摘要：為探討外源亞精胺（Spd）提高苜蓿（Medicago sativa L.）抗旱的生理機(jī)制并為干旱緩解提供理論依據(jù)，本研究以‘龍苜807’為材料，采用營(yíng)養(yǎng)液法培養(yǎng)苜蓿幼苗，以20% PEG-6000模擬干旱脅迫，研究不同濃度的Spd （0，0.3，0.6，0.9，1.2 mmol·L-1）對(duì)苜蓿幼苗葉片細(xì)胞膜透性、抗氧化酶活性、滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)及葉綠素的影響，利用隸屬函數(shù)法綜合評(píng)價(jià)外源Spd最佳緩解濃度。發(fā)現(xiàn)0.9 mmol·L-1Spd 使干旱脅迫下苜蓿幼苗葉片丙二醛（MDA）含量、H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率降低37.29%，46.84%和39.00%；超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）活性增大65.75%和60.21%；可溶性蛋白和脯氨酸含量增加93.27%和52.30%；葉綠素含量增加76.54%；0.6 mmol·L-1Spd 使干旱脅迫下苜蓿幼苗POD活性增加26.07%。1.2 mmol·L-1Spd處理可溶性糖含量增加了77.62%。適宜Spd濃度可有效緩解干旱對(duì)苜蓿幼苗的傷害，以0.9 mmol·L-1Spd為最佳。因此，外源Spd濃度可穩(wěn)定苜蓿生物膜系統(tǒng)，增強(qiáng)抗氧化能力，維持細(xì)胞滲透平衡，有效緩解干旱對(duì)苜蓿幼苗的傷害。

關(guān)鍵詞：亞精胺；干旱脅迫；苜蓿；生理指標(biāo)

中圖分類號(hào)：S332.1""" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A""""" 文章編號(hào)：1007-0435（2024）07-2099-07

doi：10.11733/j.issn.1007-0435.2024.07.011

引用格式：

孫天國(guó)， 衣" 蘭， 谷新穎，等.外源亞精胺對(duì)苜蓿幼苗干旱緩解生理機(jī)制分析［J］.草地學(xué)報(bào)，2024，32（7）：2099-2105

SUN Tian-guo， YI Lan， GU Xin-ying，et al.Analysis of the Physiological Mechanism of Drought Alleviation of Alfalfa Seedlings by Exogenous Spermidin［J］.Acta Agrestia Sinica，2024，32（7）：2099-2105

收稿日期：2023-12-27；修回日期：2024-03-01

基金項(xiàng)目：黑龍江省省屬高等學(xué)校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)科研項(xiàng)目（135409427）；齊齊哈爾大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目（20201023194）資助

作者簡(jiǎn)介：

孫天國(guó)（1966-），男，漢族，黑龍江肇源人，碩士，副教授，主要從事植物抗逆性機(jī)制研究，E-mail：stg1966@163.com

Analysis of the Physiological Mechanism of Drought Alleviation of Alfalfa

Seedlings by Exogenous Spermidin

SUN Tian-guo1，2*， YI Lan1， GU Xin-ying1， WANG Si-qi1， ZHANG Shuang1

（1.College of Life Sciences， Agriculture and Forestry， Qiqihar University， Qiqihar， Heilongjiang 161006， China; 2.Heilongjiang

Provincial Key Laboratory of Resistance Gene Engineering and Protection of Biodiversity in Cold Areas， Qiqihar，

