喬德水，林 彬，梅 麗

（江蘇萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司，江蘇 徐州 221004）

格列美脲（glimepiride）屬第3代口服磺酰脲類(lèi)降血糖藥，臨床用于治療非胰島素依賴(lài)型糖尿病，主要機(jī)理是刺激胰島β細(xì)胞分泌胰島素，部分提高周?chē)M織對(duì)胰島素的敏感性，具有高效、長(zhǎng)效、用量少、低血糖和心血管等不良反應(yīng)少的特點(diǎn)[1]。該藥口服吸收完全，生物利用度約為100%[2]。目前市場(chǎng)上生產(chǎn)格列美脲片的廠家較多，制劑質(zhì)量也有差異。本試驗(yàn)旨在通過(guò)比較不同廠家生產(chǎn)的格列美脲片的體外溶出行為，為評(píng)定和控制藥品質(zhì)量、臨床合理選藥和用藥提供參考。

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（島津LC-20AD雙泵、SIL-20A進(jìn)樣器、SPD-20A紫外檢測(cè)器、LCSolution色譜軟件）；RCZ-8A型智能溶出實(shí)驗(yàn)儀（天津大學(xué)無(wú)線電廠）；BP211S型電子天平（賽多利斯）。甲醇（色譜純），磷酸二氫銨、磷酸、三羥甲基氨基甲烷（分析純）；格列美脲對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為100674-200301）。5個(gè)廠家11批次的格列美脲片（1 mg/片格列美脲片：A1廠為安萬(wàn)特制藥有限公司，商品名為亞莫利，批號(hào)為E478；B1廠為萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司，商品名為萬(wàn)蘇平，批號(hào)為0606703，0607701，0610701。2 mg/片格列美脲片：A2廠為安萬(wàn)特制藥有限公司，商品名為亞莫利，批號(hào)為E564，B2廠為萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司，商品名為萬(wàn)蘇平，批號(hào)為0609701，0611701，0609702；C廠批號(hào)060601；D廠批號(hào)為060202；E廠批號(hào)為06021602）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Hypersil BDS 柱 （150 mm × 3.9 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-pH=3.5的0.02 mol/L磷酸二氫銨溶液（70∶30）；檢測(cè)波長(zhǎng)：228 nm。理論塔板數(shù)按格列美脲峰計(jì)應(yīng)不低于2 000，格列美脲峰與各雜質(zhì)峰分離度應(yīng)符合要求。

2.2 含量測(cè)定

取樣品20片（1 mg取40片），精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于格列美脲10 mg），置50 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min使格列美脲溶解，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，過(guò)濾。精密量取濾液5 mL，置25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密稱(chēng)取格列美脲對(duì)照品10 mg，置1 000 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度（質(zhì)量濃度為10 μg/mL），搖勻，分別稀釋成質(zhì)量濃度為 6，8，12，14，16 μg/mL 的對(duì)照品溶液。以格列美脲質(zhì)量濃度（X，μg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（Y）為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為 Y=33 817 X-11 432，r=0.999 6（n=5）。結(jié)果表明，格列美脲質(zhì)量濃度的線性范圍為6～16 μg/mg。

2.4 溶出度測(cè)定

取樣品，照溶出度測(cè)定法[3][2005年版《中國(guó)藥典（二部）附錄ⅩC第三法]試驗(yàn)，以0.02%三羥甲基氨基甲烷溶液200 mL（2 mg規(guī)格）或100 mL（1 mg規(guī)格）為溶劑，轉(zhuǎn)速為75 r/min，依法操作，5，10，15，20，30，45，60 min 時(shí)取溶液 2 mL，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。用各批樣品實(shí)測(cè)含量對(duì)溶出度數(shù)據(jù)進(jìn)行校正，用校正后的溶出度進(jìn)行各項(xiàng)研究。結(jié)果見(jiàn)表1、表2和圖1、圖2。

表1 格列美脲片（規(guī)格1 mg）的累積溶出度測(cè)定結(jié)果（%， ± s，n=6）

表1 格列美脲片（規(guī)格1 mg）的累積溶出度測(cè)定結(jié)果（%， ± s，n=6）

時(shí)間（min）5 10 15 20 30 45 60 A1 75.8±6.1 94.1±3.1 99.0±1.5 99.5±3.5 101.6±1.4 102.1±1.6 102.1±1.9 B1-1 76.0±6.9 93.7±2.8 97.4±1.8 99.1±1.5 99.6±1.9 99.9±1.7 100.1±1.6 B1-2 76.8±4.7 94.3±3.6 97.8±3.2 99.4±3.0 100.0±2.8 100.5±2.8 100.8±2.1 B1-3 70.6±5.6 89.0±3.6 96.1±3.6 97.0±2.8 99.0±3.1 99.4±3.0 102.1±3.5

