摘要:葉酸在促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、維持細(xì)胞活性、參與細(xì)胞增殖和分裂過(guò)程中起關(guān)鍵作用。彩色小麥富含花青素、鐵、鋅、硒等功能營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),人們對(duì)彩色小麥需求越來(lái)越大,為研究彩色小麥籽粒葉酸及衍生物的含量,以42 份不同粒色的小麥品種(系)為材料,利用高效液相色譜法測(cè)定了3 個(gè)生長(zhǎng)條件籽粒中四氫葉酸(tetrahydrofolate,THF)、5-甲基四氫葉酸(5-CH3-THF)、5-甲?;臍淙~酸(5-CHO-THF)和5,10-亞甲基四氫葉酸(5, 10-CH+THF) 4種葉酸衍生物的含量。結(jié)果表明,4種葉酸衍生物在不同粒色的小麥中均有分布,總?cè)~酸含量變異范圍較廣,變異系數(shù)為18.34%~21.10%,其中臨4179總含量為66.99 μg·100g-1,為高葉酸含量品種。5-CH3-THF和5-CHO-THF含量約為總?cè)~酸含量的70%,且與總?cè)~酸含量顯著相關(guān);紫粒和藍(lán)粒品種的總?cè)~酸平均含量分別為62.31和62.97 μg·100 g-1,顯著高于白粒(41.90 μg·100 g-1)和紅粒品種(44.36 μg·100 g-1);基因型效應(yīng)是影響總?cè)~酸含量的主要因素,環(huán)境因素的影響較小。研究結(jié)果為小麥葉酸生物強(qiáng)化品種的選育和栽培提供了有價(jià)值的信息。
關(guān)鍵詞:小麥;粒色;葉酸;衍生物
doi:10.13304/j.nykjdb.2024.0184
中圖分類號(hào):S512 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):10080864(2024)11005610
葉酸(維生素B9)是一種水溶性B族維生素,由四氫葉酸及其衍生物組成。作為生命體必需的微量營(yíng)養(yǎng)素,葉酸能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、維持細(xì)胞活性、參與細(xì)胞增殖和分裂,在機(jī)體的正常代謝和生長(zhǎng)發(fā)育中起著重要作用[1]。不同葉酸衍生物的區(qū)別主要在于吡嗪環(huán)上有不同取代物,以及與鄰位氨基苯甲?;劝彼峤Y(jié)合的谷氨酸殘基。缺乏葉酸會(huì)引發(fā)許多疾病,主要有巨幼細(xì)胞貧血、動(dòng)脈粥樣硬化和結(jié)直腸癌等[23]。對(duì)于孕婦而言,葉酸攝入不足可能會(huì)使嬰兒體重低,同時(shí)增加?jì)雰夯即诫窳?、心臟病和神經(jīng)管畸形等疾病的風(fēng)險(xiǎn)[4]。目前每年約有790萬(wàn)嬰兒患有出生缺陷,其中神經(jīng)管畸形的發(fā)生率約占10%[56]。因此,如何合理、有效地補(bǔ)充葉酸,防止葉酸缺乏逐漸引起人們的重視。植物和微生物可自身合成葉酸,而動(dòng)物和人類無(wú)法直接合成,必需依賴飲食攝入[7]。世界衛(wèi)生組織推薦的葉酸攝入量為成人400 μg·d-1,孕婦600 μg·d-1 [8],葉酸缺乏現(xiàn)象多在貧窮地區(qū)和發(fā)展中國(guó)家發(fā)生[7,910]。通過(guò)服用藥片和加工食品補(bǔ)充葉酸以及多樣化飲食來(lái)攝入天然葉酸是解決葉酸缺乏癥的常用方法[7]。然而,藥片和加工食品的成本較高,這一方法在欠發(fā)達(dá)地區(qū)難以實(shí)施,而且攝入過(guò)多人工合成的葉酸會(huì)提高全基因組水平DNA甲基化,進(jìn)而增加結(jié)腸癌、直腸癌和前列腺癌的患病風(fēng)險(xiǎn),還會(huì)導(dǎo)致認(rèn)知障礙[11-13]。由于經(jīng)濟(jì)制約、飲食習(xí)慣或缺乏穩(wěn)定的社會(huì)政策和持續(xù)的財(cái)政支持,世界上許多人無(wú)力消費(fèi)除主食外的各種飲食[14]。