胡仲秋，洪小迪，岳田利

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

光皮木瓜綠原酸的提取及抗菌活性測(cè)定

胡仲秋，洪小迪，岳田利

(西北農(nóng)林科技大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

為提高木瓜的利用價(jià)值，首次利用甲醇研究光皮木瓜中綠原酸的最佳提取工藝，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)考察浸提溶劑體積分?jǐn)?shù)、浸提溫度、浸提料液比和浸提時(shí)間對(duì)綠原酸提取的影響，并初步考察綠原酸樣品液對(duì)志賀氏痢疾桿菌及金黃色葡萄球菌的抗菌活性。結(jié)果表明從木瓜中提取綠原酸的最佳工藝條件為：以85%甲醇溶液(85:15，V/V)浸提木瓜粉、浸提料液比1:30(g/mL)、浸提溫度40℃、浸提時(shí)間14h。在該工藝條件下，綠原酸的最高產(chǎn)率可達(dá)到0.142%。綠原酸提取液對(duì)志賀氏痢疾桿菌和金黃色葡萄球菌具有明顯的抗菌活性，表明民間所用的木瓜白酒浸泡液的主要藥理活性成分可能為綠原酸。

光皮木瓜；綠原酸；提取優(yōu)化；抗菌活性；志賀氏痢疾桿菌；金黃色葡萄球菌

綠原酸(chlorogenic acid)是許多食用植物及藥用植物中抗菌消炎、清熱解毒的重要活性成分[1-4]，有研究認(rèn)為，綠原酸是很有希望的抗艾滋病毒(HIV)的先導(dǎo)化合物[5]，它具有清除自由基[6-7]、抗脂質(zhì)過氧化[8]和抗菌抗病毒等作用[9-10]。國內(nèi)外一些學(xué)者從植物中提取多酚(綠原酸作為多酚中的一個(gè)組分)，并考察了綠原酸的活性[11-12]。然而，很少有人從資源豐富的木瓜中提取綠原酸并研究其活性。木瓜為薔薇科植物貼梗海棠[Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai]的成熟果實(shí)，有平肝和胃、去濕舒筋的功效，常用于治療腰酸腿痛、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、四肢轉(zhuǎn)筋、吐瀉等癥[13-14]。在民間醫(yī)術(shù)中，木瓜常用水或酒精浸泡，飲用后可以治腹瀉和腫脹。木瓜在我國廣泛種植，為我國特有古老果樹之一，而且產(chǎn)量極大，僅云南省木瓜年產(chǎn)量就達(dá)5×106kg，現(xiàn)在山東、河南、陜西、安徽、江蘇、湖北、四川、浙江、江西、廣東、廣西等省(區(qū))都有栽培。本實(shí)驗(yàn)基于我國豐富的木瓜資源，研究光皮木瓜中綠原酸的甲醇提取法及其最佳工藝，并根據(jù)民間用木瓜白酒浸泡液治療腹瀉和腫脹，初步考察綠原酸對(duì)志賀氏痢疾桿菌及金黃色葡萄球菌的抗菌活性。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器

鮮光皮木瓜(干燥后制成粉狀)，采于西北農(nóng)林科技大學(xué)；綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品 中國藥品生物制品檢定所；金黃色葡萄球菌CVM14、志賀氏桿菌CMCC56由西北農(nóng)林科技大學(xué)食品微生物安全試驗(yàn)室楊保偉博士恵贈(zèng)。

甲醇(分析純)；正己烷、氯仿(均為分析純)；蒸餾水；甲醇(色譜純) 美國Fisher公司。

MP200B電子天平 上海精科天平儀器廠；電熱恒溫水浴鍋 楊凌天成公司；SHB-III循環(huán)水式多用真空泵鄭州長城科工貿(mào)有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 瑞士Buchi公司；PK121R離心機(jī) 意大利ALC公司；UV mini 1240紫外分光光度計(jì)和Lc2010型高壓液相色譜儀 日本Shimadzu公司；PL202-S精密電子天平 瑞士梅特勒-托利多公司；CNP-9080隔水式恒溫培養(yǎng)箱 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限責(zé)任公司；ClassⅡ生物安全柜 美國 Nuaire公司。