Heilongjiang Province 161006， China）

Abstract：In order to explore the physiological mechanism of exogenous spermidine （Spd） to improve drought resistance and drought mitigation in alfalfa （Medicago Sativa L.），‘Longmu No.807’cultivated by nutrient solution was used as the experiment material and 20% polyethylene glycol （PEG-6000） was used to simulate osmotic stress. The effects of spermidine with different concentrations （0，0.3，0.6，0.9，1.2 mmol·L-1）on membrane permeability substances，antioxidant enzyme activities，contents of osmotic adjustment substances and chlorophyll were analyzed. The optimal relieve concentration of exogenous Spd was evaluated by the membership function method.The results showed that when 0.9 mmol·L-1Spd was applied to alfalfa seedlings under 20% PEG stress，the content of MDA and H2O2，O-2· production rate decreased by 37.29%，46.84% and 39.00%，respectively. The antioxidant enzyme activities of SOD and CAT increased by 65.75% and 60.21%，respectively. The contents of soluble protein，proline and chlorophyll increased by 93.27%，52.30% and 76.54%;respectively，when 0.6 mmol·L-1Spd was applied to alfalfa seedlings under 20% PEG stress. The activity of POD increased by 26.07%. The contents of soluble sugar increased by 77.62% when 1.2 mmol·L-1Spd was applied. The comprehensive evaluation of subordinate function showed that suitable Spd concentration could alleviate the damage of drought to alfalfa seedlings and Spd concentration of 0.9 mmol·L-1 was the best in the study herein. Therefore，exogenous Spd could stabilize the cell membrane system，enhance the antioxidant capacity，maintain the osmotic balance，and alleviate the damage of drought to alfalfa seedlings.

Key words：Spermidine;Drought stress;Alfalfa;Physiological indexes

伴隨著養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，我國(guó)對(duì)優(yōu)質(zhì)牧草需求量增大，苜蓿（Medicago sativa L.）其營(yíng)養(yǎng)及其豐富、品質(zhì)好、產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)，被我國(guó)作為首選的高蛋白飼草品種大量種植。苜蓿對(duì)水的依賴性很強(qiáng)，每形成1 g干物質(zhì)需水約1 kg［1］。多年來，干旱現(xiàn)象在所有的非生物脅迫中造成的農(nóng)作物損失占據(jù)全球首位，干旱成為限制植物生長(zhǎng)和發(fā)育的重要環(huán)境因素之一［2-3］。苜蓿的生產(chǎn)也因?yàn)楦珊凳艿絿?yán)重制約，因此，研究提高苜?？购的芰Τ蔀檠芯繜狳c(diǎn)。曾澤堂［4］研究了干旱脅迫下3種紫花苜蓿生長(zhǎng)狀況，隨著PEG濃度的增大，3種紫花苜蓿種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)等相關(guān)指數(shù)皆呈下降趨勢(shì)。楊秀娟等［5］對(duì)國(guó)內(nèi)外22個(gè)紫花苜蓿品種抗旱性能進(jìn)行了分類;陳靜等［6］對(duì)紫花苜蓿與藍(lán)花苜?？购敌阅芊治?蔡桌山［7］研究發(fā)現(xiàn)，外源NO對(duì)水分脅迫下苜蓿幼苗的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用；李波等［8］認(rèn)為合適濃度的CaCl2能夠有效緩解苜蓿幼苗干旱。

多胺（PAs）是一種具有強(qiáng)烈生理活性的含氮的堿性化合物，在非生物脅迫下，多胺能夠清除植物體中的自由基、調(diào)節(jié)陰陽離子平衡和滲透平衡，與植物脅迫耐性調(diào)控密切相關(guān)［9］。多胺主要包括亞腐胺（Putrescine，Put）、精胺（Spermine，Spm）和亞精胺（Spermidine，Spd）3種［10］，因Spd具有獨(dú)特的分子結(jié)構(gòu)，在植物中具有對(duì)抗非生物逆境脅迫的強(qiáng)大功能，而廣泛用于抗逆性研究［11］。關(guān)于亞精胺在抗旱性研究主要集中于糧食作物［12］，水果［13］，蔬菜［14］等，而關(guān)于苜蓿的研究報(bào)道較少。本研究以苜蓿為材料，采用模擬干旱脅迫分析不同濃度的Spd對(duì)20%PEG干旱脅迫的緩解效應(yīng)，為闡明Spd調(diào)節(jié)苜蓿干旱機(jī)制提供參考。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料及培養(yǎng)

