株，共收集18個(gè)樣本。

1.2 方 法

1.2.1 生理生化指標(biāo)測(cè)定

葉綠素采用便攜式葉綠素儀（SPAD-502Plus）分別測(cè)定不同處理下棉株最大功能葉。采用硫代巴比妥酸比色法、氮藍(lán)四唑光還原法和愈創(chuàng)木酚-過(guò)氧化氫法，分別測(cè)定丙二醛的含量、超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性^［31］。

1.2.2 葉片顯微結(jié)構(gòu)觀察

采用垂直葉脈切法，將不同處理的葉片分別置于FAA固定液中。固定狀態(tài)良好后，進(jìn)行修剪、脫水、包埋、切片、染色、封片及鏡檢合格樣片，并用番紅-固綠染色液染片。用3DHIST型ECH（Hungary）生產(chǎn)的全景切片掃描儀（PANNORAMICDESK/MIDI/250/1000和CaseViewer2.2）采集和掃描瀏覽圖像，通過(guò)Media Cybemetics（美國(guó)）生產(chǎn)的Image-Pro Plus 6.0分析。測(cè)量每張切片中5處葉片厚度、上表皮厚度、柵欄組織厚度、海棉組織厚度和下表皮厚度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2020整理分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用SPSS型 26.0進(jìn)行差異性檢驗(yàn)，通過(guò)GraphPad Prism繪制分組比較圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 棉花幼苗鹽脅迫和復(fù)水后表型變化

研究表明，ST型和SS型幼苗在NaCl脅迫0～48 h中葉片和莖稈逐漸軟化，子葉在48 h萎蔫嚴(yán)重。SS型幼苗在48 h子葉枯萎并凋落，真葉葉緣輕微焦化。復(fù)水后，ST型生長(zhǎng)得到緩解，SS型真葉枯萎。圖1

2.2 棉花葉片對(duì)鹽脅迫和復(fù)水后生理生化的響應(yīng)

研究表明，NaCl 48 h處理下，ST型和SS型幼苗丙二醛濃度顯著升高，葉綠素含量、超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性均降低，鹽脅迫影響了棉株正常的生長(zhǎng)發(fā)育。ST型和SS型的丙二醛濃度分別較 0 h （CK）升高36.07%和64.61%，復(fù)水48 h后ST型幼苗丙二醛濃度較CK變化不明顯，而SS型幼苗丙二醛濃度較CK升高11.54%。鹽脅迫顯著影響了細(xì)胞質(zhì)膜過(guò)氧化水平，而復(fù)水對(duì)ST型的緩解效果優(yōu)于SS型。ST型和SS型幼苗的葉綠素含量，鹽脅迫下分別較CK降低10.29%和13.89%，復(fù)水后較CK分別降低5.23%和10.36%。鹽脅迫顯著抑制了棉花葉綠素合成，復(fù)水也顯著改善了ST型和SS型的葉綠素合成。ST型的超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性，在鹽脅迫下分別降低3.06%和12.98%，復(fù)水后，分別較CK降低0.36%和12.51%。SS型的超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性，在鹽脅迫下分別顯著降低27.31%和22.46%，復(fù)水后較CK顯著降低39.79%和36.67%。鹽脅迫下ST型活性氧清除能力強(qiáng)，SS型活性氧清除能力強(qiáng)，且復(fù)水并未改善SS型的活性氧清除能力。圖2

2.3 鹽脅迫和復(fù)水后棉花葉片顯微結(jié)構(gòu)

研究表明，正常條件下ST型和SS型幼苗切片染色較深，顯微結(jié)構(gòu)排列較緊密，泡狀細(xì)胞形如單層不規(guī)則的四邊形，并緊密排列；鹽脅迫下泡狀細(xì)胞呈卵圓形，柵欄組織和海綿組織細(xì)胞排列較松散，葉片變得軟化。復(fù)水后泡狀細(xì)胞形如長(zhǎng)卵形，葉片較平展，逐漸恢復(fù)正常生長(zhǎng)。圖3

