柯俊華,陳金水

病毒性心肌炎(viralmyocarditis,VMC)是指嗜心肌性病毒感染引起的以心肌非特異性間質(zhì)性炎癥為主要病變的心肌炎。病毒性心肌炎是常見的心血管疾病之一,其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,目前尚無特異的治療方法。近年來大量研究表明多種中藥對(duì)病毒性心肌炎有良好的治療作用,對(duì)其作用機(jī)制的研究也較為全面,中藥現(xiàn)已成為治療病毒性心肌炎的重要藥物。

1 中藥對(duì)實(shí)驗(yàn)性病毒性心肌炎的檢測(cè)指標(biāo)及結(jié)果

常用藥效作用指標(biāo)主要有,基礎(chǔ)指標(biāo):小鼠存活率、心臟與體重比例等;病理學(xué)指標(biāo):心肌組織切片,或利用電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)觀察病理改變,主要為心肌細(xì)胞的溶解、壞死、變性水腫等,或表現(xiàn)為心肌纖維之間和血管周圍結(jié)締組織中炎性細(xì)胞浸潤(rùn);心肌酶學(xué)指標(biāo):血清心肌酶釋放水平,如肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)及乳酸脫氫酶(LDH)等升高是診斷心肌炎的重要條件[1];細(xì)胞因子:細(xì)胞因子在病毒誘發(fā)的炎癥和感染后免疫反應(yīng)的產(chǎn)生及進(jìn)展過程中起橋梁作用,致炎因子白介素(IL)-1、IL-6和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等在病毒性心肌炎中起加速心臟失衡,抗炎因子 IL-4、IL-10、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)、干擾素-γ(IFN-γ)減輕心肌損害[2]。炎癥中選擇素和整合素的作用,是近年來免疫生物學(xué)和分子免疫學(xué)研究的熱點(diǎn),趨化因子血管細(xì)胞黏附分子-1(VCAM-1)和細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)也是重要指標(biāo)之一[3],另外氧自由基所致的脂質(zhì)過氧化對(duì)心肌損害亦起著重要作用,Suzuki等[4]研究發(fā)現(xiàn)VMC小鼠模型心肌損傷越重,心肌超氧化物歧化酶(SOD)含量越低,丙二醛(MDA)含量越高。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕_定多種中藥,成藥和注射液在治療柯薩奇病毒B3(CVB3)所致病毒性心肌炎的作用和量效關(guān)系。是否顯效均是從各醫(yī)家在臨床中應(yīng)用以及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果中得到體現(xiàn),實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)主要通過接種柯薩奇病毒的Balb/c小鼠造模后,用灌胃或腹腔注射等給藥途徑,觀察不同劑量中藥對(duì)病毒性心肌炎小鼠的治療作用。

2 單味中藥對(duì)病毒性心肌炎作用機(jī)理的研究

2.1 黃芪 黃芪有效成分中含有豐富的多糖、生物堿、皂苷等。病毒感染可引發(fā)心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子超載,又引發(fā)心肌細(xì)胞異常動(dòng)作電位,郭棋等[5]證實(shí)了黃芪有鈣拮抗作用,可減少病毒感染所致的心肌內(nèi)鈣流量并且顯著抑制CVB3核酸復(fù)制。楊英珍等不但發(fā)現(xiàn)黃芪對(duì)實(shí)驗(yàn)性病毒性心肌炎有效,且已初步闡明了其主要機(jī)制除了抗病毒還有:①調(diào)節(jié)T細(xì)胞免疫,減輕心肌炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和縮小心肌壞死面積。②提高NK細(xì)胞的活性及IFN-γ的水平[6]。羅永姣等[7]試驗(yàn)證明黃芪甲甙使過氧化氫酶(CAT)、SOD等活性增強(qiáng),這種抗氧化作用對(duì)小鼠CVB3病毒性心肌炎具有明顯的保護(hù)作用。