試驗(yàn)材料為苜蓿品種‘龍牧807’（Medicago sativa‘Longmu No.807’）。在實(shí)驗(yàn)室中挑選顆粒飽滿的種子，用5%次氯酸鈉消毒3分鐘后，用清水反復(fù)清洗。將種子播撒于裝有營(yíng)養(yǎng)土和蛭石（3∶1）的營(yíng)養(yǎng)缽中，每個(gè)營(yíng)養(yǎng)缽中放入60粒種子，置于27℃（12 h光照/12 h黑暗）培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)幼苗至3葉1心，選擇45株健壯苗繼續(xù)培養(yǎng)，每2 d澆水1次，待幼苗高度大約16 cm開始試驗(yàn)。

1.2" 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)采用20%PEG模擬干旱，以不加PEG為對(duì)照，每個(gè)處理35株，3次重復(fù)。將培養(yǎng)的幼苗根部土壤洗凈，將根部侵入到盛有1/2 Hoagland培養(yǎng)液的器皿中于培養(yǎng)室內(nèi)（27℃，12 h光照/12 h黑暗）培養(yǎng)4 d，每天定時(shí)補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)液。試驗(yàn)分為對(duì)照，脅迫和緩解處理（表1），試驗(yàn)處理采用根浸法60 h（預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)干旱處理大于60 h幼苗生長(zhǎng)受到嚴(yán)重抑制），然后取各處理葉片于-80℃條件保存，備用。

1.3" 生理指標(biāo)測(cè)定

丙二醛（MDA）含量依據(jù)Dhindsa等［15］的硫代巴比妥酸法測(cè)定，H2O2 含量和O-2·產(chǎn)生速率分別采用二甲酚橙法和羥胺法測(cè)定［16］，超氧化物歧化酶（SOD）活性采用NBT法測(cè)定［17］，過氧化氫酶活性 （CAT）采用紫外吸收法進(jìn)行測(cè)定［18］，采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定 POD活性［18］。脯氨酸含量、可溶性糖含量和可溶性蛋白含量分別采用茚三酮比色法、蒽酮比色法測(cè)和考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定［18］，葉綠素含量采用乙醇浸泡法測(cè)定［19］，各指標(biāo)3次重復(fù)。

1.4" 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 進(jìn)行單因素方差分析，Microsoft Excel 2016繪圖，采用隸屬函數(shù)法綜合分析抗旱性能。公式U=（X-Xmin）/（Xmax-Xmin）分析與抗性指標(biāo)正相關(guān)的數(shù)據(jù)，U′=1-（X-Xmin）/（Xmax-Xmin）分析與抗性指標(biāo)負(fù)相關(guān)的數(shù)據(jù)。公式中X為各處理中各指標(biāo)測(cè)定值，Xmin和Xmax為各指標(biāo)最小值和最大值。

2" 結(jié)果與分析

2.1" Spd對(duì)干旱脅迫下苜蓿幼苗葉片MDA，H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率的影響

在20%PEG的處理下苜蓿幼苗葉片MDA、H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率顯著提高，與對(duì)照相比分別提高148.80%，136.96%和92.51%（圖1），說明苜蓿幼苗葉片膜系統(tǒng)遭到破壞。不同濃度外源Spd處理苜蓿葉片后，對(duì)苜蓿幼苗葉片MDA、H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率產(chǎn)生影響，但各個(gè)濃度效果差異較大，0.3 mmol·L-1 Spd處理降低幅度最小，MDA，H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率分別降低6.14%，8.31%和6.70%，與對(duì)照比差異均不顯著，其它濃度Spd處理均有效降低苜蓿葉片MDA，H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率，其中0.9 mmol·L-1Spd處理效果最為顯著，降幅最大，與干旱處理比分別降低37.29%、46.84% 和39.00%（Plt;0.05）。因此，一定濃度的Spd 可以有效降低苜蓿葉片的膜脂化過氧化程度，增強(qiáng)膜的穩(wěn)定性。