在正常條件下，ST型和SS型棉花幼苗的葉表皮結(jié)構(gòu)差異不顯著；NaCl脅迫條件下，ST型和SS型的葉片厚度、柵欄組織厚度和海綿組織厚度均下降，在復(fù)水后有所恢復(fù)。ST型棉花幼苗經(jīng)過(guò)NaCl處理后，葉片厚度、柵欄組織厚度和海綿組織厚度較對(duì)照分別降低16.17%、13.92%和18.46%；SS型的葉片厚度、柵欄組織厚度和海綿組織厚度較對(duì)照分別顯著降低32.43%、30.13%和41.10%。與對(duì)照差異顯著。表1

3 討 論

3.1 鹽通過(guò)限制植物對(duì)水分的吸收而滲透損害，并導(dǎo)致植物細(xì)胞中積累過(guò)高離子含量脅迫^［32］。棉花亦進(jìn)化出一系列應(yīng)對(duì)鹽度和其他環(huán)境壓力的反應(yīng)，包括形態(tài)、生理、生化和分子過(guò)程來(lái)應(yīng)對(duì)環(huán)境脅迫，可避免脅迫后恢復(fù)，使植物能夠在非生物脅迫下生存^［33］。耐鹽材料與鹽敏感材料的區(qū)別可能就在于耐鹽材料在遇到外部高鹽脅迫的時(shí)候，相對(duì)鹽敏感材料有一個(gè)快速適應(yīng)、生理間和耐受力^［34］。NaCl 48h處理下，棉花幼苗葉片受損傷嚴(yán)重，ST型和SS型幼苗葉片的丙二醛濃度顯著升高，葉綠素含量和超氧化物歧化酶活性均顯著降低。經(jīng)過(guò)復(fù)水處理后，ST型和SS型得到一定的恢復(fù)，丙二醛濃度降低，葉綠素含量、超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性均升高。與袁雨豪^［34］的研究結(jié)果相類似，耐鹽型材料比敏感型材料表現(xiàn)出更大的耐鹽性和復(fù)水后更快的恢復(fù)。

3.2 鹽分不僅改變植物的代謝機(jī)制， 而且影響植物的正常生長(zhǎng)， 尤其是植物的形態(tài)學(xué)和解剖學(xué)^［35］，葉片是高等植物光合作用的中心，在遭受逆境脅迫時(shí)，植物葉片的表型、生理、解剖結(jié)構(gòu)等性狀均能及時(shí)響應(yīng)^［36］。棉花Na⁺區(qū)隔化研究表明，陸地棉葉片腺毛泌鹽是棉花耐鹽的具體表現(xiàn)之一^［37］。葉片的顯微結(jié)構(gòu)特征是植物適應(yīng)鹽堿脅迫的一個(gè)重要方面，在NaCl脅迫下， 棉花葉片各組成細(xì)胞失水收縮，葉片橫切面厚度變薄，柵欄組織等細(xì)胞形態(tài)受到影響^［28］。研究中正常條件下棉花葉片顯微結(jié)構(gòu)排列較緊密，泡狀細(xì)胞形如單層不規(guī)則的四邊形，并緊密排列；鹽脅迫下泡狀細(xì)胞呈卵圓形，柵欄組織和海綿組織細(xì)胞排列較松散，葉片變得軟化。復(fù)水后泡狀細(xì)胞形如長(zhǎng)卵形，葉片較平展，逐漸恢復(fù)正常生長(zhǎng)。在正常條件下，ST型和SS型棉花幼苗的葉表皮結(jié)構(gòu)差異不顯著；NaCl脅迫條件下，ST型和SS型的葉片厚度、柵欄組織厚度和海綿組織厚度均下降，在復(fù)水后ST型得到了更好的恢復(fù)。