1.2 木瓜中綠原酸的甲醇提取工藝以及工藝優(yōu)化方法

1.2.1 提取工藝

工藝流程：200g干燥的木瓜片→粉碎成粉狀(60目過篩)→加入甲醇浸提(2000mL)→抽濾→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(60℃旋轉(zhuǎn)至100mL)→冷凍干燥得51.3g固體→取7g加入150mL蒸餾水充分溶解→加入100mL正己烷萃取→加入100mL氯仿→濾紙過濾→通過0.22μm水系濾膜過濾→獲得濾液80mL→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(60℃旋轉(zhuǎn)至50mL)→冷凍干燥得2.0g綠原酸粗品。

檢測(cè)步驟：取2.0g綠原酸粗品和綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品0.020g分別于100mL的容量瓶中用蒸餾水溶解并定溶，即得到樣品液和0.2g/L綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)液稀釋10倍后為0.02g/L的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。樣品液和0.02g/L標(biāo)準(zhǔn)溶液分別通過0.45μm水系濾膜過濾，分別上高壓液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。流動(dòng)相為甲醇-水(3:7，V/V)，流速0.8mL/min，紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長設(shè)定為329nm，用Dikma HPLC反相C18柱(250mm×46mm，5μm)分離，確證提取液中是否含有綠原酸。

1.2.2 光皮木瓜綠原酸提取的單因素試驗(yàn)

采用1.2.1節(jié)提取工藝，用紫外-可見分光光度計(jì)檢測(cè)綠原酸含量。

1.2.2.1 甲醇溶液的選擇

精確稱取5.00g木瓜粉，分別用體積分?jǐn)?shù)50%、70%、90%、100%甲醇溶液100mL作為浸提劑， 40℃水浴浸提12h。按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行操作。

1.2.2.2 浸提時(shí)間的選擇

精確稱取5.00g木瓜粉，用100mL 70%甲醇溶液作為浸提劑，分別在40℃水浴下浸提8、12、24、36h，按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行操作。

1.2.2.3 浸提溫度的選擇

精確稱取5.00g木瓜粉，用100mL 70%甲醇溶液作為浸提劑，分別在30、40、50、60℃水浴下浸提12h，按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行操作。

1.2.2.4 料液比的選擇

按照浸提料液比為1:10、1:20、1:30、1:40(g/mL)精確稱取10.00、5.00、3.33、2.50g木瓜粉，用100mL 70%甲醇溶液作為浸提劑，在40℃水浴下浸提12h，按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行操作。

1.2.3 木瓜中綠原酸的甲醇提取法正交試驗(yàn)

將甲醇溶液體積分?jǐn)?shù)、浸提時(shí)間、浸提溫度、浸提料液比4個(gè)因素，分別設(shè)計(jì)3個(gè)不同水平，選擇L9(34)正交試驗(yàn)表(表1)，按照1.2.2節(jié)方法進(jìn)行試驗(yàn)。

表1 甲醇提取法提取木瓜中綠原酸因素水平表Table 1 Factors and levels for extracting chlorogenic acid from Chaenomeles sinensis Koehne

1.2.4 正交試驗(yàn)預(yù)期最佳組合驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

從正交試驗(yàn)中得到的最佳組合如果沒有在正交試驗(yàn)表中，則進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

1.2.5 光皮木瓜甲醇提取物中綠原酸的檢測(cè)

粗提物中綠原酸的確證采用HPLC方法檢測(cè)，后續(xù)結(jié)果均采用紫外分光光度計(jì)法檢測(cè)。

1.2.5.1 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品紫外分光光度法檢測(cè)波長的掃描

精確稱取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品0.020g，用無水甲醇溶解，定容于100mL容量瓶中，在紫外分光光度計(jì)上從310～400nm對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行波長掃描，獲得標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的紫外吸收光譜曲線。

1.2.5.2 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

精確稱取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品20mg，用100mL無水甲醇溶解配制為200μg/mL的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，吸取一定體積的200μg/mL綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別制作成質(zhì)量濃度1.0、3.0、5.0、7.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0μg/mL的梯度溶液，用無水甲醇作參比液，在紫外分光光度計(jì)上于329nm波長處分別測(cè)量各自的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.6 光皮木瓜綠原酸提取產(chǎn)率的計(jì)算

將木瓜綠原酸提取樣品溶液稀釋100倍，分別于329nm處檢測(cè)其吸光度，根據(jù)其吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得綠原酸含量。所有實(shí)驗(yàn)平行3次，數(shù)值為3次實(shí)驗(yàn)平均值。光皮木瓜綠原酸提取產(chǎn)率按下式計(jì)算:

式中：V為稀釋100倍濾液中綠原酸的含量/(μg/mL)；C為過濾后的體積/mL；m為木瓜粉的質(zhì)量/g。

1.2.7 抗菌活性實(shí)驗(yàn)