2.2" 外源 Spd 對(duì)干旱脅迫下苜蓿幼苗葉片抗氧化酶活性的影響

苜蓿幼苗3種抗氧化酶活性在20% PEG脅迫下升高顯著（圖2），與對(duì)照比SOD、POD和CAT活性分別增加31.27%，26.39%和27.49%（Plt;0.05），說明20% PEG對(duì)苜蓿葉片產(chǎn)生了傷害，生物體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)提高3種酶活性以清除活性氧自由基。苜蓿幼苗葉片在不同濃度的Spd作用下，表現(xiàn)有所差異，其中SOD，POD和CAT活性在0.3 mmol·L-1Spd增幅最小，分別升高7.32%，7.68%和8.43%；在0.9 mmol·L-1Spd處理下苜蓿幼苗SOD和CAT活性增幅最大，分別增大65.75%和60.22%（Plt;0.05），而POD活性在0.6 mmol·L-1Spd處理下增幅最大，增大26.07%（Plt;0.05）。適宜濃度的Spd 有助提高苜蓿葉片的抗氧化酶活性，ROS被有效清除，提高苜蓿幼苗抗旱性。

2.3" 外源Spd對(duì)干旱脅迫下苜蓿幼苗葉片滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

在20% PEG干旱脅迫下苜蓿幼苗可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量升高，與對(duì)照相比分別升高33.02%，23.76% 和30.58%（Plt;0.05）（見圖3）。說明20% PEG破壞了苜蓿幼苗滲透平衡，通過提高滲透物質(zhì)含量發(fā)揮滲透調(diào)節(jié)功能維持細(xì)胞功能。苜蓿幼苗葉片在0.3 mmol·L-1Spd處理下可溶性蛋白和脯氨酸含量分別增加9.29%和8.44%，與干旱處理相比差異不顯著，而可溶性糖含量增加23.34%（Plt;0.05）；可溶性蛋白和脯氨酸含量在0.9 mmol·L-1Spd處理下增幅最大，增大93.27%和52.68%，而可溶性糖含量在1.2 mmol·L-1Spd處理達(dá)到最大值，增大77.62%。Spd 能夠使干旱脅迫下苜蓿葉片滲透物質(zhì)含量得到積累，降低滲透勢(shì)，提高苜蓿抗旱性。

2.4" 外源Spd對(duì)干旱脅迫下苜蓿幼苗葉綠素含量的影響

苜蓿幼苗葉綠素含量在干旱脅迫下顯著降低，在20%PEG作用下葉綠素含量下降45.98%，說明苜蓿幼苗的光合作用受到影響。不同濃度Spd對(duì)苜蓿幼苗葉綠素含量影響不同，0.3 mmol·L-1Spd處理下，葉綠素含量增加了9.88%，差異不顯著，其它濃度Spd處理均有效提高了苜蓿幼苗葉片葉綠素含量，其中0.9 mmol·L-1Spd增幅最大與干旱處理相比增加76.54% （Plt;0.05）（圖4）。因此，Spd 適宜濃度能夠提高苜蓿葉片光合效率。

2.5" 外源Spd對(duì)滲透脅迫下苜蓿葉片各項(xiàng)指標(biāo)的隸屬函數(shù)分析

依據(jù)外源Spd 對(duì)滲透脅迫下苜蓿葉片各項(xiàng)指標(biāo)隸屬函數(shù)分析可以看出，外源Spd具有一定抗性能力，但不同的濃度表現(xiàn)有一定差異，所得函數(shù)值越大說明Spd通過提高抗氧化酶活性和滲透物質(zhì)含量積累，提高光合效率，減少干旱對(duì)膜的損傷效果越顯著。從表2可以看出不同濃度Spd對(duì)苜蓿幼苗緩解20%PEG干旱脅迫順序?yàn)?.9 mmol·L-1＞0.6 mmol·L-1＞1.2 mmol·L-1＞0.3 mmol·L-1。因此，0.9 mmol·L-1Spd提高了苜蓿幼苗的抗旱能力。

