冀 楊 徐有青 王 晨

鐵作為人體最豐富的必需微量元素之一，廣泛參與體內(nèi)各項(xiàng)生理活動(dòng)，在紅細(xì)胞生成、DNA合成及細(xì)胞呼吸中均起著重要的作用。但是過(guò)量的鐵可催化過(guò)氧化物和超氧化物（O2-）成為氧化性更強(qiáng)的羥自由基（OH-）、高鐵自由基或超高鐵自由基，加重氧化應(yīng)激及脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，造成細(xì)胞損傷[1]。在正常情況下，機(jī)體嚴(yán)格調(diào)節(jié)鐵的吸收和利用以保持體內(nèi)鐵穩(wěn)態(tài)（iron homeostaisis）。鐵調(diào)節(jié)蛋白（Hepcidin）就是這樣一個(gè)由肝臟分泌，通過(guò)調(diào)節(jié)十二指腸、脾臟及骨髓中鐵轉(zhuǎn)運(yùn)以維持鐵穩(wěn)態(tài)的鐵調(diào)蛋白。在人體內(nèi)，肝臟和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)是鐵儲(chǔ)存的主要場(chǎng)所，肝臟鐵沉積在很多肝臟疾病中普遍存在，而鐵代謝紊亂在這些疾病發(fā)展中起著推波助瀾的作用。酒精性肝病患者常伴有鐵代謝相關(guān)蛋白表達(dá)異常，出現(xiàn)轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度和鐵蛋白增高及肝臟鐵沉積。酒精和鐵呈協(xié)同作用加重肝臟損傷。目前研究認(rèn)為酒精抑制鐵調(diào)節(jié)蛋白在肝臟表達(dá)可能是酒精性肝病“二次打擊”假說(shuō)的一個(gè)發(fā)病機(jī)制。

一、酒精性肝病與鐵沉積

酒精性肝?。╝lcoholic liver disease，ALD）是指由于過(guò)量酒精攝入導(dǎo)致的肝臟損害及其一系列病變，包括輕癥酒精性肝病、酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化[2]。早期研究發(fā)現(xiàn)酒精與機(jī)體鐵代謝紊亂相關(guān)。肝細(xì)胞吸收鐵的方式可分為轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，Tf）和非轉(zhuǎn)鐵蛋白途徑。大部分血清鐵首先與Tf結(jié)合，再通過(guò)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（transferrin receptor，TfR）被肝細(xì)胞吸收。而非結(jié)合鐵（non-Tf-bound iron，NTBI）的吸收則通過(guò)二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（divalent metal transporter，DMT1）。肝細(xì)胞膜上有兩種轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TfR），TfR1和TfR2。TfR2介導(dǎo)的鐵攝取是肝細(xì)胞獲得鐵的主要途徑。在正常肝臟細(xì)胞中TfR2呈穩(wěn)定表達(dá)，而TfR1生成則受到抑制。Suzuki觀察到ALD患者肝臟組織中TfR1表達(dá)增加了80%，而正常組織中則沒(méi)有變化[3]。體外實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)酒精和鐵處理后的大鼠肝臟細(xì)胞中TfR1表達(dá)顯著增加[4]，從而證實(shí)酒精可以影響TfR1表達(dá)和鐵吸收。臨床上有超過(guò)30%的ALD患者表現(xiàn)為血清鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度增高，肝臟內(nèi)出現(xiàn)鐵的過(guò)度沉積[5]。在ALD早期階段僅在肝臟細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)輕微的鐵沉積，當(dāng)發(fā)展到酒精性肝硬化晚期，肝臟細(xì)胞及巨噬細(xì)胞中均會(huì)出現(xiàn)顯著的鐵沉積。同樣在ALD患者中還發(fā)現(xiàn)小腸及肝臟鐵攝取率較普通人增加[6，7]。酒精性肝硬化患者的血清鐵蛋白含量增高，其死亡率與肝臟鐵含量及鐵蛋白有關(guān)[8]。美國(guó)一項(xiàng)大規(guī)模人群調(diào)查也發(fā)現(xiàn)輕或中度飲酒即可提高鐵沉積的風(fēng)險(xiǎn)，而大量攝入酒精（每日飲用酒精飲品超過(guò)2瓶）后該作用更加明顯[9]。鐵沉積同樣存在于ALD動(dòng)物模型[10]。但也有研究發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期酗酒可致患者貧血和缺鐵，究其原因?yàn)轱嬍硿p少、消化吸收障礙或者胃腸道出血所致，向酗酒者提供全面和充分的營(yíng)養(yǎng)后則不會(huì)發(fā)生，同時(shí)在營(yíng)養(yǎng)良好的酒精性肝病患者中也不存在貧血和缺鐵情況[11]，均證明酒精本身不會(huì)引起鐵缺乏。目前我國(guó)尚缺乏酒精性肝病的全國(guó)性大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查資料。