4 結(jié) 論

NaCl處理下，棉花葉片丙二醛濃度顯著升高，葉綠素含量和超氧化物歧化酶活性均顯著降低。經(jīng)復(fù)水處理，耐鹽型和敏感型均得到一定的恢復(fù)，丙二醛濃度降低，葉綠素含量、超氧化物歧化酶活性和過(guò)氧化物酶活性均升高。鹽脅迫不僅對(duì)棉花的生理生化水平有影響，還誘導(dǎo)細(xì)胞和組織發(fā)生結(jié)構(gòu)性的改變，復(fù)水可有效緩解鹽脅迫下棉花的生理生化水平。耐鹽型材料比敏感型材料表現(xiàn)出更大的耐鹽性和復(fù)水后更快的恢復(fù)。

參考文獻(xiàn)（References）

［1］Li Q， Song J. Analysis of widely targeted metabolites of the euhalophyte Suaeda salsa under saline conditions provides new insights into salt tolerance and nutritional value in halophytic species［J］.BMC Plant Biology， 2019， 19（1）： 388.

［2］ Wang J， Jiang X， Zhao C F， et al. Transcriptomic and metabolomic analysis reveals the role of CoA in the salt tolerance of Zygophyllum spp［J］.BMC Plant Biology， 2020， 20（1）： 9.

［3］ Li X W， Zheng H L， Wu W S， et al. QTL mapping and candidate gene analysis for alkali tolerance in japonica rice at the bud stage based on linkage mapping and genome-wide association study［J］.Rice， 2020， 13（1）： 48.

［4］ 趙起越， 夏夜， 鄒本東. 土壤鹽漬化成因危害及恢復(fù)［J］.農(nóng)業(yè)與技術(shù)， 2022， 42（11）： 115-119.

ZHAO Qiyue， XIA Ye， ZOU Bendong. Causes， harm and recovery of soil salinization［J］.Agriculture and Technology， 2022， 42（11）： 115-119.

［5］ 努爾沙吾列·哈斯木漢. 新疆土壤鹽漬化成因及其防治對(duì)策［J］.科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新， 2020， （9）： 52-53.

Nuershawulie Hasimuhan. Causes of soil salinization in Xinjiang and its control countermeasures［J］.Scientific and Technological Innovation， 2020， （9）： 52-53.

［6］ Zhao H X， Gu B J， Chen D C， et al. Physicochemical properties and salinization characteristics of soils in coastal land reclamation areas： a case study of China-Singapore Tianjin Eco-City［J］.Heliyon， 2022， 8（12）： e12629.

［7］Rogers P P， Llamas M R， Martínez-Cortina L. Water Crisis： Myth Or Reality［M］.Taylor and Francis， CRC Press.

［8］ van Zelm E， Zhang Y X， Testerink C. Salt tolerance mechanisms of plants［J］.Annual Review of Plant Biology， 2020， 71： 403-433.

［9］ Zhang B L， Chen X G， Lu X K， et al. Transcriptome analysis of Gossypium hirsutum L. reveals different mechanisms among NaCl， NaOH and Na₂CO₃ stress tolerance［J］.Scientific Reports， 2018， 8： 13527.

［10］ Chen W C， Cui P J， Sun H Y， et al. Comparative effects of salt and alkali stresses on organic acid accumulation and ionic balance of seabuckthorn （Hippophae rhamnoides L.）［J］.Industrial Crops and Products， 2009， 30（3）： 351-358.

［11］ Byrt C S， Munns R， Burton R A， et al. Root cell wall solutions for crop plants in saline soils［J］.Plant Science， 2018， 269： 47-55.

［12］ Geng G， Li R R， Stevanato P， et al. Physiological and transcriptome analysis of sugar beet reveals different mechanisms of response to neutral salt and alkaline salt stresses［J］.Frontiers in Plant Science， 2020， 11： 571864.

［13］ 盧秀茹， 賈肖月， 牛佳慧. 中國(guó)棉花產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及展望［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2018， 51（1）： 26-36.