3" 討論

植物體在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中建立了完善的生理平衡機(jī)制，能夠平衡體內(nèi)的自由基的產(chǎn)生和清除［20］，當(dāng)植物體遭遇干旱時(shí)，過氧化氫（H2O2）和超氧自由基在細(xì)胞內(nèi)過量產(chǎn)生，打破植物體動(dòng)態(tài)平衡，膜透性增大，反映膜脂化的程度和傷害程度的重要指示物MDA含量大幅增高［21-22］。本研究中在20% PEG脅迫下，苜蓿幼苗葉片的MDA含量顯著高于對(duì)照，說明干旱脅迫使得苜蓿葉片產(chǎn)生大量的自由基，生物膜透性增大。本研究中0.6，0.9和1.2 mmol·L-1Spd的施用有效降低了苜蓿葉片MDA含量，這與Spd直接抑制活性氧的產(chǎn)生有關(guān)。陳坤明等［23］認(rèn)為多胺可抑制羥自由基（·OH）的產(chǎn)生，田婧等［24］認(rèn)為外源 Spd 能夠維持機(jī)體自由基平衡，減緩由于自由基積累而導(dǎo)致的膜損傷，而且外源Spd在細(xì)胞膜的保護(hù)和修復(fù)作用方面具有重要的功能，能夠有效減輕或防止對(duì)膜系統(tǒng)的傷害，維持細(xì)胞膜選擇性滲透能力。

SOD，POD和CAT是生物體重要的3種保護(hù)酶，在逆境中酶活性維持較高水平，能夠清除活性氧自由基，發(fā)揮保護(hù)細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和完整性的功能。本研究發(fā)現(xiàn)，在20% PEG作用下苜蓿葉片SOD、POD和CAT的酶活性升高，說明苜蓿葉片受到傷害作用，體內(nèi)發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，提高酶活性，抵抗外界環(huán)境的傷害作用。有研究表明，植物體內(nèi)結(jié)合態(tài)PAs含量的增大有利于促進(jìn)PAs與酶蛋白的結(jié)合，使得抗氧化酶活性增強(qiáng)、蛋白結(jié)構(gòu)和功能得以穩(wěn)定、阻止蛋白降解，進(jìn)而提高幼苗抗氧化能力［25］，在本研究中，苜蓿葉片施用較高濃度的Spd（＞0.6 mmol·L-1）均能有效提高SOD，POD和CAT的活性，從而有效降低滲透脅迫對(duì)苜蓿幼苗的傷害，起到保護(hù)作用，但效果和Spd濃度有關(guān)，吳旭紅等研究發(fā)現(xiàn)不同濃度Spd顯著提高了南瓜（Cucurbita moschata Duch）幼苗根系和葉片抗氧化酶活性，本研究結(jié)論與之相同［26］，外源Spd能有效提高苜蓿幼苗的抗氧化能力，一方面是Spd在DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯發(fā)揮調(diào)控功能，促進(jìn)功能蛋白的合成，另一方面通過提高抗氧化酶基因的表達(dá)水平，平衡生物體內(nèi)的自由基，從而增強(qiáng)抗氧化性［27-29］。