2.2 丹參 丹參具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈增加冠脈血流量(改善心肌缺血狀態(tài)作用),能抑制心肌損傷后兒茶酚胺、氧自由基(OFR)以及單胺類物質(zhì)等內(nèi)源性化學(xué)因子和致炎細(xì)胞因子的生成和釋放,抑制脂質(zhì)過氧化,減少對(duì)心肌組織的損害[8]。

2.3 苦參 苦參藥理學(xué)研究證明可通過提高心肌舒張期興奮閾值和延長(zhǎng)有效不應(yīng)期而治療心律失常,陳曙霞等[9]臨床上在病毒性心肌炎患者使用苦參提取液治療發(fā)現(xiàn)其在提高NK細(xì)胞活性,增加心排血量,恢復(fù)心功能,減少左心室重量和重量指數(shù)等方面均有明顯優(yōu)勢(shì)。

2.4 虎杖 王衛(wèi)華等對(duì)虎杖提取液對(duì)CVB3體外的影響進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究顯示虎杖提取液既能直接殺死CVB3又能抑制其生物合成,但不能阻斷CVB3吸附敏感細(xì)胞。王志潔[10]進(jìn)一步證實(shí)虎杖抗CVB3的主要有效成分為虎杖蒽醌化合物,作用效果是病毒唑的(1～27)倍,其通過抑制病毒生物合成和直接殺死兩個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮抗CVB3作用。

2.5 紅景天 孫寒等[11]利用BALB/C小鼠建立了CVB3病毒感染心肌炎動(dòng)物模型,研究高山紅景天酪醇對(duì)模型小鼠免疫功能及體內(nèi)抗氧化酶活性的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)紅景天酪醇治療組比病毒對(duì)照組高209%,與正常對(duì)照組差異不明顯。紅景天酪醇可以促進(jìn)小鼠脾臟淋巴細(xì)胞的增殖活性,治療組中的NK細(xì)胞活性是病毒對(duì)照組的4倍,與正常對(duì)照組無明顯差異。同時(shí),心肌組織中的SOD和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)二種抗氧化酶活性明顯增加,血清中的過氧化脂質(zhì)(LPO)含量和LDH活性下降。

2.6 其他 在已知的這些具有抗CVB3作用的天然藥物中,還有許多有效中藥:貫眾對(duì)早期病毒感染效果明顯,黨參、西洋參能直接興奮心肌,加強(qiáng)心肌收縮力,增加心排血量,改善循環(huán),增強(qiáng)機(jī)體的特異性抵抗力,發(fā)揮抗CVB3作用。有的不能直接殺死CVB3而是通過抑制其生物合成,有抗菌消炎抗病毒作用,如貫眾、板藍(lán)根、大黃、連翹、苦瓜、大蒜等;有的既能直接殺死又能抑制CVB3的生物合成,如虎杖、桑寄生等;有的通過保護(hù)心肌細(xì)胞,改善心律失常起作用,如苦參、丹參、草蓯蓉、空心蓮子草、甘草等。

3 中藥復(fù)方對(duì)病毒性心肌炎作用機(jī)制的研究

3.1 復(fù)方對(duì)心肌炎中病毒的作用 程志清[12]利用斑點(diǎn)雜交技術(shù)研究了清心飲(由生曬參、麥冬、丹參、瓜蔞皮、銀花、黃連等組成)對(duì)感染心肌細(xì)胞CVB3-RNA復(fù)制的影響,結(jié)果表明在心肌細(xì)胞總含量相同的情況下,病毒加清心飲血清組陽性雜交信號(hào)指數(shù)最低,與病毒空白血清組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),表明清心飲血清在培養(yǎng)心肌細(xì)胞中有效地抑制了CVB3-RNA的復(fù)制。陳光亮等[13]通過實(shí)驗(yàn)證明,由生曬參、苦參、瓜蔞、麥冬等藥組成的心肌爾康沖劑無論體內(nèi)體外均能抑制柯薩奇病毒復(fù)制,在體內(nèi)通過直接抗病毒及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,達(dá)到降低小鼠死亡率,延長(zhǎng)存活時(shí)間。

