紀曉紅 張 莉 邱 娟

(山東省化工研究院，濟南 250014)

山東省化工研究院生化室研發(fā)出通過間苯二胺酸解制備間苯二酚的新工藝，此工藝克服了傳統(tǒng)工藝的一些缺點，提高了反應(yīng)收率。為了更好地控制工藝流程，保證實驗的順利進行，提高反應(yīng)收率，需要進行中控分析，即需要檢測間苯二胺酸解反應(yīng)液中間苯二酚的含量?！吨腥A人民共和國藥典》中有間苯二酚的化學分析方法[1]，但僅限于間苯二酚成品的分析，對于新工藝酸解反應(yīng)液中間苯二酚含量的測定不適用。因為間苯二酚反應(yīng)液中除了有間苯二酚外還有少量未反應(yīng)間苯二胺和中間體間氨基酚以及其它雜質(zhì)，它們對分析結(jié)果有較大影響。現(xiàn)有文獻資料中均未見間苯二酚的定量方法，因此筆者研究了采用高效液相色譜法測定間苯二酚反應(yīng)液中間苯二酚含量的方法。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

液相色譜儀：LC-10ATvp型，附帶SPA-10Avp可變紫外檢測器，日本島津公司；

N2000雙通道色譜工作站；

紫外光柵分光光度計：752型，上海第三分析儀器廠；

間苯二酚標準樣品：分析純，含量為99.5%，天津市大茂化學試劑廠；

甲醇：一級色譜純，天津四友精細化學品有限公司；

乙酸：分析純，山東省化工研究院；

實驗用水為自制二次蒸餾水。

1.2 色譜條件

色譜柱：Diamonsil ODS(150 mm×4.6 mm, 5 μm)；流動相為A∶B=5∶95混合溶液(A為乙腈，B為5 mmol/L 1,8-二胺辛烷與20 mmol/L庚磺酸鈉水溶液混合后調(diào)節(jié)至pH 4.5)，流速為1.0 mL/min；UV檢測波長：276 nm；進樣量：5 μL。

1.3 實驗方法

(1)標準貯備液配制

稱取0.2 g間苯二酚標準樣品(準確至0.000 2 g)置于100 mL容量瓶中，用高純水溶解并稀釋至刻度。

(2)標準曲線與線性范圍

用移液管精確吸取標準貯備液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL分別置于10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，過濾。待儀器穩(wěn)定后，按1.2色譜條件進樣分析，記錄峰面積。對峰面積A與濃度c進行線性回歸，得線性方程為A=4.84×109c+16 035(r2=0.999 6)，間苯二酚濃度在0.1～0.5 g/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

(3)標準溶液制備

精確吸取標準貯備液2 mL置于10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，過濾，備用。

(4)樣品溶液制備

精確稱取約0.1 g樣品﹙準確至0.000 2 g﹚置于10 mL容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，過濾，備用。

(5)間苯二酚含量測定

按1.2色譜條件，待儀器工作狀態(tài)穩(wěn)定后，按下列程序進樣分析：(a)樣品溶液；(b)標樣溶液；(c)標樣溶液；﹙d﹚樣品溶液，分別進樣5 μL，記錄峰面積，用外標法[2]計算間苯二酚含量。

1.4 結(jié)果計算

間苯二酚反應(yīng)液中間苯二酚的含量按式(1)計算:

(1)

式中：X——間苯二酚的含量，%；

A2——a、d兩針反應(yīng)液中間苯二酚峰面積的平均值；

m1——間苯二酚標樣的質(zhì)量，g；

P——間苯二酚標樣的質(zhì)量分數(shù)，%；

A1——b、c兩針間苯二酚標樣峰面積的平均值；

m2——間苯二酚反應(yīng)液的質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動相的選擇

反應(yīng)液中雜質(zhì)較多，其中含量較大的有未反應(yīng)完全的原料間苯二胺和中間體間氨基酚。起初采用甲醇和水混合液，由于甲醇的洗脫能力較弱，主峰峰形很不理想，因此改為乙腈和水進行實驗。首先采用乙腈-水(體積比為60∶40)作為流動相，但分離度太小，主峰與主要雜質(zhì)間苯二胺、間氨基酚無法分開。后來增加流動相中水的體積分數(shù)：V(乙腈)∶V﹙水﹚=20∶80、V(乙腈)∶V(水)=10∶90，主峰與主要雜質(zhì)的分離度變大，但是間苯二酚的色譜峰拖尾明顯。最后將乙腈和水的體積比調(diào)整為5∶95，且加入了少量的緩沖鹽并調(diào)節(jié)至pH 4.5，發(fā)現(xiàn)可以使間苯二酚主峰與各種主要雜質(zhì)峰得到很好的分離而且主峰峰形好，色譜圖如圖1所示。間苯二酚的保留時間為9.432 min。

1—間苯二胺； 2—間氨基酚； 3—間苯二酚圖1 間苯二酚反應(yīng)液色譜圖

2.2 檢測波長的選擇

根據(jù)文獻[3]并經(jīng)過實驗驗證可知，間苯二酚在(276±1)nm的波長處有最大吸收。雖然反應(yīng)液中除間苯二酚外還有較多的中間體間氨基酚和未反應(yīng)的間苯二胺，因主要是測定反應(yīng)中間苯二酚的含量，故不考慮間氨基酚和間苯二胺，因此選擇檢測波長為276 nm。

2.3 方法的精密度與檢出限

取間苯二酚含量為0.4 g/L的標準溶液在1.2色譜條件下平行進樣8次，8次色譜峰面積測定結(jié)果的相對偏差為0.85%。在1.2色譜條件下，將標準溶液稀釋一定倍數(shù)，進樣分析，以S/N=3計算方法的檢出限為0.2 μg/L。

2.4 回收試驗

分別在已知含量的樣品中加入一定量的間苯二酚標準樣品，平行進樣3次進行測定，計算回收率，結(jié)果見表1。

表1 回收試驗結(jié)果

3 結(jié)語

采用高效液相色譜法測定間苯二酚反應(yīng)液中間苯二酚的含量，測定結(jié)果準確可靠，為整個工藝流程的控制、反應(yīng)收率的提高提供了理論依據(jù)。該方法也適用于廢水中間苯二酚含量的檢測以及間苯二酚成品的分析。

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典(第二部)[M].第2版.北京：化學工業(yè)出版社，人民衛(wèi)生出版社,1990：251-252.

[2] 汪正范.色譜定性與定量[M].北京：化學工業(yè)出版社，2000：205.

[3] 鞠秀蘭.皮炎寧酊中抗氧劑的選擇與間苯二酚和水楊酸的測定[J].藥物分析雜志，1992，12(3)：169-170.