摘 要：【目的】研究新疆阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌分類地位，分析其營養(yǎng)成分組成和解析主要多糖功能結(jié)構(gòu)，為野生牛肝菌多糖的深入開發(fā)及利用提供科學(xué)參考?！痉椒ā坷眯螒B(tài)學(xué)和分子生物學(xué)手段對野生牛肝菌進(jìn)行鑒定，分析牛肝菌中的營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)進(jìn)行檢測。采用水提醇沉法提取皺皮疣柄牛肝菌粗多糖，并利用DEAE-52纖維素柱層析進(jìn)行純化，利用高壓液壓色譜分析其單糖組成?！窘Y(jié)果】阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌歸屬為傘菌目，牛肝菌科，疣柄牛肝菌屬，分子鑒定為皺皮疣柄牛肝菌（Leccinum duriusculum）。其主要的營養(yǎng)物質(zhì)為糖類和蛋白質(zhì)，分別占57.57%和27.32%。通過柱層析聯(lián)合中壓色譜系統(tǒng)分離的手段獲得了三種多糖組分為LD-1、LD-2和LD-3，其中LD-1的提取率最高，為78.8%，有較強的水溶性，紅外光譜表明其含有糖類化合物，葡萄糖占比最高。【結(jié)論】阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌富含多糖，持水力強。

關(guān)鍵詞：牛肝菌；營養(yǎng)成分；礦物質(zhì)；多糖；分離純化

中圖分類號：S646 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1001-4330（2024）10-2557-09

收稿日期（Received）：2024-03-11

基金項目：第三次新疆綜合科學(xué)考察子課題（2022xjkk1200）；新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新穩(wěn)定支持專項（xjnkywdzc-2022005-6）；新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新平臺能力提升建設(shè)專項（nkypt005）；新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主培育項目團(tuán)隊建設(shè)專項（nkyzztd-001）

作者簡介：張芯語（1999-），女，河南人，碩士研究生，研究方向食品加工與安全，（E-mail）1807835109@qq.com

通訊作者：張志東（1977-），男，新疆人，研究員，博士，碩士生導(dǎo)師，研究方向為特殊環(huán)境微生物及益生菌資源，（E-mail）zhangzheedong@sohu.com

0 引 言

【研究意義】牛肝菌隸屬于擔(dān)子菌門（Basidiomycota）蘑菇綱（Agaricomycetes）牛肝菌目（Boletales），其具有重要的生態(tài)和經(jīng)濟價值^［1］。目前，我國發(fā)現(xiàn)的牛肝菌種類多達(dá)390種以上，其中近200種可食用，如美味牛肝菌（Boletus edulis）、銅色牛肝菌（B.aereus）、橙香牛肝菌（B.citrifragrans）、褐圓孔牛肝菌（Gyroporuscastaneus）、藍(lán)圓孔牛肝菌（Gcyanescens）、橙黃疣柄牛肝菌（Leccinum aurantiacum）、黃皮疣柄牛肝菌（L.crocipodium）和褐環(huán)乳牛肝菌（Suillus luteus）等均具有美味可食，營養(yǎng)豐富，富含鈣、鐵等人體所必需的礦物質(zhì)元素等特點^［2，3］。新疆阿克蘇地區(qū)，是典型的綠洲農(nóng)業(yè)區(qū)，每年7～9月，該地區(qū)部分區(qū)域的楊樹林下野生牛肝菌子實體成熟，少數(shù)牛肝菌因有毒或味苦而不能食用。因此，加強野生牛肝菌的鑒別對于強化食品安全有著重要的意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】賈莉等^［4］闡述了阿克蘇地區(qū)楊樹林下牛肝菌的產(chǎn)業(yè)價值，指出了野生資源過度采摘、人工培育難等問題。牛肝菌多糖含量較高，具有抗氧化、抗疲勞、免疫調(diào)節(jié)等作用^［5，6］。鄭俏然等^［7］表明一定劑量的美味牛肝菌多糖能減輕CCl4引起的小鼠肝損傷，提高肝臟抗氧化能力。鄭金玲^［8］研究表明銅色牛肝菌多糖可有效抑制S180實體瘤的生長并保護(hù)免疫器官?！颈狙芯壳腥朦c】有關(guān)阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌的分類鑒定和功能活性鮮有報道，其多糖的提取、純化及結(jié)構(gòu)尚不清晰，有待深入研究。需分析阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌營養(yǎng)成分測定及其多糖的結(jié)構(gòu)分析。【擬解決的關(guān)鍵問題】分析野生牛肝菌的主要營養(yǎng)成分和礦物質(zhì)元素，以及其多糖的結(jié)構(gòu)，研究阿克蘇地區(qū)野生牛肝菌中營養(yǎng)成分及礦質(zhì)元素的含量水平，為有效保護(hù)其野生資源、實現(xiàn)人工馴化栽培以及對野生牛肝菌的食品質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