LU Xiuru， JIA Xiaoyue， NIU Jiahui. The present situation and prospects of cotton industry development in China［J］.Scientia Agricultura Sinica， 2018， 51（1）： 26-36.

［14］ 史曉玲. 國(guó)家、生態(tài)、技術(shù)、市場(chǎng)——棉花與魯西北社會(huì)變遷（1906-2006）［D］.濟(jì)南： 山東大學(xué)， 2020.

SHI Xiaoling. Country， Ecology， Technology and Market： Cotton and Social changes in Northwest Shandong（1906-2006）［D］.Jinan： Shandong University， 2020.

［15］ 吳方衛(wèi)， 張錦華. 絲綢之路經(jīng)濟(jì)帶農(nóng)牧業(yè)合作的空間、潛力與中國(guó)農(nóng)業(yè)“走出去” 策略［J］.科學(xué)發(fā)展， 2016， （4）： 76-81.

WU Fangwei， ZHANG Jinhua. Space and potential for husbandry cooperation in silk road economic belt and “going out” strategy of Chinese agriculture［J］.Scientific Development， 2016， （4）： 76-81.

［16］ 蘇瑩， 郭安慧， 華金平. 棉花耐鹽性鑒定方法探討［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 2021， 26（12）： 11-19.

SU Ying， GUO Anhui， HUA Jinping. Strategies for evaluation the salt tolerance in cotton［J］.Journal of China Agricultural University， 2021， 26（12）： 11-19.

［17］ 孫小芳， 劉友良， 陳沁. 棉花耐鹽性研究進(jìn)展［J］.棉花學(xué)報(bào)， 1998， 10（3）： 118-124.

SUN Xiaofang， LIU Youliang， CHEN Qin. Recent progresses in studies on salinity tolerence in cotton［J］.Cotton Science， 1998， 10（3）： 118-124.

［18］Maryum Zahra， Luqman Tahira， Nadeem Sahar， et al. An overview of salinity stress， mechanism of salinity tolerance and strategies for its management in cottonamp;#13;［J］.Frontiers in Plant Science， 2022， 13.

［19］Fu H Q，Yang Y Q. How Plants Tolerate Salt Stress［J］， 2023， 45（7）： .5914-5934.

［20］ 毛桂蓮， 許興， 徐兆楨. 植物耐鹽生理生化研究進(jìn)展［J］.中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2004， 12（1）： 43-46.

MAO Guilian， XU Xing， XU Zhaozhen. Advances in physiological and biochemical research of salt tolerance in plant［J］.Chinese Journal of Eco-Agriculture， 2004， 12（1）： 43-46.

［21］ Hasanuzzaman M， Oku H， Nahar K， et al. Nitric oxide-induced saltstress tolerance in plants： ROS metabolism， signaling， and molecular interactions［J］.Plant Biotechnology Reports， 2018， 12（2）： 77-92.

［22］ 段慧榮， 周學(xué)輝， 胡靜， 等. 高等植物K⁺吸收及轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制研究進(jìn)展［J］.草業(yè)學(xué)報(bào)， 2019， 28（9）： 174-191.

DUAN Huirong， ZHOU Xuehui， HU Jing， et al. Advances in understanding molecular mechanisms of K⁺ uptake and transport in higher plants［J］.Acta Prataculturae Sinica， 2019， 28（9）： 174-191.

［23］ Hauser F， Horie T. A conserved primary salt tolerance mechanism mediated by HKT transporters： a mechanism for sodium exclusion and maintenance of high K（+）/Na（+） ratio in leaves during salinity stress［J］.Plant， Cell amp; Environment， 2010， 33（4）： 552-565.

［24］ 李瑞強(qiáng)， 王玉祥， 孫玉蘭， 等. 鹽脅迫對(duì)無(wú)芒雀麥幼苗葉片形態(tài)及解剖結(jié)構(gòu)的影響［J］.草地學(xué)報(bào)， 2022， 30（6）： 1450-1459.