酒精在肝臟經(jīng)過(guò)細(xì)胞色素P450酶、乙醇脫氫酶、過(guò)氧化物酶代謝后產(chǎn)生超氧陰離子和自由基，誘發(fā)氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)；鐵作為一種強(qiáng)力催化劑，也能促進(jìn)氧自由基的產(chǎn)生。當(dāng)二者產(chǎn)生協(xié)同作用時(shí)，則加劇這一反應(yīng)過(guò)程，造成肝臟損傷。肝臟中鐵沉積程度與脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（malondialdehyde，MDA）和 4-羥基壬烯醛（4-Hydroxynonenal，4-HNE）水平呈正相關(guān)驗(yàn)證了此觀點(diǎn)[12，13]。同時(shí)巨噬細(xì)胞中鐵含量升高會(huì)引起轉(zhuǎn)錄因子如細(xì)胞核因子（nuclear factor-kappa，NF-κB）活性和促炎因子如腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白介素 1（interleukin-1，IL-1）、白介素6（interleukin-6，IL-6）表達(dá)增加。這些脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)產(chǎn)物通過(guò)刺激肝細(xì)胞膠原的合成，促進(jìn)肝纖維化，加速發(fā)展為肝硬化。另外，體內(nèi)高鐵環(huán)境對(duì)腫瘤還有誘發(fā)和促進(jìn)作用。有報(bào)道稱(chēng)鐵超載可引起肝細(xì)胞腫瘤。而口服鐵螯合劑治療可以減輕慢性酒精性肝病大鼠的脂質(zhì)過(guò)氧化損傷。

二、鐵代謝和鐵調(diào)節(jié)蛋白

在正常情況下，食物中的三價(jià)鐵首先在小腸粘膜上皮中的十二指腸細(xì)胞色素 b（duodenal cytochrome b，Dcytb）作用還原成二價(jià)鐵，然后由二價(jià)金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（divalent metal transporter1，DMT1）轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入腸上皮細(xì)胞。再經(jīng)腸上皮細(xì)胞基底膜側(cè)的膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（ferroportin1，F(xiàn)P1）和膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)輔助蛋白（hephaestin，HP）作用將二價(jià)鐵轉(zhuǎn)運(yùn)入血并氧化為三價(jià)，轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin）可與之結(jié)合，通過(guò)血液運(yùn)送到全身各處。骨髓是機(jī)體利用鐵的主要部位，它通過(guò)網(wǎng)織紅細(xì)胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體攝取鐵后合成紅細(xì)胞及血紅素。網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中的巨噬細(xì)胞通過(guò)吞噬衰老紅細(xì)胞獲取鐵，亦可通過(guò)膜表面的TfR直接從循環(huán)系統(tǒng)中攝取鐵，保證鐵再循環(huán)。巨噬細(xì)胞中的鐵可以在銅藍(lán)蛋白作用下氧化后釋放到血漿供其他組織利用，也可以?xún)?chǔ)存在細(xì)胞內(nèi)。在生理狀態(tài)下機(jī)體缺乏鐵排泄的機(jī)制，因此鐵穩(wěn)態(tài)的維持顯得尤為重要。