野生牛肝菌采自阿克蘇地區(qū)拜城縣賽里木鎮(zhèn)（82°11′55″E，41°47′10″N）。新鮮牛肝菌子實體經(jīng)清洗后切片，80 ℃烘干6 h，粉碎，過60目篩，備用。

1.2 方 法

1.2.1 牛肝菌的鑒定

1.2.1.1 形態(tài)學(xué)

根據(jù)牛肝菌的生長條件、外觀等初步鑒定形態(tài)特征。

1.2.1.2 分子生物學(xué)

（1）總DNA提取及其濃度檢測

將新鮮牛肝菌子實體清洗干凈后，烘干切片，粉碎保存。按照Ezup柱式真菌基因組DNA抽提試劑盒說明書提取總DNA，超微量微孔板檢測DNA濃度與純度，于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

（2）PCR擴增及測序

ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）通用引物進(jìn)行PCR擴增。PCR反應(yīng)體系為50 μL（2×Taq Mix 25 μL，DNA模板、ITS1、ITS4各1 μL，ddH₂O 22 μL）。PCR擴增條件：94 ℃ 5 min；94 ℃ 45 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 10 s，30個循環(huán)；72 ℃ 10 min。取10 μL反應(yīng)液用1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測。將PCR產(chǎn)物送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序，測序結(jié)果在NCBI進(jìn)行序列相似性比對分析，利用MEGA11.0軟件對擴增片段序列和部分已知的真菌DNA序列做進(jìn)化樹分析。

（3）營養(yǎng)成分

總糖含量的測定按照GB/T15672-2009測定；粗蛋白含量的測定按照GB5009.5-2016測定；粗灰分含量的測定按照GB5009.4-2016測定；牛肝菌中礦物質(zhì)元素含量的測定分別采用：磷-GB5009.87-2016、錳-GB5009.242-2017、鈣-GB5009.92-2016、鐵-GB5009.90-2016、銅-GB5009.13-2017、鋅-GB5009.14-2017、鈉-GB9009.91-2017、鉀-GB9009.91-2017。

1.2.1.3 牛肝菌粗多糖的提取

稱取牛肝菌子實體粉末，水為提取液，按料液比1：20，80 ℃下提取2 h后，8 000 r/min，離心5 min，收集上清液，加入無水乙醇至終濃度為80%，4 ℃靜置過夜，以6 000 r/min，離心5 min，收集沉淀，并將沉淀用80%乙醇洗滌2次；在-80 ℃下冷凍干燥，得到牛肝菌粗多糖^{［9，10］}。

多糖提取率（%）=（多糖質(zhì)量/菌粉質(zhì)量）×100%.（1）

1.2.1.4 粗多糖脫蛋白

將粗多糖復(fù)溶，配制成濃度為5 mg/mL的多糖溶液，按溶液體積的1/4加入Sevage試劑（正丁醇∶氯仿=1∶4），磁力攪拌20 min，離心（4 000 r/min，5 min）后除去下層有機試劑和中間層的蛋白，此過程重復(fù)操作3次。多糖溶液中加入終濃度為80%的乙醇，4 ℃靜置過夜，沉淀冷凍干燥得粗多糖，備用^［11］。

1.2.1.5 蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

考馬斯亮藍(lán)G250的配制：稱取0.1 g的考馬斯亮藍(lán)G250染色劑，將其溶解于5 mL 95%的乙醇溶液中，加入10 mL 85%磷酸溶液，蒸餾水定容至100 mL，濾紙過濾備用。

牛血清蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（0.1 mg/mL）：吸取標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白溶液（0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mL）于10 mL試管中，并補水至1 mL，再分別加入考馬斯亮藍(lán)染色液，于室溫下靜置10 min，于595 nm處檢測吸光值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