使用瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行抗菌實(shí)驗(yàn)[16]。細(xì)菌細(xì)胞菌懸液經(jīng)24h培養(yǎng)將濃度調(diào)整到1×108CFU/mL。將滅菌營養(yǎng)瓊脂倒入滅菌平板中，待瓊脂凝固后以每20mL瓊脂加200μL細(xì)菌菌懸液的比例加入調(diào)整好濃度的細(xì)菌菌懸液，并使其分布均勻。用滅菌的打孔器在平板中均勻地打孔。在孔穴中或不銹鋼圈中加入70μL綠原酸提取液，用與綠原酸提取液相同濃度的青霉素作為陽性對(duì)照，用空白樣做陰性對(duì)照。每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)1次。

1.2.8 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件(V2.000)處理和分析(α=0.01)。

2 結(jié)果與分析

2.1 綠原酸最大吸收波長的掃描

圖1 2μg/mL綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液(無水甲醇作為溶劑)的紫外光譜掃描圖譜Fig.1 Ultraviolet absorption spectrum of chlorogenic acid standard solution (2μg/mL in anhydrous methanol)

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)以200μg/mL綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋100倍(2 μg/mL)后的掃描圖譜最好。即從圖1可看出，綠原酸的最大吸收峰都在329nm(峰4)，即選取329nm為HPLC和紫外分光光度法檢測(cè)綠原酸的檢測(cè)光波長。

2.2 光皮木瓜甲醇粗提物中綠原酸的HPLC檢測(cè)結(jié)果

由圖2可以看出，木瓜綠原酸提取純化液的HPLC圖譜中峰2與綠原酸標(biāo)品溶液的峰1重合，而且綠原酸是提取物中的一個(gè)主要成分。

圖2 綠原酸樣品液和0.02g/L綠原酸標(biāo)品溶液HPLC圖譜的比對(duì)Fig.2 HPLC chromatograms chlorogenic acid sample solution and 0.02 g/L of chlorogenic acid standard solution

2.3 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線

用200μg/mL的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)液溶液制作質(zhì)量濃度分別為0.0、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0μg/mL的溶液，利用紫外分光光度計(jì)在329nm波長處測(cè)出各自的吸光度繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3所示：y = 0.0562x-0.009(R2= 0.9992)。

圖3 綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液(無水甲醇作為溶劑)的標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.3 Standard curve of chlorogenic acid standard solution (anhydrous methanol as solvent)

2.4 木瓜中綠原酸的甲醇提取法單因素試驗(yàn)

2.4.1 甲醇溶液(浸提劑)體積分?jǐn)?shù)對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響

圖4 不同甲醇溶液(浸提劑)中甲醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響Fig.4 Effect of ethanol concentration on the yield of chlorogenic acid

從圖4可以看出，用甲醇溶液作為浸提劑時(shí)甲醇體積分?jǐn)?shù)分別是50%、70%、90%時(shí)，綠原酸產(chǎn)率呈逐漸上升趨勢(shì)，當(dāng)90%甲醇作提取溶劑時(shí)綠原酸產(chǎn)率達(dá)到最大，甲醇體積分?jǐn)?shù)為90%～100%時(shí)綠原酸產(chǎn)率迅速減小。方差分析顯示在1%差異水平下，90%甲醇作為浸提溶劑時(shí)與100%甲醇作為浸提溶劑時(shí)綠原酸產(chǎn)率的差異是極顯著的，說明甲醇體積分?jǐn)?shù)在70%～90%之間為提取綠原酸的最佳區(qū)域。所以做正交試驗(yàn)時(shí)甲醇體積分?jǐn)?shù)的3個(gè)水平分別選取為80%、85%、90%。

2.4.2 浸提時(shí)間對(duì)綠原酸提取的影響

圖5 浸提時(shí)間對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響Fig.5 Effect of extraction time on the yield of chlorogenic acid

從圖5可看出，浸提時(shí)間從8～12h綠原酸產(chǎn)率迅速提高，12h達(dá)到最高，12h后開始逐漸降低，24h次之，36h綠原酸產(chǎn)率最低。方差分析顯示，在1%差異水平下，8h浸提的產(chǎn)率與其他各水平的產(chǎn)率呈極顯著性差異。浸提時(shí)間12、24h和36h各水平之間，綠原酸產(chǎn)率的差異都是極不顯著的。從提高綠原酸的效率角度考慮，選取正交試驗(yàn)該因素的不同水平選在12h左右為宜。故做正交試驗(yàn)時(shí)，浸提時(shí)間這個(gè)因素的3個(gè)水平分別選取為10、12、14h。