因此,利用育種或栽培措施富集主糧作物的葉酸是一種健康、覆蓋面廣且經(jīng)濟(jì)有效的方法,可使眾多欠發(fā)達(dá)地區(qū)人口受益。小麥?zhǔn)侨蚍N植廣泛和較重要的糧食作物之一,其籽粒中的葉酸主要以四氫葉酸(tetrahydrofolate, THF)、5- 甲基- 四氫葉酸(5-methyltetrahydrofolate, 5-CH3-THF)、5-甲?;?四氫葉酸(5-formyltetrahydrofolate, 5-CHO-THF)和5, 10-亞甲基- 四氫葉酸(5, 10-methylenetetrahydrofolate,5, 10-CH+THF)等形式存在[1516],培育富含葉酸的作物品種,通過(guò)日常飲食即可補(bǔ)充葉酸將有助于解決葉酸缺乏癥頻發(fā)的問(wèn)題[17]。
根據(jù)籽粒種皮顏色的差異,小麥可分為普通的紅粒和白粒小麥,以及藍(lán)色和紫色的彩色小麥。彩色小麥富含植物蛋白、膳食纖維、維生素、微量元素和花青素、黃酮、生物堿、植物甾醇等活性物質(zhì),對(duì)改善糖尿病、貧血病以及心腦血管疾病有一定的功效[18]。彩色小麥營(yíng)養(yǎng)豐富,常用于開(kāi)發(fā)功能保健食品[19]。不同小麥品種間的葉酸含量差異較大,Davis等[20]研究發(fā)現(xiàn),美國(guó)和加拿大的小麥中總?cè)~酸含量為16~81 μg·100 g-1;Piironen等[21]報(bào)道普通小麥總?cè)~酸含量范圍為32.3~77.4 μg·100 g-1;Arcot等[22]報(bào)道小麥總?cè)~酸含量達(dá)48~114 μg·100 g-1;Riaz 等[15]對(duì)中國(guó)北方地區(qū)315 個(gè)小麥品種的籽粒葉酸含量進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)不同小麥品種間總?cè)~酸含量變化范圍為10.15~91.44 μg·100 g-1;Zheng 等[16] 分析了262 份中國(guó)小麥微核心種質(zhì)的葉酸含量,總?cè)~酸含量變化范圍為22.68~111.77 μg·100 g-1。這些研究測(cè)定了小麥種質(zhì)中總?cè)~酸的含量,為葉酸的生物營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化提供了一定的理論依據(jù),但這些研究所選材料基本為普通小麥品種,暫無(wú)彩色小麥籽粒葉酸含量的研究,彩色小麥?zhǔn)欠窀缓~酸尚不明確。本研究采用高效液相色譜(high-performance liquid chromatography,HPLC)測(cè)定小麥籽粒中葉酸及其衍生物的含量,分析葉酸在不同粒色小麥中的分布規(guī)律和特點(diǎn),研究結(jié)果可為小麥生物營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化和主糧作物功能化提供有價(jià)值的信息。
1 材料與方法
1. 1 試驗(yàn)材料
1.1.1 小麥材料 供試材料為42份小麥 (Triticumaestivum L.)品種(系),籽粒種皮顏色包括紅色、白色、藍(lán)色和紫色,由本課題組收集。所有材料分別于2018年(E1)、2019年(E2)和2021年(E3)種植于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)小麥研究所試驗(yàn)基地(臨汾市36°2′N,111°18′ E),10月上旬播種,翌年6月中旬收獲。每份材料種4行,行長(zhǎng)2 m,每行40粒。田間管理與大田生產(chǎn)一致,小麥籽粒收獲后晾干留用。
1.1.2 試驗(yàn)試劑 THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF和5, 10-CH+THF 標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自瑞士SchircksLaboratories,純度分別為98.0%、98.4%、99.7% 和95.1%。甲醇、乙腈和甲酸(色譜純)均購(gòu)自上海麥克林生化有限公司。β-巰基乙醇、抗壞血酸、α-淀粉酶和小鼠血清等生物試劑購(gòu)自阿拉丁試劑(上海)有限公司。磷酸二氫鉀和三水磷酸氫二鉀為分析純,購(gòu)自上海生工生物工程股份有限公司。