蛋白質(zhì)脫除率（%）=（A₁-A₀）／A₁×100%.（2）

式中，A₁：未除蛋白時粗多糖溶液中蛋白質(zhì)的含量；A₀：除蛋白后粗多糖溶液中蛋白質(zhì)的含量。

多糖回收率（%）＝（A₀/A₁）×100%.（3）

式中，A₀：脫蛋白后的多糖含量；A₁：脫蛋白前的多糖含量。

1.2.1.6 小分子雜質(zhì)的透析

采用透析法去除小分子物質(zhì)，該方法主要分為三個步驟：第一步收集洗脫液，濃縮；第二步使用透析袋進(jìn)行透析（截留分子量為7 000 D^［12］，透析袋預(yù)先100 ℃煮沸10 min），用純凈水透析24 h，并保證每隔8 h徹底更換一次純凈水；第三步將透析后的牛肝菌多糖溶液進(jìn)行干燥處理，得到多糖粉末。

1.2.1.7 DEAE-52纖維素柱層析

參照文獻(xiàn)方法^［13］，對DEAE-52纖維素進(jìn)前處理：用蒸餾水充分?jǐn)嚢杈鶆?，浸?4 h后抽濾，再用0.5 mol/L的NaOH溶液浸泡2 h，每隔15 min攪拌一次。再次抽濾，蒸餾水洗至中性，用0.5 mol/L HCl溶液浸泡2 h，抽濾，蒸溜水洗至中性，最后再用0.5 mol/L的NaOH溶液浸泡2 h，蒸餾水洗至中性，將纖維素裝入盛有蒸餾水的燒杯中備用。

裝柱與平衡：①裝柱：采用濕法裝柱，用蒸餾水將層析柱清洗干凈，活化好的柱材料攪拌均勻后，緩慢倒入層析柱，使柱材料自然沉降。②平衡：平衡的緩沖液選用蒸餾水或?qū)嶒炈玫南疵撊芤?，控制流速? mL/min。

1.2.1.8 水溶性和持水力

（1）水溶性測定

參照文獻(xiàn)方法^［14］，準(zhǔn)確稱取0.2 g不同組分粗多糖樣品，置于50 mL的燒杯中，再加入20 mL的去離子水，90 ℃連續(xù)攪拌水浴30 min，水浴結(jié)束后，6 000 r/min，離心10 min，取上清液，于105℃烘干至恒重，記錄質(zhì)量，計算多糖的水溶性。

水溶性（%）=M₀M×100%. （4）

式中，M₀表示烘干后固體的質(zhì)量，M表示樣品質(zhì)量。

（2）持水力（WHC）測定

參照文獻(xiàn)方法^［15］略做修改，準(zhǔn)確稱取0.2 g不同組分多糖樣品，于50 mL的離心管中，加入40 mL的蒸餾水，振蕩搖勻后室溫靜置24 h，轉(zhuǎn)速6 000 r/min，離心10 min，去除上清液，并使用濾紙吸取沉淀中的剩余水分，稱量沉淀重量并作記錄。

持水力（g/g）＝M₁-MM.（5）

式中，M₁表示樣品恒重后的質(zhì)量，M表示樣品質(zhì)量。

1.2.1.9 紫外光譜掃描

將洗脫得到的3種多糖樣品（LD-1，LD-2和LD-3）配制成質(zhì)量濃度為5 mg/mL的待測溶液，將配制后的溶液置于石英比色皿中，進(jìn)行200～800 nm紫外區(qū)全波長掃描，記錄分析3種多糖樣品的紫外光譜圖，并觀察各樣品在260 nm和280 nm處的吸收峰情況。

1.2.1.10 紅外光譜掃描

取5 mg醇沉多糖與溴化鉀粉末混合碾磨后，制片壓片，在波數(shù)4 000～400 cm^-1內(nèi)進(jìn)行光譜掃描，組合均在4 000～400 cm^-1出現(xiàn)吸收峰^{［16，17］}，分析比較不同樣品的紅外光譜圖。