滲透調(diào)節(jié)在植物抗逆性方面發(fā)揮及其重要作用［30］，主要是通過滲透壓調(diào)節(jié)功能提高植物吸水能力，同時(shí)通過滲透保護(hù)作用以保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完成和維持細(xì)胞功能［31］。作為重要滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的可溶性糖和可溶性蛋白在干旱脅迫下，增加含量以增強(qiáng)植物的抗旱能力［32］，脯氨酸對(duì)外界環(huán)境變化十分敏感，脯氨酸含量的累加是植物對(duì)不良環(huán)境的忍耐能力的反映［33］，本研究中在20%PEG脅迫下苜蓿葉片中的可溶性蛋白、可溶性糖和脯氨酸含量大幅增加抵御干旱脅迫，外源Spd的施用進(jìn)一步提高了脯氨酸，可溶性蛋白和可溶性糖的含量，特別是Spd在較高濃度下（＞0.6 mmol·L-1）3種物質(zhì)含量顯著提高。吳旭紅等［34］在研究不同濃度的Spd對(duì)干旱脅迫燕麥（Avena nuda L.）幼苗生長(zhǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，各濃度的Spd 顯著提高了3種滲透物質(zhì)含量，但不同濃度的效果有所差異，本研究結(jié)論與之相同。前人認(rèn)為，Spd之所以能夠提高可溶性蛋白含量和它具有緩解蛋白質(zhì)降解和提高誘導(dǎo)逆境蛋白相關(guān)基因的表達(dá)水平有關(guān)［35］。Spd調(diào)節(jié)可溶性糖的含量可通過相應(yīng)的碳代謝積累物質(zhì)［36］，此外，外源亞精胺能夠提高脯氨酸含量和在谷氨酸代謝途徑中發(fā)揮關(guān)鍵作用的Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）和Δ1-吡咯啉-5-羧酸還原酶（P5CR）活性，促進(jìn)脯氨酸的積累［37］。

葉綠素含量是反映光合能力重要指標(biāo)，在干旱脅迫下，由于植物碳同化速率的降低導(dǎo)致葉片的各生理指標(biāo)下降［38］。姜義寶等［39］研究發(fā)現(xiàn)不同土壤含水量航安脅迫降低了‘敖漢’苜蓿（Medicago sativa ‘Aohan’）葉綠素含量，本研究中苜蓿葉片葉綠素含量在20% PEG干旱脅迫下顯著降低，說明PEG損壞苜蓿葉綠體結(jié)構(gòu)并發(fā)生功能改變。施用不同濃度的Spd，促進(jìn)光合作用，苜蓿葉片葉綠素含量提高顯著，特別是0.9 mmol·L-1Spd 效果更為顯著。魏曉凱等［40］研究發(fā)現(xiàn)0.4 mmol·L-1Spd能夠顯著緩解輕度和重度干旱下烤煙幼苗的葉綠素含量降低，本研究結(jié)論與之相同。

PAs能夠進(jìn)入葉綠體清除有害物質(zhì)，從而有效保護(hù)葉綠體的結(jié)構(gòu)和功能的完整性，減緩光合色素的降解速率［41］。本研究表明外源Spd可以緩解苜蓿葉片的葉綠素含量的降低，且以0.9 mmol·L-1Spd的效果最佳。Spd可以作為光合色素降解的抑制劑，發(fā)揮保護(hù)光合系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的功效，提高苜蓿的抗旱性。

4" 結(jié)論

苜蓿幼苗施用適宜濃度的Spd可以有效降低MDA、H2O2含量和O-2·產(chǎn)生速率，修復(fù)膜的損傷，穩(wěn)定膜的結(jié)構(gòu)，顯著提高了苜蓿葉片SOD，POD，CAT活性，有效清除活性氧傷害，通過苜蓿葉片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸含量的提高，維持了細(xì)胞滲透平衡，通過提高光合效能，提高了葉綠素含量，其中以0.9 mmol·L-1Spd緩解效果最佳。

參考文獻(xiàn)

［1］" 李樂，李丹寧，楊葉研，等. 干旱脅迫下紫花苜蓿葉片代謝組分析及氣孔調(diào)節(jié)物質(zhì)的篩選［J］. 草地學(xué)報(bào)，2023，31（9）：2671-2683

［2］" ANJUM S A，ASHRAF U，ZOHAIB A，et al. Growth and developmental responses of crop plants under drought stress：A review ［J］. Zemdirbyste-Agriculture，2017，104（3）：267-276

［3］" FANG Y J，XIONG L Z. General mechanisms of drought response and their application in drought resistance improvement in plants ［J］. Cellular and Molecular Life Sciences，2015，72（4）：673-689

［4］" 曾澤堂. 模擬干旱脅迫環(huán)境下 3 種紫花苜蓿的萌芽能力與紫花苜蓿生長(zhǎng)［D］. 蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：32

