籍 濤，王麗英

(1.中國人民解放軍北京軍區(qū)衛(wèi)生干部訓(xùn)練中心，北京 102300;2.中國人民解放軍第322醫(yī)院，山西 大同 037006)

辛芩口服液是由辛夷、黃芩、蒼耳子、金銀花、荊芥5味藥材加工而成的復(fù)方中藥制劑，具有清熱解毒、消炎排膿、散風(fēng)寒、通鼻竅等功效，臨床用于治療急、慢性鼻炎，鼻竇炎，過敏性鼻炎等癥。筆者對辛芩口服液的抗過敏作用進(jìn)行了相關(guān)研究，現(xiàn)報道如下。

1 材料

藥品與試劑:辛芩口服液(含辛夷200 g、黃芩250 g、蒼耳子250 g、金銀花150 g、荊芥150 g)，將辛夷、蒼耳子、荊芥水蒸氣蒸餾收集蒸餾液，藥渣與黃芩、金銀花加水煎煮兩次并濃縮，加乙醇沉淀后過濾，合并蒸餾液，過濾，100℃ 40 min流通蒸氣滅菌即得;供試品溶液(濃度為100%，中國人民解放軍第322醫(yī)院制劑室提供，批號為080524);息斯敏(西安楊森制藥有限公司，批號為080221);地塞米松(山東魯抗振興藥業(yè)有限公司，批號為080413)。磷酸組胺(中國科學(xué)院上海生化所東風(fēng)生化技術(shù)公司，批號為030711);卵蛋白(OA，美國 Sigma公司);百日咳疫苗(菌株 CS，1.040×1012/mL，北京生物制品所)。伊文思藍(lán)(中國醫(yī)藥公司北京采購供應(yīng)站進(jìn)口分裝，批號為020223);2，4－二硝基氯代苯(DNCB，北京化學(xué)試劑廠，批號為040718)。

動物:SD大鼠，雄性，體重180～200 g，6～7周齡，動物合格證號為 SCXK(京)2002－0003;NIH小鼠，雌雄各半，體重18～20 g，6～7周齡，動物合格證號為SCXK(京)2002－0010;豚鼠，雌雄各半，體重150～200 g，動物合格證號為SCXK(京)2002－0026。均由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供。

儀器:Jasco U－530型紫外可見分光光度計(jì)(日本);Sartorius BP－2110型電子分析天平(德國);XSB－3型顯微鏡(上海物理光學(xué)儀器廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)的影響[1]

取雄性SD大鼠，每側(cè)大腿肌肉注射1%卵蛋白生理鹽水0.2mL，同時腹腔注射生理鹽水稀釋的百日咳疫苗2×1010/mL，1mL/只，于第13天眼眶靜脈叢取血，500 r/min轉(zhuǎn)速離心，分離血清，置－4℃冰箱備用。取同種雄性大鼠40只，隨機(jī)分為4組，即空白對照組(A組)，辛芩口服液高、低劑量組(B1組及B2組)，陽性對照組(C組)。灌胃給藥，空白對照組給予生理鹽水10 mL/kg(下同)，1次/d，連續(xù)14 d。末次給藥次日，大鼠背部中線兩側(cè)距脊柱1.5 cm處剃毛，以1∶10稀釋的抗血清背部皮內(nèi)注射，每側(cè)兩點(diǎn)，間隔1.5～2 cm，每點(diǎn)0.1 mL。48 h后，尾靜脈注射1%伊文思藍(lán)、2%卵蛋白生理鹽水各0.5 mL，30 min后脫頸處死，翻轉(zhuǎn)背部皮膚，剪下帶有藍(lán)色的部分，置入盛有5 mL丙酮－生理鹽水(7∶3)的試管內(nèi)浸泡48 h，2 500 r/min轉(zhuǎn)速離心，取上清液于610 nm波長處測定吸光度(OD值)，計(jì)算平均 OD值及抑制率。抑制率(%)=(100－實(shí)驗(yàn)組 OD值)/對照組OD值×100。結(jié)果見表1?？梢?，辛芩口服液高、低劑量均能明顯抑制48 h同種被動皮膚過敏反應(yīng)，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.01或 P＜0.05)，并呈一定的量效關(guān)系。

表1 辛芩口服液對大鼠同種被動皮膚過敏反應(yīng)的影響(X ± s，n=10)

2.2 對豚鼠鼻黏膜過敏反應(yīng)的影響[2]