研究發(fā)現(xiàn)近段小腸中存在一種稱(chēng)為十二指腸隱窩細(xì)胞（duodenal crypt cells）的小腸上皮前體細(xì)胞，它能夠通過(guò)感受自身鐵含量又稱(chēng)鐵池（iron pool）變化調(diào)控鐵調(diào)節(jié)蛋白（iron regulatory protein，IRPs）活性。當(dāng)循環(huán)鐵水平升高，隱窩細(xì)胞內(nèi)鐵池增大，抑制腸上皮細(xì)胞膜中DMT1和FP1等表達(dá)，減少鐵吸收。反之，循環(huán)鐵降低引起隱窩細(xì)胞內(nèi)鐵池變小，鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)量升高，鐵攝入量增加。但是鐵代謝信號(hào)在小腸、肝臟、骨髓和巨噬細(xì)胞之間傳遞的機(jī)制還不清楚。因此，推測(cè)存在一種廣泛分布體內(nèi)的可溶性蛋白作為鐵代謝調(diào)節(jié)信號(hào)的傳遞者。

2000年Krause等[14]從血液中分離到一個(gè)富含半胱氨酸的抗菌多肽，后被證明就是一種鐵代謝調(diào)節(jié)激素，稱(chēng)為肝臟表達(dá)的抗菌多肽-1（liver-expressed antimicrobial peptide-1，LEAP-1）。2001年P(guān)ark等人[15]從人尿中也分離到這一多肽，命名為 Hepcidin，或 HAMP（hepcidin antimicrobial peptide）。它是由一個(gè)富含精氨酸和賴(lài)氨酸的84個(gè)氨基酸多肽，經(jīng)加工剪切后成為20、22和25個(gè)氨基酸三種成熟形式的多肽，其中以Hepcidin25生物活性最強(qiáng)。Hepcidin廣泛存在于血液及其它體液并在肝臟特異性表達(dá)，心臟、肺及脊髓中也有少量表達(dá)，而其他臟器幾乎沒(méi)有表達(dá)。鐵調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)構(gòu)在不同物種間高度保守。小鼠體內(nèi)存在兩個(gè)Hepcidin基因，分別為Hepcl和Hepc2。它們與人類(lèi)Hepcidin基因的同源性達(dá)到76%和58%。人類(lèi)的Hepcidin基因位于19號(hào)染色體上，它由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子組成，其中第3個(gè)外顯子編碼了Hepcidin的氨基酸序列。其上游存在轉(zhuǎn)錄因子CAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白（CAAT enhancer binding protein，C/EBP）、NF-κB和肝核因子（hepatic nuclear factor，HNF）等潛在轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)結(jié)合位點(diǎn)以及TATA起始結(jié)合位點(diǎn)。肝臟中Hepcidin基因表達(dá)還受到其上游基因的調(diào)節(jié)，其中轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2（TfR2）、遺傳性血色素沉著病基因（Hfe）、青少年血色病基因（Hjv）起正向調(diào)節(jié)作用。最近新發(fā)現(xiàn)一種跨膜絲氨酸蛋白酶（TMPRSS6），它是第一個(gè)被證明對(duì)Hepcidin表達(dá)起著負(fù)向調(diào)節(jié)作用的因子。

Hepcidin主要通過(guò)抑制腸道鐵吸收和單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)鐵釋放調(diào)控鐵穩(wěn)態(tài)，它在肝臟、小腸、網(wǎng)織紅細(xì)胞和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)之間傳遞鐵調(diào)節(jié)信號(hào)[16]。高鐵飲食、鐵過(guò)載或炎癥因子均引起肝臟Hepcidin表達(dá)增加[17]，貧血及缺氧則抑制其表達(dá)[18]。Niconlas等[19]發(fā)現(xiàn)在上游的刺激因子（upstream stimulatory factor 2，USF2）基因敲除的小鼠模型中出現(xiàn)嚴(yán)重鐵過(guò)剩，癥狀與遺傳性血色素沉著病極其相似。并隨后證實(shí)鐵過(guò)度沉積與USF2基因敲除小鼠不能表達(dá)下游的Hepcidin基因有關(guān)。而Hepcidin高表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠在出生幾小時(shí)后即死于嚴(yán)重的缺鐵性貧血[20]。Nemeth的研究[21]發(fā)現(xiàn)，Hepcidin通過(guò)調(diào)控位于小腸基底外側(cè)膜FPl的表達(dá)來(lái)調(diào)控鐵的吸收。Hepcidin首先與腸上皮細(xì)胞膜中膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（FP1）結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞膜上FPN1內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞，最后在溶酶體降解。隨后Ganz對(duì)Hepcidin調(diào)控鐵代謝機(jī)制作了闡述。他認(rèn)為在機(jī)體鐵貯備過(guò)高時(shí)，肝臟合成Hepcidin量增加，高水平的Hepcidin與FP1結(jié)合后降解，而FP1是目前已知的在脊椎動(dòng)物中唯一的鐵輸出蛋白通道，也就是阻斷了鐵從腸細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到血漿，同時(shí)也將鐵鎖定在腸細(xì)胞、肝臟及巨噬細(xì)胞內(nèi)，而富含鐵的小腸細(xì)胞會(huì)在2天內(nèi)脫落排出體外，阻止腸道攝入鐵以及肝臟、巨噬細(xì)胞中鐵的釋放和再利用，從而降低循環(huán)鐵量。