1.2.1.11 單糖組成

參照文獻(xiàn)方法^［18］略修改多糖水解及柱前衍化：取10 mg多糖樣品于梨形瓶中，加入2 mL 2 mol/L H₂SO₄，充入N₂并在油浴鍋里100 ℃水解8 h，水解結(jié)束后用0．3 mol/L NaOH中和至中性，離心取上清液200 μL，依次加入100 μL 0.5 mol/L PMP（1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮）甲醇溶液和100 μL 0.3 mol/L NaOH，70 ℃水浴60 min，冷卻后加入100 μL 0.3 mol/L的HCl，混勻后加入1 mL CCl₃萃取，離心取上清。重復(fù)3次，過0.22 μm水相濾膜備用。標(biāo)準(zhǔn)品同法處理。

色譜條件：采用高效液相色譜法分析LD-1的單糖組成，流動相為0.05 mol/L V（磷酸鹽）∶V（乙腈）=82∶12，流速為1.0 mL/min，檢測波長為250 nm，柱溫為30 ℃。

1.3 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2019整理數(shù)據(jù)，用SPSS 25對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 形態(tài)特征描述

研究表明，牛肝菌子實體大部分生長于白楊林中，多發(fā)生在樹坑、草坑相應(yīng)的陰涼處。當(dāng)?shù)夭烧淖訉嶓w直徑在1～20 cm不等。成熟牛肝菌的菌蓋直徑大約為5～9 cm，初期球形菌蓋緊包菌柄頂端，不同的生長環(huán)境條件下，表面也存在一定差異性。有些光滑平整，有些凹凸不平，后期因干旱，菌蓋表面多呈龜裂狀。菌肉白色，菌柄頂部表現(xiàn)為白色，菌管變褐色，與該種野生牛肝菌最近似的為傘菌目（Agaricales）的皺皮疣柄牛肝菌（Leccinum duriusculum）。圖1

2.2 牛肝菌的分子鑒定

研究表明，樣品與NCBI登錄號為AF484445（Leccinum duriusculum）的序列的親緣關(guān)系最近，相似性達(dá)到100%，將其鑒定為皺皮疣柄牛肝菌（Leccinum duriusculum），為傘菌目（Agaricales），牛肝菌科（Boletaceae），疣柄牛肝菌屬（Leccinum Qray）。圖2

2.3 營養(yǎng)成分測定

研究表明，試驗中牛肝菌的總糖含量為57.57%，蛋白質(zhì)含量為27.32%，灰分為11.02%，每1 000 g樣品中，鈣含量最高（670 mg/kg），其次是鐵（434 mg/kg）、磷（332 mg/kg）、鉀（142 mg/kg）、鈉（137 mg/kg）、鋅（85 mg/kg）、銅（48 mg/kg），含量最低的是錳（12 mg/kg）。

2.4 粗多糖脫蛋白

研究表明，采用線性擬合回歸方程進(jìn)行求解。經(jīng)計算，3次脫蛋白后粗多糖中蛋白質(zhì)的脫除率為4.44%，多糖回收89.5%。圖3

2.5 DEAE-52纖維素柱層析

研究表明，分別收集水洗脫部分LD-1，0.1 mol/L NaCl洗脫部分LD-2，0.2 mol/L NaCl洗脫部分LD-3，提取率分別為78.8%、12.65%和8.55%。LD為棕色的粉末狀，LD-1為純白色絮狀，LD-2和LD-3均為淡黃色絮狀物。圖4，圖5

2.6 不同多糖組合的水合性質(zhì)

研究表明，LD-1水溶性較強，LD-3次之，LD-2水溶性最弱，且LD-2持水力最大。表1

2.7 紫外光譜掃描

研究表明，3個組分所對應(yīng)的曲線在波長260 nm和280 nm處平緩光滑，無吸收峰出現(xiàn)，LD-1、LD-2和LD-3中不存在游離的核酸及蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。圖6

2.8 紅外光譜掃描

研究表明，3 288、3 332和3 350 cm^-1波數(shù)處的寬的吸收峰為O-H的伸縮振動引起的，說明三種多糖組分中均存在分子內(nèi)和分子間氫鍵，1 409 cm^-1波數(shù)處是由C-H的變角振動引起的，這組峰是糖類的特征吸收峰；1 018、1 023、1 028、1 076、1 080、1 146、1 152、1 153和1 179 cm^-1波數(shù)處的吸收峰與吡喃環(huán)的醚鍵C-O-C的伸縮振動有關(guān)，在此區(qū)域（1 200～1 000 cm^-1）內(nèi)為多糖的分子指紋區(qū)，3個組分均為吡喃糖。圖7