LI Ruiqiang， WANG Yuxiang， SUN Yulan， et al. Effects of salt stress on leaf morphology and anatomical structure of Bromus inermis seedlings［J］.Acta Agrestia Sinica， 2022， 30（6）： 1450-1459.

［25］ 李雙男， 郭慧娟， 侯振安. 不同鹽堿脅迫對(duì)棉花離子組穩(wěn)態(tài)及Na⁺相關(guān)基因表達(dá)影響［J］.棉花學(xué)報(bào)， 2019， 31（6）： 515-528.

LI Shuangnan， GUO Huijuan， HOU Zhen’an. Ionic homeostasis and expression of Na⁺ related genes of cotton under different salt and alkali stresses［J］.Cotton Science， 2019， 31（6）： 515-528.

［26］ Hameed M， Ashraf M， Naz N. Anatomical adaptations to salinity in cogon grass［Imperata cylindrica （L.） Raeuschel］from the Salt Range， Pakistan［J］.Plant and Soil， 2009， 322（1）： 229-238.

［27］ 趙海燕， 王建設(shè)， 劉林強(qiáng)， 等. 海島棉苗期鹽脅迫下形態(tài)學(xué)和生理學(xué)指標(biāo)變化［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2017， 50（18）： 3494-3505.

ZHAO Haiyan， WANG Jianshe， LIU Linqiang， et al. Morphological and physiological mechanism of salt tolerance in Gossypium barbadense to salt stress at seedling stage［J］.Scientia Agricultura Sinica， 2017， 50（18）： 3494-3505.

［28］ Azeem A， Wu Y Y， Xing D K， et al. Photosynthetic response of two okra cultivars under salt stress and re-watering［J］.Journal of Plant Interactions， 2017， 12（1）： 67-77.

［29］ Du L， Cai C P， Wu S， et al. Evaluation and exploration of favorable QTL alleles for salt stress related traits in cotton cultivars （G. hirsutum L.）［J］.PLoS One， 2016， 11（3）： e0151076.

［30］ 范蓉. 基于生理指標(biāo)與基因表達(dá)量評(píng)價(jià)棉花抗旱耐鹽性［D］.烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2020.

FAN Rong. Evaluation of Cotton Drought and Salt Tolerance Based on Physiological Indexes and Gene Expression［D］.Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2020.

［31］ 李娜. 不同基因型大白菜對(duì)鹽堿脅迫的響應(yīng)特性［D］.泰安： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2022.

LI Na. Response Characteristics of Different Genotype Chinese Cabbages to Salt and Alkali Stress［D］.Taian： Shandong Agricultural University， 2022.

［32］ 葉武威. 棉花種質(zhì)的耐鹽性及其耐鹽基因表達(dá)的研究［D］.北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院， 2007.

YE Wuwei. Study on the Salinity Resistance and Resistance Gene Expression in Cotton Germplasm［D］.Beijing： Chinese Academy of Agricultural Sciences， 2007.

［33］ 王德龍. 鹽脅迫下棉花細(xì)胞壁重塑相關(guān)基因GhEXLB1與GhGRP1功能研究［D］.烏魯木齊： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2021.

WANG Delong. Study on the Function of GhEXLB1 and GhGRP1 Genes Related to Cell Wall Remodeling in Cotton under Salt Stress［D］.Urumqi： Xinjiang Agricultural University， 2021.

［34］ 袁雨豪. 鹽脅迫下糜子的生理響應(yīng)及適應(yīng)機(jī)制研究［D］.楊凌： 西北農(nóng)林科技大學(xué)， 2022.

YUAN Yuhao. Study on Physiological Response and Adaptive Mechanism of Broomcorn Millet（Panicum Miliaceum L.）Under Salt Stress［D］.Yangling： Northwest A amp; F University， 2022.