取豚鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每只腹腔注射卵蛋白福氏不全佐劑(10 mg/mL)，0.5 mL致敏，按表2方法灌胃給藥，1次/d，連續(xù)14 d。末次給藥60 min后，靜脈注射1%伊文思藍(lán)生理鹽水每100 g體重0.5 mL，隨后立即以1 mg/mL卵蛋白生理鹽水溶液自雙側(cè)鼻孔注入，每側(cè)0.05 mL，20 min后脫頸處死，沿雙眼內(nèi)眥連線，剪下鼻部，用濾紙吸干血液，剝?nèi)テつw，將鼻甲及黏膜一起剪碎，浸入5 mL 70%丙酮生理鹽水48 h，2 500 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，取上清液在600 nm波長處測定 OD值，以平均 OD值表示過敏程度。結(jié)果見表2?？梢?，高、低劑量辛芩口服液均能非常顯著抑制卵蛋白誘發(fā)的豚鼠鼻黏膜過敏反應(yīng)，與空白對照組比較，有非常顯著性差異(P＜0.01)。

表2 辛芩口服液對豚鼠鼻黏膜過敏反應(yīng)的影響(X ± s，n=10)

2.3 對磷酸組胺致過敏反應(yīng)的影響[3]

取豚鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，按表3方法灌胃給藥，1次/d，連續(xù)10 d。于第9天所有動物脫去背部4 mm×4 mm面積毛發(fā)，末次給藥1 h后，用5號針頭輕輕劃破脫毛處表皮，避免出血。在劃痕部位順序滴入不同體積分?jǐn)?shù)的磷酸組胺(0.01%～0.1%)，每次留置2 min，觀察豚鼠舌舔劃痕部位、前爪搔抓頭或甩頭、后爪搔抓軀干、嘴咬全身各部位、全身劇烈抖動、躁動不安、打滾或休克等現(xiàn)象，以引起反應(yīng)的最低磷酸組胺質(zhì)量作為致敏閾并記錄各組平均致敏閾及反應(yīng)持續(xù)時間。結(jié)果見表3?？梢?，高、低劑量辛芩口服液均可明顯提高豚鼠對磷酸組胺的致敏閾(P＜0.01或 P＜0.05)，高劑量辛芩口服液還能顯著縮短過敏反應(yīng)的持續(xù)時間。

表3 辛芩口服液對磷酸組胺致過敏反應(yīng)的影響(X ± s，n=10)

2.4 對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響[4]

取NIH小鼠40只，隨機(jī)分為4組，按表4方法灌胃給藥，1次/d，連續(xù)9 d。第5天給藥后，將小鼠腹部去毛，范圍3 cm×3 cm，將用1%DNCB丙酮中性麻油(1∶1)溶液50 μL均勻涂于去毛部位致敏，次日強(qiáng)化1次。給藥第9天后，再以1%DNCB溶液均勻涂于小鼠右耳激發(fā)過敏反應(yīng)，左耳為對照。涂耳24 h后，脫頸椎處死，剪下雙耳耳廓，以直徑8 mm打孔器摘取左右耳片稱重，以兩側(cè)耳重的差值作為遲發(fā)型超敏反應(yīng)值，計(jì)算腫脹度;并摘取胸腺、脾臟稱重，以10 g體重之胸腺和脾質(zhì)量表示脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。結(jié)果見表4。可見，高、低劑量辛芩口服液組均可抑制DNCB所致小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.01或 P＜0.05);高劑量辛芩口服液還可增加胸腺和脾臟質(zhì)量，提示其可能具有免疫增強(qiáng)作用。

表4 辛芩口服液對小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)的影響(X ± s，n=10)

3 討論

辛芩口服液可顯著抑制卵蛋白誘發(fā)的大鼠同種皮膚和豚鼠鼻黏膜過敏反應(yīng);并能有效拮抗磷酸組胺的致敏作用，顯著降低豚鼠的致敏閾，高劑量時可縮短過敏反應(yīng)的持續(xù)時間;同時還能顯著抑制DNCB誘導(dǎo)的小鼠耳殼腫脹。試驗(yàn)結(jié)果顯示，該藥物不僅可顯著抑制速發(fā)型過敏反應(yīng)，對遲發(fā)型過敏反應(yīng)亦有明顯的拮抗作用。此外，大劑量辛芩口服液還能增加免疫器官的質(zhì)量，提示其可能具有免疫調(diào)節(jié)作用。

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