總之，Hepcidin對(duì)單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)鐵儲(chǔ)存起正向調(diào)控作用，而對(duì)腸道鐵吸收起負(fù)向調(diào)控作用，并通過(guò)十二指腸腸細(xì)胞以及單核巨噬細(xì)胞參與機(jī)體鐵穩(wěn)態(tài)的調(diào)控。

三、酒精與鐵調(diào)節(jié)蛋白

酒精不僅可以誘發(fā)氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，還可以增加小腸中鐵及內(nèi)毒素的吸收，從而激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生釋放炎癥因子和活性氧。而鐵、病毒感染、內(nèi)毒素和自由基在酒精性肝病的病情進(jìn)展中的作用無(wú)異于二次打擊。同樣，Hepcidin在肝臟中表達(dá)也受鐵負(fù)荷、酒精、丙型肝炎病毒、炎癥因子、缺氧和氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)[17，18，22]。在遺傳性血色素病患者中，盡管存在嚴(yán)重的肝臟鐵沉積，但因其血清pro-hepcidin低于健康人，患者的鐵吸收仍處于高水平。因此，推測(cè)Hepcidin下調(diào)就是酒精性肝病患者發(fā)生肝臟鐵沉積的重要機(jī)制之一。

事實(shí)上，無(wú)論是在ALD動(dòng)物模型還是ALD患者、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)還是體外實(shí)驗(yàn)、慢性飲酒還是急性酒精性肝損傷中，研究均發(fā)現(xiàn)酒精能夠下調(diào)肝臟Hepcidin表達(dá)，繼而引起十二指腸DMT1及FP表達(dá)增加[23，24]。慢性酒精攝入會(huì)引起大鼠肝臟中鐵蛋白升高[25]。Ohtake等[24]觀察到酒精性肝病患者血清pro-Hepcidin明顯降低，酒精性肝病小鼠模型的肝臟hepcidin表達(dá)下降，均驗(yàn)證了這一點(diǎn)。此外，酒精并不改變轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1（TfR-1）、鐵蛋白的表達(dá)以及鐵調(diào)節(jié)蛋白（IRP）的活性，說(shuō)明酒精調(diào)節(jié)Hepcidin是作用于其本身而不是靠改變細(xì)胞內(nèi)鐵環(huán)境而發(fā)揮作用的[23]。Harrison-Findik等人[23]在研究小鼠急性酒精性肝損傷模型時(shí)發(fā)現(xiàn)乙醇可以減少hepcidin的轉(zhuǎn)錄因子CAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白（C/EBP）合成，并且抑制其DNA連接蛋白活性。因此，兩者共同作用可抑制肝臟Hepcidin的表達(dá)。隨后Harrison-Findik[23]又使用乙醇脫氫酶特異性抑制劑4-甲基吡唑和抗氧化劑維生素E阻斷酒精性脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)后則消除了上述的抑制作用，從而有力地說(shuō)明了酒精引起的脂質(zhì)過(guò)氧化在抑制肝臟Hepcidin合成中起著重要的作用，其機(jī)制是通過(guò)影響C/EBP表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)肝臟Hepcidin轉(zhuǎn)錄與合成，并反饋性地增加十二指腸鐵的吸收。