［5］" 楊秀娟，韓瑞宏，盧欣石，等. 苗期紫花苜蓿品種抗旱性初步研究［J］. 草業(yè)科學(xué)，2008，25（11）：54-59

［6］" 陳靜，宮文龍，張尚雄.紫花苜蓿與藍(lán)花苜?？购敌员容^研究［J］. 中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2020，42（2）：32-40

［7］" 蔡卓山. 水分脅迫下外源 NO 對(duì)苜蓿種子萌發(fā)和幼苗抗旱生理的影響［D］.蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013：71-72

［8］" 李波，劉暢，李紅，等. 外源氯化鈣對(duì)‘龍牧807’苜蓿幼苗干旱緩解效應(yīng)分析［J］. 草地學(xué)報(bào)，2020，28（4）：990-997

［9］" ROYCHOUDHURY A，BASU S，SENGUPTA D N. Amelioration of salinity stress by exogenously applied spermidine or spermine in three varieties of indica rice differing in their level of salt tolerance［J］. Journal of Plant Physiology，2011，168（4）：317-328

［10］IMAI A，MATSUYAMA T，HANZAWA Y，et al. Spermidine synthase genes are essential for survival of Arabidopsis ［J］. Journal of Plant Physiology，2004，135（3）：1565-1573

［11］YU Z，JIA D Y，LIU T B. Polyamine oxidases play various roles in plant development and abiotic stress tolerance ［J］. Plants，2019，8（6）：184

［12］李麗杰，顧萬榮，孟瑤，等. 干旱脅迫下亞精胺對(duì)玉米幼苗抗旱性影響的生理生化機(jī)制［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2018，29（20）：554-564

［13］高志明. 外源亞精胺對(duì)葡萄耐旱性的影響［J］. 中國(guó)南方果樹，2018，47（1）：108-110，113

［14］張春梅，鄒志榮，黃志，等. 外源亞精胺對(duì)干旱脅迫下不同品種番茄幼苗光合作用的影響［J］. 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2010，28（3）：182-187

［15］DHINDSA R S，DHINDSA P P，THORPE T A. Leaf senescence：correlated with increased leaves of membrane permeability and lipid peroxidation，and decreased levels of superoxide dismutase and catalase［J］. Journal of Experimental Botany，1981，32（1）：93-101

［16］張志良，瞿偉菁，李小方. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］. 第4版. 北京：高等教育出版社，2009：221-222，223-224

［17］GIANNOPOLITIS C N，RIES S K. Superoxide dismutase I. Occurrence in higher plants［J］. Journal of Plant Physiology，1977，59（2）：309-314

［18］李合生. 植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù)［M］. 北京：高等教育出版社，2000：164-167，184-185，195-197，258-260

［19］鄒琦. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2000：72-75

［20］王憲葉，沈文飚，徐郎萊. 外源一氧化氮對(duì)滲透脅迫下小麥葉片膜脂過氧化的緩解作用［J］. 植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報(bào)，2004，30（2）：195-200

［21］李秀玲，劉開強(qiáng)，劉君，等. 干旱脅迫對(duì)六種觀賞草枯葉率及生理指標(biāo)的影響［J］. 中國(guó)草地學(xué)報(bào)，2012，34（4）：93-100

［22］NAHAR K，HASANUZZAMAN M，ALAM M M，et al. Glutathi-one-induced drought stress tolerance in mung bean：Coordinated roles of the antioxidant defence and methylg-lyoxal detoxification systems［J/OL］. AoB Plants，https：//doi.org/10.1093/aobpla/plv069，2015-07-01/2024-03-01

［23］陳坤明，張承烈. 干旱期間春小麥葉片多胺含量與作物抗旱性的關(guān)系［J］.植物生理學(xué)報(bào)，2000，26（5）：381-386

［24］田婧，郭世榮，孫錦，等. 外源Spd對(duì)高溫脅迫下黃瓜幼苗葉片膜脂過氧化及質(zhì)子泵活性的影響［J］. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2011，22（12）：3252-3258

