繆界萍

銀屑病是一種由多基因遺傳決定的、多環(huán)境因素刺激誘導的免疫異常性慢性炎癥性和增生性皮膚病[1]。目前，關(guān)于本病的免疫發(fā)病的機制尚未完全清楚，我們檢測了尋常性銀屑病患者血液中T淋巴細胞亞群和腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）含量，進一步探討T細胞免疫和TNF-α在尋常型銀屑病的發(fā)生及持續(xù)存在中的機制和臨床意義，為臨床的治療及療效觀察提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 對象

尋常型銀屑病患者組 50例，均為2006年5月至2007年4月江蘇省中醫(yī)院皮膚科經(jīng)門診確診病例，男性 26例，女性24 例，年齡 19～64歲。正常對照組32例，年齡 24～63 歲，男性16例，女性 16例。均為江蘇省中醫(yī)院健康體檢者，無心、肝、腎等重要臟器疾患，無皮膚病及自身免疫性疾病，無免疫制劑應用史。

1.2 檢測方法

1.2.1 T淋巴細胞亞群

美國Becton Dickinson公司 FACScalibur 流式細胞儀，采用美國Becton Dickinson公司Simultest IMK-Lymphocyte試劑盒，試劑盒中的雙色熒光抗體均是FITC和PE標記的鼠抗人單克隆抗體，catalog No.340182。取腫瘤患者的外周靜脈血，肝素抗凝，采用BD公司生產(chǎn)的Smultest IMK-Lymphocyte雙色直標的免疫熒光試劑盒，按試劑盒操作說明進行染色，使用BD公司提供的質(zhì)控微球調(diào)校流式細胞儀使其分辨率達到最佳工作狀態(tài)。采用BD公司的SimulSET自動軟件進行T淋巴細胞亞群測定和分析，計數(shù)成熟的T淋巴細胞亞群所占的百分率，T淋巴細胞（CD3+）、T輔助/誘導細胞亞群T抑制/毒性細胞亞群同時還可以得到T輔助細胞/T抑制細胞的比值

1.2.2 TNF-α血清含量測定

由上海森雄生物技術(shù)有限公司提供，采用ELISA操作方法，均按試劑盒說明要求進行。

1.3 統(tǒng)計方法

表1 尋常性銀屑病患者和對照組外周血T淋巴細胞亞群測定結(jié)果（±s）

表1 尋常性銀屑病患者和對照組外周血T淋巴細胞亞群測定結(jié)果（±s）

銀屑病組與正常對照組比較，**P＜0.01，*P＜0.05

組 別 n CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+銀屑病組 50 64.92±9.81 34.44±6.33** 27.74.±6.74 1.32±0.49*正常對照組 32 65.97±5.44 38.00.±4.96 25.81±4.87 1.54±0.41

2 結(jié) 果

2.1 尋常型銀屑病患者和對照組外周血 T淋巴細胞亞群測定結(jié)果 銀屑病組的比值均低于對照組，有顯著性差異，分別為P＜0.01和P＜0.05。銀屑病組的CD8+（%）結(jié)果較對照組略有增高，但無顯著性差異，見表1。