3.2 復(fù)方的營養(yǎng)心肌及抗氧化作用 趙美華等[14]發(fā)現(xiàn)VMC患者血中SOD、GSH-Px明顯低于健康人,MDA明顯高于健康人,而生脈散組患者血中SOD、GSH-Px較服藥前明顯增加,MDA顯著降低,證明生脈散能夠抑制氧自由基的生成,具有抗脂質(zhì)過氧化作用。鄭善子等[15]在小鼠病毒模型試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)炙甘草湯合生脈散加減液明顯減輕感染病毒后心肌病變,改善心肌細(xì)胞活性,明顯降低心肌細(xì)胞釋放酶(乳酸脫氫酶、磷酸肌酸激酶)活性,減輕超微結(jié)構(gòu)病變。王雪峰等[16]體外培養(yǎng)病毒性心肌炎大鼠心肌細(xì)胞后,予小柴胡湯治療,發(fā)現(xiàn)治療組細(xì)胞線粒體細(xì)胞色素氧化酶酶活性強(qiáng)度接近正常水平。王雪峰等[16]更在后來試驗(yàn)中證明小柴胡湯在亞急性期可能減少IL-2R及FasL表達(dá),從而減輕后期機(jī)體免疫紊亂對(duì)心肌的損傷。

3.3 復(fù)方針對(duì)細(xì)胞因子免疫的作用 病毒性心肌炎存在免疫失常,包括 TH1/TH2失衡、NK細(xì)胞活性降低等。高玉峰等[17]發(fā)現(xiàn)可利用生黃合劑(由黃芩莖葉總黃酮和傳統(tǒng)名方生脈飲組成)對(duì)模型鼠血清IL-2及IL-10進(jìn)行調(diào)節(jié),可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)來調(diào)節(jié)TH平衡,降低TH1類細(xì)胞因子水平,提高TH2類細(xì)胞因子的濃度。第14天1∶1液組小鼠血清中IL-10水平高于其他各組,IL-2水平低于病毒對(duì)照組。劉強(qiáng)等[18]用清心飲后通過分別測(cè)定病毒感染后 10 d小鼠脾臟中的T淋巴細(xì)胞量群和NK細(xì)胞活性,以及血清中的 ICAM-1、TNF-α與IL-2,發(fā)現(xiàn)明顯抑制 VM C小鼠血清中ICAM-1、TNF-α及IL-2的表達(dá),調(diào)節(jié)紊亂的免疫吸附作用,減少免疫效應(yīng)細(xì)胞對(duì)心肌的攻擊。曹紅欣[19]采用雙抗體夾心ELISA法,測(cè)定了Bala/c小鼠感染CVB3后不同時(shí)期血清的 TNF-α、IL-6的水平變化以及藥物參白口服液對(duì)它的影響,發(fā)現(xiàn)中藥參白口服液高劑量組含量基本接近正常鼠含量,并且TNF-α、IL-6水平明顯低于病毒組,推斷參白口服液可能通過調(diào)節(jié)這些細(xì)胞因子而起防治作用。

4 小 結(jié)

中醫(yī)藥是我國的瑰寶,從以上論述中可以發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥對(duì)病毒性心肌炎的實(shí)驗(yàn)研究越來越廣泛,采用中藥及中西醫(yī)結(jié)合治療病毒性心肌炎大大提高了療效,充分顯示出中醫(yī)藥治療病毒性心肌炎的廣闊前景。但也存在一些不足,就單種中藥而言,其作用相對(duì)于復(fù)方較為局限,這就要求在臨床中根據(jù)患者的不同病情,選用幾種中藥合用的復(fù)方以提高療效。同時(shí),對(duì)中藥試驗(yàn)研究一直以西醫(yī)理論為指導(dǎo),而辨證施治一直是中醫(yī)的特色,根據(jù)辨證應(yīng)用的中成藥研究仍然很少,促進(jìn)現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)研究和臨床治療效果結(jié)合的合理化用藥以及進(jìn)一步開發(fā)中藥與西藥標(biāo)準(zhǔn)化治療相對(duì)比的中西醫(yī)結(jié)合方法也是今后研究的重點(diǎn)。