［35］ 石亞飛， 閔煒?lè)迹?擺小蓉， 等. 外源物調(diào)節(jié)堿脅迫水稻生理特性及相關(guān)基因表達(dá)的效應(yīng)［J］.植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)， 2023， 29（5）： 813-825.

SHI Yafei， MIN Weifang， BAI Xiaorong， et al. Effects of exogenous regulatory substances on physiological characteristics and gene expression of rice seedlings under alkali stress［J］.Journal of Plant Nutrition and Fertilizers， 2023， 29（5）： 813-825.

［36］ Zhao B Q， Liu Q Y， Wang B S， et al. Roles of phytohormones and their signaling pathways in leaf development and stress responses［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2021， 69（12）： 3566-3584.

［37］ 彭振. 棉花苗期耐鹽和耐熱的生理機(jī)制及其基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析［D］.雅安： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2016.

PENG Zhen. The Gene Transcriptional Regulation Analysis and Physiology Mechanism of Salt Tolerance and Thermotolerance at Seedling Stage in Upland Cotton［D］.Yaan： Sichuan Agricultural University， 2016.

Effects of salt stress and re-watering on the physiology，

biochemistry and microstructure of cotton leaf structure

ZHAO Kang¹， CHENG Rongrong²，PANG Bo¹， ZHANG Mengyuan¹， ZHANG Ru¹，

WANG Yongpan¹， YANG Zhining¹，WANG Zhi²，WANG Honggang¹， GAO Wenwei¹

（1. College of Agronomy， Xinjiang Agricultural University， Urumqi 830052， China; 2. No. 3 Exploration Institute of Geology and Mineral Resources， Yantai Shandong 264000， China；3.Center of Urumqi Comprehensive Survey Natural Resources， Urumqi 830057， China）

Abstract：【Objective】 To study the response mechanism of cotton seedlings in response to salt stress， and to provide experimental basis for the screening of salt-tolerant varieties of cotton. 【Methods】 Salt-tolerant and sensitive cotton seedlings were treated with 200 mM NaCl at the three-leaf stage， and the microstructures of cotton leaves were observed， and physiological and biochemical indexes were analyzed at 0， 48 h and 48 h of re-watering under NaCl treatment.【Results】 Salt-tolerant and sensitive seedlings gradually softened their leaves and stalks under NaCl stress from 0-48 h. Sensitive seedlings withered and faded their cotyledons and slightly scorched the margins of the true leaves under NaCl treatment. The malondialdehyde concentration of cotton leaves was significantly elevated， and the chlorophyll content and the activity of superoxide dismutase were significantly reduced under NaCl treatment. After re-watering， both salt-tolerant and sensitive types were somewhat restored， malondialdehyde concentration was reduced， and chlorophyll content， superoxide dismutase activity and peroxidase activity were increased.Under salt stress conditions， leaf thickness， fenestrated tissue thickness and spongy tissue thickness of salt-tolerant and sensitive types decreased， and the SS type of sensitive material decreased more， and the difference was significant compared with normal conditions， but both materials recovered after re-watering， and the salt-tolerant material recovered better. 【Conclusion】 NaCl treatment for 48 h not only has an effect on the physiological and biochemical levels of cotton， but also induces the cellular activity of superoxide dismutase and oxidase activity. levels， but also induces structural changes in cells and tissues， and re-watering can effectively alleviate the physiological and biochemical levels of cotton under salt stress. Salt-tolerant materials have stronger salt tolerance and faster recovery after re-watering than sensitive materials.

Key words： cotton; salt tolerance; physiology and biochemistry; microstructure; re-watering

Fund projects：National key research and development plan sub-project（2021YFD1900802-4）

Correspondence author： GAO Wenwei （1973-）， male， from Xinjiang， Professor， Ph.D.， Master/Doctoral' s supervisor instructor， research direction：crop genetics and breeding， （E-mail） 280594606@qq.com