1.1.3 試驗(yàn)主要儀器 1260 Infinity 高效液相色譜儀(Agilent Technology)、JFS-13A 型實(shí)驗(yàn)室旋風(fēng)式粉粹磨(杭州大成光電儀器有限公司)、SB-5200DT 超聲脫氣機(jī)(寧波新芝生物科技股份有限公司)、AllegraX-30R 高速低溫離心機(jī)(BeckmanCoulter)、MX-S 旋渦儀(SCILOGEX)。
1. 2 葉酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制備
準(zhǔn)確稱取THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF 和5, 10-CH+THF標(biāo)準(zhǔn)品各5.0 mg,分別轉(zhuǎn)移至10 mL棕色容量瓶中,用pH 7.0的20 mmol·L-1磷酸緩沖液(含質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)1% 的抗壞血酸和體積分?jǐn)?shù)0.1%的β-巰基乙醇)定容,均配置成質(zhì)量濃度為0.5 mg·mL-1 的葉酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,于-20 ℃冷凍儲(chǔ)藏,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)分別取葉酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋,此過(guò)程需在避光條件下進(jìn)行。
1.3 樣品制備及葉酸測(cè)定
將籽粒烘干至14%的含水量,使用旋風(fēng)式粉粹機(jī)將小麥籽粒磨粉(過(guò)100目篩),稱取0.10 g全麥粉加入1.0 mL新配置的磷酸緩沖液,使用漩渦儀充分混合。為防止葉酸衍生物相互轉(zhuǎn)化,首先沸水浴5 min,取出后迅速置于冰上冷卻,加入50 μL α-淀粉酶溶液混勻后37 ℃孵育30 min,每10 min振蕩1次。沸水浴3 min使α-淀粉酶滅活后迅速置于冰上冷卻,加入20 μL 小鼠血清后37 ℃孵育2 h,每20 min振蕩1次。經(jīng)小鼠血清孵育后,沸水浴3 min 滅活,冰上冷卻,4 ℃條件下12 000 r·min-1離心10 min,將上清液轉(zhuǎn)移至3 kD超濾離心管中離心30 min (4 ℃、12 000 r·min-1),取上清液-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
1.4 色譜參數(shù)及方法學(xué)驗(yàn)證
Agilent1260 高效液相色譜儀系統(tǒng)為AgilentChem Station,配備紫外檢測(cè)器,樣品環(huán)體積為20 μL,色譜柱為Akzo Nobel 100-5 C18分析柱,規(guī)格50.0 mm×2.1 mm。流動(dòng)相A和B分別為水和乙腈,二者均含體積分?jǐn)?shù)0.1% 的甲酸。流動(dòng)相過(guò)0.22 μm有機(jī)濾膜后經(jīng)超聲脫氣機(jī)20 min。梯度洗脫10 min,流速0.2 mL·min-1,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。進(jìn)樣器和色譜柱柱溫箱的溫度分別保持在4和25 °C。初始洗脫條件為95.0%流動(dòng)相A和5.0%流動(dòng)相B;在接下來(lái)的2 min內(nèi),流動(dòng)相B的比例從5.0%增加至9.0%;8 min時(shí),流動(dòng)相B 的比例從9.0% 增加至9.6%;隨后的2 min 內(nèi)B相的比例降低到初始的比例,最后達(dá)到平衡。葉酸標(biāo)準(zhǔn)品用于確定洗脫條件和保留時(shí)間,樣品中葉酸各衍生物通過(guò)保留時(shí)間鑒定,根據(jù)色譜系統(tǒng)Agilent Chem Station 自動(dòng)積分獲取峰面積,外標(biāo)法定量,每個(gè)樣品測(cè)定3次取平均值。