2.9 LD-1單糖組分

研究表明，LD-1中單糖組分為葡萄糖、鼠李糖、果糖、阿拉伯糖，其中含量最高的是葡萄糖，占比85%。表2

3 討 論

3.1 目前新疆地區(qū)已報道的牛肝菌主要有亞洲小牛肝菌、褐蓋牛肝菌、美味牛肝菌、紅腳牛肝菌、堅實牛肝菌、火紅牛肝菌、褐黃牛肝菌、小橙黃牛肝菌、灰疣柄牛肝菌、褐疣柄牛肝菌和亞疣柄牛肝菌等^［19］。新疆阿克蘇地區(qū)擁有良好的生態(tài)環(huán)境和豐富的森林資源基礎(chǔ)，然而，有關(guān)該地區(qū)野生牛肝菌的分類鑒定鮮有報道。目前，皺皮疣柄牛肝菌在我國分布主要有西藏及新疆額爾齊斯河沿岸，該菌屬樹木的外生菌根菌；其子實體受外界環(huán)境影響較大，在雨后氣溫偏低、適宜的散射光照、濕度較大時發(fā)生，子實體生長快，個體較大，菌肉較松軟，菌蓋表面少有龜裂，而在沙漠綠洲等較干旱的環(huán)境下，子實體生長緩慢，個體小，菌肉緊密硬實，菌蓋表面常龜裂^{［20，21］}。皺皮疣柄牛肝菌與皺蓋疣柄牛肝菌極為相似，但皺蓋疣柄牛肝菌，菌蓋多有皺縮；皺皮疣柄牛肝菌菌蓋則沒有皺縮，似有刻紋狀凸起，后期變至平滑。

3.2 野生牛肝菌富含多糖和蛋白質(zhì)，并含有多種人體所需的礦物質(zhì)，但含量隨著產(chǎn)地不同有所差異。馬長中等^［22］分別對產(chǎn)自百巴和林芝覺木的橙黃疣柄牛肝菌營養(yǎng)組成進(jìn)行了分析，其粗蛋白含量為19.77%和21.17%，總糖含量為9.02%和10.11%，粗脂肪含量為4.42%和4.67%，且富含礦物元素，其中K含量最高，其次是Na和Ca；劉秋鳴等^［23］測定了采自云南省的25個產(chǎn)地的黃皮疣柄牛肝菌，其粗蛋白含量為24.54%～37.25%，粗脂肪含量為0.88%～3.78%，可溶性總糖含量為7.03%～19.03%；張春霞等^［24］測定了暗褐網(wǎng)柄牛肝菌子實體的總糖和蛋白質(zhì)的含量分別為2.64%和23.3%，發(fā)現(xiàn)其Fe、P和K的含量相對較高。研究檢測的阿克蘇野生皺皮疣柄牛肝菌中總糖含量為57%，蛋白質(zhì)含量為27%，其礦物質(zhì)中Ca含量最高，其次是Fe和P。與其他牛肝菌相比，其總糖含量是橙黃疣柄牛肝菌的5倍、是暗褐網(wǎng)柄牛肝菌的20倍；蛋白質(zhì)含量與黃皮疣柄牛肝菌含量相當(dāng)，略高于橙黃疣柄牛肝菌和暗褐網(wǎng)柄牛肝菌；在礦物質(zhì)元素中Ca、Fe含量是白牛肝菌和黑牛肝菌的60倍^［25］，Mn的含量僅次于黑牛肝菌，表明該地區(qū)野生皺皮疣柄牛肝菌是一種富含糖分、蛋白質(zhì)、高礦物質(zhì)的野生食用菌。