2.4.3 浸提溫度對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響

圖6 浸提溫度對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響Fig.6 Effect of extraction temperatures on the yield of chlorogenic acid

從圖6可看出，浸提溫度分別設(shè)定為30、40、50、60℃時(shí)，綠原酸產(chǎn)率呈現(xiàn)先增高后減小趨勢(shì)。30℃到40℃為上升階段，40℃時(shí)最大，從40℃到50℃迅速降低，而50℃到60℃緩慢下降。說明在40℃以下時(shí)隨溫度的增加產(chǎn)率增加，但當(dāng)溫度超過40℃時(shí)，溫度再升高產(chǎn)率不僅沒有增加，反而導(dǎo)致產(chǎn)率下降，這與時(shí)間因素的現(xiàn)象一致。方差分析顯示，在1%差異水平下，50℃和60℃與40℃和30℃水平之間綠原酸產(chǎn)率的差異都極顯著。因此為了提高提取綠原酸的效率，在40℃左右為最佳，所以正交試驗(yàn)時(shí)浸提溫度的3個(gè)水平分別選取35、40、45℃。

2.4.4 料液比對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響

圖7 液料比對(duì)綠原酸產(chǎn)率的影響Fig.7 Effect of liquid-to-solid ratio on the yield of chlorogenic acid

從圖7可看出，料液比從1:10減小到1:20時(shí)綠原酸產(chǎn)率迅速增加，料液比從1:20減小到1:30時(shí)其產(chǎn)率緩慢增加，料液比在1:30到1:40時(shí)其產(chǎn)率緩慢下降。說明當(dāng)料液比達(dá)到一定的比例但卻未達(dá)到飽和綠原酸溶解度時(shí)，綠原酸的產(chǎn)率隨料液比的減小而增大，料液比在1:30和1:40之間可能是綠原酸在木瓜粉細(xì)胞內(nèi)外的溶解平衡區(qū)。方差分析顯示，在1%差異水平下，料液比1:30、1:40、1:20各水平間的綠原酸產(chǎn)率的差異是極不顯著的；料液比1:10與其他各水平之間的綠原酸產(chǎn)率的差異都是很顯著的。因此為了提高提取綠原酸的效率、節(jié)省提取劑，做正交試驗(yàn)時(shí)料液比的3個(gè)水平分別選取為1:25、1:30、1:35。

2.5 木瓜中綠原酸的甲醇提取法正交試驗(yàn)

2.5.1 木瓜中綠原酸甲醇提取法正交試驗(yàn)極差分析

表2 甲醇提取木瓜中綠原酸產(chǎn)率L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Results and analysis of the orthogonal test

由表2中各因素極差R值可知，影響木瓜中綠原酸產(chǎn)率的因素主次順序?yàn)椋篊＞B＞A＞D，即浸提料液比＞甲醇體積分?jǐn)?shù)＞浸提時(shí)間＞浸提溫度。由正交試驗(yàn)極差分析還可知，其最佳組合條件為A3B2C2D2，即浸提時(shí)間14h、甲醇體積分?jǐn)?shù)85%、浸提料液比1:30、浸提溫度40℃。

2.5.2 木瓜中綠原酸甲醇提取法正交試驗(yàn)方差分析

對(duì)木瓜中綠原酸提取正交試驗(yàn)的方差分析結(jié)果，采用新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析(表3)。

表3 甲醇提取木瓜中綠原酸產(chǎn)率正交試驗(yàn)方差分析結(jié)果Table 3 Analysis of variance

表3以D因素(影響最小)來估計(jì)其他各因素的F值，從表3結(jié)果可看出，其他因素F值均小于Fα，即4個(gè)因素影響都不顯著，這說明各因素水平取值在最佳范圍。從表3還可以看出，影響木瓜中綠原酸產(chǎn)率因素主次順序?yàn)镃＞B＞A，即浸提料液比＞甲醇體積分?jǐn)?shù)＞浸提時(shí)間，這與2.5.1節(jié)中的極差分析結(jié)果相一致。

2.5.3 預(yù)期最佳組合的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由于最佳組合試驗(yàn)并沒有在正交表中，所以按照最佳的試驗(yàn)組合A3B2C2D2進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，結(jié)果所測(cè)得的產(chǎn)率為(0.142±0.006)%，高于正交試驗(yàn)9個(gè)試驗(yàn)組合中任一個(gè)產(chǎn)率值，說明正交試驗(yàn)結(jié)果可靠。

