厲鳳英，朱鵬，史向紅，余珍艷，王鴻

（1.浙江普洛家園藥業(yè)有限公司，浙江東陽(yáng)322118；2.浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，浙江杭州310014）

RP-HPLC測(cè)定鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質(zhì)的含量

厲鳳英1,2，朱鵬1，史向紅1，余珍艷1，王鴻2

（1.浙江普洛家園藥業(yè)有限公司，浙江東陽(yáng)322118；2.浙江工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，浙江杭州310014）

建立了一個(gè)測(cè)定抗抑郁藥鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質(zhì)的高效液相色譜方法，該方法準(zhǔn)確、靈敏、精密度高，可用于抗抑郁藥鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質(zhì)的含量測(cè)定。關(guān)鍵詞：反相高效液相色譜法；鹽酸安非他酮；間氯苯甲酸；含量測(cè)定

鹽酸安非他酮（Bupropion Hydrochloride）是一種新型的抗抑郁藥[1，2]，生產(chǎn)中間氯苯甲酸會(huì)被帶到產(chǎn)品中，鹽酸安非他酮降解也會(huì)產(chǎn)生間氯苯甲酸。美國(guó)藥典（USP）中用TLC方法來控制間氯苯甲酸雜質(zhì)[3]，而采用高效液相色譜法檢測(cè)間氯苯甲酸雜質(zhì)還未見報(bào)道。為了更好的控制該雜質(zhì)來評(píng)價(jià)鹽酸安非他酮的產(chǎn)品質(zhì)量，本文建立了鹽酸安非他酮中間氯苯甲酸雜質(zhì)含量測(cè)定的液相方法，該方法滿足ICH[4]中關(guān)于分析方法驗(yàn)證的要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試藥

Agilent1100（四元泵、柱溫箱、脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外檢測(cè)器）。

乙腈（GC）；三氟乙酸（GC）；超純水；間氯苯甲酸對(duì)照品（默克公司，批號(hào)為S）；鹽酸安非他酮對(duì)照品（美國(guó)藥典（USP）標(biāo)化的對(duì)照品，批號(hào)為W）；鹽酸安非他酮樣品（批號(hào)：1、2、3）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAXSB-C18（4.6×250mm，5μm）（安捷倫公司）；流動(dòng)相：水-乙腈-三氟乙酸（65∶35∶0.1）；檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm；流速：1.0mL· min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL；運(yùn)行時(shí)間：30min。

1.2.2 溶液配制

1.2.2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性溶液精密稱取50mg鹽酸安非他酮工作對(duì)照品于50mL容量瓶中，用適量流動(dòng)相溶解后，加0.50mL的400μg·mL-1間氯苯甲酸儲(chǔ)備液，并用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。

1.2.2.2 間氯苯甲酸對(duì)照溶液配制4μg·mL-1的間氯苯甲酸對(duì)照液，此溶液為間氯苯甲酸的100%溶液。

1.2.2.3 供試液精密稱取20mg鹽酸安非他酮樣品于10mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2 結(jié)果與分析

2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性實(shí)驗(yàn)

照“1.2.1”項(xiàng)下的色譜條件注入高效液相色譜儀一次，其具體數(shù)據(jù)見表1。

表1 系統(tǒng)適應(yīng)性數(shù)據(jù)Tab.1Data of system suitability

由表1可知，結(jié)果表明符合鹽酸安非他酮與間氯苯甲酸分離度應(yīng)不小于10，間氯苯甲酸相對(duì)保留時(shí)間約為2.05的要求。

2.2 精密度

取“1.2.2.2”項(xiàng)下的間氯苯甲酸對(duì)照溶液注入高效液相色譜儀，連續(xù)測(cè)定6次，計(jì)算主峰峰面積的RSD應(yīng)不大于2%。測(cè)得的數(shù)據(jù)見表2。結(jié)果表明符合要求。

表2 精密度數(shù)據(jù)Tab.2Data of RSD

2.3 定量限（LOQ）和檢測(cè)限（LOD）

將間氯苯甲酸逐步稀釋成一定濃度，直至S/ N=10，連續(xù)進(jìn)6針，記下該濃度，計(jì)算定量限（LOQ），再換算檢測(cè)限（LOD），得到的數(shù)據(jù)見表3。

表3 定量限和檢測(cè)限數(shù)據(jù)Tab.3Data of LOQ and LOD

表3結(jié)果表明，該方法的定量限為1.60ng；檢測(cè)限0.48ng。

2.4 線性實(shí)驗(yàn)

分別精密稱取間氯苯甲酸適量，用流動(dòng)相配制成LOQ、25%、50%、100%、200%的溶液，各進(jìn)3針，其相關(guān)數(shù)據(jù)見表4。結(jié)果表明，間氯苯甲酸在LOQ～200%的范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R為1.000，有良好的線性。

表4 線性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)Tab.4Data of linear experiment

2.5 準(zhǔn)確度

分別精密稱取間氯苯甲酸適量，用流動(dòng)相配制成50%、100%、200%的溶液，分別進(jìn)樣3針，分別計(jì)算回收率，得到的數(shù)據(jù)見表5。

表5 回收率實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)Tab.5Data of recovery experiment

表5結(jié)果表明，符合回收率應(yīng)在98%～102%之間的要求。

3 結(jié)論

取“1.2.2.3”項(xiàng)下3個(gè)批次的鹽酸安非它酮樣品的供試液，照“1.2.1”項(xiàng)下的色譜條件得到的檢測(cè)結(jié)果與TLC方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，其數(shù)據(jù)見表7。

表7 三批樣品的含量Tab.7The assay of three lots of samples

表7結(jié)果表明，RP-HPLC方法較TLC方法更靈敏。并且分析方法的確認(rèn)結(jié)果表明該方法能夠有效的進(jìn)行鹽酸安非它酮中間氯苯甲酸雜質(zhì)的檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)

［1］Settle EC Jr.Bupropion sustained release:side effect profile［J］.J. Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:32-36.

［2］Goldstein MG.Bupropion sustained release and smoking cessation［J］.J.Clin.Psychiatry，1998，59（l4）:66-72.

［3］美國(guó)藥典［S］.2005年版，2005.1721.

［4］ICH三方協(xié)調(diào)指南匯編，（第一版）［M］.2000.76.

Determination of m-chlorobenzoic acid in bupropion hydrochloride by RP-HPLC

LI Feng-ying1，2，ZHU Peng1，SHI Xiang-hong1，YU Zhen-yan1，WANG Hong2
（1.Apela Jiayuan Pharmaceutical Co.,Doyang 322118,China; 2.College of Pharmaly,Zhejiang University of Techology,Hangzhou 310014,China）

A RP-HPLC method for the determination of m-chlorobenzoic acid in the antidepressant of bupropion hydrochloride was estab lised.The method was proved to be accurate,sensitive and precise.It can be applied for the content assay of m-chlorobenzoic acid in the bupropion hydrochloride.

RP-HPLC；bupropion hydrochloride;m-chlorobenzoic acid；assay

book=2010,ebook=231

1002-1124（2010）11-0027-03

2010-09-26

厲鳳英（1969-）女，浙江東陽(yáng)人，浙江普洛家園藥業(yè)有限公司質(zhì)量經(jīng)理，工程師，浙江工業(yè)大學(xué)在讀工程碩士，研究方向：藥物分析。

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