眾所周知，Hepcidin在肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞中特異性的表達(dá)，但是與體外實(shí)驗(yàn)相比，發(fā)現(xiàn)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中Hepcidin下降得更為顯著，提示肝臟中有某些非實(shí)質(zhì)細(xì)胞參與了調(diào)節(jié)，例如巨噬細(xì)胞，后者在酒精性肝病發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。酒精能夠下調(diào)肝細(xì)胞Hepcidin的表達(dá)，而炎癥反應(yīng)則上調(diào)Hepcidin的表達(dá)。因此，巨噬細(xì)胞與炎癥反應(yīng)在酒精調(diào)節(jié)Hepcidin中的總體作用一直存有爭(zhēng)議。Nemeth E等[26]通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)證明TNF-α能夠下調(diào)Hepcidin的表達(dá)。肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞和肝巨噬細(xì)胞在酒精調(diào)節(jié)Hepcidin過(guò)程中共同發(fā)揮作用。但Nemeth研究中也發(fā)現(xiàn)IL-6可以顯著誘導(dǎo)肝細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)小鼠表達(dá)Hepcidin。那么炎癥因子在酒精調(diào)節(jié)Hepcidin中的關(guān)系以及是否有其他非實(shí)質(zhì)細(xì)胞參與其中仍需進(jìn)一步研究。

四、總結(jié)

目前酒精調(diào)節(jié)肝臟Hepcidin的分子機(jī)理已經(jīng)基本明確。酒精通過(guò)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)抑制C/EBP的結(jié)合活性以及肝臟Hepcidin轉(zhuǎn)錄，從而下調(diào)Hepcidin表達(dá)。肝臟Hepcidin分泌減少導(dǎo)致小腸轉(zhuǎn)鐵蛋白表達(dá)增加。肝臟Hepcidin代謝紊亂可能是酒精引起鐵沉積的一個(gè)基礎(chǔ)病因。酒精性肝病在我國(guó)的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，而鐵作為酒精性肝病的二次打擊因子倍受重視。我國(guó)研究顯示表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）能通過(guò)類(lèi)鐵螯合劑作用上調(diào)Hepcidin表達(dá)，減輕鐵負(fù)荷，對(duì)酒精性肝病起到保護(hù)作用。因此，進(jìn)一步研究Hepcidin在酒精與鐵穩(wěn)態(tài)的分子機(jī)制將有助于早期發(fā)現(xiàn)及治療酒精性肝損傷。盡管關(guān)于Hepcidin還存在很多疑點(diǎn)，但應(yīng)用Hepcidin競(jìng)爭(zhēng)劑和拮抗劑治療和預(yù)防貧血以及各種與肝鐵代謝紊亂有關(guān)的疾病具有積極的意義。

[1]AISEN P，ENNS C，WESSLING-RESNICK M.Chemistry and biology of eukaryotic iron metabolism[J].Int J Biochem Cell Biol，2001，33（10）:940-959.

[2]中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.酒精性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].中華肝臟病雜志，2003，11（2）:17.

[3]SUZUKI Y，SAITO H，SUZUKI M，et al.Up-regulation of transferrin receptor expression in hepatocytes by habitual alcohol drinking is implicated in hepatic iron overload in alcoholic liver disease[J].Alcohol Clin Exp Res，2002，26（8）:26-31.

[4]SUZUKI M，F(xiàn)UJIMOTO Y，SUZUKI Y，et al.Induction of transferrin receptor by ethanol in rat primary hepatocyte culture[J].Alcohol Clin Exp Res，2004，28（8）:98-105.

[5]BELL H，SKINNINGSRUD A，RAKNERUD N，et al.Serum ferritin and transferrin saturation in patients with chronic alcoholic and non-alcoholic liver diseases[J].J Intern Med，1994，236（3）:315-322.

[6]IRVING MG，HALLIDAY JW，POWELL LW.Association between alcoholism and increased hepatic iron stores[J].Alcohol Clin Exp Res，1988，12（1）:7-13.

[7]DUANE P，RAJA KB，SIMPSON RJ，et al.Intestinal iron absorption in chronic alcoholics[J].Alcohol Alcohol，1992，27（5）:539-544.

[8]GANNE-CARRIE N，CHRISTIDIS C，CHASTANG C，et al.Liver iron is predictive of death in alcoholic cirrhosis:a multivariate study of 229 consecutive patients with alcoholic and/or hep atitis C virus cirrhosis:a prospective follow up study[J].Gut，2000，46 （2）:277-282.