提取臨6308和晉麥47葉酸后分別以添加標(biāo)品和不加標(biāo)品的處理作為對(duì)照,測(cè)定3次取平均值,檢測(cè)各葉酸衍生物的加標(biāo)回收率;重復(fù)提取5次品臨6308葉酸,檢測(cè)葉酸衍生物含量,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deviation,RSD),評(píng)價(jià)檢測(cè)方法的精密度和準(zhǔn)確度。
1.5 數(shù)據(jù)處理
利用JMP Pro16 (2022 JMP Statistical DiscoveryLLC)求最佳線性無(wú)偏預(yù)測(cè)(best linear unbiasedprediction, BLUP)以及廣義遺傳力,使用SPSS26.0 (IBM SPSS Statistics;IBM Corp., Armonk, NY,United States)進(jìn)行相關(guān)性分析和差異顯著性比較,使用Origin 2022b繪制高效液相色譜圖及標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2 結(jié)果與分析
2.1 方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果
標(biāo)準(zhǔn)品THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF和5,10-CH+THF分別用磷酸緩沖液(20 mmol·L-1,pH 7.0)溶解,經(jīng)HPLC 分析,確定THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF 和5, 10-CH+THF 的保留時(shí)間分別為1.69、2.30、5.75和6.50 min(圖1)。從圖1可以看出,不同葉酸衍生物色譜圖基線平穩(wěn),標(biāo)品峰形較好,無(wú)明顯拖尾。不同葉酸衍生物標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度從低到高依次進(jìn)樣,峰面積外標(biāo)法進(jìn)行定量分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的線性良好,根據(jù)對(duì)應(yīng)的出峰時(shí)間和峰面積,代入相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線中即可求得樣品中葉酸衍生物的含量(圖2)。
檢測(cè)添加標(biāo)品和不加標(biāo)品的臨6308和晉麥47各葉酸衍生物含量,結(jié)果表明各葉酸衍生物的加標(biāo)回收率均在95.00%以上,進(jìn)一步說(shuō)明檢測(cè)方法準(zhǔn)確可靠(表1)。
選擇臨6308重復(fù)測(cè)定各葉酸衍生物含量以驗(yàn)證方法精密度,發(fā)現(xiàn)葉酸衍生物含量RSD均小于4.00%(表2),說(shuō)明提取和檢測(cè)方法具有較好精密度和重復(fù)性。
2.2 小麥籽粒葉酸含量分析
對(duì)3個(gè)環(huán)境下收獲的材料提取葉酸,4種葉酸衍生物在不同粒色的小麥中均有分布(表3)。不同小麥品種的總?cè)~酸含量變異范圍較大,變異系數(shù)為18.34%~21.10%;3個(gè)環(huán)境下含量范圍分別為35.49~71.02、37.29~69.50和33.60~66.67 μg·100 g-1,平均值分別為52.01、53.84和49.41 μg·100 g-1。E1環(huán)境下總?cè)~酸含量最高的3個(gè)品種分別為太紫372、臨4179、運(yùn)紫827;E2環(huán)境下為紫優(yōu)11、臨1547和臨4179;E3環(huán)境下為臨4179、紫優(yōu)11和運(yùn)紫827。其中臨4179 在3 個(gè)環(huán)境下總?cè)~酸含量均超過(guò)65 μg·100 g-1,是高葉酸含量的品種;臨6080 的5-CH3-THF含量在所有品種中最高。