3.3 牛肝菌多糖具有多種生物活性，而有關(guān)皺皮疣柄牛肝菌子實體多糖的功能活性和組成相關(guān)研究極為有限。前期研究發(fā)現(xiàn)，阿克蘇野生皺皮疣柄牛肝菌粗多糖具有較好的抗氧化能力，其抗氧化活性與多糖的濃度成正相關(guān)，不同提取方法下，當(dāng)粗多糖LD-80濃度達(dá)到10 mg/mL時，其清除DPPH和OH^-自由基能力也達(dá)到48%和52%，與已報道的皺蓋疣柄牛肝菌多糖^［26］抗氧化能力相當(dāng)?，F(xiàn)有研究表明，不同種屬牛肝菌多糖其單糖組成往往存在差異，伍燕等^［27］通過提取和精制皺蓋疣柄牛肝菌多糖，獲得LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ兩個組分，其LRP-Ⅰ單糖組成為甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、木糖和巖藻糖，LRP-Ⅱ單糖組成為甘露糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和巖藻糖。樊瑩潤等發(fā)現(xiàn)黃皮疣柄牛肝菌多糖的單糖組成為甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、巖藻糖。試驗研究通過對粗多糖的純化，獲得了LD-1、LD-2和LD-3等三個多糖組分，其中LD-1占比最高，約為粗多糖的78.8%；通過單糖組成測定，LD-1中單糖為葡萄糖、鼠李糖、果糖、阿拉伯糖，其中葡萄糖占比最高，為85%，與相關(guān)疣柄牛肝菌多糖的單糖組成存在明顯差異。

4 結(jié) 論

阿克蘇野生牛肝菌鑒定為皺皮疣柄牛肝菌（Leccinum duriusculum），為傘菌目（Agaricales），牛肝菌科（Boletaceae），疣柄牛肝菌屬（Leccinum Qray）。該牛肝菌營養(yǎng)物質(zhì)豐富，其主要的營養(yǎng)物質(zhì)為糖類和蛋白質(zhì)，分別占57.57%和27.32%，并富含有鈣、鐵、磷、鉀、鈉、鋅、銅和錳等礦物質(zhì)元素。組分為LD-1、LD-2和LD-3，其中LD-1提取率最高，為78.8%，測定了LD-1中單糖組成為葡萄糖、鼠李糖、果糖和阿拉伯糖，其中占比最高的是葡萄糖。

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Determination of nutrient components and structural analysis of polysaccharides from wild Boletus ZHANG Xinyu^1，2， Munire Mutalifu^1，2 ， YE Yijie^1，2， FENG Qian^{1，2，3}， ZHANG Zhidong²

（1. College of Food Science and Pharmacy， Xinjiang Agricultural University， Urumqi 830052， China；2. Institute of Microbiology， Xinjiang Academy of Agricultural Sciences/Xinjiang Key Laboratory of Special Environmental Microbiology， Urumqi 830091， China；3. Food Safety Testing Center of Aksu Region， Aksu Xinjiang 843000， China）

Abstract：【Objective】 In order to grasp the taxonomic status of Aksu wild Boletus， clarify its nutritional composition and analyze the main polysaccharide functional structure.【Methods】 Using morphological and molecular biology methods to identify wild Boletus， analyze the nutritional components and minerals in Boletus for detection. The crude polysaccharide of Boletus pumila was extracted using water extraction and alcohol precipitation method， and purified using DEAE-52 cellulose column chromatography. Then， its monosaccharide composition was analyzed using high-pressure hydraulic chromatography.【Results】 The wild Boletus from Aksu belongs to the order Agaricularia， family Boletus， and genus Boletus， and is identified by molecular identification as Leccinum duriusculum. Its main nutrients are sugars and proteins， accounting for 57.57% and 27.32% respectively. Three polysaccharide components were obtained through column chromatography combined with medium pressure chromatography system separation： LD-1， LD-2， and LD-3. Among them， LD-1 had the highest extraction rate of 78.8% and had strong water solubility. Infrared spectroscopy showed that it contained carbohydrate compounds with the highest proportion of glucose. 【Conclusion】 Wild Boletus in Aksu region is rich in polysaccharides and has strong water holding capacity. This result can provide scientific reference for the in-depth development and utilization of wild Boletus polysaccharides.

Key words：Boletus; nutrient composition; mineral elements; polysaccharide; isolation and purification

Fund projects：Sub-project of the third comprehensive scientific investigation in Xinjiang （2022xjkk1200）; The Project of Fund for Stable Support to Agricultural Sci-Tech Renovation（xjnkywdzc-2023005-6）; Agricultural Science and Technology Innovation Platform Capacity Improvement Project of Xinjiang Academy of Agricultural Sciences （nkypt005）; Agricultural Sciences Independent Cultivation Project Team Construction Project of Xinjiang Academy of Agricultural Sciences （nkyzztd-001）

Correspondence author：ZHANG Zhidong （1977-）， male， from Xinjiang， researcher， Ph.D.，master's supervisor，research direction： Special environmental microorganisms and probiotic resources， （E-mail） zhangzheedong@sohu.com