[1]張淑芹,孫非,劉志屹,等.病毒抗體、心肌抗體、心肌酶三種檢測(cè)指標(biāo)在病毒性心肌炎診斷中的應(yīng)用[J].吉林醫(yī)學(xué),2003,12(24):505-506.

[2]Lenzo JC,Mantield JP,Sivamoorthy S,et al.Cy tokine expression in reline cytomegalovims-induced myocardifis:Medulafton tllinterferon-atherapy[J].Cellular Immunol,2003,223(1):77-86.

[3]丁桂鳳.免疫系統(tǒng)在病毒性心肌炎發(fā)病中的作用[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2002,33(1):30-37.

[4]Suzuki H,Matsumon A,M atoba Y,et al.Enhanced expression of supeoxide dismulase messenger RNA in viral myocarditis:An SH-dependent reduction of its expression and myocardial mury[J].J Clm Linlneal,1993,91:272.

[5]郭棋,彭天慶,楊英珍,等.黃芪對(duì)柯薩奇B3病毒感染培養(yǎng)大鼠心肌鈣離子內(nèi)流及該病毒RNA復(fù)制的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1995,15(8):483-485.

[6]Zhang ZC,Yang YZ,Li SJ,et al.Effect of astragaloside on myocardial fibrosis in viral myocarditic mice[J].New Drugs Clin Rem(in Chinese),2003,22:515-519.

[7]羅永姣,李雙杰,劉紅英.黃芪甲甙對(duì)小鼠柯薩奇B3病毒性心肌炎的抗氧化作用[J].中國動(dòng)脈硬化雜志,2008,16(3):205-208.

[8]李彥清.丹參輔助綜合療法治療病毒性心肌炎的療效觀察[J].中外醫(yī)療,2008,20:77.

[9]陳曙霞,梅尚文,王平全,等.抗柯注射液治療柯薩奇B3病毒性心肌炎及其機(jī)理研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1997,17(4):207.

[10]王志潔.虎杖蒽醌化合物抗CVB3病毒的實(shí)驗(yàn)研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),1999,22(2):41-43.

[11]孫寒,孫非,張淑芹,等.中藥復(fù)方制劑抗病毒性心肌炎的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,1999,5(3):27-30.

[12]程志清.清心飲對(duì)實(shí)驗(yàn)VMC小鼠的治療與免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中醫(yī)藥科技,2000,7(1):13-15.

[13]陳光亮,王欽茂,龔瑾貞,等.心肌爾康沖劑抗柯薩奇B3病毒作用的初步研究[J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1996,15(5):53.

[14]趙美華,榮燁之,呂寶金,等.生脈散對(duì)急性病毒性心肌炎患者血清脂質(zhì)過氧化物的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,1996,16(3):207.

[15]鄭善子,申成華,樸花子.生脈散復(fù)方制劑對(duì)體外感染柯薩奇B3病毒的大鼠心肌細(xì)胞的影響[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2007(6):27-28.

[16]王雪峰,劉芳,李冬梅,等.小柴胡湯對(duì)心肌炎小鼠 IL-2R及FasL表達(dá)的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志,2001,28(7):439-440.

[17]高玉峰,李素婷.生黃合劑對(duì)病毒性心肌炎小鼠血清IL-2及IL-10的影響[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2007,18(2):424-425.

[18]劉強(qiáng),李樹雯,程志清,等.清心飲對(duì) VMC小鼠細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2002,13(3):154-156.

[19]曹紅欣.病毒性心肌炎血清 TNF-α,IL-6,IFN-γ的變化及參白口服液防治作用的研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2002,9:145-147.