2.3 粒色對(duì)小麥葉酸含量的影響
根據(jù)種皮顏色將小麥分為白粒、紅粒、藍(lán)粒和紫粒,對(duì)不同顏色籽粒中葉酸及衍生物含量進(jìn)行比較,結(jié)果(表4)表明,紫粒和藍(lán)粒小麥的總?cè)~酸含量分別為62.31和61.97 μg·100 g-1,白粒和紅粒小麥總?cè)~酸含量分別41.90和44.36 μg·100 g-1,紫粒和藍(lán)粒小麥的總?cè)~酸含量顯著高于白粒和紅粒小麥。紫粒和藍(lán)粒小麥的5-CH3-THF 和5-CHOTHF平均含量顯著高于白粒和紅粒小麥,而THF和5-CHO+THF含量差異不顯著。白粒和紅粒小麥以及紫粒和藍(lán)粒小麥相比,THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF和5,10-CH+THF以及總?cè)~酸含量均無(wú)明顯差異。紫粒和藍(lán)粒品種的5-CH3-THF、5-CHO-THF 和總?cè)~酸含量顯著高于白粒和紅粒品種。
2.4 各成分和種皮顏色與總量的相關(guān)性
對(duì)不同葉酸衍生物與總?cè)~酸含量進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果(表5)表明,5-CH3-THF和5-CHO-THF與總?cè)~酸的含量間存在顯著相關(guān)性,同時(shí)5-CH3-THF 和5-CHO-THF 之間也存在顯著相關(guān)性。種皮顏色與5-CH3-THF、5-CHO-THF 以及總?cè)~酸含量間存在顯著相關(guān)性,而THF和5,10-CH+THF與總?cè)~酸含量以及種皮顏色間相關(guān)性都不顯著。
2.5 基因型、環(huán)境及其互作對(duì)葉酸含量的影響
以3個(gè)環(huán)境下籽粒中各葉酸衍生物含量以及總?cè)~酸含量研究基因型(genotype,G)、環(huán)境(environment,E)及其互作(G×E)對(duì)葉酸含量的影響,結(jié)果(表6)表明,基因型效應(yīng)(G)和基因型與環(huán)境互作效應(yīng)(G×E) 對(duì)籽???cè)~酸含量的影響均達(dá)到極顯著水平?;蛐蛯?duì)4種葉酸衍生物的含量均有顯著影響;而環(huán)境條件僅對(duì)5-CH3-THF和5,10-CH+THF 有顯著影響。對(duì)THF、5-CHOTHF和總?cè)~酸含量的影響排序?yàn)镚gt;G×Egt;E,對(duì)5-CH3-THF變化的影響排序?yàn)镚gt;Egt;G×E,而對(duì)5,10-CH+THF 變化的影響排序?yàn)镚×Egt;Ggt;E。上述結(jié)果表明,基因型是影響葉酸含量的主要因素,環(huán)境因素對(duì)葉酸含量的影響較小。
3 討論
當(dāng)前葉酸測(cè)定方法主要有微生物法、紫外-可見(jiàn)分光光度法、熒光分析法、高效液相色譜法等[23-27]。微生物法是經(jīng)典的葉酸測(cè)定方法,根據(jù)微生物對(duì)樣品中葉酸的吸收程度從而對(duì)葉酸進(jìn)行定量,能測(cè)定基質(zhì)中總?cè)~酸的含量。微生物法檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確且成本低,但只能檢測(cè)待測(cè)樣品中總?cè)~酸的含量,不同的葉酸衍生物無(wú)法區(qū)分,且實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)、批次間檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性較差。紫外-分光光度法操作簡(jiǎn)便,對(duì)提取條件要求低,但只能測(cè)定葉酸總量,無(wú)法檢測(cè)不同組分含量,且溶劑種類易造成較大誤差。熒光分析法雖較紫外分光光度法靈敏度較高,但是葉酸本身發(fā)射出的熒光強(qiáng)度較弱,因此常需加入敏化劑,如高錳酸鉀、芬頓試劑或過(guò)硫酸鉀等,而敏化劑的加入常使測(cè)定結(jié)果誤差變大。