2.2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α 測定結(jié)果

尋常型銀屑病組的TNF-α結(jié)果顯著高于對照組，有顯著性差異（P＜0.01），見表2。

表2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α結(jié)果（±s）

表2 尋常型銀屑病患者和正常對照組TNF-α結(jié)果（±s）

銀屑病組與正常對照組比較，**P＜0.01

組 別 n TNF-α(pg/mL)銀屑病組 50 40.26 ±32.56**對照組 32 24.35 ±12..85

3 討 論

銀屑病的病因和發(fā)病機制至今尚不清楚，近年來的研究認為銀屑病是多基因遺傳背景下的T細胞免疫功能異常的疾病。T細胞免疫功能異常是銀屑病的一個重要的因素，T-淋巴細胞是機體免疫系統(tǒng)中主要的調(diào)節(jié)及效應細胞，可通過對抗原的識別、處理、遞呈引起多種細胞因子同多種細胞之間的網(wǎng)絡聯(lián)系，構(gòu)成維持免疫功能的生理狀態(tài)平衡。T淋巴細胞是銀屑病發(fā)病過程中的主要效應細胞，激活的T淋巴細胞及多種炎癥細胞釋放的細胞因子等在發(fā)病過程中起重要作用。在我們的實驗結(jié)果中顯示，尋常型銀屑病患者外周血細胞所占的百分率和比值顯著低于對照組，提示T淋巴細胞免疫功能發(fā)生紊亂，T淋巴細胞確實參與了銀屑病的發(fā)生和發(fā)展過程?，F(xiàn)在普遍的觀點認為：銀屑病的發(fā)病機制與細胞免疫，尤其是與T細胞密切相關(guān)，異常的T細胞功能導致繼發(fā)性的表皮KC（角質(zhì)形成細胞）過度增生[2]。Kastelan等[3]認為，具有特殊活性的細胞在皮膚局部聚集，同時分泌細胞因子，產(chǎn)生一個I型細胞因子環(huán)境，為CD8+T細胞進一步活化提供了基礎(chǔ)。細胞的活化提供最終觸發(fā)了銀屑病復雜的級聯(lián)應，銀屑病的發(fā)生、發(fā)展過程是細胞，特別是Th1型細胞、I型細胞毒性T細胞與KC之間交互作用的過程，表明T細胞在銀屑病皮損的發(fā)生，發(fā)展及維持中起著關(guān)鍵性作用。

尋常型銀屑病在以T淋巴細胞為主的作用中又涉及了一系列復雜的細胞因子反應，共同參與了銀屑病的發(fā)生，我們的實驗結(jié)果表明尋常型銀屑病患者血清中TNF-α的水平明顯高于正常人（P＜0.01），說明在尋常型銀屑病患者的疾病過程中，其血清中TNF-α確實存在高于正常人水平的TNF-α，其結(jié)果與Chodorowska[4]報道結(jié)果一致。馮崢等[5]應用雙抗體夾心ELISA方法及免疫組織化學檢查檢測16例尋常型銀屑病患者及10例正常人血清中TNF-α濃度和皮膚標本中TNF-α及其受體的分布。TNF-α水平在尋常型銀屑病患者血清及皮膚組織中均高于正常人。TNF-α是由單核-巨噬細胞產(chǎn)生的具有廣泛生物活性的多肽調(diào)節(jié)因子，除了有殺傷或抑制腫瘤細胞的生物學活性外，還有促炎癥作用和免疫調(diào)節(jié)作用，與機體的炎癥免疫有著十分密切的關(guān)系。TNF-α是-種與銀屑病免疫炎性反應密切相關(guān)的細胞因子，不僅能夠誘導皮膚內(nèi)粘附分子的表達，促進淋巴細胞的浸潤，加速朗格罕細胞的成熟，增強其活化T細胞的能力，而且還能夠促進角質(zhì)形成細胞的增殖[6]。TNF-α可促進角質(zhì)形成細胞增生，其機制為TNF-α可增加角質(zhì)形成細胞TNF-α受體結(jié)合而促進增生，同時TNF也是重要的促炎性細胞因子，促進皮損的炎癥形成[7]。TNF-α作為促炎性因子，在銀屑病的發(fā)生、發(fā)展中起到重要的作用[8,9]。因此，銀屑病是T細胞免疫功能紊亂和細胞因子的表達異?？赡苁倾y屑病發(fā)病的主要環(huán)節(jié)，免疫活性細胞和TNF-α等細胞因子通過免疫-炎癥網(wǎng)絡形式的相互作用而共同參與銀屑病的致病過程并在銀屑病的發(fā)生，發(fā)展及維持中起著重要的作用。檢測尋常型銀屑病患者外周血中的T淋細胞亞群和TNF-α對銀屑病的治療和疾病發(fā)展的機制探討都有重要的參考價值，同時為進一步研發(fā)銀屑病藥物治療提供實驗依據(jù)。

雖然T淋巴細胞和TNF-α在銀屑病的發(fā)病機制中占有非常重要的地位，這些因素可能是整個機體防御系統(tǒng)對致病因素反應的一部分，銀屑病的免疫發(fā)病機制中的許多細節(jié)尚未闡明，還在不同程度上受到許多包括遺傳在內(nèi)的各種其它因素的影響，需要我們從分子水平對環(huán)境因素和遺傳因素等各個角度對這一疾病有更進一步研究，相信隨著研究的深入，將會發(fā)掘出更好的治療策略。

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