表2 格列美脲片（規(guī)格2 mg）的累積溶出度測(cè)定結(jié)果（%，±s，n=6）

表2 格列美脲片（規(guī)格2 mg）的累積溶出度測(cè)定結(jié)果（%，±s，n=6）

D C E取樣時(shí)間（min）5 10 15 20 30 45 60 A2 78.5±5.5 90.5±4.0 93.9±3.0 95.1±2.5 95.6±2.3 95.9±2.3 96.0±2.4 B2-1 71.5±9.6 89.7±2.6 96.1±4.7 98.6±3.8 99.7±2.8 99.8±3.4 99.7±2.3 B2-2 73.3±6.2 92.1±4.0 97.6±5.5 100.4±3.2 102.4±3.5 103.1±3.6 103.6±2.8 B2-3 68.1±7.9 85.8±3.2 92.1±3.7 95.1±5.2 97.9±3.7 99.6±2.9 100.7±3.0 39.3±8.1 71.2±3.5 84.3±2.4 91.1±1.9 98.3±2.3 102.3±3.7 105.6±2.0 68.9±4.3 87.4±1.8 95.3±1.9 97.9±1.8 101.5±1.7 102.1±3.1 103.2±1.9 52.7±8.5 79.8±2.9 89.7±3.2 93.6±2.1 93.2±4.1 98.4±4.6 100.6±3.3

圖1 格列美脲片（規(guī)格1 mg）的累積溶出度比較

2.5 溶出行為比較

圖2 格列美脲片（規(guī)格2 mg）的累積溶出度比較

采用美國(guó)食品和藥物管理局（FDA）推薦的相似因子（f2）法評(píng)價(jià)仿制品和對(duì)照藥品的溶出度差異。其基本原理是基于生物等效性的基本假設(shè)進(jìn)行體外溶出度的等效性評(píng)價(jià)。相似因子法計(jì)算的基本假設(shè)是試驗(yàn)藥品與對(duì)照藥品的累積溶出度差的平方和最小[4]。相似因子 f2值在50～100之間時(shí)可以認(rèn)定樣品和參比制劑之間的溶出行為具有相似性。其值越接近100，相似性越高；相似因子 f2值小于50，則說(shuō)明樣品和參比制劑的溶出度不相似。根據(jù)相似因子評(píng)價(jià)方法，分別以A1（亞莫利，1 mg）為對(duì)照，對(duì)萬(wàn)蘇平3個(gè)批次的1 mg格列美脲片進(jìn)行比較，結(jié)果B1，B2，B3廠家產(chǎn)品的相似因子 f2分別為 87，89，74；以 A2（亞莫利，1 mg）為對(duì)照，對(duì) B 廠（萬(wàn)邦醫(yī)藥），C，D，E四個(gè)廠家6個(gè)批次的2 mg格列美脲片進(jìn)行比較，結(jié)果B1，B2，B3，C，D，E 廠家產(chǎn)品的相似因子 f2分別為 69，62，65，38，61，48?？梢?jiàn)，1 mg萬(wàn)蘇平3批產(chǎn)品與A1溶出行為非常相似，2 mg萬(wàn)蘇平3批產(chǎn)品和A1的溶出行為是相似的；同樣，D廠產(chǎn)品也與A1的溶出行為相似；C廠和E廠的 f2值均小于50，說(shuō)明其溶出行為和A1的溶出行為有較大差異。

3 討論

溶出度是評(píng)價(jià)一種藥物制劑不同品種、不同廠家產(chǎn)品、不同批次之間質(zhì)量的重要數(shù)據(jù)。體外溶出度在某種程度上與體內(nèi)生物利用度有一定的相關(guān)性，從體外溶出度數(shù)據(jù)也往往可以估計(jì)其藥物動(dòng)力學(xué)的藥物生物利用度的特性[4]。溶出度評(píng)價(jià)方法有多種，美國(guó)FDA在1999年的口服固體藥品生物利用度和生物等效性指導(dǎo)原則中推薦使用相似因子法評(píng)價(jià)溶出度，以確定仿制藥和對(duì)照藥的溶出度差異，并確定試驗(yàn)藥品的相似因子 f2不小于50為等效。

本試驗(yàn)中，5個(gè)廠家11個(gè)批次的格列美脲片的溶出度試驗(yàn)結(jié)果均符合2005年版《中國(guó)藥典（一部）》關(guān)于溶出度時(shí)限的規(guī)定，但是通過(guò)FDA推薦的相似因子法比較，與參比制劑還是有一定差異的。

溶出度試驗(yàn)只能在一定程度上初步體現(xiàn)藥物的生物利用度。由于不同廠家所使用的原輔料、處方、制備工藝等不同，片劑質(zhì)量存在較大差異，這種差異是否影響藥物的生物利用度和生物等效性，尚有待進(jìn)一步研究。本試驗(yàn)結(jié)果為完善處方和生產(chǎn)工藝、評(píng)定和控制藥品質(zhì)量提供了重要依據(jù)，也可為臨床合理選藥和用藥提供參考。

[1]Langtry HD，Balfour JA.Glimepiride:a review of its use in the management of type 2 diabets mellitus[J].Drugs，1998，55：563-584.

[2]Badian M，Korn A，Lehr KH，et al.Pharmacokinetics and pharmacodynamics of hydroxymetabolite of glimepiride （Amaryl）after intrevenous administration[J].Drug Metabol Drug Interact，1996，13:69-85.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄73-75.

[4]夏錦輝，劉昌孝.固體藥物制劑的體外溶出度的統(tǒng)計(jì)學(xué)[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2000，35（2）:130-131.