高效液相色譜法對(duì)不同的葉酸衍生物分離效果好、選擇靈敏性強(qiáng),可與多種技術(shù)聯(lián)用,是目前使用最廣泛的葉酸檢測(cè)方法,已應(yīng)用于果蔬和作物中不同葉酸衍生物含量的測(cè)定[28-30]。因此,本研究采用了高效液相色譜法來(lái)測(cè)定小麥籽粒中的葉酸含量。已有研究表明,THF、5-CH3-THF、5-CHO-THF 和5, 10-CH+THF 這4種葉酸衍生物占小麥籽???cè)~酸含量的90%以上,是小麥籽粒中葉酸的主要存在形式[1516,3132]。由于種質(zhì)來(lái)源和測(cè)定方法的不同,前人對(duì)小麥籽粒中葉酸含量的測(cè)定結(jié)果略有差異。Piironen等[21]采用微生物法測(cè)定了種植在同一地點(diǎn)的150份小麥品種的總?cè)~酸含量,含量范圍為32.3~77.4 μg·100 g-1,同時(shí)他們選用高效液相色譜法分析了9 份小麥品種中不同葉酸衍生物的含量,5-CHO-THF 是小麥葉酸的主要存在形式。Riaz等[15]采用高效液相色譜法測(cè)定了360份小麥品種中葉酸的含量,范圍為(10.15±2.86)~(91.44±5.64) μg·100 g-1,5-CH3-THF 和5-CHO-THF 是小麥籽粒中葉酸的主要存在形式,這與本文的研究結(jié)果一致。但Riaz等[15]的研究結(jié)果中不同環(huán)境下的共有品種數(shù)較少,本文篩選到多個(gè)環(huán)境中葉酸總含量均高于65 μg·100 g-1的品種有臨4179,同時(shí)臨6080的5-CH3-THF含量顯著高于其余品種,這些材料可為生物強(qiáng)化品種選育提供種質(zhì)資源。
彩色小麥籽粒的顏色越深,其花青苷的含量越高,可達(dá)常規(guī)小麥的2~6倍,同時(shí)藍(lán)粒和紫粒小麥品種的品質(zhì)性狀普遍優(yōu)于白粒品種[33]。但葉酸含量是否與種皮顏色有關(guān),目前暫無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。本文通過(guò)比較42份不同粒色小麥的葉酸含量,發(fā)現(xiàn)藍(lán)粒和紫粒小麥總?cè)~酸含量顯著高于紅粒和白粒種質(zhì),但紅粒和白粒種質(zhì)間及藍(lán)粒與紫粒小麥種質(zhì)間總?cè)~酸含量無(wú)明顯差異,可能是因?yàn)橄噍^于紅粒和白粒種質(zhì),藍(lán)粒和紫粒小麥的種皮和糊粉層含有較多的次生代謝產(chǎn)物,在代謝產(chǎn)物積累的同時(shí)也積累了葉酸不同衍生物。但需要注意的是,造成不同粒色間葉酸含量差異的原因也可能與本實(shí)驗(yàn)選擇的品種數(shù)偏少有關(guān)。Shewry等[34]將相同小麥品種種植到不同國(guó)家,收獲后測(cè)定籽粒中葉酸的含量,發(fā)現(xiàn)環(huán)境對(duì)總?cè)~酸含量影響顯著,基因型的影響較小。Riaz等[15]發(fā)現(xiàn),小麥葉酸含量除受環(huán)境影響之外,基因和基因×環(huán)境互作效應(yīng)對(duì)葉酸含量的影響也達(dá)到極顯著水平。這與本文得出基因型是影響葉酸含量的關(guān)鍵因素的結(jié)論不一致,可能是由于Shewry 等[34]和Riaz等[15]的研究采用的材料份數(shù)較少或不同環(huán)境下的共有品種數(shù)較少,不能準(zhǔn)確分析基因型和環(huán)境對(duì)小麥葉酸含量的影響。Zheng等[16]以中國(guó)小麥微核心種質(zhì)為材料,測(cè)定不同環(huán)境下收獲的籽粒葉酸含量,發(fā)現(xiàn)影響葉酸含量的主要因素是基因型,本文測(cè)定了42份不同粒色的小麥在不同環(huán)境下收獲后籽粒的葉酸含量,得出了一致的結(jié)論。這些結(jié)果為今后小麥葉酸及衍生物營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化品種的選育和推廣提供了有價(jià)值的信息。
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