[9]IOANNOU GN，DOMINITZ JA，WEISS NS，et al.The effect of alcohol consumption on the prevalence of iron overload，iron deficiency，and iron deficiency anemia[J].Gastroenterology，2004，126（5）:1293-1301.

[10]JR-VALERIO LG，PARKS T，PETERSEN DR.Alcohol mediates increases in hepatic and serum nonheme iron stores in a rat model for alcohol-induced liver injury[J].Alcohol Clin Exp Res，1996，20（8）:1352-1361.

[11]EICHNER ER，HILLMAN RS.The evolution of anemia in alcoholic patients[J].Am J Med，1971，50（2）:218-232.

[12]OHHIRA M，OHTKE T，MATSUMOTO A，et al.Immunohistochemical detection of 4-hydroxy-2-nonenalmodified-protein adducts in human alcoholic liver diseases[J].Alcohol Clin Exp Res，1998，22 （3 Suppl）:145-149.

[13]LI CJ，NAN-JI AA，SIAKOTOS AN，et al.Acetaldehyde-modified and 4-hydroxynonenal-modified proteins in the livers of rats with alcoholic liver disease[J].Hepatology，1997，26（3）:650-657.

[14]KRAUSE A，NEITZ S，MAGERT HJ，et al.LEAP-1，a novel highly disulfide-bonded human peptide，exhibits antimicrobial activity[J].FEBS Lett，2000，480 （2-3）:147-150.

[15]PARK CH，VALORE EV，WARING AJ，et al.Hepcidin，a urinary antimicrobial peptide synthesized in the liver[J].J Biol Chem，2001，276（11）:7806-7810.

[16]NEMETH E，GANZ T.Regulation of iron metabolism by hepcidin[J].Annu Rev Nutr，2006，26:323-342.

[17]PIGEON C，ILYIN G，COURSELAUD B，et al.A new mouse liver-specific gene，encoding a protein homolo－gous to human antimicrobial peptide hepcidin，is overexpressed during iron overload[J].J Biol Chem，2001，276（11）:7811-7819.

[18]NICOLAS G，CHAUVET C，VIATTE L，et al.The gene encoding the iron regulatory peptide hepcidin is regulated by anemia，hypoxia，and inflammation[J].J Clin Invest，2002，110（7）:1037-1044.

[19]NICOLAS G，BENNOUN M，DEVAUX I，et al.Lack of hepcidin gene expression and severe tissue iron overload in upstream stimulatory factor 2（USF2）knockout mice[J].Proc Natl Acad Sci USA，2001，98（15）:8780-8785.

[20]NICOLAS G，BENNOUN M，PORTEU A，et al.Severe iron deficiency anemia in transgenic mice expressing liver hepcidin[J].Proc Natl Acad Sci USA，2002，99（7）:4596-4601.

[21]NEMETH E，TUTTLE MS，POWELSON J，et al.Hepcidin regulates cellular iron efflux by binding to ferroportin and inducing its internalization[J].Science，2004，306（5704）:2090-2093.

[22]NISHINA S，HINO K，KORENAGA M，et al.Hepatitis C virus-induced reactive oxygen species raise hepatic iron level in mice by reducing hepcidin transcription[J].Gastroenterology，2008，134（1）:226-238.

[23]HARRISON-FINDIK DD，SCHAFER D，KLEIN E，et al.Alcohol metabolism-mediated oxidative stress downregulates hepcidin transcription and leads to increased duodenal iron transporter expression[J].J Biol Chem，2006，281（32）:22974-22982.

[24]OHTAKE T，SAITO H，HOSOKI Y，et al.Hepcidin is down-regulated in alcohol loading[J].Alcohol Clin Exp Res，2007，31（1）:2-8.

[25]HARRISON-FINDIK DD，KLEIN E，CRIST C，et al.Iron-mediated regulation of liver hepcidin expression in rats and mice is abolished by alcohol[J].Hepatology，2007，46（6）:1979-1985.

[26]NEMETH E，RIVERA S，GABAYAN V，et al.IL-6 mediates hypoferremia of inflammation by inducing the synthesis of the iron regulatory hormone hepcidin[J].J Clin Invest，2004，113（9）:1271-1276.