2.5.4 抗菌活性檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)初步純化的綠原酸樣品液對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌試驗(yàn)結(jié)果如圖8A所示，對(duì)志賀氏痢疾桿菌的抗菌試驗(yàn)結(jié)果如圖8B所示。

從圖8A可以看出，綠原酸樣品液對(duì)金黃色葡萄球菌具有明顯的抗菌活性，而且隨劑量的增大抗性增強(qiáng)。當(dāng)綠原酸質(zhì)量濃度從0.49×10-3g/mL增大到0.71×10-3g/mL時(shí)，抑菌圈從(12.0±0.3)mm增大到(16.2±0.2)mm。從圖8B可以看出，綠原酸樣品液對(duì)志賀氏痢疾桿菌也具有明顯的抗菌活性，當(dāng)綠原酸質(zhì)量濃度為0.49×10-3g/ mL時(shí)，抑菌圈直徑為(12.3±0.1)mm，表現(xiàn)出對(duì)志賀氏痢疾桿菌與對(duì)金黃色葡萄球菌相當(dāng)?shù)目剐?。這個(gè)結(jié)果表明，民間使用木瓜白酒浸泡液對(duì)冶療腹瀉和腫脹的機(jī)理是因?yàn)槠渲泻兄饕钚猿煞志G原酸。面對(duì)當(dāng)前病原菌對(duì)抗生素類藥物產(chǎn)生了普遍的耐藥性[15-16]，利用我國豐富的木瓜資源開發(fā)出抗菌新藥，這無疑具有廣闊的前景。

圖8 綠原酸樣品液的抗菌活性檢測(cè)結(jié)果Fig.8 Antibacterial activities of chlorogenic acid sample solution against Staphylococcus aureus and Shigella dysenteria

3 結(jié) 論

3.1 本實(shí)驗(yàn)首次從光皮木瓜中提取出綠原酸，通過數(shù)據(jù)分析可知，甲醇提取法在試驗(yàn)范圍內(nèi)各因素對(duì)綠原酸產(chǎn)率影響作用的大小依次為浸提料液比＞甲醇體積分?jǐn)?shù)＞浸提時(shí)間＞浸提溫度。

3.2 甲醇提取法提取木瓜中綠原酸的最佳工藝參數(shù)是：以體積分?jǐn)?shù)85%甲醇溶液為浸提溶劑，以浸提料液比1:30(g/mL)在40℃浸提14h后得到綠原酸的最高產(chǎn)率為0.142%。

3.3 綠原酸樣品液對(duì)引起炎癥的金黃色葡萄球菌和對(duì)引起腹瀉的志賀氏痢疾桿菌具有明顯的抗性。該結(jié)果表明民間木瓜白酒浸泡液的主要藥理活性成分為綠原酸。

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Extraction of Chlorogenic Acid from Fruit of Chaenomeles sinensis Koehne and Evaluation of Its Antibacterial Activity

HU Zhong-qiu，HONG Xiao-di，YUE Tian-li
(College of Food Science and Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)

Chlorogenic acid was extracted from the fruit of Chaenomeles sinensis Koehne using methanol as solvent. Effects of four extraction variables (methanol concentration, extraction temperature, solid/liquid ratio and extraction time) on yield of chlorogenic acid were investigated by conducting single factor test. Subsequently, a L9(34) orthogonal test was employed to optimize the extraction conditions. In the following, the anti-Shigella dysenteriae and Staphylococcus aureus activities were evaluated by using inhibition zone test. Results showed the optimum extractions conditions were as follows: aqueous methanol concentration 85%, the solid/liquid ratio 1:30 (C. sinensis Koehne powder(g)/aqueous methanol (mL)), extraction at 40 ℃ for 14 hours. Under the optimum conditions, the yield of chlorogenic acid were 0.142%. The antibacterial activity of chlorogenic acid samples against S. dysenteriae and S. aureus was significant. It indicated that chlorogenic acid may be a main pharmacological compound of a folk medicine of white spirit soaked with C. sinensis Koehne.

Chaenomeles sinensis Koehne；chlorogenic acid；extraction and optimization；antibacterial activity；Shigella dysenteriae；Staphylococcus aureus.

S646

A

1002-6630(2010)24-0008-06

2010-02-06

“十一五”國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAK02A24)

*通信作者：胡仲秋(1969—)，男，講師，博士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物提取。E-mail：hutiger-2005@126.com