［25］LIU H P，YU B J，ZHANG W H. Effect of osmotic stress on the activity of H+ -ATPase and the levels of covalently and nocovalently polyamines in plasma membrane preparation from wheat seedling roots［J］. Plant Science，2005，168 （6）：1599-1607

［26］吳旭紅，馮晶旻. 外源亞精胺對(duì)滲透脅迫下南瓜幼苗抗氧化酶活性等生理特性的影響［J］. 干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2017，35（4）：255-262

［27］李秀，鞏彪，徐坤. 外源亞精胺對(duì)高溫脅迫下生姜葉片內(nèi)源激素及葉綠體超微結(jié)構(gòu)的影響［J］. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，48（1）：120-129

［28］GILL S S，TUTEJA N. Polyamines and abiotic stress tolerance in plants［J］. Plant Signalingamp;Behavior，2010， 5（1）：26-33

［29］KUSANO T，BERBERICH T，TATEDA C，et al. Polyamines：essential factors for growth and survival［J］. Planta，2008，228（3）：367-381

［30］GHADERI N，SIOSEMANDEH A. Response to drought stress of two strawberry cultivars （cv.Kurdistan and Selva） ［J］. Horticulture，Environment and Biotechnology，2011，52（1）：6-12

［31］LAMBERS H，SHANE M W，CRAMER M D，et al. Root structure and functioning for efficient acquisition of phosphorus：Matching morphological and physiological traits ［J］. Annals of Botany，2006，98（4）：693-713

［32］SILINDILE P M，ALBERT T M，SAMSON Z T，et al. Maize grain soluble sugar and protein contents in response to simulated hail damage［J］. South African Journal of Plant and Soil，2018，35（5）：377-383

［33］MAACH M，BAGHOUR M，AKODAD M，et al. Overexpression of LeNHX4 improved yield，fruit quality and salt tolerance in tomato plants（Solanum lycopersicum L.）［J］. Molecular Biology Reports，2020，47（4）：4145-4153

［34］吳旭紅，馮晶旻. 外源亞精胺對(duì)PEG 脅迫下燕麥幼苗生長(zhǎng)及部分生理特性的影響）［J］. 麥類作物學(xué)報(bào)，2017，37（1）：122-129

［35］KASUKABE Y，HE L X，NADA K，et al. Overexpression of spermidine synthase enhances tolerance to multiple environmental stresses and up-regulates the expression of various stress-regulated genes in transgenic Arabidopsis thaliana［J］. Plant and Cell Physiology，2004，45（6）：712-722

［36］SHI H T，CHAN Z L. Improvement of plant abiotic stress tolerance through modulation of the polyamine pathway ［J］. Journal of Integrative Plant Biology，2014，56（2）：114-121

［37］杜紅陽，李青芝，楊青華，等. 亞精胺對(duì)滲透脅迫下小麥幼苗滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量和脯氨酸代謝酶活性的影響［J］. 麥類作物學(xué)報(bào)，2014，34（8）：1092-1097

［38］丁燕芳，梁永超，朱佳，等. 硅對(duì)干旱脅迫下小麥幼苗生長(zhǎng)及光合參數(shù)的影響［J］. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2007，13（3）：471-478

［39］姜義寶，崔國(guó)文，李紅. 干旱脅迫下外源鈣對(duì)苜?？购迪嚓P(guān)生理指標(biāo)的影響［J］. 草業(yè)學(xué)報(bào)，2005，5（14）：32-36

［40］魏曉凱，景延秋，何佶弦，等. 外源亞精胺對(duì)烤煙幼苗干旱脅迫的緩解效應(yīng)研究［J］. 作物雜志，2022（3）：143-148

［41］LI X，GONG B，XU K. Interaction of nitric oxide and polyamines involves antioxidants and physiological strategies against chilling-induced oxidative damage in Zingiber officinale Roscoe［J］. Scientia Horticulturae，2014（170）：237-248

（責(zé)任編輯" 彭露茜）